非经典型蛋白激酶C在尿蛋白诱导肾小管上皮细胞转分化中的作用

目的:探讨非经典型PKC同工酶(PKC-ζ和PKC-ι)在尿蛋白诱导的肾小管上皮细胞(RTECs)转分化中的作用。方法:首先免疫组化法检测PKC-ζ和PKC-ι在人正常及不同类型肾小球疾病患者肾组织的表达并分析其表达量的变化。接着应用不同浓度的尿蛋白(0 mg/ml、0.5 mg/ml、1.0 mg/ml、2.0 mg/ml、4.0 mg/ml及8.0 mg/ml)处理体外培养的HK-2细胞,应用免疫细胞化学法检测HK-2细胞E-cadherin和α-SMA的表达以观察HK-2细胞转分化情况,选择诱导HK-2细胞转分化适宜的尿蛋白浓度进行后续试验。将HK-2细胞分对照组和尿蛋白组,分别给予无血清培养基和尿蛋白(4.0 mg/ml)刺激,分别用免疫荧光及Western Blot法检测各组细胞内PKC-ζ和PKC-ι在细胞膜及细胞浆的活化易位情况。结果:(1)两种非经典型PKC同工酶PKC-ζ和PKC-ι在正常和肾小球疾病肾组织肾小球和RTECs均有表达,在肾间质均无表达,表达量不尽相同。PKC-ζ在肾小球疾病肾组织肾小球中的表达量均较正常肾组织显著减少(P<0.05),在MCD和FSGS的RTECs中的表达量较正常肾组织显著减少(P<0.05)。PKC-ι在FSGS的肾小球和RTECs中的表达量均显著减少(P<0.05),在Ig AN肾组织RTECs中表达显著增高(P<0.05),在肾小球表达无明显差别。(2)不同浓度的尿蛋白刺激HK-2细胞48 h后,当尿蛋白的浓度逐渐升高时,HK-2细胞随之转变为类似成纤维细胞形态,细胞E-cadherin表达下调及α-SMA表达上调。尿蛋白浓度为4.0 mg/ml诱导HK-2细胞转分化最明显。(3)尿蛋白诱导HK-2细胞转分化时,PKC-ζ和PKC-ι无明显活化易位。结论:两种非经典型PKC同工酶均在人类肾组织表达,提示PKC-ζ和PKC-ι均参与肾脏的生理过程,但PKC-ζ和PKC-ι在尿蛋白诱导的肾小管上皮细胞转分化中并未发挥相关作用。     

Wnt/β-catenin在IgA肾病中的表达及意义

目的:探讨Wnt/β-catenin及其下游靶基因在IgA肾病中的表达,分析其与患者的临床病理参数的相关性。方法:根据肾小管间质病变程度分组,采用RT-PCR、Western blot和En Vision-免疫组化技术检测各组IgA肾病患者以及正常对照组患者肾活检组织中Wnt/β-catenin及其下游靶基因snail、基质金属蛋白酶-7(MMP-7)、α-平滑肌动蛋白(α-SMA)的表达,各组之间进行比较。结果:IgA肾病患者肾活检组织中β-catenin、snail、MMP-7、α-SMA mRNA和蛋白表达水平较正常对照组升高(P0.05)。β-catenin、snail在伴有轻度肾小管间质病变的IgA肾病患者肾活检组织中表达水平高于无肾小管间质病变的IgA肾病患者(P0.05),其后随着肾小管间质病变程度的加重逐渐下降。MMP-7、α-SMA在IgA肾病患者肾活检组织中的表达水平与肾小管间质病变的严重程度相一致。结论:Wnt/β-catenin及其下游靶基因在IgA肾病中表达异常,可能参与IgA肾病的发生发展。     

