过表达miR-145-5p 通过下调IGF1R抑制食管鳞状细胞TE-10 细胞的恶性生物学行为

目的：探究miR-145-5p 对食管鳞状细胞癌TE-10 细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）等恶性生物学行为的分子机制。方法：qPCR法检测miR-145-5p 在食管鳞状细胞癌细胞和正常食管上皮细胞中的表达水平。采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-145-5p 与胰岛素样生长因子1 受体（insulin-like growth factor 1 receptor，IGF1R）的靶向调控关系，Western blotting 检测IGF1R蛋白和EMT相关蛋白的表达，CCK-8 法和Transwell 检测miR-145-5p/IGF1R分子轴对TE-10 细胞增殖、侵袭、迁移的影响。结果：miR-145-5p 在3 株食管鳞状细胞癌细胞中低表达且在TE-10 细胞中表达最低（P<0.01 或P<0.05）。过表达miR-145-5p 可显著抑制TE-10 细胞的增殖、侵袭、迁移和EMT进程（P<0.01 或P<0.05）。双荧光素酶报告基因证实miR-145-5p 靶向下调IGF1R表达（P<0.01）。回复实验进一步证实，与单独过表达IGF1R相比，同时过表达miR-145-5p 和IGF1R能显著缓解IGF1R 对TE-10 细胞的增殖、侵袭、迁移和EMT 进程的促进作用（P<0.01 或P<0.05）。结论：过表达miR-145-5p 通过靶向下调IGF1R进而抑制了食管鳞状细胞癌TE-10 细胞的增殖、侵袭、迁移和EMT进程。     

过表达miR-129-5p通过靶向MAPK1抑制宫颈癌HeLa细胞恶性生物行为

[摘要] 目的：探讨miR-129-5p 对宫颈癌HeLa细胞侵袭、迁移和EMT的作用及其机制。方法：选取宫颈癌HeLa细胞,利用生物信息学预测软件筛选miR-129-5p 的靶基因,双荧光素酶报告基因验证miR-129-5p 和MAPK1 的靶向关系。将miR-129-5p mimic、miR-129-5p inhibitor 和pcDNA-MAPK1 单独或联合转染到HeLa细胞,用qPCR检测HeLa细胞中miR-129-5p 和MAPK1 的表达水平,用Transwell、划痕愈合实验分别检测HeLa 细胞的侵袭、迁移能力,WB检测细胞中E-cadherin、N-cadherin、MAPK1、STAT3 和Bcl-xL的表达。构建裸鼠HeLa细胞皮下移植瘤模型,观察miR-129-5p 过表达对移植瘤生长的影响,WB检测移植瘤组织中EMT及MAPK1 通路相关蛋白的表达。结果：miR-129-5p 与MAPK1 在3’UTR区存在结合位点,过表达miR-129-5p 靶向抑制MAPK1（P<0.01）。与对照组相比,miR-129-5p mimic 组侵袭细胞数目减少（P<0.01）,划痕愈合率降低（均P<0.01）;细胞中Ecadherin表达上调而N-cadherin、MAPK1、STAT3 和Bcl-xL 表达下调（均P<0.01）;共转染MAPK1 可逆转上述现象。成功建立裸鼠HeLa 细胞移植瘤模型,与对照组相比,miR-128-3p mimic 组肿瘤质量减轻（P<0.01）;瘤组织中E-cadherin 表达水平上调而N-cadherin、MAPK1、STAT3 和Bcl-xL 的表达下调（均P<0.01）。结论：过表达miR-129-5p 通过靶向MAPK1 抑制宫颈癌HeLa细胞的侵袭、迁移和EMT。     

lncRNA SBF2-AS1 通过调控miR-140-5p/VEGFA 分子轴促进宫颈癌HeLa细胞上皮间质转化

目的：探讨lncRNA SBF2-AS1 通过调控miR-140-5p/血管内皮生长因子A（VEGFA）分子轴对宫颈癌HeLa 细胞上皮间质转化（EMT）的影响。方法：细胞培养和转染后分为NC、miR-140-5p mimic、miR-140-5p mimic+pcDNA-VEGFA、si-lncRNASBF2-AS1+pcDNA-VEGFA及si-lncRNA SBF2-AS1+miR-140-5p mimic组5 组。采用qPCR检测lncRNA SBF2-AS1 在宫颈癌组织及细胞系中的表达水平,双荧光素酶报告基因验让lncRNA SBF2-AS1、miR-140-5p 与VEGFA的靶向关系,WB检测HeLa细胞中VEGFA及EMT标志物N-cadherin、Vimentin 和E-cadherin 的表达水平,Transwell 实验检测HeLa细胞侵袭和迁移能力。结果：lncRNASBF2-AS1 在宫颈癌组织及细胞系中高表达（P<0.05 或P<0.01）,lncRNA SBF2-AS1 靶向结合miR-140-5p,且VEGFA 是miR-140-5p 的靶基因（P<0.05）。敲降lncRNA SBF2-AS1 抑制HeLa细胞侵袭、迁移及EMT。进一步实验证实,lncRNA SBF2-AS1通过miR-140-5p 上调VEGFA的表达水平,从而促进HeLa 细胞侵袭、迁移及EMT（P<0.05 或P<0.01）。结论：lncRNA SBF2-AS1通过miR-140-5p/VEGFA分子轴促进HeLa细胞EMT。     

