miR-452-5p靶向SOX7促进食管癌KYSE-150细胞增殖、侵袭及EMT

目的： 检测miR-452-5p在食管鳞状细胞癌（ESCC）中的表达,并探讨其异常表达对食管癌KYSE-150细胞增殖、侵袭能力和EMT进程的影响及其分子机制。 方法： 收集2012年3月至2015年12月在河北医科大学第四医院就诊的86名ESCC患者的癌组织样本和对应的癌旁组织,用 qPCR 法检测 miR-452-5p 及其他相关基因在 ESCC 组织和细胞中的表达;向 KYSE-150 细胞中分别转染 miR-452-5p mimic 或 pcDNA3.1-SOX7 构建过表达的细胞株。分析 miR-452-5p 表达与 ESCC 病理特征和患者 5 年 OS 的关系。用 MTS、Tanswell 法检测miR-452-5p过表达对食管癌 KYSE-150 细胞增殖、侵袭能力和 EMT 进程的影响;用双荧光素酶报告基因实验及TOP/FOP报告基因系统检测miR-452-5p与 SRY 盒转录因子（SOX7）3''UTR 区的结合作用及对 Wnt/β-catenin通路活化水平的影响。 结果： miR-452-5p在ESCC组织中呈明显高表达（P<0.01）,并与ESCC患者的淋巴结转移、TNM分期及5年OS密切相关（均P<0.01）。miR-452-5p过表达明显促进食管癌KYSE-150细胞的增殖、侵袭能力及 EMT 进程（P<0.05或P<0.01）。SOX7是miR-452-5p的直接靶基因,miR-452-5p通过对SOX7的负向调控影响了Wnt通路活化水平（P<0.05或P<0.01）,同时,miR-452-5p表达也受Wnt通路活化水平的影响（P<0.05或P<0.01）,其可能为Wnt通路下游靶基因。 结论： miR-452-5p通过miR-452-5p/SOX7/Wnt/miR-452-5p正反馈环路提高Wnt/β-catenin通路活化水平,进而促进ESCCKYSE-150细胞的增殖、侵袭能力及EMT进程,miR-452-5p有望成为ESCC患者靶向治疗的潜在靶点及预后评估的新型分子标志物。     

LINC00665通过靶向miR-708-5p/DKK3抑制食管癌细胞的增殖及侵袭

目的 探讨LINC00665在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma, ESCC)组织及细胞中的表达，并探讨其异常表达对ESCC细胞增殖、侵袭能力的影响及可能的分子机制。方法 采用qRT-PCR法检测LINC00665及miR-708-5p的表达情况；采用MTS、Transwell侵袭实验检测LINC00665异常表达对ESCC细胞增殖及侵袭能力的影响。采用双荧光素酶报告基因检测LINC00665与miR-708-5p的相互作用及miR-708-5p对靶基因的调控作用。结果 ESCC组织中LINC00665表达量(3.834±2.016)明显低于癌旁正常组织(7.973±2.752)(P<0.01)。LINC00665表达与ESCC淋巴结转移、浸润深度及TNM分期密切相关(P均<0.05)。LINC00665过表达明显抑制TE13细胞的增殖及侵袭能力(P均<0.05)。LINC00665过表达降低TE13细胞中miR-708-5p的表达及报告基因的荧光素酶活性(P均<0.05);miR-708-5p mimics可降...     

LINC01140 通过 miR-452-5p/Wnt/β -catenin 轴调控食管鳞状细胞癌 Eca109细胞的增殖与侵袭

目的：探讨长链非编码RNA（lncRNA）LINC01140在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）组 织及细胞中的表达及其对Eca109细胞增殖与侵袭的影响及其分子机制。方法：选取2012年3月至2015年5月河北医科大学第 四医院收治的 133 例 ESCC 患者的临床资料和 GEPIA 数据库中收集的 182 例 ESCC 组织及 286 例食管正常黏膜组织的 LINC01140表达数据,以及 ESCC 细胞系 Kyse150、Eca109 和 TE13。用 qPCR 法检测癌组织和细胞中LINC01140的表达水平, 分析其表达水平与患者临床病理特征及预后的关系。分别将pcDNA3.1-LINC01140、阴性对照（pcDNA3.1-NC）或 miR-452-5p mimic及阴性对照（miR-NC）转染到Eca109细胞,MTS、Transwell实验分别检测细胞的增殖与侵袭能力。用双荧光报告基因实验 及 TOP/FOP 报告基因系统检测 LINC01140 与 miR-452-5p 的靶向结合作用及 LINC01140 对 Wnt/β-catenin 通路活化水平的影 响。结果：LINC01140在ESCC组织和细胞中表达均显著下调（均P<0.01）,LINC01140 低表达与 ESCC 患者年龄、淋巴结 转移、TNM分期及OS密切相关（均P<0.05）。LINC01140过表达明显抑制 Eca109 细胞的增殖及侵袭能力（均P<0.01）。机制 研究表明,LINC01140可能通过竞争结合miR-452-5p影响Wnt/β-catenin信号通路的活化水平继而调控Eca109细胞的恶性生物学 行为。结论：LINC01140通过靶向miR-452-5p/Wnt/β-catenin轴促进ESCC细胞的增殖与侵袭能力,其有望成为ESCC患者靶向 治疗的潜在靶点及预后评估的标志物。