大鼠脑组织经反复高加速度暴露后bcl-2,bax,p53和白细胞介素1β转化酶的表达

背景反复高正加速度(+Gz)暴露可引起脑损伤,但其病理机制尚不清楚.目的了解反复高正加速度(+Gz)暴露后大鼠脑组织中bcl-2,bax,p53和白细胞介素1β转化酶基因的表达变化,探讨细胞凋亡在反复高+Gz暴露所致脑损伤中的病理作用.设计以SD大鼠为研究对象的随机对照实验研究.单位一所医院的航空医学研究中心.材料选用体质量为180～220 g健康雄性SD大鼠26只,随机分成对照组和+Gz暴露组,其中对照组4只,+Gz暴露组22只.干预将大鼠固定于动物离心机的转臂上,头朝向离心机轴心,+Gz暴露组条件为G值+14 Gz,增长率1.5G/s,峰值持续时间45 s,共作用3次,两次中间间歇0.5 h.对照组大鼠亦在动物离心机上经历类似实验步骤,所承受的G值为+1 Gz.分别于暴露后0.5,6.0,24.0和48.0 h断头取脑.用半定量反转录聚合酶链反应方法检测对照组和+Gz暴露后0.5,6.0,24.0和48.0 h大鼠脑组织中bcl-2,bax,p53和白细胞介素1 β转化酶mRNA表达水平,并用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法检测脑组织中凋亡细胞.主要观察指标各组大鼠+Gz暴露后大鼠脑组织中bcl-2,bax,p53和白细胞介素1β转化酶mRNA表达水平.结果+Gz重复暴露后6h,大鼠脑组织bcl-2 mRNA表达水平(0.32±0.08)明显低于对照组(0.69±0.15),bax,p53和ICE mRNA表达水平[(.55±0.09),(0.48±0.12),(0.79±0.12)]明显高于对照组[(0.33±0.09),(0.31±0.05),(0.51±0.09)],差异有显著性意义(P＜0.01).+Gz重复暴露后24 h,大鼠脑组织bcl-2mRNA表达水平(0.28±0.05亦明显低于对照组(0.69±0.15),bax,p53和ICE mRNA表达水平[(0.61±0.15),(0.54±0.07),(0.84±0.15)]亦明显高于对照组[(0.33±0.09),(0.31±0.05),(0.51±0.09)],差异有显著性意义(P＜0.01).+Gz重复暴露后0.5 h和48 h,大鼠脑组织bcl-2,bax,p53和ICE mRNA表达水平与对照组比较,差异无显著性意义(P＞0.05).+Gz重复暴露后6 h和24 h在大脑皮质、海马CA1区和纹状体可见部分神经元细胞发生凋亡.结论反复高+Gz暴露可引起大鼠脑组织中bcl-2,bax,p53和白细胞介素1β转化酶表达变化,细胞凋亡可能是反复高Gz暴露致脑损伤的机制之一.     

实验性大鼠急性脑缺血细胞凋亡与相关蛋白表达的关系

目的:研究大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡及p53,Bcl-2蛋白家族表达的变化,并探讨它们在细胞凋亡中的作用。方法:实验在华北煤炭医学院形态实验室完成。54只大鼠用随机数字表法随机分成3组:脑缺血组(42只)、假手术组(6只)和正常组(6只)。脑缺血组又分为7组:即缺血2h再灌注1,3,6,12,24,48和72h组(n=6)。采用线栓法制作局灶性脑缺血再灌注模型,用TUNEL法检测细胞凋亡的变化,用免疫组化法检测p53,Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果:①缺血2h再灌注1h皮质区可见凋亡细胞[(7.83±1.72)个/高倍视野],24～48h达高峰[(43.33±5.20)个/高倍视野,(48.50±6.25)个/高倍视野],72h开始下降[(26.67±3.56)个/高倍视野](P<0.05,P<0.01);缺血2h再灌注1h皮质区可见p53蛋白阳性细胞[(14.35±1.92)个/高倍视野],24h达高峰[(48.00±6.42)个/高倍视野],48h后开始下降[(31.00±6.60)个/高倍视野](P<0.05,P<0.01);缺血2h再灌注1h皮质区可见Bcl-2蛋白阳性细胞[(28.62±6.80)个/高倍视野],3h达高峰[(56.50±7.87)个/高倍视野],6h后开始下降[(45.00±6.63)个/高倍视野](P<0.01);缺血2h再灌注1h皮质区可见Bax蛋白阳性细胞[(45.83±4.07)个/高倍视野],24h达高峰[(61.00±8.88)个/高倍视野],48h开始逐渐下降[(45.83±6.49)个/高倍视野](P<0.     

