镉通过类雌激素样作用促进人乳腺癌MCF-7细胞增殖

[目的]研究镉对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及雌激素受体(estrogen receptor,ER)蛋白表达水平的影响及其可能机制。[方法]用1×10~(-6)、1×10~(-7)、1×10~(-8)、1×10~(-9)、1×10~(-10)、1×10~(-11) mol/L的17β-雌二醇(后称雌激素)培养不同来源的A、B两株MCF-7细胞4 d,应用CCK8法筛选敏感细胞株并确定雌激素促细胞增殖作用最强的浓度。用1×10~(-6)、1×10~(-7)、1×10~(-8)、1×10~(-9)、10~(-10)、1×10~(-11) mol/L的镉溶液染毒敏感细胞株,确定镉促进细胞增殖的最大浓度。设置阴性对照组(去雌激素培养液)、实验组(1×10~(-8) mol/L镉)、阳性对照组(1×10~(-9) mol/L雌激素),通过克隆形成实验检测镉对MCF-7细胞集落形成能力的影响。利用ER抑制剂(ICI182780)初步探讨镉致细胞增殖的可能机制,增设实验抑制剂组(1×10~(-8) mol/L镉+1×10~(-7) mol/L ER抑制剂)、阳性抑制剂组(1×10~(-9) mol/L雌激素+1×10~(-7) mol/L ER抑制剂),通过CCK8法、流式细胞术和Western blot分别检测各组的细胞增殖率、细胞周期S期比例和ER表达水平。[结果]实验所用B株MCF-7细胞为雌激素敏感细胞株,且当雌激素浓度为1×10~(-9) mol/L时,对MCF-7细胞的促进增殖作用[(203.55±36.65)%]最大(P0.001)。与阴性对照组(100%)相比,1×10~(-8)~1×10~(-10) mol/L镉溶液可促进MCF-7细胞增殖[(163.78±31.90)%~(176.88±10.06)%](P0.001)。1×10~(-8) mol/L镉可促进细胞集落形成(P0.05),增加细胞S期比例(P0.001),提高细胞ER蛋白表达水平(P0.001)。与实验组相比,加入ER抑制剂能够抑制镉对MCF-7细胞的促增殖作用[由(135.17±23.96)%降至(107.66±7.64)%](P0.01),抑制镉诱导的细胞S期比例增加[由(24.17±0.53)%降至(12.36±0.43)%](P0.001),拮抗镉诱导的ER表达增加[由(56.19±3.67)%降至(38.84±1.04)%](P0.05)。[结论]镉可以促进人乳腺癌细胞MCF-7增殖和ER表达,这种作用可被ER抑制剂所抑制,提示镉可能具有雌激素样作用。     

甘草次酸和甘草甜素雌激素样作用研究

目的探讨甘草次酸和甘草甜素两种三萜类成分的雌激素样作用,为开发新的活性植物雌激素成分奠定基础。方法采用溴化噻唑蓝四氮唑(MTT)法观察两种三萜成分对雌激素受体(ER)阳性人乳腺癌细胞系MCF-7细胞增殖的影响,Western Blot法和半定量RT-PCR法测定两种三萜成分对MCF-7细胞ER亚型蛋白及mRNA表达的影响。实验数据(±s)采用SPSS 23.0进行统计分析,基于单因素方差分析的方法,组间比较用SNK法和LSD法。结果 100μmol/L和10μmol/L甘草甜素能够抑制MCF-7细胞的增殖;100μmol/L、1μmol/L和10-2μmol/L甘草次酸能够促进MCF-7细胞的增殖;10μmol/L的甘草次酸可诱导MCF-7细胞ERα、ERβ蛋白表达,mRNA表达均显著升高(P0.05);加入1×10~(-7)μmol/L的雌激素受体拮抗剂ICI182780均能抑制甘草次酸的以上效应。结论甘草次酸具有促进MCF-7细胞增殖作用,其作用机制可能是上调MCF-7细胞ERα、ERβ基因和蛋白的表达,显示有雌激素样作用,且其雌激素样作用可能是ER介导产生的。抗雌激素样作用的甘草甜素的作用机制还有待于深入研究。     

