慢性马兜铃酸肾病大鼠肾组织微血管损伤机制及温阳活血方的干预作用

目的:研究慢性马兜铃酸肾病大鼠肾组织微血管损伤机制及温阳活血方对其干预作用,探讨温阳活血方对慢性马兜铃酸肾病的保护作用机制.方法:将48只雄性SD大鼠随机分为5组.(1)正常对照组(n=8):予生理盐水灌胃;(2)模型组(n=10):按关木通水煎液10 ml·kg-1·d-1(相当于关木通40 g·kg-1·d-1,马兜铃酸A 2.6 mg·kg-1·d-1)给大鼠灌胃;(3)中药组(n=10):在模型组基础上,再予温阳活血方30 g·kg-1·d-1灌胃;(4)西药组(n=10):在模型组基础上,再予科素亚33.3 mg·kg-1·d-1灌胃;(5)中西药结合组(n=10):在模型组基础上,再予温阳活血方30 g·kg-1·d-1 科素亚33.3 mg·kg-1·d-1灌胃.20周末,光镜观察肾脏病理,采用CD 34免疫组化染色来反映肾组织微血管的损伤情况,实时PCR检测肾组织中Ang-1、Ang-2、Tie-2和VEGF mRNA的表达.结果:(1)与正常对照组比较,模型组大鼠肾组织CD34表达明显降低(P＜0.01);而治疗组大鼠肾组织CD34表达较模型组明显升高(P＜0.05),其中尤以中药组明显(P＜0.01);(2)与正常对照组比较,模型组大鼠肾组织Ang-1、Tie-2、VEGF mRNA表达明显降低(P＜0.05,P＜0.01),Ang-2表达明显升高(P＜0.01);而治疗组大鼠肾组织Ang-1、Tie-2、VEGF mRNA表达较模型组明显升高(P＜0.05,P＜0.01),中西药结合组Ang-2表达明显减少(P＜0.01).结论:慢性马兜铃酸肾病大鼠肾组织存在微血管的损伤,其损伤机制可能与Ang-1、Tie-2和VEGF mRNA的下调,Ang-2 mRNA上调有关,温阳活血方能明显改善微血管的损伤,对慢性马兜铃酸肾病大鼠肾脏具有保护作用.     

骨肉瘤中血管生成素-2与受体Tie-2 mRNA表达及其意义

目的 探讨血管生成素-2（Ang-2）及其受体Tie-2在骨肉瘤血管生成中作用及其对骨肉瘤恶性演进的影响。方法 采用原位杂交和免疫组织化学技术，检测46例骨肉瘤、15例骨软骨瘤、5例正常骨组织中Ang-2、Tie-2mRNA表达及骨肉瘤中VEGF、CD34蛋白表达，计数微血管密度（MVD）；并与骨肉瘤主要病理学参数进行比较。结果 Ang-2、Tie-2mRNA在正常骨组织无表达，少量表达于骨软骨瘤及骨肉瘤瘤旁组织，明显表达于骨肉瘤中（69．6％、73．9％）；Ang-2、Tie-2表达水平与骨肉瘤组织学分级分型无关，转移组显著高于无转移组（P〈0．01）；高MVD组高于低MVD组（P〈0．01），Ang-2与VEGF表达相关，Ang-2与Tie-2表达正相关（r=0．445，P〈0．01）。结论 Ang-2及其受体Tie-2参与了骨肉瘤血管生成调控，与骨肉瘤浸润性生长和转移密切相关。     

