全自动琼脂糖凝胶电泳系统检测血红蛋白A_2诊断β-地中海贫血

目的:分析全自动琼脂糖凝胶电泳系统检测血红蛋白A2(HbA2)在β-地中海贫血(β-地贫)筛查和诊断中的应用价值。方法:使用SH-2020全自动琼脂糖电泳系统对5 208例标本进行Hb电泳分析,测定Hb A、Hb F、Hb A2和异常Hb含量,并对可疑病例进行基因检测。结果:5 208例中检出β-地贫177例,Hb H病12例,β-地贫合并Hb E病10例,Hb G 5例,Hb D 2例,Hb CS 1例。结论:全自动琼脂糖凝胶电泳分辨率较高,能准确分析出Hb A、Hb F、Hb A2、Hb E、HbG、Hb D、Hb H和Hb CS,能较好地诊断地中海贫血(地贫),特别是对β-地贫筛查有很好的诊断价值。     

HbA2和HbF检测在儿童β-地中海贫血筛查中的应用研究

目的评价HbA2和HbF检测在儿童β-地中海贫血(β-地贫)筛查中的应用价值。方法选取β-地中海贫血患儿98例以及健康儿童105例作为研究对象,分别检测血浆中Hb A2、HbF含量。结果β-地贫组HbA2、Hb F水平明显高于对照组(P0.01)。HbA2、HbF及联合诊断β-地贫受试者工作特征曲线下面积分别为0.921,0.900,0.951,cutoff值分别为3.3%,0.6%。Logistic回归分析表明,与HbF相比,HbA2诊断价值更大。结论 HbA2和HbF检测对β-地贫诊断具有较高的灵敏度和特异性,是大规模筛查β-地贫比较理想的方法;且HbA2的诊断价值优于HbF;HbA2和HbF联合检测可提高儿童β-地贫的诊断符合率。     

两种不同溶血方法对Hb电泳分辨率的影响

目的探讨两种不同溶血方法对Hb电泳分辨率的影响。方法采用常规的四氯化碳法(CCL4)和美国Helena公司提供的进口REP溶血试剂法制备Hb液,用Helena公司REP型全自动琼脂糖凝胶电泳仪进行血红蛋白(Hb)电泳,比较两种溶血方法对Hb各区带分辨率的影响。结果检测临床标本189例,正常成人Hb电泳区带HbA2,REP法明显浅于四氯化碳法且区带扫描不清,定量不准;异常Hb区带如HbH,HbBat's,传统四氯化碳法区带清晰明显,REP法区带不明显。对HbH检出率四氯化碳法为90%,REP法为10%,经非参数检验中的麦克内马尔检验,两者之间有显著差异。结论用四氯化碳法制备Hb,电泳后的区带分辨率明显优于REP溶血试剂法,对异常血红蛋白病,如α-地贫、β-地贫等,应使用四氯化碳法制备Hb液。     

26335例地中海贫血监测结果分析

目的:干预地中海贫血(简称地贫)出生缺陷的发生。方法:对26335例育龄人群进行地贫筛查,测定受检者红细胞脆性及微量血红蛋白(Hb)电泳。然后对筛查异常者进行复查,做HbA2、HbF、HbH定量测定及应用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行肽链分析检测ζ链。HbA2和(或)HbF升高者为β地贫,ζ链阳性者为α地贫。夫妇双方均患α或β地贫者为高危夫妇,做产前诊断。结果:26 335例受检者中筛查阳性7 376例,接受复查的4 849例中查出地贫患者2 907人;高危夫妇402对,接受地贫产前诊断235对,检出中、重型地贫胎儿45例(已全部终止妊娠)。结论:广西是地贫的高发区,应在育龄人群中开展普查,对高危夫妇进行产前诊断干预地贫儿的出生,意义重大。     