miR-192-5p通过靶向ZEB2调控胰腺癌PANC-1细胞的恶性生物学行为

目的：探讨miR-192-5p靶向E盒锌指结合同源框2（ZEB2）对胰腺癌PANC-1细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化（EMT）的影响及其作用机制。方法：利用TCGA数据库数据分析miR-192-5p和ZEB2在胰腺癌组织中的表达及两者的相关性。采用qPCR法和WB法分别检测人正常胰腺上皮细胞HPNE和胰腺癌PANC-1细胞中miR-192-5p和ZEB2的表达水平。利用脂质体转染技术转染PANC-1细胞,实验分为miR-192-5p mimic组、Mimic NC组、miR-192-5p inhibitor组、Inhibitor NC组、Mimic NC+pcDNA3.1 组 、miR-192-5p mimic+pcDNA3.1 组 、miR-192-5p mimic+pcDNA3.1-ZEB2 组。CCK-8 法 、克隆形成 、划痕愈合 、Transwell实验分别检测转染PANC-1细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力。qPCR法、WB法、双重免疫荧光实验检测PANC-1细胞中ZEB2、E-cadherin、vimentin的表达水平。通过生物信息学网站预测miR-192-5p的靶基因,并利用双荧光素酶报告基因实验验证miR-192-5p对靶基因的调控作用。结果：胰腺癌组织中ZEB2的表达显著高于正常胰腺组织（P<0.01）,且胰腺癌组织中miR-192-5p和ZEB2表达呈负相关（r=-0.419,P<0.01）。与HPNE细胞比较,PANC-1细胞中miR-192-5p低表达、ZEB2蛋白高表达（均P<0.01）。miR-192-5p过表达后,PANC-1细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力均显著降低,E-cadherin的mRNA和蛋白表达均上调、vimentin和ZEB2 mRNA和蛋白表达均下调;而抑制miR-192-5p后得到了相反的结果（P<0.05或P<0.01）。miR-192-5p靶向调控ZEB2的表达,过表达ZEB2可部分逆转上调miR-192-5p对PANC-1细胞增殖、迁移、侵袭和EMT进程的抑制作用。结论：miR-192-5p通过靶向ZEB2调控胰腺癌PANC-1细胞的恶性生物学行为。     

hsa-miR-150-5p靶向HIF1α 对成胶质细胞瘤U-251MG细胞恶性生物学行为的影响

目的：探讨hsa-miR-150-5p 靶向低氧诱导因子1α（hypoxia inducibility factor 1,HIF1α）对成胶质细胞瘤(glioblastoma,GBM)U-251MG细胞恶性生物学行为的影响及其作用机制。方法：qRT-PCR检测miR-150-5p 及其HIF1α mRNA在U-251MG细胞中的表达水平,荧光素酶报告实验验证miR-150-5p 和HIF1α 之间的生物学关系及miR-150-5p 和HIF1α 在U-251MG细胞中的生物学功能,Western blotting 检测miR-150-5p 及HIF1α 蛋白在U-251MG细胞中的表达,Transwell 实验检测U-251MG细胞的侵袭能力,划痕实验检测U-251MG细胞的迁移能力。结果：miR-150 mimic 转染U-251MG细胞后,HIF1α mRNA表达水平明显下调（P<0.01）,HIF1α 蛋白水平也明显下调（P<0.01)。miR-150-5p 降低了wt HIF1α 3’-UTR转染细胞的荧光素酶活性（P<0.05）,证实miR-150-5p 通过结合HIF1α 的3''-UTR负调控HIF1α 的表达。在U-251MG细胞中,miR-150-5p 过表达可明显抑制HIF1α 蛋白表达、细胞侵袭和迁移（均P<0.05）。结论：miR-150-5p 通过负调控HIF1α 抑制U-251MG细胞的侵袭和转移,表明miR-150-5p 和HIF1α 有可能是GBM潜在的治疗靶点。     

miR-126-5p靶向Notch2 对结肠癌SW480 细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响