血管生成素及其受体、血管内皮生长因子与糖尿病肾脏微血管病变的关系

目的 探讨血管生成素(Ang)及其受体(Tie-2)和血管内皮生长因子(VEGF)在糖尿病肾脏中的表达变化规律，研究其与肾脏微血管结构变化的关系。 方法 将雄性成年SD大鼠分成糖尿病组和对照组，糖尿病组采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射造模。采用RT-PCR以及免疫组化技术，连续多时点观察肾脏Ang-1、Ang-2、Tie-2、VEGF以及血栓调节蛋白(TM-1) mRNA和蛋白表达变化规律，并分析其相关性。 结果 (1)糖尿病组Ang-1 mRNA于第4、8周时显著上调(吸光度A，83.58±10.23、88.59±6.97)， 第24周时低于对照组 (47.13±8.02比64.53±8.77，P < 0.05)。免疫组化显示Ang-1突出表达于肾小球，糖尿病组第4周后肾小球阳性染色明显强于对照组(A对数值，4周1.64±0.12比1.08±0.16，24周1.24±0.11比1.11±0.17)。(2) 糖尿病组Tie-2 mRNA在4~16周显著高于对照组(A，4周87.31±11.69比63.62±5.61，16周81.75±8.58比60.15±2.66)。免疫组化显示Tie-2突出表达于肾小球，糖尿病组各时点均显著高于对照组，高峰在4~8周。(3)糖尿病组仅在第16和20周时检测到明显的Ang-2 mRNA表达。免疫组化显示12周后仅在皮质区肾小管周围有Ang-2染色的微血管，而在第16周时最明显。(4) 糖尿病组2~20周时肾小球TM-1染色显著高于对照组(A对数值，2周0.99±0.15比0.68±0.17，20周1.03±0.17比0.74±0.13)， 第24周时低于对照组，但差异无统计学意义。(5)糖尿病组VEGF mRNA和蛋白表达均较对照组明显升高。(6) 糖尿病组Ang-1、Tie-2、VEGF和TM-1相互间均呈正相关，它们与尿蛋白、肾重/体重、肾小球体积、肾小球面积也均呈正相关。结论 (1)糖尿病肾脏存在VEGF、Ang及Tie-2表达的改变，早期Ang-1、Tie-2表达上调， 后期下调并伴Ang-2表达上调。(2)Ang、Tie及VEGF的改变与糖尿病肾脏新生血管生成有关，其Ang-1下调和VEGF、Ang-2上调起重要作用。(3)糖尿病肾脏中后期皮质区肾小管周围已有Ang-2染色的新生微血管生成。     

Ang-1在去卵巢骨质疏松症大鼠骨组织中表达变化以及中医不同治法对其影响的实验研究

目的观察去卵巢骨质疏松症模型大鼠的骨组织中血管生成素1(Ang-1)mRNA和蛋白含量变化,及中药不同方剂对其影响,探讨中药组方治疗骨质疏松的可行性。方法骨质疏松症模型的建立采用切除雌性大鼠双侧卵巢的方法。运用补肾填精中药复方、活血化瘀中药复方、补肾活血中药复方对模型大鼠灌胃12周,用骨疏康作为阳性药物对照组,还有正常组和模型空白组。RT-PCR检测各组骨组织Ang-1mRNA相对表达量;ELISA法检测各组骨组织Ang-1蛋白含量。结果去卵巢骨质疏松症模型大鼠的骨组织中Ang-1mRNA相对表达量与正常组比较,显著降低(P0.01);与模型空白组比较,各个用药组Ang-1mRNA相对表达量显著升高(P0.01);但各个用药组间比较无统计学意义。去卵巢骨质疏松症模型大鼠骨组织中Ang-1蛋白含量与正常组比较,显著降低(P0.01);与模型空白组比较,各个用药组Ang-1含量显著升高(P0.01);各个用药组间比较,补肾活血组Ang-1含量升高最为显著,与补肾填精组和活血化瘀组比较有显著性差异(P0.01)。结论补肾活血中药复方可提高Ang-1mRNA相对表达量及其蛋白含量,且优于单纯的补肾填精和活血化瘀中药复方,起到防止骨质疏松症的作用。     

厄贝沙坦联合雷公藤甲素对2型糖尿病大鼠肾脏ANGPTL2、VEGF表达影响

目的：观察厄贝沙坦联合雷公藤甲素（TP）对ANGPTL2、VEGF在2型糖尿病（T2DM）大鼠肾脏表达的影响并探讨其机制.方法：50只SD雄性大鼠随机分为正常对照组（NC,10只）和实验组（40只）,实验组给予高糖高脂喂养联合小剂量链脲佐菌素（STZ 30 mg/kg）建立T2DM大鼠模型,再随机分为4组：糖尿病对照组（DM）、厄贝沙坦组（DI）、雷公藤甲素组（DT）及厄贝沙坦联合雷公藤甲素组（DIT）.药物干预8周后,测体重、血压、肾重、血糖、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）,24 h尿蛋白（UAL）的排泄量;镜下观察肾组织病理改变;免疫组化显色技术及实时定量PCR检测血管生成素样蛋白2（ANGPTL2）、血管内皮生长因子（VEGF）表达的变化.结果：DM组与NC组相比血糖、肌酐、BUN及UAL明显升高（P〈0.01）,实时定量PCR示ANGPTL2、VEGF mRNA 明显上调（P〈0.01 ）;与DM组相比较,DT、DI及DIT组血糖、肌酐、BUN及UAL明显降低（P＜0.01）,DT、DI组中ANGPTL2、VEGF mRNA表达下调,DIT组更为明显（P〈0.05）.结论：ANGPTL2、VEGF在T2DM大鼠肾脏中的表达上调,厄贝沙坦及雷公藤甲素可降低ANGPTL2及VEGF在T2DM大鼠肾脏中的表达,并有协同作用.     