慢性马兜铃酸肾病患者肾小管上皮细胞转分化的研究

目的探讨慢性马兜铃酸肾病。肾小管上皮细胞转分化与肾间质纤维化的关系。方法以慢性马兜铃酸肾病患者的肾组织为标本,作常规Masson染色化病理检查;用天狼星红组织化学(组化)染色检查胶原Ⅰ、Ⅲ表达;用免疫组化染色检查角蛋白(CK)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vim)及转化生长因子-β1(TGF-β1)表达。对结果进行定量或半定量分析。结果 肾间质Masson染色纤维化面积及胶原Ⅰ、Ⅲ面积,与肾小管间质α-SMA及Vim阳性表达面积呈显著正相关(P<0.05),与肾小管CK阳性表达面积呈显著负相关(P<0.05);病变过程中健存肾小管TGF-β1表达明显增强。结论慢性马兜铃酸肾病患者的肾小管上皮细胞可转分化为肌成纤维细胞,参与肾间质纤维化,而这细胞转分化很可能与其自身高表达TGF-β1相关。     

RGC-32在儿童IgA肾病肾组织中的表达及意义

目的 研究RGC-32（response gene to complement 32）在IgA肾病(IgAN) 儿童及正常肾组织中的表达及其意义。 方法 用免疫组织化学方法观察IgAN儿童及正常肾组织中RGC-32蛋白的表达与分布,并与α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1（TGF-β1）的表达、IgAN肾组织病理损伤程度及临床相关指标进行统计学分析。 结果 RGC-32蛋白在IgAN及正常肾组织的肾小管均明显表达,而在肾小球、肾小管间质及肾血管未见表达。RGC-32 在正常肾组织、IgAN轻度、中度及重度损伤组中的阳性表达指数分别为（18.29±6.22）%、（23.90±9.65）%、（31.23±9.86）%和（34.52±10.63）%。RGC-32在IgAN儿童肾组织的阳性表达指数与肾小球评分、肾小管间质评分均呈正相关（r = 0.385,0.347,P < 0.05）;与α-SMA、TGF-β1表达亦呈正相关（r = 0.594,0.521,P < 0.01）;而与Scr、尿NAG/Cr、尿Alb/Cr、尿 IgG/Cr、尿α1微球蛋白/Cr均无相关（r = 0.117,-0.115,-0.138,-0.176,-0.028,P均>0.05)。 结论 首次发现RGC-32蛋白在IgAN儿童和正常肾组织中表达于肾小管,而在肾小球、肾小管间质及肾血管未见表达。RGC-32可能参与了IgAN患儿的肾小管间质损伤,尤其是TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞-间充质转分化（EMT）过程。     

Wnt4/β-catenin信号通路在肾小球疾病中的表达及其临床意义

目的初步探讨原发性肾小球肾炎肾组织中wnt4、β-catenin的表达与肾小管损伤及肾间质纤维化的关系。方法收集明确诊断为原发性肾小球肾炎并行肾穿刺活检患者56例为研究对象,根据肾小管间质损伤评分分为轻度损伤组(n=22)、中度损伤组(n=18)、重度损伤组(n=16),另外选取10例正常肾组织(均来自于肾肿瘤患者切除肾脏的远端正常肾组织)作为正常对照组。采用免疫组化检测肾组织中wnt4、β-catenin表达水平,同时测定相关的临床指标,分析wnt4、β-catenin的水平变化与患者的临床特点的关系。结果免疫组化显示,wnt4、β-catenin在正常对照组肾组织中无明显表达,而在原发性肾小球肾炎患者肾组织中表达明显,随着肾间质纤维化的程度,wnt4、β-catenin蛋白表达呈递增趋势(P0.05)。wnt4在肾小管上皮细胞中的表达强度与β2微球蛋白(r=0.29,P0.05)呈正相关性,与eGFR(r=-0.38,P0.05)呈负相关性。结论 wnt4、β-catenin在肾间质纤维化的原发性肾小球肾炎患者肾组织中的表达水平一致,均高于未发生纤维化的正常肾组织,wnt4/β-catenin信号通路可能参与原发性肾小球肾炎肾小管间质纤维化进程。     