目的:探讨miR-126-5p 对结肠癌SW480 细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及其作用机制。方法：用miR-126 mimic和pcDNA Notch2（pc-Notch2）等分别或同时转染结肠癌SW480 细胞,用qPCR法检测miR-126-5p 和Notch2 的表达;荧光素酶报告实验观察miR-126-5p 和Notch2 的靶向关系;CCK-8 法、划痕愈合实验、Transwell 小室法和Annexin V/PI 染色流式细胞术分别检测转染细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡,Western blotting 检测Notch2、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen, PCNA）、cleaved Caspase-3、MMP-2 和MMP-9 的表达。结果：转染miR-126 mimic 能显著升高SW480 细胞miR-126-5p 的表达水平（P<0.01）和显著抑制SW480 细胞Notch2 的表达（P<0.01）,同时证实Notch2 上存在miR-126-5p 的结合位点。上调miR-126-5p 显著抑制SW480 细胞增殖并降低PCNA的表达水平（P<0.01）、升高细胞凋亡率和cleaved Caspase-9 的表达水平（均P<0.01）,pc-Notch2显著减弱miR-126 mimic 对SW480 细胞增殖和凋亡的调控作用;miR-126 mimic 显著降低SW480 细胞划痕愈合率和穿膜细胞数（均P<0.01）、抑制MMP-2 和MMP-9 的表达（P<0.01）;pc-Notch2 显著减弱miR-126 mimic 对SW480 细胞迁移、侵袭及MMP-2、MMP-9表达的抑制作用（均P<0.01）。结论：miR-126-5p 通过抑制Notch2 表达,降低结肠癌SW480 细胞增殖、迁移和侵袭能力。     

miR-452-5p靶向SOX7促进食管癌KYSE-150细胞增殖、侵袭及EMT

目的： 检测miR-452-5p在食管鳞状细胞癌（ESCC）中的表达,并探讨其异常表达对食管癌KYSE-150细胞增殖、侵袭能力和EMT进程的影响及其分子机制。 方法： 收集2012年3月至2015年12月在河北医科大学第四医院就诊的86名ESCC患者的癌组织样本和对应的癌旁组织,用 qPCR 法检测 miR-452-5p 及其他相关基因在 ESCC 组织和细胞中的表达;向 KYSE-150 细胞中分别转染 miR-452-5p mimic 或 pcDNA3.1-SOX7 构建过表达的细胞株。分析 miR-452-5p 表达与 ESCC 病理特征和患者 5 年 OS 的关系。用 MTS、Tanswell 法检测miR-452-5p过表达对食管癌 KYSE-150 细胞增殖、侵袭能力和 EMT 进程的影响;用双荧光素酶报告基因实验及TOP/FOP报告基因系统检测miR-452-5p与 SRY 盒转录因子（SOX7）3''UTR 区的结合作用及对 Wnt/β-catenin通路活化水平的影响。 结果： miR-452-5p在ESCC组织中呈明显高表达（P<0.01）,并与ESCC患者的淋巴结转移、TNM分期及5年OS密切相关（均P<0.01）。miR-452-5p过表达明显促进食管癌KYSE-150细胞的增殖、侵袭能力及 EMT 进程（P<0.05或P<0.01）。SOX7是miR-452-5p的直接靶基因,miR-452-5p通过对SOX7的负向调控影响了Wnt通路活化水平（P<0.05或P<0.01）,同时,miR-452-5p表达也受Wnt通路活化水平的影响（P<0.05或P<0.01）,其可能为Wnt通路下游靶基因。 结论： miR-452-5p通过miR-452-5p/SOX7/Wnt/miR-452-5p正反馈环路提高Wnt/β-catenin通路活化水平,进而促进ESCCKYSE-150细胞的增殖、侵袭能力及EMT进程,miR-452-5p有望成为ESCC患者靶向治疗的潜在靶点及预后评估的新型分子标志物。     