环境雌激素对乳腺癌细胞株MCF-7凋亡作用的影响

[目的] 通过观察对-壬基酚(nonylphenol,NP)、双酚A(bisphenol A,BisA)和邻苯二甲酸二丁酯(dibutylphthalate,DBP)对乳腺癌细胞株MCF-7凋亡的影响,探讨环境雌激素促进MCF-7细胞增殖的生物学机制.[方法] 将在DMEM培养液(含10%小牛血清)中的MCF-7细胞采用开放式单层贴壁培养,加受试物前5 d将培养细胞用PBS洗涤后改为在无酚红DMEM(含5%经活性碳-葡聚糖苷处理的胎牛血清,CDT-FBS)中培养连续5 d,其目的是耗尽细胞内储存的雌激素.实验设溶剂对照组、雌激素对照组、抗雌激素(它莫西芬)对照组及三个实验组,采用流式细胞术、DNA片段凝胶电泳和细胞苏木素染色(HE),观察环境雌激素对雌激素耗尽所诱导的细胞凋亡作用的影响.[结果] 3.2×10-6 mol/L NP和3.2×10-5 mol/L BisA对MCF-7细胞处理72 h,与对照组相比,流式细胞仪分析结果表明,二倍体细胞(G1期细胞)明显增加,亚二倍体细胞峰(即细胞凋亡率)消失,DNA凋亡片段凝胶电泳不显示典型的凋亡DNA片段梯带,细胞苏木素染色结果也显示凋亡细胞明显减少.[结论] 与溶剂对照组相比,NP和BisA均能够抑制MCF-7细胞的凋亡作用,而3.2×10-4 mol/L DBP对细胞凋亡的影响作用不明显.这一结果提示,该类物质有可能是通过抑制细胞凋亡而发挥其促进MCF-7细胞增殖作用的.     

五溴联苯醚对MCF-7细胞c-myc和p53 mRNA及蛋白表达的影响

[目的]观察五溴联苯醚(5-BDEs)对乳腺癌细胞MCF-7c-myc和p53 mRNA及蛋白表达的影响,以探讨5-BDEs雌激素活性的分子生物学作用机制.[方法]将MCF-7细胞在DMEM培养液中进行常规传代培养.采用MTT比色法观察5-BDEs对MCF-7细胞增殖的影响,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术和免疫组化方法检测5-BDEs对c-myc原癌基因和p53抑癌基因表达的影响.[结果]与溶剂对照组相比,在1×(10-4～10-8)mol/L浓度范围内,5-BDEs与1×10-8mol/L雌二醇作用类似可显著促进MCF-7细胞增殖(P<0.05),并表现出良好的剂量-效应和时间-效应关系.RT-PCR及免疫组化结果显示,1×(10-4～10-8)mol/L的5-BDEs可促进MCF-7 c-myc和抑制p53 mRNA及蛋白表达.[结论]5-BDEs具有雌激素样生物活性,可促进雌激素反应性肿瘤细胞MCF-7增殖,这一效应主要是通过影响c-myc mRNA和蛋白质的表达而实现的.     

五氯酚的类雌激素效应初探

目的 研究五氯酚(PCP)的类雌激素活力对MCF-7细胞增殖的影响.方法 采用离体MCF-7细胞增殖试验检测PCP的类雌激素活力,并用生长曲线对其作用机制进行初步探讨.结果 PCP在7.5×10-7～7.5×10-5 mol/L有明显刺激MCF-7细胞增殖的类雌激素活力,在7.5×10-6 mol/L增殖效应最大.细胞周期分析PCP组细胞增殖指教均明显高于溶剂对照组.结论 PCP在7.5×10-7 ～7.5×10-5 mol/L具有刺激MCF-7细胞增殖的类雌激素活力.     