粘附分子P选择素在人类肾小球疾病中表达及其意义

目的探讨粘附分子Ｐ选择素与人类肾小球肾炎的关系。方法采用免疫组化（ＬＳＡＢ）和原位杂交方法观察１３３例肾小球疾病患者肾组织中Ｐ选择素表达情况。根据肾小球内炎细胞浸润、细胞增生及硬化程度分为三组。Ⅰ组：肾小球内无明显炎细胞浸润；Ⅱ组：肾小球有较明显炎症病变和细胞增生；Ⅲ组：肾小球炎症过程趋向静止及（或）出现较多肾小球硬化。结果正常肾组织中Ｐ选择素基本不表达。在肾小球疾病肾组织中，Ｐ选择素在肾小管上皮细胞表达显著高于肾小球和肾间质；在肾小球表达以血小板表面为主，其中Ⅱ组肾小球Ｐ选择素表达水平与Ⅰ组（Ｐ＜０．０５）、Ⅲ组（Ｐ＜０．０１）比较有显著性差异。肾小管间质病变程度与肾小管上皮细胞、间质表达Ｐ选择素显著相关（ｒｓ＝０．３９５和ｒｓ＝０．３３７，Ｐ＜０．０１）。原位杂交发现肾小球、小管上皮细胞、间质、血管内皮部位均有Ｐ选择素ｍＲＮＡ表达，与蛋白质表达部位一致。结论在人类增生性肾小球肾炎发病早期，Ｐ选择素介导了肾内血小板聚集活化、炎细胞浸润，并与肾小管间质病变程度密切相关     

CTGF和TGF-β_1在乙肝病毒相关性肾炎中的表达及其意义

目的：观察CTGF及其上游因子TGF-β1在乙肝病毒相关性肾炎（HBV-GN）肾组织中的表达情况,探讨它们在HBV-GN进展中的作用。方法：采用免疫组化检测87例HBV-GN患者肾活检组织中CTGF和TGF-β1的表达,进行半定量评分,分析其与临床病理指标的相关性。结果：87例中膜性肾病（MN）35例、系膜增生性肾小球肾炎（MsPGN）26例、膜增生性肾小球肾炎（MPGN）11例I、gA肾病（IgAN）9例及其他类型6例。正常肾组织CTGF和TGF-β1呈微弱表达或不表达,HBV-GN肾组织中CTGF和TGF-β1的表达明显高于对照组,不同病理类型中CTGF和TGF-β1的表达差异有统计学意义,CTGF和TGF-β1的表达与肾小管间质病变程度及肾小球的病变程度成正相关。结论：在HBV-GN中CTGF和TGF-β1参与其间质纤维化和疾病的进展。     

糖尿病肾病患者肾活检组织血管紧张素受体表达及与肾脏病理损伤的关系

目的:观察糖尿病肾病(DN)患者肾活检组织血管紧张素受体表达情况,并探讨与肾小球及肾间质病理损伤程度的关系。方法:选取2004年1月~2014年9月在中日友好医院肾内科行肾穿刺活检并经临床及病理诊断为DN的患者90例,其中病理分型为Ⅰ型+Ⅱa型14例,Ⅱb型13例,Ⅲ型58例,Ⅳ型5例。使用免疫组化染色分析累积光密度评估肾组织中AT1、AT2及MAS受体表达情况。比较各型患者的临床资料、肾脏AT1、AT2及MAS受体表达,并评估后者与其他肾小球损伤病理指标(缺血肾小球百分比、球性硬化肾小球百分比及新月体百分比)和肾间质损伤病理指标(肾间质纤维化肾小管萎缩评分、肾间质炎症评分及小动脉玻璃样变评分)之间的相关性。结果:肾小球AT1受体表达与缺血肾小球百分比和球性硬化肾小球百分比均存在显著正相关。病理分型为Ⅲ型的患者肾小球和肾间质的AT2受体表达均显著高于Ⅱb型患者,且肾小球AT2受体表达与缺血肾小球百分比呈现显著正相关。结论:DN患者肾组织血管紧张素受体表达与肾脏病理改变存在一定的相关性,为深入了解RAS在DN病理损伤过程的作用提供了依据。     