miR-32-5p通过靶向下调EZH2的表达抑制胰腺癌PANC-1细胞的恶性 生物学行为与裸鼠移植瘤生长

目的：探究miR-32-5p通过靶向zeste基因增强子人类同源物2（EZH2）对胰腺癌PANC-1细胞恶性生物学行为的影响及其分子机制。方法：利用GEPIA数据库分析胰腺癌组织中EZH2的表达水平及其与患者的预后生存期的关系,并分析miR-32-5p表达与患者临床病理因素的关系。qPCR法检测正常胰腺HPDE6-C7细胞和胰腺癌PANC-1、AsPC-1、SW1990细胞中miR-32-5p和EZH2 mRNA的表达,通过LipofectamineTM 2000将miR-NC、miR-32-5p mimic、miR-32-5p inhibitor、pcDNA-NC、pcDNA EZH2质粒分别转染PANC-1细胞,其分为对照组（不转染）、miR-NC组（转染miR-NC）、miR-32-5p mimic组（转染miR-32-5p mimic）、Anti-miR-32-5p 组（转染miR-32-5p inhibitor）、miR-NC+pcDNA-NC组（转染miR-NC+pcDNA-NC）、miR-NC+pcDNA EZH2组（转染miR-NC+pcDNA EZH2）、miR-32-5p mimic+pcDNA-NC组（转染miR-32-5p mimic+pcDNA-NC）、miR-32-5p mimic+pcDNA EZH2组（转染miR-32-5p mimic+pcDNA EZH2）。双荧光素酶报告基因实验验证miR-32-5p与EZH2的靶向关系;MTT法及克隆形成实验检测各组细胞的增殖能力,划痕愈合实验检测各组细胞的迁移能力;Transwell小室实验检测各组细胞的侵袭能力,WB法检测各组细胞EZH2、E-cadherin、N-cadherin的表达;裸鼠成瘤实验检测转染后各组 PANC-1 细胞移植瘤的生长情况,免疫组化染色法观察移植瘤组织中Ki67和MMP-2的表达。结果：GEPIA数据库显示胰腺癌组织中EZH2的表达水平高于癌旁组织,患者预后生存期与EZH2的表达水平呈负相关（均P<0.05）;miR-32-5p表达水平与胰腺癌神经浸润、肿瘤分化程度、TNM 分期、淋巴结转移有明显的关联（均P<0.05）;与HPDE6-C7细胞相比,PANC-1、AsPC-1、SW1990细胞中miR-32-5p呈高表达、EZH2 mRNA呈低表达、miR-32-5p表达水平与EZH2 表达水平呈负相关（均P<0.05）。miR-32-5p靶向EZH2且抑制其表达（均P<0.05）;过表达miR-32-5p能够下调Ki67、MMP-2、N-cadherin 表达水平、上调 E-cadherin 表达水平,抑制 PANC-1 细胞的增殖、迁移和侵袭能力,抑制移植瘤质量增加（均 P<0.05）。结论：miR-32-5p能够靶向调控EZH2从而影响胰腺癌PANC-1细胞的增殖、迁移、侵袭、EMT进程及裸鼠体内移植瘤的生长。     

miR-223-3p 通过靶向RAC1 调控肝细胞癌SMMC-7721 细胞的增殖和凋亡

目的：探讨miR-223-3p 通过调控Ras 相关C3 肉毒素底物1（Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1，RAC1）对肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）细胞增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法：选用2016 年8 月至2018 年8 月吉林市中心医院手术切除的30 例HCC 组织及其癌旁组织标本和人HCC 细胞系SMMC-7721、Bel-7402、HepG2 及人正常肝细胞QSG-7701，用qPCR检测HCC组织和细胞系中miR-223-3p的表达水平。分别将miR-223-3p mimics、miR-223-3p inhibitor 和siRAC1转染至SMMC-7721 细胞，通过CCK-8、克隆形成实验和Annexin V-FITC/PI 染色流式细胞术检测SMMC-7721 细胞的增殖、克隆形成和凋亡水平。用双荧光素酶报告基因实验检测miR-223-3p 与RAC1 的靶向关系，Western blotting 检测细胞中RAC1 蛋白的表达水平。结果：miR-223-3p 在HCC组织的表达水平显著低于癌旁组织（P<0.01），其表达水平与肿瘤大小、TNM分期及肿瘤分化病理特征相关（P<0.05 或P<0.01）；miR-223-3p 在HCC细胞系表达水平显著低于QSG-7701 细胞（均P<0.01），以在SMMC-7721细胞中表达水平最低。双荧光素酶报告基因实验证实RAC1 是miR-223-3p 靶基因，miR-223-3p 靶向负调控RAC1 的表达。转染miR-223-3p mimics 显著抑制SMMC-7721 细胞的增殖和克隆形成能力（P<0.05 或P<0.01），并促进细胞凋亡（P<0.01）；转染miR-223-3p inhibtor 则逆转miR-223-3p mimics 对细胞的抑制作用。结论：过表达miR-223-3p 抑制HCC细胞增殖和克隆形成能力并促进细胞凋亡，其机制可能与靶向下调RAC1表达有关。     

lncRNA XIST通过调控miR-337-3p/HOXC8 轴促进胃癌的发展进程

[摘要] 目的：探讨lncRNA XIST（XIST）通过调控miR-337-3p/HOXC8 分子轴介导胃癌发展进程的分子机制。方法：选取2013 年3 月至2018 年1 月河北省唐山市开滦总医院普通外科手术切除的58 例胃癌组织和对应的癌旁组织标本,以及人胃癌细胞系AGS、MGC803、HGC27 和人胃黏膜细胞GES-1,用qPCR检测胃癌组织和细胞系中XIST 和miR-337-3p 的表达水平。将XIST敲降载体、miR-337-3p mimics/inhibitor 和HOXC8 过表达载体转染进AGS细胞,用CCK-8、Transwell 实验检测AGS细胞的增殖及侵袭能力,用WB检测HOXC8 及上皮钙黏蛋白（E-cadherin）、神经钙黏蛋白（N-cadherin）和波形蛋白（vimentin）的表达水平。用双荧光素酶报告基因验证XIST、miR-337-3p 和HOXC8 的靶向关系。结果：XIST在胃癌组织和细胞系中高表达（均P<0.01）。敲降XIST 显著抑制AGS细胞的增殖、侵袭和EMT（P<0.05 或P<0.01）。XIST 靶向作用miR-337-3p 并下调其表达,HOXC8 是miR-337-3p 的靶基因。敲降XIST 通过靶向上调miR-337-3p 对HOXC8 表达的抑制作用,从而抑制AGS细胞增殖、侵袭和EMT（P<0.05 或P<0.01）。结论：敲降XIST 可抑制AGS 细胞增殖、侵袭和EMT,其作用机制是通过靶向miR-337-3p 并下调HOXC8的表达。     

