多药耐药大肠埃希菌11种外排泵基因的研究

目的 调查多药耐药大肠埃希菌中11种外排泵基因存在情况.方法 用PCR方法检测多药耐药大肠埃希菌中11种外排泵基因(emrB、emrD、emrE、mdfA、sugE、mdtI、tehA、oqxA、qacE△1、qacE、smr-2),并进行BIOCYC基因数据库检索.结果 20株多药耐药大肠埃希菌中共检出emrB、emrD、emrE、mdfA、sugE、mdtI、qacE△1、tehA、oqxA 9种基因,检出率分别为100.0％、100.0％、95.0％、100.0％、100.0％、100,0％、75.0％、100.0％、20.0％,未检测到qacE、smr-2基因;每株细菌中均检测到了6～9种基因.结论 多药耐药大肠埃希菌中外排泵基因携带率较高,或许是多药耐药大肠埃希菌的高度耐药的一个重要原因.     

从一例患者尿液中分离到二株不同的大肠埃希菌克隆株

大肠埃希菌在尿路感染患者中的分离率居临床首位,已成为医院感染的重要病原菌.本研究从1例患者尿液标本中2次分离到大肠埃希菌(ECO-003株和ECO-005株),并对其进行了7种抗菌制剂外排泵基因(smr-2、emrB、emrD、emrE、mdfA、tehA、qacE△1)和1种氨基糖苷类修饰酶基因[aac(6')-Ⅰb]检测和分析,证实为2株不同的克隆株.     

大肠埃希菌尿液分离株消毒剂与灭菌剂耐药基因研究

目的 了解临床尿液标本分离的60株大肠埃希菌消毒剂、灭菌剂耐药基因的存在情况.方法 收集2006年1月-2008年10月从住院患者尿液中分离出大肠埃希菌60株,应用K-B纸片扩散法检测细菌对15种抗菌药物的敏感性;应用PCR及序列分析3种消毒剂、灭菌剂耐药基因(qacE△1、tehA、merA).结果 60株大肠埃希菌除对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢西丁、阿米卡星、庆大霉素有较高的敏感率(>70.0 %)外,对其他10种抗菌药物的敏感率均较低(<50.0%)}60株菌中42株检出qacE△1基因(70.0%),10株检出merA基因(16.7%),全部检出tehA基因,1号菌tehA基因测得序列与美国核酸库(GenBank)已登录的tehA基因序列不同,为新亚型.结论 临床尿液标分离的大肠埃希菌70.0%携带qacE△1基因,未来细菌消毒剂的耐药可能是医院感染的主要因素之一.     

多药耐药肺炎克雷伯菌15种抗菌制剂外排泵基因研究

目的 调查一组多药耐药肺炎克雷伯菌(MDRKP)中抗菌制剂外排泵基因的存在情况.方法 收集2008年8月-2010年5月浙江省杭州市和湖州市6所医院共47株MDRKP,采用聚合酶链反应(PCR)的方法分析15种抗菌制剂外排泵基因.结果 47株MDRKP共检出emrB、mdfA、ramA、qacE△1、oqxA、tehA、smr-Kpn、sugE、tetB、emrD和tetA 11种抗菌制剂外排泵基因,阳性率分别为100.00％、100.00％、100.00％、82.98％、80.85％、29.79％、8.51％、4.26％、4.26％、2.13％、2.13％,其余4种基因未检出;可分为10种阳性检出模式,其中以emrB+ mdfA+ ramA+ oqxA+ qacE△1阳性模式为主,占53.19％.结论 携带这11种抗菌制剂外排泵基因是导致本组菌呈多药耐药的一个重要原因,在肺炎克雷伯菌同时检测这15种抗菌制剂外排泵基因为国内首次报道.     

多药耐药肺炎克雷伯菌抗菌制剂外排泵基因研究

目的了解20株多药耐药肺炎克雷伯菌(MDR-KPN)的灭菌剂、消毒剂、抗菌药物等抗菌制剂外排泵基因存在情况。方法运用PCR法对20株多药耐药肺炎克雷伯菌mdfA、tehA、smr、qacE△1等抗菌制剂外排泵基因进行检测。结果检出mdfAt、ehA、smr、qacE△1等4种外排泵基因,阳性率分别为:85.0%、5.0%、20.0%、75.0%;mdfA、qacE△1阳性率高,多数菌株能同时检出多种外排泵基因;在肺炎克雷伯菌中检出mdfA、tehA、smr基因为国内首次报道。结论多耐药肺炎克雷伯菌易检出多种外排泵基因,与医院多药耐药肺炎克雷伯菌耐药机制相关的可移动遗传元件主要有mdfA、qacE△1,耐药菌外排泵携带率高,开发抑制剂显得十分重要。     