肾小球疾病中转化生长因子-β_1与肌成纤维细胞的表达及意义

目的：探讨肾小球疾病中转化生长因子-β1（TGF-β1）与肌成纤维细胞的α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达及其对肾硬化的影响作用。方法：将原发性肾小球肾炎患者42例根据不同病理类型分为4组,利用肾活检组织免疫组织化学染色观察TGF-β1、α-SMA、胶原Ⅲ（Col-Ⅲ）表达与患者血肌酐（Scr）和内生肌酐清除率（Ccr）之间的相关性,根据镜下免疫组织化学染色在肾小球、肾小管间质中的着色深浅程度及分布,用MetuMorph图像处理系统,测出灰度按半定量方法,进行统计学分析。结果：不同病理类型的肾小球肾炎有不同的表达,随硬化程度的加重,其表达显著增加。TGF-β1表达主要分布于肾小球的系膜基质区、新月体中和小管间质的肾小管上皮细胞胞浆、间质成纤维细胞胞浆中、间质基质区和炎性细胞大量浸润区。α-SMA的表达在MsPGN组最高,而FSGS,SGN肾小球上几乎无α-SMA的表达,在肾间质中α-SMA的表达,随病变程度的加重,其表达显著增加。肾硬化中TGF-β1表达量与患者Scr和Ccr之间呈正相关,α-SMA、Col-Ⅲ在肾小管间质的表达量与患者Scr和Ccr之间呈正相关。结论：在肾硬化形成过程中,TGF-β1是重要的促发因素,肾硬化病变的初期,炎症反应使巨噬细胞和成纤维细胞等活化,分泌TGF-β1增加,TGF-β1进一步刺激（肾小管上皮细胞）TEC和成纤维细胞等,使表型转化为Myo-FB,Myo-FB合成和释放TGF-β1,进入恶性循环,最终导致肾硬化形成。     

糖肾方对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1及MMP-9表达的影响

目的：研究糖肾方对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1、MMP-2、MMP-9及Ⅳ型胶原表达的影响,探讨糖肾方对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护机制。方法：50只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、蒙诺组（0．833mg／kg）、糖肾方大剂量组（2．67g／kg）、糖肾方小剂量组（1．33g／kg）,每组10只,利用单侧肾切除加腹腔注射链脲佐菌素造成糖尿病肾病大鼠模型,连续给药20周。动态检测血糖和尿蛋白／肌酐水平;取肾组织进行病理组织学观察并对肾小球硬化和肾小管间质纤维化程度进行评分;RT-PCR方法检测TGF-β1、MMP-2及MMP-9 mRNA表达,免疫组化方法检测肾组织TGF-β1及Ⅳ型胶原表达。结果：大剂量糖肾方能显著降低糖尿病肾病大鼠尿蛋白／肌酐（P〈0．05）,降低肾小球硬化指数（P〈0．01）和肾小管间质纤维化指数（P〈0．01）,减少TGF-β1mRNA与蛋白表达（P〈0．05）,增加MMP-9mRNA表达（P〈0．05）,减少Ⅳ型胶原蛋白表达（P〈0．05）。结论：糖肾方可减轻实验大鼠肾小球硬化和肾小管间质纤维化,其作用机制可能与抑制TGF-β1表达和提高MMP-9mRNA水平有关。     

ATP结合元件A1与肾间质泡沫细胞形成、小管间质损害及血清胆固醇的相关性

目的 研究肾小球肾病患者肾间质区域ATP结合元件A1（ABCA1）蛋白的表达及其与泡沫细胞形成、肾小管间质损害、血清胆固醇的相关性。方法 选取诊断明确的Alport综合征患者5例、膜增生性肾小球肾炎（MPGN）患者28例、局灶节段性肾小球硬化（FSGS）患者35例、特发性膜性肾病（IMN）患者36例、IgA肾病（IgAN）患者34例为研究对象。采用免疫组织化学法检测患者肾间质区域（除肾小管）ABCA1蛋白的表达;用直线相关分析其与肾间质区域泡沫细胞相对面积、肾小管间质损害积分、血清胆固醇的相关性。 结果 在各类肾小球疾病患者的肾间质区域中,浸润的单核巨噬细胞、泡沫细胞及肾小管上皮细胞均表达ABCA1蛋白。泡沫细胞浸润者肾间质区域ABCA1蛋白的阳性表达量显著高于无泡沫细胞浸润者（P < 0.05）,但ABCA1的阳性表达量与泡沫细胞相对面积无相关。MPGN、FSGS、IMN患者肾间质区域ABCA1表达量与肾小管间质损害积分呈正相关（P < 0.05）。血清胆固醇与肾间质区域ABCA1蛋白的阳性表达量呈正相关（P < 0.05）。 结论 在各种病理类型的肾小球疾病患者中,血清胆固醇可促进肾间质ABCA1的表达;ABCA1对胞内脂质的转运具有双向作用,其与泡沫细胞形成缺乏肯定关联;ABCA1可能参与了肾小管间质的损害。     