miR-139-5p通过靶向Notch1抑制上皮性卵巢癌细胞的增殖与侵袭

目的：探讨miR-139-5p靶向Notch1抑制上皮性卵巢癌（epithelial ovarian cancer，EOC）细胞增殖和侵袭的作用机制。方法：选取2018年1月至2018年12月在河南省南阳市中心医院妇科手术切除的24例EOC患者的癌和相应的癌旁组织标本，以及人卵巢癌细胞系SKOV3、ES2、HEY-T30和人卵巢上皮细胞株IOSE80，用qPCR检测EOC组织和细胞系中miR-139-5p和Notch1 mRNA的表达。将过表达miR-139-5p载体、重组质粒pLV-Notch1转染至SKOV3细胞，并设置空白对照组（Ctrl组）和阴性对照组（NC组），用双荧光素酶报告基因实验验证miR-139-5p与Notch1 3’-UTR靶向关系，用CCK-8、Transwell、划痕愈合实验分别检测细胞的增殖、侵袭和迁移能力，用Western blotting检测细胞中增殖和迁移相关蛋白的表达。结果：与癌旁组织和IOSE80细胞比较，EOC组织和细胞系中miR-139-5p表达显著降低、Notch1 mRNA表达显著升高（均P<0.01）。双荧光素酶报告基因实验结果证实，Notch1是miR-139-5p的靶基因。与NC组比较，miR-139-5p mimic组3 d时SKOV3细胞的增殖、侵袭、迁移能力和Notch1、NICD、Cyclin D1、Cyclin A1、Snail1、β-catenin及N-cadherin表达水平均明显降低（均P<0.01），E-cadherin表达水平明显升高（P<0.01）；同时过表达Notch1可逆转miR-139-5p抑制SKOV3细胞增殖、侵袭与迁移的作用。结论：miR-139-5p可靶向Notch1抑制EOC细胞的增殖、侵袭和迁移能力，可能与其下调NICD、Cyclin D1、Cyclin A1、Snail1、β-catenin、N-cadherin而上调E-cadherin的表达水平有关。     

miR-1207-5p通过靶向LIMD1调控乳腺癌T47D干细胞的增殖、迁移和 侵袭

目的：探讨 miR-1207-5p 对乳腺癌 T47D 干细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其可能的机制。方法: 以 IGF-1、EGF、 bFGF诱导、富集乳腺癌T47D干细胞并进行成球培养,流式细胞术分离干细胞,采用WB法检测干细胞分子标志物。采用qPCR 检测干细胞中miR-1207-5p的表达水平,双荧光素酶报告基因实验分析miR-1207-5p和LIMD1的靶向关系。CCK-8、Transwell和 划痕实验检测T47D干细胞的增殖、迁移和侵袭能力。WB法检测干细胞中LIMD1蛋白的表达水平。结果: 分离的T47D干细胞 能够形成细胞球,细胞球体积随培养天数的增加而增加;干细胞分子标志物 ALDH1、ESA 和 OCT4 的表达水平较亲本 T47D细 胞显著升高（P<0.05或P<0.01）,miR-1207-5p在干细胞中高表达（P<0.01）,敲降miR-1207-5p显著抑制T47D干细胞的增殖、迁移和侵袭（均 P<0.01）。miR-1207-5p靶向下调LIMD1 的表达（PP<0.01）,miR-1207-5p通过靶向下调LIMD1 促进乳腺癌 T47D 干细胞的增殖、迁 移 和 侵袭能力（P<0.05或 P<0.01）。结论：miR-1207-5p通过靶向下调LIMD1的表达来促进乳腺癌T47D干细胞的增殖、迁移和侵袭能力。     

lncRNA MEG3 通过miR-9-5p/SOCS5 轴对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响