罗格列酮通过下调糖尿病大鼠肾血管生成素-2表达发挥肾保护作用

目的:探讨血管生成素(angiopoietins,Ang)及其受体Tie-2和血管内皮生长因子(VEGF)在糖尿病大鼠肾组织中的表达以及罗格列酮对其表达的影响。方法:18只SD大鼠随机分为正常对照组(C组)、糖尿病组(D组)和糖尿病罗格列酮治疗组(R组)。实时定量RT-PCR和免疫组化方法分别检测3组大鼠肾组织中Ang-1、Ang-2、Tie-2和VEGF的表达;Western印迹法检测3组大鼠肾组织中Ang-2的蛋白表达。结果:实时定量RT-PCR和与Western印迹法结果显示,Ang-2糖尿病组[(80.88±28.30)&(0.76±0.19)]表达,较对照组[(47.81±20.50)&(0.28±0.07)]明显升高(P<0.05);经罗格列酮治疗后,Ang-2表达[(52.35±8.50)&(0.45±0.04)]显著下调(P<0.05)。相关分析显示,Ang-2mRNA水平与尿蛋白/肌酐值(Upro/Ucr)、平均肾小球体积(VG)和肾小球细胞外基质相对含量(RM)呈显著正相关(r=0.505,P=0.027;r=0.490,P=0.033;r=0.471,P=0.042)。结论:Ang-2的异常表达可能在早期糖尿病肾病的发病机制中起了重要的作用。罗格列酮可能通过下调糖尿病大鼠肾组织Ang-2的表达而发挥肾保护作用。     

Ang-2和TM-1与糖尿病鼠肾新生血管生成关系的初步研究

目的：探讨糖尿病肾脏促血管生成素-2（angiopoietin-2,Ang-2）和血栓调节蛋白（thrombomodulin-1,TM-1）表达变化及其与新生血管生成的关系。方法：用雄性SD大鼠建立STZ诱导的糖尿病肾病模型,设正常对照和模型组,分别于2、4、8、12、16、20、24周清洁取肾,采用免疫组织化学染色,定量分析肾脏Ang-2和血栓调节蛋白TM-1表达变化,用逆转录聚合酶链式反应技术（RT-PCR）检测肾脏Ang-2 mRNA的表达。结果：糖尿病组仅于16周和20周时探及肾组织Ang-2 mRNA表达;免疫组化显示糖尿病肾脏12周时皮质区肾小管周围出现Ang-2着染微血管,16周表达最强;整个实验期间对照组未探及Ang-2 mRNA和蛋白表达;TM-1突出表达于肾小球,糖尿病组2~20周肾小球TM-1着染显著高于对照组（P〈0.001）,峰期在4~16周,24周时低于对照组,但无统计学意义（P〉0.05）,TM-1表达变化与肾重/体重、肾小球面积和体积呈正相关。结论：糖尿病肾脏中后期皮质区肾小管管周围存在Ang-2着染的新生微血管,Ang-2和TM-1的异常表达与肾脏新生血管生成有关。     