肥大细胞与慢性马兜铃酸肾病间质纤维化关系的初步探讨

目的:初步探讨慢性马兜铃酸肾病(CAAN)患者肾间质肥大细胞浸润与间质纤维化之间关系.方法:随机选取CAAN 16例、非CAAN的慢性间质性肾炎(CIN)16例及微小病变病(MCD)11例患者肾穿刺组织作为研究对象.采用免疫组织化学、免疫荧光双重染色方法观察类胰蛋白酶(Try)染色阳性的肥大细胞(MCs)、蛋白酶活化受体-2(PAR-2)、转化生长因子-β1(TGF-β1)及Ⅰ型胶原(ColⅠ)表达的变化.结果:与MCD对照组相比,CAAN、CIN组肾间质MCs数量、肾小管上皮细胞PAR-2和TGF-β1及肾间质ColⅠ表达面积显著增加,而CAAN与CIN两组间上述指标无统计学差异;MCs数量与肾小管上皮细胞PAR-2和TGF-β1表达面积及肾间质ColⅠ表达面积呈显著正相关,肾小管上皮细胞PAR-2与TGF-β1表达面积之间也呈显著正相关;MCs数量分别与肾间质PAR-2和TGF-β1阳性细胞数量呈显著正相关,PAR-2阳性细胞数量和TGF-β1阳性细胞数量间也呈显著正相关.肾间质中Try染色阳性细胞与PAR-2或TGF-β1染色阳性细胞存在部分重叠.结论:MCs可能参与CAAN细胞外基质蓄积,推理可能与活化PAR-2,增加TGF-β1表达相关.     

人类肾小球肾炎中肾小管及间质细胞表型转化的研究

目的观察人类肾小球肾炎时肾小管-间质细胞发生的表型转化现象.方法对34例肾小球肾炎患者肾穿刺标本进行免疫组织化学染色,观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(vimentin,Vim)、角蛋白(cytokeratin,CK)、增殖细胞核抗原(PCNA)及Ⅳ型胶原(ColⅣ)表达,并进行透射电镜观察.结果在人类肾小球肾炎中,肾小管上皮细胞可出现间质细胞标志物波形蛋白及α-SMA表达,并可游离至肾间质中;肾间质中α-SMA阳性的肌纤维母细胞(myofibroblast,Myo-FB)增多,与波形蛋白阳性的间质细胞分布区域近似,并伴有Ⅳ型胶原的聚积增多.α-SMA阳性的肾小管-间质细胞均有增殖现象.结论人类肾小球肾炎时,肾小管上皮细胞和间质成纤维细胞可发生向肾间质肌纤维母细胞的表型转化,参与肾间质纤维化的发展.     

慢性肾小球肾炎患者肾脏BMP-7表达与肾间质纤维化程度的观察

目的观察慢性肾小球肾炎肾组织骨形态发生蛋白-7（BMP-7）、Ⅲ型胶原（Col-Ⅲ）、旷平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达、肾间质纤维化程度及肾功能的关系和临床应用价值。方法采用免疫组化二步法（SP法）检测60例慢性肾小球肾炎及6例正常肾组织中BMP-7、Col-Ⅲ、α-SMA表达，并用计算机图像分析软件检测肾小管间质BMP-7、Col-Ⅲ、α-SMA阳性染色相对面积，同时检测慢性肾小球肾炎患者肌酐清除率、24小时尿蛋白、血清白蛋白、总蛋白改变；常规病理检查。结果①与正常对照组比较，慢性肾小球肾炎患者BMP-7表达明显下降（P〈0．01）；②BMP-7表达随着肾小管间质纤维化加重呈明显降低趋势，并同Col-Ⅲ、α-SMA的表达呈显著负相关。结论BMP-7表达与慢性肾小球肾炎肾间质纤维化程度密切相关，它可以作为慢性肾小球肾炎肾间质纤维化程度的标志。     