目的：探讨lncRNA 母源性印记基因3（maternal imprinting gene 3, MEG3）通过miR-9-5p/SOCS5 轴对宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition, EMT）的调控作用。方法: 收集2017 年1 月至2019 年6 月重庆市中医院手术切除的20 例宫颈癌患者的癌及癌旁组织标本；利用脂质体转染技术分别将pcDNA3.1-MEG3、si-MEG3、miR-9-5p mimics、miR-9-5p inhibitor 及其对照质粒等转染进宫颈癌HeLa 和SiHa 细胞，构建过表达和沉默细胞模型。用qPCR检测宫颈癌组织及细胞模型中MEG3、miR-9-5p 和SOCS5 表达水平，用CCK-8 法、Transwell 小室法检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力，用细胞免疫荧光实验检测细胞中E-cadherin 和vimentin 表达水平。通过在线生物信息学TargetScan 数据库预测靶基因，用双荧光素酶报告基因实验验证miR-9-5p 分别与MEG3 和SOCS5 的靶向关系。结果: 分别与癌旁组织和宫颈上皮HcerEpic 细胞比较，宫颈癌组织和细胞系中MEG3 和SOCS5 表达显著下调、miR-9-5p 表达显著上调（均P<0.01）。TargetScan 数据库分析和双荧光素酶报告基因实验证实miR-9-5p 与MEG3 或SOCS5 存在靶向关系。MEG3 和SOCS5 显著抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移与侵袭能力（均P<0.01），miR-9-5p 显著提高细胞的增殖、迁移与侵袭能力（均P<0.01）。MEG3 和SOCS5 促进E-cadherin 表达、抑制vimentin表达；miR-9-5p 抑制E-cadherin 表达、促进vimentin 表达（P<0.05 或P<0.01）。结论: lncRNA MEG3 通过miR-9-5p/SOCS5 分子轴调控宫颈癌细胞的增殖、迁移、侵袭与EMT进程。     

lncRNA TUG1通过miR-524-5p/BRAF轴调节甲状腺乳头状癌TPC-1细胞的增殖、凋亡和EMT进程

目的：lncRNA牛磺酸上调基因1（lncRNA TUG1）对甲状腺乳头状癌（PTC）细胞（TPC-1）增殖、凋亡和EMT进程的影响及作用机制。方法：qPCR检测人PTC组织（2019年5月至2021年4月期间在河北省唐山市工人医院手术切除的35例PTC组织及对应癌旁组织标本）与人PTC细胞TPC-1、BHP10-3、K1、SW-1736及人正常甲状腺上皮Nthyori 3-1细胞中lncRNA TUG1的表达。体外培养 TPC-1 细 胞 ,将 其 分 为 对 照 组 、si-NC 组 、si-TUG1 组 、miR-NC 组 、miR-524-5p mimic 组 、si-TUG1+NC inhibitor组、si-TUG1+miR-524-5p inhibitor 组、miR-524-5p mimic+pcDNA 组、miR-524-5p mimic+pcDNABRAF）组,对细胞进行si-TUG1、miR-524-5 pmimic、miR-524-5p inhibitor、pcDNA BRAF和各自相应的对照质粒转染,采用CCK-8法、FCM法分别检测TPC-1细胞增殖、凋亡情况;WB法检测TPC-1细胞中BRAF、PCNA、Caspase-3、E-cadherin、N-cadherin和vimentin的表达,双荧光素酶报告基因实验验证miR-524-5p与lncRNA TUG1、BRAF的靶向关系。结果：lncRNA TUG1在PTC组织及细胞中呈高表达（均P<0.05）;敲减lncRNA TUG1表达或上调miR-524-5p表达可显著抑制TPC-1细胞增殖及EMT,促进细胞凋亡（均P<0.05）;双荧光素酶报告基因实验显示,lncRNA TUG1与BRAF、miR-524-5p之间存在靶向关系;抑制miR-524-5p表达可逆转敲减lncRNA TUG1表达对TPC-1细胞的增殖、EMT进程的抑制及对其凋亡的促进作用（均P<0.05）,上调BRAF表达可逆转过表达miR-524-5p对TPC-1细胞增殖、EMT的抑制及对其凋亡的促进作用（均P<0.05）。结论：lncRNA TUG1在PTC组织与TPC-1细胞中呈高表达,敲减lncRNA TUG1表达可通过miR-524-5p/BRAF轴抑制PTC细胞的增殖与EMT进程,并促进TPC-1细胞凋亡。     

lncRNA SNHG5在缺氧诱导肝细胞癌细胞侵袭及迁移中的作用

目的：探讨长链非编码RNA（long non-coding RNA, lncRNA）SNHG5在缺氧诱导肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）细胞侵袭及迁移中的作用。方法：收集2017年1月至2018年6月西安交通大学第一附属医院手术切除的20例HCC患者的癌与癌旁组织标本，以及人HCC细胞系HepG2、MHCC-97L、MHCC-97H、Huh7和永生化人肝细胞LO2。利用生物信息学方法分析缺氧诱导因子1α（hypoxia-inducible factor 1α，HIF-1α）与SNHG5的结合位点，将pCMV-HIF-1α、shRNA-SNHG5（sh-SNHG5）质粒转染进HCC细胞，用qPCR法检测HCC组织和缺氧条件下HCC细胞中SNHG5的表达水平，用Western botting检测HCC细胞中HIF-1α蛋白的表达水平，用Transwell小室法检测沉默SNHG5后常氧和缺氧条件下对HCC细胞侵袭及迁移能力的影响。结果：分别与癌旁组织和LO2细胞比较，HCC组织和各细胞系中SNHG5表达水平显著上调（均P<0.01）。缺氧可上调HCC细胞中SNHG5的表达水平，其机制可能与缺氧活化HIF-1α 与 SNHG5 启动子结合从而促进其转录有关 ；缺氧能够增强 HepG2和 MHCC-97L 细胞的侵袭及迁移能力（均P<0.01），沉默SNHG5表达能够显著抑制缺氧条件下HepG2和MHCC-97L细胞的侵袭及迁移能力（均 P<0.01）。结论：SNHG5在HCC组织及细胞系中高表达，并在缺氧诱导的HCC细胞侵袭及迁移中发挥重要作用。     