负压通过Ang/Tie-2信号通路促进糖尿病大鼠创面微血管成熟的实验研究

目的探讨负压创面治疗(NPWT)糖尿病大鼠创面微血管的改变,进一步分析其潜在的分子机制。方法将96只大鼠随机分为NPWT组、NPWT+Tie-2组、纱布组(Gauze组)、Gauze+Tie-2组。NPWT组、NPWT+Tie-2组创面选择合适尺寸的VSD敷料覆盖,Gauze组和Gauze+Tie-2组进行常规纱布换药。NPWT+Tie-2组及Gauze+Tie-2组大鼠腹腔注射Tie-2抑制剂50 mg/kg。于术后1、3、7、10 d取创面肉芽组织行HE染色、免疫组化、mRNA及蛋白水平检测。结果NPWT组中Ang-1的mRNA及蛋白表达水平在术后第1、3天显著低于其他3组(P 0.05),术后第7、10天时呈增加趋势且其表达水平显著高于其他3组(P 0.05)。NPWT组中Ang-2的mRNA表达水平在术后第1、3天显著高于其他3组(P 0.05),术后第7、10天时急剧下降且其表达水平显著低于其他3组(P 0.05)。结论糖尿病创面愈合早期负压使Ang-2能够优先被Tie-2受体绑定并产生磷酸化作用,血管处于可塑和失稳定状态,促进微血管发芽;在创面愈合后期负压能够促使Ang-1和Tie-2受体优先绑定使激酶磷酸化过程提前出现,血管处于不可塑和稳定状态,创面微环境逐渐稳定并促进微血管成熟。因此,负压通过Ang/Tie-2信号通路促进糖尿病创面微血管成熟。     

反转录-聚合酶链式反应检测促血管生成素-1和促血管生成素-2及Tie-2受体的mRNA在血管瘤组织中的表达及其意义

目的研究血管瘤组织中促血管生成素-1（Ang-1）、促血管生成素-2（Ang-2）及Tie-2受体的mRNA表达水平,探讨其在血管瘤血管生成中的作用与意义。方法用反转录-聚合酶链式反应（RT—PCR）的方法分别检测30例血管瘤组织（增生期血管瘤17例,消退期血管瘤13例）以及10例小儿正常皮肤组织中Ang-1mRNA、Ang-2mRNA及Tie-2mRNA的表达水平。用免疫组织化学方法检测血管瘤组织Ki-67蛋白的表达。结果增生期血管瘤组织中Ang-2mRNA及Tie-2mRNA表达水平高于消退期血管瘤组织（P〈0．01）。血管瘤组织中Ang-1mRNA表达为阴性。结论Ang—Tie-2体系表达失衡在血管瘤的发生发展过程中可能起重要的作用。     

促血管生成素家族在大肠腺癌中的表达及与微血管密度和临床病理特征的关系

目的 探讨促血管生成素-1（Ang-1）、促血管生成素-2（Ang-2）、促血管生成素受体（Tie-2）及血管内皮生长因子（VEGF）在大肠腺癌及癌旁正常组织中的表达，及与微血管密度（MVD）和临床病理特征的关系。方法 采用免疫组织化学方法检测Ang-1、Ang-2、Tie-2及VEGF在45例大肠腺癌及10例癌旁正常组织中的表达。结果 大肠腺癌组织中的Ang-2蛋白及VEGF蛋白明显高于癌旁正常组织（P〈0．01），腺癌的分化程度越低，Ang-2及VEGF蛋白的表达率越高（P〈0．05），Ang-2与VEGF蛋白的表达存在明显正相关性（r=0．997，P〈0．01）；大肠腺癌组织中的Ang-1蛋白明显低于癌旁正常组织（P〈0．01），腺癌的分化程度越高，Ang-1蛋白的表达率越高（P〈0．05）；Tie-2蛋白在大肠腺癌和癌旁正常组织中的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。大肠腺癌的分化程度越低，MVD越高（P〈0．05），腺癌组织中Ang-1蛋白阳性表达组MVD明显低于阴性表达组（P〈0．01），Ang-2蛋白阳性表达组MVD明显高于阴性表达组（P〈0．01）。≥5cm及有淋巴结转移的大肠腺癌组织中，Ang-2蛋白的表达明显增加（x^2=8．889，P〈0．01；x^2=10．020，P〈0．01）。结论 在大肠腺癌组织中，相对Ang-1占优势的Ang-2的过度表达，可能在肿瘤的血管生成和进展过程中起着重要作用。     