转化生长因子β1和结缔组织生长因子在狼疮肾炎肾小管间质中的表达

目的 研究狼疮性肾炎肾小管间质转化生长因子β1（TGF－β1）和结缔组织生长因子（CTGF）的表达特点及其意义。方法 应用免疫组织化学方法比较原发性肾小球肾炎微小病变型（MCD）和狼疮肾炎（LN）肾小管间质中TGF－β1和CTGF的表达及分布以及浸润细胞，α－平滑肌肌动蛋白（SMA）的表达特点。结果 TGF－β1及CTGF可不同程度地表达于LN的肾小球和肾小管间质，且较MCD的表达普遍增高，肾间质TGF－β1表达量与CTGF的表达量之间的相关系数r=0.5316,P=0.023。LN患者肾间质内CD3阳性细胞，CD68阳性细胞，PCNA阳性细胞以及α－SMA的表达明显高于MCD患者。α－SMA的表达程度与肾小管间质纤维化程度存在正相关关系，r=0.436,P=0.032。结论 LN肾间质内TGF－β1和CTGF表达增高，可能与LN肾间质病变及炎性细胞的浸润有关。     

UⅡ在原发性系膜增生性肾小球肾炎的表达以及与中医辨证分型的相关性

目的:研究尾加压素Ⅱ(UⅡ)在系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)中的表达趋势及MsPGN与中医辨证分型的相关性.方法:回顾性的分析原发性MsPGN 110例,根据中医辨证分为4型.从轻、中、重度的MsPGN 患者肾穿组织蜡块中,随机选取36块肾穿组织标本,应用免疫组化Envision二步法检测肾小球及肾小管区UⅡ表达变化情况,采用HPIAS-2000型高清晰度彩色病理图像分析系统半定量分析肾小球和肾小管间质特异染色部分的相对面积,同时进行统计学处理.结果:UⅡ染色相对面积随系膜增生病变程度加重而增加.系膜增生不同程度的肾小球、肾小管间质UⅡ染色相对面积不同,且它们之间的差异有统计学意义(P<0.01).肺肾两虚型病理类型相对较轻,脾肾阳虚型、气阴两虚型比肝肾阴虚型相对较轻.其对应的UⅡ在肾小球、肾小管间质的表达亦呈逐渐增强阳性表达.结论:UⅡ与MsPGN病变程度相关;不同病理类型的MsPGN患者,可以有不同的证候,提示在治疗中应该注意把握要点.     

糖肾方改善单侧输尿管梗阻小鼠肾间质纤维化的机制研究

目的:观察糖肾方对单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾间质纤维化的作用,并初步探讨其机制。方法:45只雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组(Sham)、UUO模型组(UUO)、糖肾方组(TSF);预先给药7 d,除Sham组外其余各组行UUO手术,术后7 d取肾组织进行HE染色及Masson染色观察肾组织病理改变,免疫组化染色检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原(Collagen typeⅠ,ColⅠ)和Ⅲ型胶原(Collagen typeⅢ,ColⅢ)表达,Western Blot法检测转化生长因子-β_1(transforming growth factor-β_1,TGF-β_1)、E-钙连素(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)表达。结果:与Sham组比,UUO组小鼠肾小管间质损伤评分及纤维化面积百分比均显著升高;与UUO组比,TSF组肾小管间质损伤评分及纤维化面积百分比均显著降低。免疫组化与Western blot结果显示,与Sham组比,UUO组小鼠肾组织TGF-β_1及ColⅠ、ColⅢ表达水平显著升高;肾小管上皮细胞间质转分化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)标志性分子α-SMA和vimentin蛋白表达水平明显升高,E-cadherin蛋白表达水平明显降低,TSF可显著逆转UUO小鼠肾组织上述蛋白表达。结论:糖肾方可改善UUO小鼠肾间质纤维化,其机制与其抑制TGF-β_1,减少EMT发生有关。     