氯氰菊酯对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响

目的通过观察氯氰菊酯(cypermethrin,CYP)对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞增值的影响,探讨氯氰菊酯促进细胞增殖的生物学机制。方法 MCF-7细胞在加受试物前7 d改为无酚红完全培养基,以耗尽细胞内储存的雌激素。实验设为6组:无水乙醇(EtOH)溶剂对照组、雌二醇(E2)雌激素对照组、他莫西芬(TAM)抗雌激素对照组及氯氰菊酯3个浓度梯度(1.0×10-7mol/L、1.0×10-8mol/L、1.0×10-9mol/L)实验组。采用CCK8法检测各组细胞的增值情况,采用Hoechst 33342和Propidium Iodide双染荧光显微镜观察氯氰菊酯对雌激素耗尽诱导细胞凋亡作用影响。结果第4、5天细胞增殖实验,与EtOH溶剂对照组相比,除TAM抗雌激素组与EtOH溶剂对照组细胞增殖活力低外,其他4组细胞增殖活力低,依次为E2雌激素对照组、氯氰菊酯1.0×10-7mol/L组、氯氰菊酯1.0×10-8mol/L组、氯氰菊酯1.0×10-9mol/L组,P均<0.05;第3天与EtOH溶剂对照组比,E2雌激素对照组MCF-7细胞增殖活力高,P<0.05,第2天差异无统计学意义。荧光显微镜下见,EtOH溶剂对照组相比和TAM抗雌激素组细胞的凋亡作用明显,后者强于前者,而E2雌激素对照组、氯氰菊酯1.0×10-7mol/L组、氯氰菊酯1.0×10-8mol/L组、氯氰菊酯1.0×10-9mol/L组对细胞凋亡作用不明显。结论氯氰菊酯有可能是通过抑制乳腺癌细胞凋亡而发挥其促进细胞增殖作用的。     

双酚A对乳腺癌MCF-7细胞的增殖作用及对其癌基因EphA2和c-Myc的mRNA表达水平的影响

[目的]研究具有类雌激素效应的环境污染物双酚A（Bisphenol A，BPA）对雌激素受体（Estrogen Receptor，ER）阳性的乳腺癌MCF-7细胞增殖作用及对其中癌基因EphA2和c-Myc mRNA表达的影响。[方法]以10^-4、10^-5、10^-6、10^-7、10^-8、10^-9、10^-10mol／L等不同浓度的BPA对体外培养的MCF-7细胞进行染毒，通过细胞计数检测细胞增殖情况并使用RT-PCR方法测定细胞EphA2和c-Myc的mRNA表达量。[结果]BPA作用MCF-7细胞后可引起细胞增殖，各浓度组均高于溶剂对照组（P〈0．05）；并使其中的EphA2和c-Myc的mRNA表达呈现上升趋势，各浓度组c-Myc的mRNA水平要高于溶剂对照组（P〈0．05）。[结论]BPA引起的细胞增殖可能是通过EphA2和c-Myc等癌基因的表达增加而引起的，并且BPA对细胞的增殖作用有一定的浓度范围。     

氯化汞雌激素样作用及其机制的实验研究

目的评价氯化汞(HgCl2)的雌激素样作用及其作用机制.方法从体内和体外两个水平,观察不同浓度的HgCl2对MCF-7人乳腺癌细胞增殖作用、去卵巢SD大鼠子宫的诱导增生作用、过氧化物活力的变化及对雌激素结合雌激素受体的影响.结果 10-6～10-9 mol/L的HgCl2均可引起MCF-7人乳腺癌细胞增殖,10-7 mol/L的HgCl2使MCF-7人乳腺癌细胞增殖达最大.每天0.04、0.20及1.00 mg/kg连续3 d腹腔注射HgCl2能刺激大鼠子宫增生和过氧化物酶活力增加;但HgCl2不影响雌二醇(E2)与雌激素受体结合.结论 HgCl2可能通过雌激素受体介导而表现出雌激素样作用,但不与E2竞争结合雌激素受体.     