两种不同溶血方法对Hb电泳分辨率的影响

目的探讨两种不同溶血方法对Hb电泳分辨率的影响。方法采用常规的四氯化碳法（CCL4）和美国Helena公司提供的进口REP溶血试剂法制备Hb液,用Helena公司REP型全自动琼脂糖凝胶电泳仪进行血红蛋白（Hb）电泳,比较两种溶血方法对Hb各区带分辨率的影响。结果检测临床标本189例,正常成人Hb电泳区带HbA2,REP法明显浅于四氯化碳法且区带扫描不清,定量不准;异常Hb区带如HbH,HbBat＇s,传统四氯化碳法区带清晰明显,REP法区带不明显。对HbH检出率四氯化碳法为90％．REP法为10％,经非参数检验中的麦克内马尔检验,两者之间有显著差异。结论用四氯化碳法制备Hb,电泳后的区带分辨率明显优于REP溶血试剂法,对异常血红蛋白病,如α-地贫、β-地贫等,应使用四氯化碳法制备Hb液。     

血液学指标和Hb电泳及RBC脆性对地中海贫血与缺铁性贫血的诊断价值

目的:探讨红细胞的MCV、MCH、MCHC、RDW等血液学指标及红细胞脆性、Hb电泳对地中海贫血及缺铁性贫血的诊断价值。方法:正常对照组30例,地中海贫血患者100例(其中α-地中海贫血60例,β-地中海贫血40例),缺铁性贫血患者30例。全部样本进行血细胞计数仪血常规测定、红细胞脆性检测、血红蛋白电泳仪进行血红蛋白电泳分析、地贫基因检测和血清铁蛋白检测。结果:病人组血红蛋白电泳HbA、HbA2、HbF异常,MCV、红细胞脆性均降低,与正常对照组比较有显著差异(P<0.05),MCV、红细胞脆性对地贫的灵敏度和特异度分别为98%、93%及77%、80%。HbA2对α-地贫、β-地贫灵敏度分别为83.3%,95.0%,而RDW基本正常,灵敏度为73%,缺铁性贫血的RDW升高,灵敏度为70%。结论:MCV、血红蛋白电泳、红细胞脆性对地贫有诊断意义,可作为简单、方便、快速、较准确的筛查方法;对于缺铁性贫血,RDW可作为先于血清铁蛋白的初筛试验,值得推广应用。     

广西南宁市农村育龄人群地中海贫血筛查及基因型和血液学参数分析

目的调查南宁市农村育龄人群地中海贫血（地贫）基因携带率和基因型，分析地贫血液学参数变化特点。方法以血红蛋白（Hb）自动分析仪．VARIANT（HPLC）和Cell Dyn1700全自动血细胞分析仪检测育龄青年2044例，其中430例（地贫筛查中随机选择的75对夫妇以及血细胞分析提示夫妇双方或一方为地贫表型阳性的育龄夫妇140对）同步进行地贫基因分析。结果检出8地贫163例，8地贫基因携带率7．97％，检出HbH病13例，Hb Manitoba2例，HbJ 2例，HbQ1例。α地贫2基冈型以-α^3.7／αα、-α^CS／αα和-α^WS／αα居多，α地贫1以—^SEA／αα为主，β地贫杂合子以41-42为主，α、β复合型地贫有较高的检出率。所有HbH病和β地贫平均红细胞体积（MCV）和平均红细胞Hb含量（MCH）均降低，86例α地贫1中除1例MCH正常外均降低，而66例α地贫2中17例MCV和MCH均正常，69例β地贫杂合子中有32例HbF增高，但没有一例只有HbF增高而HbA2不增高，α、β复合型地贫主要呈现β地贫血液学特点。结论南宁市农村育龄人群地贫基因携带率高，-α^WS／αα和-α^CS／αα基因型α地贫2较多，高发区MCV和MCH降低应疑为地贫。     

胎血HbA定量分析诊断β地中海贫血的价值

目的 探讨胎儿脐血HbA定量在孕中、晚期诊断β地中海贫血(β地贫)的价值。方法 应用全自动电泳分析系统对75例胎儿脐血行血红蛋白(Hb)电泳并作HbA定量分析；用反向点杂交(RDB)法检测β地中海贫血基因DNA为诊断的金标准。结果 电泳法对重型、中间型B地贫及HbE的检出灵敏度、特异度和符合率较高，误诊率及漏诊率为0，而对轻型β地贫及其他类型的检出灵敏度、特异度及符合率较低，误诊率、漏诊率较高。结论 胎儿脐血HbA定量结合家系史可实现生化水平上对孕中晚期胎儿β地中海贫血的初步诊断，反向点杂交法结合HbA定量分析有利于提高B地贫的诊断准确率。     