温肾化痰方延缓5/6肾切除大鼠肾衰竭的实验研究

目的：研究温肾化痰方治疗5/6肾大部切除大鼠慢性肾衰竭的作用及机制,探讨慢性肾衰竭患者体内“痰”的本质。方法：实验大鼠随机分为模型组、复方组及假手术组。复方组予温肾化痰方加减灌胃,模型组及假手术组均予蒸馏水灌胃。2月后观察各组大鼠的肾功能及肾脏病理变化。结果：与模型组比较,复方组大鼠血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）明显下降（P〈0.05）;肾小球硬化指数（GSI）、基质阳性面积比亦明显下降（P〈0.01）。结论：温肾化痰方能明显改善肾衰竭大鼠的肾功能,并减轻其肾脏病理变化。     

intermedin对肾脏缺血再灌注损伤后血管再生相关因子表达的影响

目的 观察intermedin（IMD）对肾脏缺血再灌注损伤(IRI)后血管生长相关因子缺血诱导因子1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）和血管生成素受体Tie-2表达的影响。探讨intermedin对肾脏IRI的修复作用。 方法 Wistar大鼠按随机数字表法分为4组：假手术组、IRI组、转空质粒组、转IMD质粒组。大鼠右肾切除后1周,用超声微泡造影剂介导的基因转染方法将大鼠IMD真核表达质粒转染大鼠肾脏,转染成功后夹闭左肾动脉45 min制作肾脏IRI模型。分别于再灌注1 d、2 d、3 d、4 d、7 d和14 d后留取肾组织标本,采用RT-PCR检测HIF-1α、VEGF和Tie-2的mRNA表达;Western印迹法检测肾组织VEGF的蛋白表达;ELISA检测HIF-1α和Tie-2的蛋白表达。 结果 与假手术组相比,IRI组HIF-1α mRNA和蛋白质表达于再灌注后1 d达到高峰,2 d时持续高表达,3 d时表达开始明显下降,4 d、7 d和14 d时接近于假手术组;VEGF和Tie-2表达均于再灌注后1 d开始增加,2 d达到高峰,3 d开始下降,4 d、7 d和14 d接近于假手术组;转IMD质粒组大鼠肾组织HIF-1α、VEGF和Tie-2 mRNA和蛋白质的表达于再灌注后1 d、2 d、3 d和4 d显著高于同时间点的IRI组大鼠（均P ＜ 0.05）,并且均于再灌注后1 d表达达到高峰,2～3 d持续表达,4 d开始下降,7 d和14 d的表达无明显改变。上述各指标在转空质粒和IRI组之间的表达差异无统计学意义。 结论 肾脏局部高表达的IMD不仅促进了肾脏IRI后血管再生相关因子HIF-1α、VEGF和Tie-2的表达,而且使表达高峰提前并延长了表达时间,可能参与了肾脏组织的修复和再生。     

Ang-1基因转染的内皮祖细胞移植对大鼠肾脏缺血再灌注后的保护作用

目的 评估Ang-1基因转染的内源性内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)移植治疗肾脏缺血再灌注损伤的作用,进一步完善EPCs对缺血肾脏产生保护作用的旁分泌机制.方法利用重组腺病毒载体Ad-Ang-1感染EPCs,并进行转染效率鉴定,进一步移植治疗大鼠缺血肾脏,术后72 h给予肾功能评估,并检测大鼠缺血肾脏中VEGF、Ang-1以及Ang-2表达情况.结果EPCs移植治疗后,大鼠肾脏功能明显改善,术后72 h检测大鼠患肾,其内VEGF、Ang-1以及Ang-2表达均明显提升.结论 Ang-1基因转染的EPCs移植治疗可以有效地治疗大鼠肾脏IRI,其作用机制可能与EPC归巢后旁分泌过量Ang-1相关,并且促使肾脏血管新生.     

健脾方对去势大鼠维生素D代谢的影响

目的采用放射免疫方法与分子生物学方法从VitD代谢的角度探讨健脾方防治原发性骨质疏松症的机制。方法建立卵巢切除致骨质疏松大鼠模型,运用骨组织病理学、血液生物化学等方法综合观察健脾方对模型大鼠骨密度、尿吡啶酚（PYD）和血清骨钙素（BGP）的影响;同时应用放射免疫方法与逆转录聚合酶链式反应观察健脾方对模型大鼠血清1,25（OH）2D3和小肠、肾脏组织维生素D受体基因（VDR mRNA）表达的影响。结果健脾方能升高模型大鼠的骨密度,降低模型大鼠血清1,25（OH）2D3的含量（P〈0.05）,同时能上调模型大鼠小肠、肾脏VDR mRNA的表达。结论健脾方能增强机体对血清1,25（OH）2D3反应敏感性,上调小肠与肾脏VDR mRNA的表达,调节VitD代谢。     