双酚A对人胚肝细胞DNA损伤和修复功能的影响

[目的]研究双酚A(BisphenolA,BPA)对人肝L-02细胞DNA损伤修复功能的影响。[方法]分别以1、10、50、100μmol/LBPA和100μmol/LBPA+30μg/LVitC处理L-02细胞,比较处理和未处理的人胚肝L-02细胞在DNA损伤程度、切除修复鼠缺陷交叉互补蛋白1(ERCC1)、尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)、错配修复hMSH2基因(hMSH2)、DNA依赖蛋白激酶复合物(DNA-PKcs)及O6-甲基鸟嘌呤甲基转移酶(MGMT)表达水平的差异。每组细胞数均为1×106个/ml。[结果]BPA处理后,彗星试验显示BPA在低剂量(10μmol/L)时即具有DNA损伤作用(P<0.05),随着剂量增大,DNA损伤效应增加。100μmol/LBPA+30μg/LVitC组DNA损伤效应降低,显示抗氧化剂VitC可减缓BPA所致的DNA损伤效应,氧化损伤是BPA所致DNA损伤的方式之一。5种DNA损伤修复酶表达水平在1μmol/L、10μmol/L、50μmol/L剂量组依次降低,在100μmol/L、100μmol/L+VitC组依次增加,50μmol/L组各种DNA损伤修复酶表达水平最低。BPA50μmol/L组与溶剂对照比较,5种DNA损伤修复酶均有明显降低,差异具有显著性(P<0.05)。100μmol/L组的表达水平均高于50μmol/L组,100μmol/L+VitC组均高于100μmol/L组。除DNA-PKcs与hMSH2外,其他DNA损伤修复酶在100μmol/L+VitC组与溶剂对照组比较差异均无显著性(P>0.05)。[结论]BPA对L-02细胞具有氧化损伤作用,并可导致DNA损伤,多种DNA损伤修复酶参与修复双酚A所导致的DNA损伤。VitC可减缓双酚A的DNA损伤作用。     

金雀异黄素对人乳腺癌细胞MCF-7生长影响

目的 观察金雀异黄素在低雌激素水平情况下对雌激素依赖阳性人乳腺癌细胞MCF-7的生长影响.方法 采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期分布情况,磷脂结合蛋白V/碘化丙啶(AnnexinV/PI)联合双染法检测细胞凋亡,间接免疫荧光法测定雌激素调节蛋白(prcsenilin2,PS2>)的表达.结果 当MCF-7细胞经过去雌激素处理以后,与对照组相比,金雀异黄素在5×10-7～10-5mol/L时可以促进细胞增殖,G0>/G1>期细胞向S期推进,PS2>蛋白表达增加,但是抑制细胞凋亡作用并不明显.结论 金雀异黄素在低雌激素水平情况下可以促进人乳腺癌细胞MCF-7的细胞增殖、DNA合成以及PS2>蛋白的表达,具有一定的雌激素样作用.     

二氯二苯二氯乙烯的类雌激素活性的实验研究

目的研究二氯二苯二氯乙烯(DDE)的类雌激素活性对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖的影响。方法采用了体外MCF-7细胞增殖试验检测了DDE(3×10-5、3×10-6、3×10-7、3×10-8、3×10-9 mol/L)的类雌激素活性,并用生长曲线分析对其作用机制进行了初步探讨。结果3×10-6 mol/LDDE染毒组吸光度值高于溶剂对照组且MST-7细胞增殖的生长曲线与10-9 mol/L17β-雌二醇染毒组相似。结论DDE具有刺激MCF-7细胞增殖的类雌激素活性,其机制可能与17β-雌二醇相同。     

P,P’-DDD对人乳腺癌细胞的增殖作用

[目的]观察对,对-二氯二苯基二氯乙烷（P,P’-DDD）对人乳腺癌（MCF-7）细胞增殖的影响。[方法]采用体外培养MCF-7细胞增殖试验检测DDD的类雌激素活性,并用生长曲线对其作用机制进行初步探讨。[结果]DDD染毒剂量在3×10^-7mol／L、3×10^-6mol／L时,存在刺激MCF-7细胞增殖的类雌激素活性（P〈0．05）,在3×10^-6mol／L剂量时其增殖效应最大。细胞生长曲线方面,DDD组在第3、5、7天各时间段细胞数均明显高于溶剂对照组（P〈0．05）。[结论]DDD在3×10^-7mol／L、3×10^-6mol／L具有刺激MCF．7细胞增殖的类雌激素活性。     