大肠埃希菌连续分离株耐药性与季胺类化合物耐药基因研究

目的 了解临床分离的大肠埃希菌耐药性和耐消毒剂基因存在状况.方法 测定临床连续分离60株大肠埃希菌对19种抗菌药物的敏感性及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)情况.采用聚合酶链反应检测qacE△1基因.结果 60株大肠埃希菌对亚胺培南/西司他丁、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦3种抗菌药物完全敏感,对其余16种抗菌药物耐药率在5.0%～90.0%,ESBLs检出率为45.0%;qacE△1基因阳性34株(阳性率56.7%).结论 大肠埃希菌具多药耐药特征,qacE△1基因携带率高.     

大肠埃希菌和铜绿假单胞菌耐药基因检测及其与医院感染的关系分析 FREE

目的探讨医院大肠埃希菌和铜绿假单胞菌连续分离株的遗传标记与医院感染的关系。方法以聚合酶链反应（PCR）法检测大肠埃希菌质粒AmpC酶基因ACT 1、DHA,Ⅰ类整合酶基因IntⅠ1,耐消毒剂基因qacE△1 sul1;铜绿假单胞菌4种整合子、转座子遗传标记(qacE△1 sul1、merA、tnpA、tnpU)。结果大肠埃希菌质粒AmpC酶基因ACT 1、DHA阳性率分别为57.50%、40.00%,Ⅰ类整合酶基因IntⅠ1阳性率为47.50%,耐消毒剂基因qacE△1 sul1阳性率为57.50%。铜绿假单胞菌中qacE△1 sul1基因阳性率为48.57%,merA阳性率为11.43%,未检出tnpA、tnpU。结论大肠埃希菌连续分离株携带质粒AmpC酶基因、Ⅰ类整合酶基因IntⅠ1及耐消毒剂基因qacE△1 sul1;铜绿假单胞菌连续分离株携带qacE△1 sul1、merA基因。不同菌株间的耐药基因可以相互传播,具有流行病学意义。     

多药耐药肺炎克雷伯菌抗菌制剂外排泵基因研究

目的了解多药耐药肺炎克雷伯菌(MDRKPN)抗菌制剂外排泵基因的存在状况。方法收集连云港市第二人民医院2008年11月-2009年10月住院患者标本中分离的多药耐药肺炎克雷伯菌20株,采用PCR法检测mdfAt、ehA、oqxA、qacE△1等4种抗菌制剂外排泵基因。结果 20株多药耐药肺炎克雷伯菌mdfA、tehA、oqxA和qacE△1基因检出阳性率分别为85.0%、15.0%、10.0%和95.0%。结论 MDRKPN抗菌制剂外排泵基因携带率较高,肺炎克雷伯菌多药耐药的表型可能与携带抗菌制剂外排泵基因相关。     

多药耐药鲍氏不动杆菌耐药性研究

目的了解多药耐药鲍氏不动杆菌(MDRABA)的耐药性与抗菌制剂外排泵基因的存在情况。方法收集医院2009年6-9月住院患者中分离的MDRABA共20株,菌株耐药性采用纸片扩散法测定,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析3种抗菌制剂外排泵基因:adeB、mdf A、qacE△1。结果β-内酰胺类药物中头孢菌素类耐药率达100%,亚胺培南耐药率也达80%;20株MDRABA中adeB、mdf A、qacE△1均有检出,阳性率分别为85%、90%、65%;除6、9号菌株外,大多数菌株携带2~3种外排泵基因。结论该组20株MDRAB抗菌制剂外排泵基因高阳性率是这些菌株高耐药原因之一。     