SD大鼠胰腺组织在聚焦超声消融损伤后的血管生成

目的通过检测经聚焦超声(FUS)消融的SD大鼠胰腺组织凝固性坏死区中Tie-2受体mRNA的表达和组织学结构变化,探讨FUS消融对凝固性坏死组织的血管生成的影响。方法随机将4~6周龄的SPF级SD大鼠60只分为FUS组(50只),对照组(10只)。FUS局部消融SD大鼠胰腺组织后,分别取消融后1周,2周,1个月,3个月,6个月和对照组的胰腺组织。用RT-PCR的方法,以GAPDH基因为内参,进行半定量分析检测Tie-2mRNA的表达;同时HE染色、光学显微镜下观察凝固性坏死区组织学的变化;免疫组织化学方法检测胰腺组织中Tie-2的表达。结果 RT-PCR检测到Tie-2mRNA在对照组和FUS消融组织中均有表达。与对照组相比,FUS消融后1、2周Tie-2mRNA的表达量降低(P0.01),消融后1个月mRNA表达量增多,于消融后3个月达到最大值(P0.01),消融后6个月表达量逐渐降低,但仍高于对照组(P0.01)。组织学表明,FUS消融后在凝固性坏死区有新生血管的逐步形成。免疫组织化学表明,在正常的胰腺组织中有Tie-2的表达,但在FUS消融胰腺组织中Tie-2的表达增多。结论在FUS消融后6个月内,大鼠胰腺凝固性坏死区域内有新生血管的生成,且比正常血管生成速度快。     

糖尿病肾病患者血清中Ang-1、Ang-2、AnnexinA_2基因表达水平及意义

目的:探讨糖尿病肾病患者血清中血管生成素-1(Ang-1)、血管生成素-2(Ang-2)、膜联蛋白A2(Annexin A2)、Ang-1/Ang-2比值表达水平变化及其意义。方法:选择2型糖尿病(T2DM)患者71例:其中糖尿病患者(DM组)39例,糖尿病肾病患者(DN组)32例;另外选取同期体检健康人对照(NC组)30例。采用实时荧光定量PCR方法检测三组人群血清中Ang-1、Ang-2、Annexin A2的表达水平。结果:(1)血清Ang-2在DN组高于DM组(P0.05);(2)血清Ang-1/Ang-2比值在DM组高于NC组(P0.05),在DN组低于DM组(P0.05);(3)血清Annexin A2在DNⅣ期患者高于DM组(P0.05)。结论:Ang-1、Ang-2、Ang-1/Ang-2比值、Annexin A2在DN微血管病变发生发展过程中发挥着重要的作用,可以作为评价DN患者微血管病变的重要客观参考指标之一。     

大黄总蒽醌对大鼠肾脏水通道蛋白2和水通道蛋白4表达的影响

目的 研究大黄总蒽醌对大鼠肾脏水通道蛋白（AQP）2、AQP4表达的影响及探讨大黄利尿机制。 方法 32只SD大鼠随机分为正常对照组，大黄总蒽醌低、中、高剂量组，每组8只，分别给予不同剂量大黄总蒽醌灌胃，每天1次，共灌5 d。第4天测定大鼠24 h尿量，尿液Na+水平及尿渗透浓度。5 d后处死大鼠，腹主动脉取血，进行血液生化指标检测；并留取肾脏，用免疫组化、Western印迹和RT-PCR法检测肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达变化。 结果 与正常对照组比较，大黄总蒽醌中、高剂量组大鼠24 h尿量显著增加[(16.21±1.96) ml、(18.16±1.80) ml比（13.85±1.25）ml, P均＜ 0.05]，低剂量组大鼠尿量变化不明显；中、高剂量组大鼠肾脏AQP2蛋白及mRNA表达均显著下降（P均＜ 0.01），高剂量组大鼠肾脏AQP4蛋白及mRNA表达显著下降（P ＜ 0.01）；中剂量组大鼠AQP4蛋白表达下降（P ＜ 0.01），但mRNA表达无显著降低；低剂量组大鼠AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达无显著变化。 结论 大黄总蒽醌能降低大鼠肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达水平，这可能是大黄产生利尿的机制之一。     