17β-雌二醇对乳腺癌细胞的增殖作用及其对雌激素受体相关受体的调控作用

目的 研究17β-雌二醇(17β-E2)对乳腺癌细胞MCF-7增殖作用及其对雌激素受体相关受体(ERRα)的调控作用.方法 分别用10-12、10-11、10-10、10-9、10-8、10-7、10-6mol/L的17β-E2作用于MCF-7细胞24h,以DMSO作为溶剂对照,采用MTr法测定细胞增殖情况.分别用10-10、10-9、10-8、10-7mol/L 17β-E2作用于MCF-7细胞24 h后,采用RT-PCR法检测ERRa表达水平的变化.结果 10-12、10-11、10-10、10-9、10-8、10-7mol/L剂量17β-E2作用于MCF-7细胞24h后,对细胞的增殖率分别为112.09%,122.09%,123.42%,120.46%,124.60%,109.23%,均能促进细胞生长,并且随着受试物浓度的增加,细胞增殖效应增加,在10-6mol/L剂量时达到最大,而10-6 mol/L剂量的17β-E2作用于MCF-7细胞24 h后,其增殖率为67.97%,对细胞生长的产生抑制.10-10、10-9、10-8、10-7 mol/L 17β-E2作用于MCF-7细胞24 h后,ERRa的表达水平上调.结论 一定剂量范围内17β-雌二醇对MCF-7细胞有增殖作用,并且可以上调ERRα表达,提示ERRα在调节乳腺癌细胞生长中可能发挥着重要作用.     

热休克蛋白70的表达在苯并[a]芘致DNA损伤中的作用

目的　探讨苯并 [a]芘 (BaP)作用下人肺腺癌A5 4 9细胞热休克蛋白 70 (HSP70 )表达改变及其在DNA损伤中的作用。方法　离体培养A5 4 9细胞 ,以不同浓度的BaP(0、1.2 5、2 .5 0、5 .0 0、10 .0 0μmol L)染毒 6h或 10 μmol L的BaP染毒不同时间 (0、4、8、12、16、2 4、4 8h) ;分别以Western blot和单细胞凝胶电泳方法检测细胞HSP70表达和DNA损伤情况 ;并进一步分析HSP70表达和DNA损伤之间的关系。结果　 1.2 5、2 .5 0、5 .0 0、10 .0 0 μmol L的BaP作用 6h时 ,A5 4 9的HSP70积分光密度分别为4 9.6 3± 1.30、4 5 .72± 1.0 3、4 0 .5 3± 0 .95、37.5 0± 1.2 0 ,均低于对照组 (5 9.4 3± 1.17) ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 ) ;10 μmol L的BaP作用 4、8、12、16h时 ,HSP70的积分光密度分别为 33.33± 0 .80、2 9.2 3± 0 .91、12 .5 1± 0 .96、9.5 0± 1.2 5 ,而在 2 4、4 8h时 ,HSP70的积分光密度分别为 2 0 .0 6± 1.38、2 4 .5 1± 1.39,与对照组 (5 6 .5 9± 0 .85 )比较 ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。 1.2 5、2 .5 0、5 .0 0、10 .0 0 μmol L的BaP作用 6h时 ,在 10 6 个细胞中 ,DNA损伤积分分别为 10 0 82± 75 80、2 3718± 2 938、30 12 8± 2 937、4 4 2 31± 384 6 ,其中 2 .5 0～ 10 .     