大肠埃希菌的耐药性及耐消毒剂基因研究

目的 了解大肠埃希菌的耐药性,同时了解产ESBLs大肠埃希菌耐消毒剂基因qacE△1-sul1的流行情况,揭示大肠埃希菌的耐药机制.方法 2007年1月-2011年11月医院分离的3688株大肠埃希菌用VITEK-32GNI+鉴定,GNS-448检测对氨基糖苷类、(p-)内酰胺类、喹诺酮类等15种抗菌药物的耐药性,并对其中36株产ESBLs大肠埃希菌用PCR法检测耐消毒剂基因qacE△1-sul1的流行状况.结果 3688株大肠埃希菌中共检出1660株产ESBLs菌株,检出率为45.0％;大肠埃希菌除对阿米卡星、亚胺培南、美罗培南、头孢西丁、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦耐药率较低外,对其他抗菌药物均产生了一定的耐药性,36株产ESBLs大肠埃希菌对氨苄西林、头孢唑林、头孢呋辛、庆大霉素全耐药,未检出亚胺培南、美罗培南耐药株;36株产ESBLs大肠埃希菌耐消毒剂基因qacE△1-sul1检测结果22株阳性,检出率为61.1％.结论 大肠埃希菌耐药性严重,但近几年基本稳定,产ESBLs大肠埃希菌存在多药耐药性;产ESBLs大肠埃希菌耐消毒剂基因qacE△1-sul1检出率较高,且与多药耐药关系密切.     

铜绿假单胞菌抗菌制剂外排泵基因与可移动遗传元件研究

目的 研究临床分离铜绿假单胞菌(PAE)抗菌制剂外排泵基因与可移动遗传元件存在状况.方法 分离自贵州省贵阳地区(A组)和江苏省苏南地区(B组)PAE各20株,用纸片扩散法测定19种抗菌药物的敏感性,采用PCR法检测抗菌制剂外排泵基因(smr、smr-2、qacE△1),质粒遗传标记(traF、trbC),插入序列遗传标记(IS1133、ISEcp1),转座子遗传标记(merA、tnpU、tnp513),整合子遗传标记(qacE△1又为Ⅰ类整合子遗传标记)等可移动遗传元件;对阳性基因进行测序,测序结果进行Biast分析.结果 两组PAE呈β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类多药耐药;A组检出qacE△1、merA等两种基因,阳性率分别为10.0％、5.0％;B组检出qacE△1、merA、tnpU、tnp513等4种基因,阳性率分别为100.0％、85.0％、5.0％、55.0％.结论 两组为多药耐药的表型,与携带抗菌制剂外排泵基因和可移动遗传元件相关.     

泛耐药鲍氏不动杆菌获得性耐药基因与可移动遗传元件指标的聚类分析

目的 调查泛耐药鲍氏不动杆菌获得性耐药相关基因和可移动遗传元件携带状况,并分析两者的相关性.方法 收集医院2008年1-12月住院患者送检痰液标本中分离的泛耐药鲍氏不动杆菌共20株,采用聚合酶链反应的方法分析54种β-内酰胺类、喹诺酮炎、氨基糖苷类获得性耐药相关基因及12种可移动遗传元件遗传标记,并对检测结果作指标聚类分析.结果 20株泛耐药鲍氏不动杆菌共检出获得性β-内酰胺类耐药基因TEM-1、ADC-3和OXA-30,三者阳性率均为100.0％;检出的5种获得性氨基糖苷类耐药基因中,aac(6′)-Ⅰ b、ant(3″)-Ⅰ和aph(3’)-Ⅰ基因阳性率为100.0％,aac(3)-Ⅰ基因阳性率为75.0％,armA基因为5.0％;外排泵基因qacE△1、adeB和可移动遗传元件遗传标记基因int Ⅰ 1、tnp513、tnpU、ISaba1、IS26的阳性率均为100.0％;其余51种基因未检出.结论 从该组泛耐药鲍氏不动杆菌指标聚类分析中可见,β-内酰胺酶基因 TEM-1、ADC-30、OXA-23,氨基糖苷炎修饰酶基因aac(6’)-Ⅰ b、ant(3")-Ⅰ,抗菌制剂外排泵基因qacE△1和abeB与可移动遗传元件intⅠ 1、tnpU、tnp513、IS26、ISaba1基因遗传标记高度相关.     