miR-383-5p通过下调MSH6抑制小儿髓母细胞瘤的增殖和侵袭

目的：探究miR-383-5p通过调控DNA错配修复基因MSH6对小儿髓母细胞瘤（medulloblastoma，MB）增殖和侵袭的影响。方法：选取2014年7月至2017年5月于我院肿瘤外科手术切除并经病理确诊为MB的15例患者癌组织及相应的癌旁组织标本，qPCR检测MB组织和细胞系中miR-383-5p的表达水平。将实验分为对照组（NC组）、miR-383-5p过表达组（miR-383-5p组）、MSH6 敲降组（si-MSH6 组）及 MSH6+miR-383-5p 同时敲降组（miR-383-5p inhibitor+si-MSH6），采用 CCK-8 法检测 UW473细胞的增殖活性，Transwell法检测UW473细胞侵袭和迁移能力，双荧光素酶报告基因验证miR-383-5p与MSH6的靶向关系，Western blotting（WB）法检测 MSH6 的表达水平。结果：miR-383-5p 在 MB 组织和细胞系中表达水平显著低于癌旁组织（均P<0.05或P<0.01）；过表达miR-383-5p显著抑制UW473细胞增殖、迁移和侵袭（均P<0.05或P<0.01），且下调MSH6在UW473细胞中的表达水平（P<0.01）。双荧光素酶报告基因结果证实 miR-383-5p 靶向结合 MSH6 的 3''UTR，敲降 MSH6 可抑制UW473 细胞增殖、侵袭和迁移（均P<0.01）。进一步实验证明，同时敲降miR-383-5p和MSH6能够恢复敲降MSH6对UW473细胞增殖、侵袭和迁移的抑制作用（均P<0.01）。结论：miR-383-5p在MB组织和细胞系中低表达，其通过靶向下调MSH6表达水平进而抑制UW473细胞的增殖、迁移及侵袭。     

circ_0000615通过靶向miR-432-5p调控胆管癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的：探讨circ_0000615在胆管癌细胞中的表达及其对胆管癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响和可能的调控机制。方法：通过 qPCR 检测 circ_0000615 在正常胆管上皮 HIBEC 细胞和胆管癌 CCLP-1、QBC939、TFK-1 和 RBE细胞中的表达水平。双荧光素酶报告基因 实 验 验 证 circ_0000615 与 miR-432-5p 的靶向关系。将 si-NC、si-circ_0000615（si-circ-1、si-circ-2）、inhibitor-NC 和 inhibitor-miR-432-5p 转染至 CCLP-1 和 QBC939 细胞 ,转染细胞分为 si-NC 组、si-circ-1 组、si-circ-2 组、si-NC+inh-NC组、si-NC+inh-miR-432-5p组和si-circ-1+inh-miR-432-5p 组,通过 CCK-8、EdU和Transwell实验 检 测 各 转染组胆管 癌 细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结果：在胆管癌细胞中 circ_0000615 呈高表达而 miR-432-5p 呈低表达（P<0.05或P<0.01）;双荧光素酶报告基因实验证实circ_0000615与miR-432-5p之间存在靶向关系（P<0.01）;敲减circ_0000615可明显抑制CCLP-1、QBC939 细胞的增殖、侵袭和迁移能力（P<0.05 或 P<0.01）;下调 miR-432-5p 可部分逆转敲减 circ_0000615 对胆管癌 CCLP-1 和QBC939细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用（P<0.05或P<0.01）。结论：circ_0000615通过靶向miR-432-5p调控胆管癌细胞的增殖、侵袭和迁移。     