玉米赤霉烯酮和氯化镉对MCF-7细胞增殖的联合作用

目的研究玉米赤霉烯酮(ZEA)和氯化镉(CdCl2)联合作用对MCF-7细胞增殖的影响。方法调整MCF-7细胞密度约为1×10~5/mL,以0(对照)、10~(-8)、10~(-7)、10~(-6)、10~(-5)、10~(-4)、10~(-3)mol/L CdCl_2分别染毒MCF-7细胞24h,以0(对照)、6.25、12.5、25、50、100nmol/L ZEA分别染毒MCF-7细胞24h,采用CCK-8法检测CdCl_2和ZEA对MCF-7细胞增殖的影响,同时进行3×3析因设计研究CdCl_2和ZEA对MCF-7细胞增殖的联合作用。结果 CdCl_2和ZEA分别在10~(-6) mol/L、100nmol/L时促增殖效应均达到最大,相对增殖率分别为112.3%和114.6%,明显高于阴性对照组的100.0%;析因实验结果显示CdCl_2和ZEA对MCF-7细胞增殖的影响表现为相加作用。结论 CdCl_2和ZEA在一定剂量范围内能促进MCF-7细胞增殖,表现为明显的拟雌激素活性,二者联合作用表现为加和效用。     

苯并芘对人支气管上皮细胞周期影响

目的 探讨苯并芘(BaP)对人支气管上皮细胞(16HBE细胞)周期影响及其作用机制.方法 使用不同浓度BaP染毒16HBE细胞后,检测细胞增殖率,使用流式细胞仪分析细胞周期的改变,并采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)和western blot检测DNA损伤相关基因共济失调毛细血管扩张突变基因(ATM)和p53改变.结果 BaP能明显抑制细胞增殖功能;BaP染毒后细胞S期延长,0、5、10、20、40、80μmol/L剂量组S期细胞比例分别为18.25％、39.59％、40.96％、41.89％、42.82％、43.16％;RT-PCR和western blot分析均显示BaP作用后ATM和p53蛋白表达增加,当BaP作用剂量达到40 μmol/L时,ATM基因相对表达量为(3.0±0.21)、p53基因的相对表达量为(3.2±0.11),明显高于对照组(P＜0.01).结论 BaP能明显延长16HBE细胞的S期,而ATM和P53基因在其中可能发挥重要作用.     

DNA聚合酶β对苯并[a]芘致细胞遗传毒性及基因组遗传不稳定性的影响

目的 研究DNA聚合酶β(polβ)表达水平对苯并[a]芘(BaP)致细胞遗传毒性及基因组遗传不稳定性的影响,为BaP的致癌分子机制提供实验依据.方法 采用3种具有相同遗传背景的小鼠胚胎成纤维细胞[polβ野生型(polβ+/+)、polβ缺陷型(polβ-/-)和polβ高表达型(polβoe)]作为模型,检测BaP对细胞的氧化损伤作用,细胞遗传毒性和基因组遗传不稳定性.结果 随着BaP浓度的增加,3种细胞的存活率和克隆形成能力均下降.5.00和20.00 μmol/L BaP染毒时,polβ-/-细胞产生的ROS荧光强度均大于polβ+/+和polβoe细胞,差异均有统计学意义(P＜0.05).在5.00和20.00μmol/L时,polβ-/-卢细胞SOD活力为(76.56±2.84)和(62.78±4.28) U/mg pro,低于对照组[(84.85±3.59) U/mg pro]和polβ+/+细胞[(85.21 ±3.20)和(76.90±3.38) U/mg pro],20.00 μmol/L BaP染毒组polβoe细胞SOD活力[(82.59±4.64) U/mg pro]低于对照组[(88.58±6.77) U/mg pro]但高于相同浓度染毒的polβ +/+细胞,差异均有统计学意义(P＜0.05).1.25、5.00和20.00 μmol/L BaP染毒组的polβ-/-细胞的微核形成率明显高于polβ +/+细胞,5.00和20.00 μmol/LBaP染毒组的polβ oe细胞的微核形成率明显低于pol β+/+细胞,差异均有统计学意义(P＜0.05).5.00和20.00 μmol/L BaP染毒组polβ-/-细胞的HPRT基因突变频率为26.16×10-6和37.51×10-6,polβ oe细胞为27.68×10-6和38.63×10-6,均明显高于polβ +/+细胞(19.76×10-6和24.78×10-6),差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 Polβ在保护细胞免受BaP造成的细胞毒性和遗传毒性方面具有积极的作用,其正常表达对于维持细胞基因组遗传稳定性具有重要的意义.     