多重耐药革兰阴性杆菌耐消毒剂基因qacE△1 sul1监测

目的了解某院临床常见革兰阴性(G-)杆菌多重耐药株耐消毒剂基因qacE△1 sul1的产生情况。方法收集临床分离的G-杆菌235株,包括155株多重耐药株和80株敏感株,采用聚合酶链反应（PCR）法检测qacE△1 sul1基因,并进行DNA测序。结果在50株产超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌、27株产ESBLs肺炎克雷伯菌、50株多重耐药的铜绿假单胞菌和28株多重耐药的鲍曼不动杆菌中,检出qacE△1 sul1 株分别为37、24、46、28株,检出率分别为74.00％、88.89%、92.00%和100.00％,总的检出率为87.10％;在非产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌以及铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的敏感株（各20株）中,分别检出qacE△1 sul1株 16、7、5、13株,检出率分别为80.00％、35.00%、25.00%和65.00％,总的检出率为51.25％。结论该院G-杆菌多重耐药株耐消毒剂基因qacE△1 sul1的携带率较高,加强多重耐药菌对消毒剂耐药性的监测,对临床合理使用消毒剂具有重要意义。     

多药耐药大肠埃希菌尿液分离株插入序列遗传标记研究

目的 调查多药耐药大肠埃希菌尿液分离株中插入序列遗传标记的存在情况.方法 收集宁波市第一医院2008年10月-2009年3月住院患者尿液标本中分离的多药耐药大肠埃希菌共28株,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法,分析3种插入序列遗传标记:ISEcpl、IS26、IS903.结果 28株大肠埃希菌中3种插入序列遗传标记均有检出:IS26 28株检出率为100.0％、ISEcp1 21株检出率为75.0％、IS903 7株检出率为25.0％.结论 多药耐药大肠埃希菌尿液分离株中插入序列有较高的携带率,插入序列介导各种耐药基因,使受体菌表现为多药耐药,在大肠埃希菌中检出插入序列IS903是国内首次报道.     

泌尿外科术后大肠埃希菌尿道感染及其耐药基因和毒力基因检测

目的探讨泌尿外科术后大肠埃希菌尿道感染现状,并对大肠埃希菌耐药基因和毒力基因进行检测。方法选择亳州市中医院泌尿外科2017年2月-2020年2月收治的术后尿道感染患者80例,收集尿样分离培养大肠埃希菌,并对大肠埃希菌株进行抗菌药物敏感性试验;使用聚合酶链反应提取耐药基因和毒力基因,并对基因做分型处理。结果大肠埃希菌现状:收集尿样80份,培养出大肠埃希菌64株,检出率80.00%。大肠埃希菌耐药率:环丙沙星(67.19%)、氨苄西林(96.88%)、头孢噻吩(54.69%)、头孢他啶(64.06%)、头孢西丁(56.25%)、庆大霉素(51.56%)、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶(18.75%)、萘啶酸(10.94%)、呋喃妥因(1.56%)、亚胺培南(7.81%);78.13%为多药耐药。耐药基因阳性率:TEM(76.56%)、aac(3)-II(50.00%)、CTX-M(62.50%)、qacE△1-sull(43.75%)、OXA-1(17.18%)、PER(10.93%)、aac(6)-I(20.31%)、SHV(15.63%)、qnr(6.25%)、gyrA(64.06%)。(4)毒力基因阳性率:fimH(93.75%)、fyuA(68.75%)、traT(67.18%)、iutA(60.94%)、kpsMTII(57.81%)、aer(56.25%)、papC(18.75%)、papGII(15.63%)、hlyA(7.81%)。结论泌尿外科术后尿道感染患者尿样中大肠埃希菌株检出率较高,临床上应及时对菌株进行药敏试验,规范合理使用抗菌药物。     

肺炎克雷伯菌中Ⅰ类整合子与qacE△1-sul1基因的研究

目的 了解医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌Ⅰ类整合子和qacE△1-sul1耐消毒剂基因的携带情况.方法 收集临床住院患者分离出的产ESBLs肺炎克雷伯菌108株;采用K-B法测定抗菌药物的敏感性;聚合酶链反应(PCR)检测Ⅰ类整合子和qacE△1-sul1基因.结果 Ⅰ类整合子基因总检出率为53.70％,qacE△1 -sul1基因总检出率为63.89％;产ESBLs肺炎克雷伯株Ⅰ类整合子阳性株除对氨苄西林和哌拉西林的耐药率与Ⅰ类整合子阴性株差异无统计学意义以外,对其他抗菌药物的耐药率均明显高于整合子阴性株,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 医院产ESBLs肺炎克雷伯菌Ⅰ类整合子和qacE△ 1-sulⅠ耐消毒剂基因携带率均较高,应进一步加强Ⅰ类整合子和耐消毒剂基因菌株的流行病学监测,并根据耐消毒剂状况,在消毒剂的使用上作出相应的调整.