血管内皮生长因子及其受体对糖尿病肾病大鼠微血管病变的作用

目的：探讨血管内皮生长因子（VEGF）及其受体（VEGFR2）在糖尿病肾病（DN）大鼠肾微血管病变发病中的作用。方法：将正常Wistar大鼠12只随机分为正常对照组、糖尿病肾病组。糖尿病肾病组用STZ诱导建立DN模型,大鼠自由进食、饮水。于第4周和第8周各组分别处死大鼠6只。测定血生化及24h尿蛋白定量,以正常肾小球为对照,采用特异性抗体和免疫组织化学方法,观察大鼠肾小球VEGF、VEGFR2、TM-1的分布及其强度变化,并结合肾脏病理进行分析。应用RT-PCR技术测定VEGF和VEGFR2mRNA的表达。结果：（1）糖尿病肾病组第4周,8周时,尿白蛋白排泄率,血糖,血脂升高,均高于正常对照组（P〈0.01）,肾组织光镜,出现早期糖尿病肾病典型的病理改变过程。（2）免疫组化显示糖尿病组4周、8周时肾脏VEGF、VEGFR2及TM-1表达均较正常对照组上调（P〈0.01）,VEGF与TM-1呈正相关（4周时r=0.947,P〈0.001;8周时r=0.923,P〈0.001）;RT-PCR检测结果显示糖尿病肾病组第8周时VEGF-mRNA和VEGFR2-mRNA表达均较正常对照组升高（P〈0.05）,第8周时VEGF-mRNA和VEGFR2-mRNA表达较第4周时增高（P〈0.05）。结论：糖尿病肾病大鼠肾小球VEGF、VEGFR2、TM-1表达增强,与糖尿病肾脏新生血管生成有关。     

参芪降糖颗粒对糖尿病肾病大鼠肾组织缺氧诱导因子-1α表达的影响

目的：本研究拟通过糖尿病肾病动物模型,探索参芪降糖颗粒对糖尿病肾病大鼠的治疗作用及其对肾组织HIF-1α和HO-1表达的影响。方法：以链脲佐菌素（STZ）诱导建立糖尿病肾病大鼠模型。随机分为对照组、糖尿病肾病组（模型组）和糖尿病肾病参芪降糖颗粒治疗组（治疗组）。给药8周后检测各组生化指标,采用免疫组化方法分析肾组织HIF-1α和HO-1的表达情况。结果：与对照组相比,模型组肾脏肥大指数、24h尿蛋白、血糖、血尿素氮、血肌酐明显升高（P〈0.01）;肾组织HIF-1α和HO-1蛋白表达明显升高（P〈0.01）。与模型组相比,参芪降糖颗粒治疗组肾脏肥大指数降低,24h尿蛋白、血尿素氮、血肌酐降低（P〈0.05,P〈0,01）;肾组织HIF-1α和HO-1蛋白表达明显降低（P〈0.01）。结论：参芪降糖颗粒对糖尿病肾病大鼠肾脏具有保护作用,其机制可能与影响肾组织HIF-1α和HO-1的表达有关。     

糖肾方对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1及MMP-9表达的影响

目的：研究糖肾方对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1、MMP-2、MMP-9及Ⅳ型胶原表达的影响,探讨糖肾方对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护机制。方法：50只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、蒙诺组（0．833mg／kg）、糖肾方大剂量组（2．67g／kg）、糖肾方小剂量组（1．33g／kg）,每组10只,利用单侧肾切除加腹腔注射链脲佐菌素造成糖尿病肾病大鼠模型,连续给药20周。动态检测血糖和尿蛋白／肌酐水平;取肾组织进行病理组织学观察并对肾小球硬化和肾小管间质纤维化程度进行评分;RT-PCR方法检测TGF-β1、MMP-2及MMP-9 mRNA表达,免疫组化方法检测肾组织TGF-β1及Ⅳ型胶原表达。结果：大剂量糖肾方能显著降低糖尿病肾病大鼠尿蛋白／肌酐（P〈0．05）,降低肾小球硬化指数（P〈0．01）和肾小管间质纤维化指数（P〈0．01）,减少TGF-β1mRNA与蛋白表达（P〈0．05）,增加MMP-9mRNA表达（P〈0．05）,减少Ⅳ型胶原蛋白表达（P〈0．05）。结论：糖肾方可减轻实验大鼠肾小球硬化和肾小管间质纤维化,其作用机制可能与抑制TGF-β1表达和提高MMP-9mRNA水平有关。