儿童中间型和重型β地中海贫血基因型及血液学特点

目的探讨广西地区儿童中间型和重型β地中海贫血(简称地贫)基因型及血液学的不同特点。方法47例β地贫儿童分为中间型(14例)和重型(33例)两组,检测β地贫基因、缺失型α地贫基因、Gγ珠蛋白基因启动子-158(Gγ-158)位点单核苷酸多态性(SNP),并测定外周血Hb、MCV、HbF和HbA2含量。结果中间型组携带nt-28β+地贫基因者7例(50%),复合--SEA缺失型α地贫1者5例(35.7%),6例(42.8%)Gγ-158位点碱基为T。重型组中,6例(18.2%)携带β+地贫基因,2例(6.1%)复合-α3.7缺失型α地贫2者3例(9.1%)携带Gγ-158(T)。中间型、重型组的血液学指标分别为Hb:(75.9±9.7)g/L、(56.4±7.6)g/L;MCV:(68.9±5.9)fl(、65.4±4.1)fl;HbF:(66.9±16.3)%(、56.5±22.7)%;HbA2:(2.4±1.2)%(、2.7±1.6)%。结论广西地区儿童β地贫中间型比重型更多地检出nt-28突变、--SEA缺失型α地贫1及Gγ-158(T)。二者的主要差别在于贫血严重程度,无法从MCV、HbF、HbA2水平区分此两型病人。     

毛细管血红蛋白电泳筛查新生儿中重度β地中海贫血截断值探讨

目的 分析新生儿毛细管血红蛋白电泳特点,探讨筛查新生儿中重度β地中海贫血的(地贫)截断值。方法 回顾性分析1 020例新生儿毛细管血红蛋白电泳结果与β地中海贫血基因检测结果。根据出生胎龄及基因结果分为6组,分析各组HbA和HbF含量。通过受试者工作曲线(ROC)确定筛查新生儿中重度β地中海贫血的截断值。结果 除异常血红蛋白组外,中重度β地贫组HbA含量低于其它各组(P＜0.05);中重度β地贫组HbF含量高于其它各组(P＜0.001)。HbA筛查新生儿中重度β地贫曲线下面积( AUC)为0.993,大于HbF的AUC 0.697。当HbA截断值为2.35%时,灵敏度为100%,特异度为99.0%。结论 毛细管血红蛋白电泳筛查新生儿中重度β地中海贫血HbA的截断值为2.35%;结合分析HbF含量及血红蛋白图谱分析可以进一步降低假阳性。     

SH2020全自动琼脂糖凝胶电泳仪在地中海贫血筛查中的应用价值

目的:探讨SH2020全自动琼脂糖凝胶电泳仪在地中海贫血筛查中的应用价值。方法:采集外周静脉血作血常规,应用SH2020全自动琼脂糖凝胶电泳仪Hb电泳进行地中海贫血筛查,筛查结果阳性者进行基因诊断确诊。结果:对玉林地区人群2 998例进行地中海贫血筛查,筛出α地中海贫血540例,阳性率18.01%,筛出β地中海贫血422例,筛查阳性率14.08%。部分阳性者经GAP-PCR方法和PCR结合反向点杂交(RDB)技术作基因诊断,α地中海贫血阳性者符合率为75.00%,β地中海贫血符合率为82.94%。结论:应用SH2020全自动琼脂糖凝胶电泳仪Hb电泳进行地中海贫血筛查简便易行,检出率较高,适宜推广使用。     

新生儿地中海贫血筛查与临床研究

目的:了解茂名市α-地中海贫血基因携带率的情况。方法:用血红蛋白电泳法,红细胞孵育渗透脆性试验(erythrocyte incuba-ted osmotic fragility test)和结合平均红细胞参数(MCV),对2006年8月~2007年11月在本院出生的新生儿进行α-地贫筛查。结果:新生儿地中海贫血阳性检出率为12.50%,(492/3935);②检出异常区带Hb-Bart's共398例,阳性率10.10%,根据Hb-Bart's含量推算出静止型、标准型α-地贫、HbH病、巴氏水肿胎的携带率分别为1.91%、7.98%和0.18%、0.01%。另外发现异常血红蛋白病共11例,发生率为0.28%,其中HbE1例、HbG3例、HbC-S1例、Hb-M3例、Hb-D3例。结论:茂名市属于地贫高发区,应加强新生儿地贫筛查和产前诊断,早发现,早预防,指导合理婚配,以达到杜绝重型地贫儿出生,降低HbH病,防止Hb-Bart's胎儿水肿综合征等重型α-地贫的发生,对优生优育,提高人口素质具有重要意义。     