顺式氯氰菊酯离体拟雌激素活性评价及机制初探

目的研究顺式氯氰菊酯对人类乳腺癌MCF-7细胞增殖及对其雌激素受体αmRNA表达的影响。方法顺式氯氰菊酯分为1.0×10-7、1.0×10-8、1.0×10-9mol/L 3个剂量组,阳性对照β-雌二醇分为1.0×10-7、1.0×10-9、1.0×10-11mol/L剂量组,以及溶剂对照和空白对照组。MCF-7细胞按以上分组于96孔板培养5 d后测吸光度值,计算细胞增殖率;相同分组及方法培养MCF-7细胞后提取RNA,逆转录,应用实时定量聚合酶链反应确定雌激素受体αmR-NA的表达量。结果不同浓度的顺式氯氰菊酯与溶剂对照组比较,细胞增殖率均升高(P<0.01)。1.0×10-7、1.0×10-8、1.0×10-9mol/L浓度顺式氯氰菊酯处理MCF-7细胞的雌激素受体αmRNA表达水平上调,分别为溶剂对照组的1.61、1.45和1.39倍。结论顺式氯氰菊酯可显著促进MCF-7细胞的生长,表现出拟雌激素样作用,并使MCF-7细胞雌激素受体αmRNA表达上调。     

双酚A和对-壬基酚雌激素受体的竞争性结合

目的　用雌激素受体竞争性结合试验检测双酚A(BPA)、对 -壬基酚 (p -NP)的雌激素样活性。 方法　将SD大鼠进行人工卵巢去除术 ,饥饿受体 14d后提取子宫胞浆雌激素受体 (ER) ,受体蛋白定量 ,作雌二醇 (E2 )非标记配体饱和分析 ,以确定E2 的IC50 。随后进行BPA和 p -NP的竞争性取代实验 ,观察BPA ,p -NP是否能与3 H -E2竞争性结合大鼠子宫胞浆ER。结果　E2 的IC50 是 1× 10 -9mol/L ,BPA、p -NP的IC50 分别为 2 0 8× 10 -5mol/L和2 6 6R10 -5mol/L ,BPA、p -NP的相对结合亲和力系数 (RBA)分别为 0 0 0 4 8和 0 0 0 38,BPA与ER的结合能力稍高于 p -NP。 结论　BPA和 p -NP结合ER是发挥其雌激素样效应机制中的重要因素     

金雀异黄素对DDT类农药诱导乳腺癌细胞增殖效应的抑制作用

目的 探讨金雀异黄素( genistein,Gen)与DDT类有机氯农药(o,p’-DDT,p,p’-DDT和p,p’-DDE)联合作用对乳腺癌(MCF-7)细胞增殖效应的抑制作用.方法 取处于对数生长期的MCF-7细胞,分别加入含100 μmol/Gen 和0.1 μmol/L o,p’-DDT、0.1μmol/Lp,p’-DDT、10 μmol/Lp,p’-DDE单独作用组以及100 μmol/L Gen +0.1 μmol/Lo,p’-DDT、100 μmol/L Gen +0.1 μmol/Lp,p’-DDT、100 μmol/L Gen+10 μmol/LP,p’-DDE的培养基,并设溶剂对照(0.1％无水乙醇)组和雌激素对照(10-3 μmol/L雌二醇)组.培养48 h后,采用噻唑蓝(MTT)实验检测MCF-7细胞的增殖情况.结果 与溶剂对照相比,100 μmol/L的Gen作用组MCF-7细胞的增殖率下降,0.1 μmo/L的o,p’-DDT作用组MCF-7细胞的增殖率升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).与相应DDT类农药单独组相比,Gen+o,p’-DDT、Gen+p,p’-DDT联合作用组MCF-7细胞的增殖率明显下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 Gen能够抑制DDT类农药诱导的MCF-7细胞增殖效应.