miR-515-5p通过靶向HDAC2影响食管癌发生发展的分子机制

目的：探讨miR-515-5p对食管癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法：选取2020年6月至2020年12月在河北医科大学第四医院手术切除的60例食管癌患者的癌组织标本和20例健康成人的食管上皮组织标本,以及食管癌细胞TE1、Eca109、KYSE30和KYSE170,用 qPCR 法检测食管癌组织和细胞中 miR-515-5p 的表达水平。在Eca109细胞中转染miR-515-5p模拟物以及其阴性对照物、在TE1细胞中转染miR-515-5p抑制剂以及其阴性对照物,qPCR法检测转染效率,用CCK-8法、Transwell实验分别检测转染细胞的增殖、迁移及侵袭能力。采用生物信息学方法分析预测miR-515-5p的下游靶基因,双荧光素酶报告基因实验验证组蛋白去乙酰化酶2（histone deacetylase 2,HDAC2）为miR-515-5p的靶基因。应用GEPIA和TCGA数据集分析HDAC2在食管癌组织中的表达及其与患者临床特征的关系。结果：miR-515-5p在食管癌组织及细胞中表达降低（均P<0.01）。过表达miR-515-5p抑制食管癌Eca109细胞的增殖、迁移和侵袭能力（P<0.05或P<0.01）,而敲低miR-515-5p 表达则可增强食管癌 TE1 细胞的增殖、侵袭和迁移能力（均P<0.05）。双荧光素酶报告基因分析证明,HDAC2是miR-515-5p的靶基因。qPCR和WB实验结果显示,miR-515-5p对HDAC2 mRNA和蛋白表达具有负调控作用。挽救实验证实miR-515-5P通过靶向HDAC2抑制食管癌Eca109细胞的增殖、迁移和侵袭能力（P<0.05或P<0.01）。结论：miR-515-5p通过靶向HDAC2影响食管癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。     

miR-361-5p对肾细胞癌ACHN细胞恶性生物学行为的影响

目的：探讨miR-361-5p对肾细胞癌ACHN细胞增殖、侵袭、迁移、凋亡及其细胞周期的影响。方法：将miR-361-5p mimics和miR-361-5p inhibitor分别转染至肾癌ACHN细胞中，用qPCR检测转染细胞中miR-361-5p的表达水平，用MTT法、划痕愈合实验、Transwell实验、流式细胞术分别检测细胞的增殖、迁移、侵袭、细胞周期和凋亡水平。结果：与空白对照组和 Mimics-NC组比较，miR-361-5p mimics组ACHN细胞中miR-361-5p表达水平显著升高（P<0.01），细胞的增殖、侵袭和迁移能力均显著减弱（均P<0.01），而凋亡率升高（P<0.01）。与空白对照组或Inhibitor-NC组比较，miR-361-5p inhibitor组细胞中miR-361-5p表达水平显著下降（P<0.01），细胞的增殖、侵袭和迁移能力均增强（均P<0.01），细胞周期运转加速（P<0.01），凋亡率降低（P<0.05）。结论：miR-361-5p可抑制肾癌ACHN细胞的增殖、侵袭和迁移，并诱导细胞凋亡，其在肾癌发生发展过程中发挥重要的抑制作用。     

miR-142-5p通过影响上皮间质转化抑制肺腺癌H1650细胞的侵袭与迁移

目的：探讨肺腺癌组织中miR-142-5p的表达及其对H1650细胞增殖、侵袭、迁移及上皮间质转化（epithelieal-mesenchymal transition，EMT）的影响及其作用机制。方法：收集2014年1月至2015年1月在河北医科大学第四医院胸外科行肿瘤切 除并经病理证实的107例肺腺癌患者的癌组织及其癌旁组织标本，以及人肺腺癌细胞系H1650、HCC827、 A549、 H1975、PC9和人 支气管上皮细胞BEAS-2B， 用qPCR实验检测肺腺癌组织及细胞中miR-142-5p的表达水平及其与患者临床特征的关系。分别用 miR-142-5p模拟物（mimics）、miR-阴性对照质粒（miR-NC）转染H1650细胞后， 用CCK8、细胞划痕愈合和Transwell侵袭实验分 别检测H1650细胞的增殖、侵袭和迁移能力。使用生物信息学工具预测miR-142-5p的靶基因，通过双荧光素酶报告基因实验验 证miR-142-5p对靶基因的调控作用，Western blotting检测细胞周期蛋白依赖性激酶5（cyclin-dependent kinase 5，CDK5）及EMT 相关蛋白的表达水平。结果：肺腺癌组织及细胞系中miR-142-5p表达水平显著低于癌旁组织及BEAS-2B细胞（均P<0.01）；107 例肺腺癌组织中， 61例（57.01%）低表达miR-142-5p，其表达水平与患者的TNM分期、淋巴结转移密切相关（均P<0.01）。转染 miR-142-5p模拟物后， H1650细胞中miR-142-5p高表达，细胞的增殖、侵袭和迁移能力显著降低（均P<0.05或P<0.01）。生物信息 学工具预测CDK5是miR-142-5p的靶基因，经双荧光素酶报告基因验证，miR-142-5p可显著降低H1650细胞中CDK5的表达水 平，显著提高E-cadherin表达，降低N-cadherin和Snail的表达水平（均P<0.01）。结论：miR-142-5p在肺腺癌组织和细胞中呈低表 达状态，其通过下调CDK5表达影响EMT抑制H1650细胞的侵袭与迁移能力。