脐血血红蛋白电泳Hb A值辅助诊断胎儿β-地中海贫血及鉴定母血污染的价值

目的探讨胎儿脐血血红蛋白电泳Hb A值在孕中、晚期诊断β-地中海贫血以及母血污染鉴定的应用价值。方法收集父母双方为β-地中海贫血携带者作为指征进行产前诊断且孕周为24²8 w的胎儿54例。应用全自动毛细管电泳系统对胎儿脐带血进行电泳分析,且采用反向点杂交法检测β地中海贫血基因。结果 12例β-地中海贫血基因型正常的胎儿脐带血Hb A的平均值为(6.3%±1.9%);31例β杂合突变的Hb A值范围为2.6%28 w的胎儿54例。应用全自动毛细管电泳系统对胎儿脐带血进行电泳分析,且采用反向点杂交法检测β地中海贫血基因。结果 12例β-地中海贫血基因型正常的胎儿脐带血Hb A的平均值为(6.3%±1.9%);31例β杂合突变的Hb A值范围为2.6%³.7%;10例基因纯合突变或双重杂合突变中有6例胎血Hb A为0,4例为0.4%3.7%;10例基因纯合突变或双重杂合突变中有6例胎血Hb A为0,4例为0.4%⁰.7%;母血污染1例。结论脐血血红蛋白电泳Hb A值可辅助诊断轻型、中间型及重型胎儿β-地中海贫血,并可以作为母血污染鉴定的一种方法。     

MCV、MCH联合Hb电泳在地中海贫血筛查中的临床应用价值

目的探讨平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白(MCH)联合血红蛋白(Hb)电泳在地中海贫血筛查中的临床应用价值,对地中海贫血初筛阳性者、夫妇为同型地中海贫携带者进行基因诊断,避免重型地中海贫血患儿出生。方法采用血常规五分类中的MCV、MCH联合血红蛋白电泳进行孕妇产前筛查。结果在3 720例被筛查人群中,筛查阳性765例,阳性率20.56%,其中:筛出α地中海贫血445例,阳性率11.96%,β地中海贫血320例,阳性率8.60%。经基因诊断确诊地中海贫血545例,占筛查总数的14.65%,其中:α地贫308例,占8.28%,β地贫杂合子185例,占4.97%,α复合β地贫52例,占1.40%。结论 MCV、MCH联合血红蛋白电泳可作为地贫初筛阳性的指标,结合基因诊断,对地中海贫的筛查和诊断有较大意义。     

HbF水平在β-地中海贫血携带者妊娠期产前筛查中的应用

目的研究胎儿血红蛋白HbF与妊娠和β-地贫的关系。方法采集妊娠与非妊娠期女性外周血,进行HbF血红蛋白电泳分析。同时提取外周血基因组DNA,应用反向斑点杂交技术进行基因分析。分别比较HbF增高在妊娠组与非妊娠组、正常组与β-地贫组、非妊娠组内β-地贫与正常样本、妊娠组内β-地贫与正常样本和β-地贫组内妊娠与非妊娠样本间的统计学差异。结果不同β-地贫突变类型人群的HbF增高比例也不同,其中-28突变的HbF增高病例占所有HbF增高病例的比例最大(39.39%),IVS-П-654、CD27-28、CD41-42和CD17也都呈现出不同的HbF增高比例,而其他的突变类型的增高情况较少。HbF增高率的差异在各分组间均有统计学意义,但其增高水平之间的差异则仅在正常组与β-地贫病例组间有统计学意义。结论 HbF增高率在β-地贫携带者妊娠期与非妊娠期、健康女性妊娠期与非妊娠期均有明显差异,β-地贫携带者在妊娠期的HbF水平增高水平更高,这些现象对β-地贫产前筛查中有积极的指导作用。