肾间质泡沫细胞MCP-1/CCR2的表达与肾小管-间质损害的关系

目的：检测Alport综合征、膜增生性肾小球肾炎、局灶节段硬化性肾小球肾炎、特发性膜性肾病及IgA肾病患者肾间质区域泡沫细胞浸润与MCP-1/CCR2蛋白的表达及小管-间质损害的相关性。方法：选取诊断明确的Alport综合征患者5例、膜增生性肾小球肾炎患者28例、局灶节段硬化性肾小球肾炎患者35例、特发性膜性肾病患者36例、IgA肾病患者34例作为研究对象。采用免疫组织化学法检测各例患者肾间质区域（除肾小管）MCP-1与CCR2的表达并分析其与肾小管-间质损害积分的相关性。结果：（1）肾小球疾病患者肾间质区域浸润的泡沫细胞上均可见MCP-1和CCR2蛋白的同时表达。（2）在各类原发性肾小球疾病患者中,泡沫细胞浸润组肾间质区域MCP-1和CCR2蛋白的表达明显高于无泡沫细胞组（P〈0.05）。（3）MCP-1和CCR2蛋白的阳性表达值与肾小管-间质损害积分呈正相关（P〈0.05）。结论：各种病理类型的肾小球疾病间质区域浸润的泡沫细胞可同时分泌产生MCP-1和CCR2蛋白,参与了肾小管-间质损害的发生。抑制泡沫细胞的浸润和阻断MCP-1/CCR2通路可延缓肾脏疾病的进展。     

慢性肾小球肾炎中医本证证型与肾纤维化程度关系研究

目的观察慢性肾小球肾炎肾组织骨形态蛋白-7（BMP-7）表达与Ⅲ型胶原（CobⅢ）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、肾间质纤维化程度、肾功能的关系,探讨BMP-7表达与中医证型之间的关系。方法用免疫组化法检测60例慢性肾小球肾炎及6例正常肾组织中BMP-7、Col—Ⅲ、α-SMA表达,并用计算机图像分析软件检测肾小管和间质BMP7、Col一Ⅲ、α-SMA阳性染色相对面积;常规病理检查;入选患者于肾活检前24h内行中医证候分析。结果与正常对照组比较,慢性肾小球肾炎患者BMP-7表达明显下降。BMP-7表达随着肾小管间质纤维化加重呈明显降低趋势,并同Col-Ⅲ、α—SMA的表达呈显著负相关。肺肾气虚、肝肾阴虚、气阴两虚、脾肾阳虚型慢性肾小球肾炎患者BMP-7表达较正常对照组显著下降。气阴两虚型、脾肾阳虚型BMP-7表达较肝肾阴虚型显著降低。肝。肾阴虚型BMP-7较肺肾气虚型显著降低。结论BMP7表达可以作为慢性肾小球肾炎肾问质纤维化程度的参考指标。BMP-7表达随着肺肾气虚型、肝肾阴虚型、气阴两虚型、脾肾阳虚型逐渐下降,这可能是患者出现不同中医证型表现的内在因素之一。     

梗阻性肾病大鼠肾组织periostin的表达及意义

目的 研究梗阻性肾病大鼠肾组织periostin表达的变化及其与肾间质纤维化的相关性.方法 18只SD雄性大鼠按随机数字法分成3组:假手术组、模型组和贝那普利组,每组6只.用单侧输尿管结扎法建立梗阻性肾病大鼠模型.RT-PCR检测各组大鼠肾组织periostin和转化生长因子(TGF) β1的mRNA表达;ELISA检测各组大鼠肾组织periostin、血管紧张素Ⅱ( AngⅡ)、TGF- β1的蛋白水平;HE及Masson染色观察肾间质变化;免疫组化检测肾组织Ⅰ型胶原蛋白.结果 与假手术组比较,模型组大鼠肾组织periostin、TGF-β1、AngⅡ蛋白表达显著升高(均P＜0.05).与模型组比较,贝那普利组上述蛋白表达显著降低,差异有统计学意义(均P＜0.05).与假手术组比较,模型组大鼠肾组织periostin和TGF- β1的mRNA表达显著上调,差异有统计学意义(均P＜0.05),而贝那普利组periostin和TGF- β1的mRNA表达则显著下调(均P＜0.05).肾组织periostin蛋白表达与AngⅡ、TGF-β1和Ⅰ型胶原的蛋白表达以及肾间质纤维化积分均呈正相关(r值分别为0.652、0.781、0.776和0.825,均P＜0.05).结论 梗阻性肾病大鼠肾组织periostin呈高表达,其可能参与了梗阻性肾病肾间质纤维化进程.