Graves病伴血细胞减少症患者外周血淋巴细胞的研究

为了研究Graves病伴血细胞减少症患者外周血淋巴细胞的变化,探讨Graves病伴血细胞减少症的发病机制,以流式细胞术测定24例患者外周血Th细胞亚群及CD5+B淋巴细胞的数量、B淋巴细胞胞浆内凋亡蛋白Bcl-2的表达水平,并与18名正常人作对照。结果表明:正常对照组Th1细胞和Th2细胞百分率、Th2/Th1比值、CD5+B细胞百分率、Bcl-2表达率分别是(0.39±0.24)%、(0.28±0.15)%、(0.52±0.12)%、(7.89±0.38)%、(36.49±6.79)%;患者组Th1细胞和Th2细胞百分率、Th2/Th1比值、CD5+B细胞百分率、Bcl-2表达率分别是(0.81±0.45)%、(6.83±3.02)%、(20.55±6.15)%、(20.89±1.62)%、(80.25±15.56)%,均显著多于正常人对照(P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.05,P<0.05)。结论:Graves病伴血细胞减少症发病可能与Th1/Th2比例失衡,Th2细胞增多,导致CD5+B细胞数量上升及凋亡减低,自身抗体的产生增加有关。     

腹腔镜手术对子宫颈癌细胞生物行为的影响

目的:探讨腹腔镜手术对子宫颈癌细胞增殖和转移能力的影响。方法:子宫颈癌患者20例,在腹腔镜下行广泛子宫全切加盆腔淋巴结清扫术,采用流式细胞术测定术前和术后子宫颈癌细胞凋亡率,以及B cl2、T ra iL、NM 23和M TA 1基因表达水平的变化,并与开腹手术子宫颈癌细胞,以及腹腔镜下子宫全切术正常子宫颈细胞手术前后相对比。结果:子宫颈癌细胞术前凋亡率为(4.36±0.28)%,腹腔镜手术后为(26.65±0.75)%,差异有显著性(P<0.01);开腹手术后为(5.19±0.39)%,与术前相比,差异无显著性(P>0.05)。正常子宫颈细胞腹腔镜手术前后的凋亡率分别为(18.37±0.57)%和(17.47±0.68)%,差异无显著性(P>0.05)。子宫颈癌细胞M TA 1和B cl2基因表达术前为187.65±6.35和55.26±0.47,腹腔镜手术后为117.35±4.66和29.45±0.57,差异有显著性(P<0.01);开腹术后为190.31±5.56和58.77±0.98,差异无显著性(P>0.05)。NM 23和T ra iL基因术前表达率为50.87±0.75和62.16±0.27,腹腔镜术后为67.56±0.76和81.32±0.38,差异有显著性(P<0.01);开腹术后为47.87±0.39和59.79±0.75,差异无显著性(P>0.05)。正常子宫颈细胞M TA 1、B cl2、NM 23和T ra iL基因表达水平术前分别为23.45±0.57、39.33±0.39、19.82±0.21和33.79±0.56,腹腔镜手术后分别为26.42±0.38、40.11±0.42、18.79±0.47和32.56±0.43,差异均无显著性(P>0.05)。结论:腹腔镜手术用于治疗子宫颈癌并不增加其细胞的增殖和转移能力,是一种安全的手术方法。     

重型再生障碍性贫血患者外周血树突细胞亚群及共刺激分子表达的研究

目的了解重型再生障碍性贫血(SAA)患者在免疫抑制治疗(IST)前、后外周血树突细胞(DC)亚群数量、比值的变化,测定外周血 T 细胞激活协同分子(CD80、CD86、CD40)在树突细胞及 B细胞表面的表达。方法用单克隆抗体三标法和流式细胞术检测26例发病期和13例 IST 后恢复的SAA 患者外周血髓系 DC 前体(pDC1)与淋系 DC 前体(pDC2)的数量、比例,并与15名正常对照比较。其中10例患者检测了治疗前、后2个月的 pDC1与 pDC2的数量。检测16例 SAA 患者及12名正常对照外刷血 DC 及 B 淋巴细胞表面 CD80、CD86、CD40的表达。结果正常对照组外周血 pDC 总量、pDC1、pDC2及 pDC1/pDC2比值分别为(0.72±0.08)%,(0.41±0.05)%,(0.30±0.05)%,1.58±0.18:而初发 SAA 患者为(0.96±0.18)%,(0.67±0.13)%.(0.32±0.06)%,2.70±0.32,pDC1显著增多(P<0.05),pDC1/pDC2比例明显失衡(P<0.01);恢复期 SAA 患者上述指标下降为(0.77±0.13)%,(0.43±0.10)%,(0.34±0.09)%,1.78±0.36,与正常对照组无差异(P 值均>0.05)。10例 SAA 患者治疗前 pDC1、pDC2及 pDC1/pDC2比值分别为(0.87±0.31)%,(0.35±0.09)%,2.65±0.40,治疗2个月后分别为(0.24±0.09)%,(0.14±0.04)%,2.16±0.26,pDC1、pDC2显著下降(P值均<0.05)。正常对照组外周血 DC 表面 CD80、CD86、CD40的表达分别为(1.61±0.84)%,(11.97±4.31)%,(0.56±0.45)%,而 SAA 患者分别为(9.14±4.08)%,(29.84±3.02)%,(7.04±3.79)%,SAA 患者 DC 表面 CD86表达明显高于正常对照(P<0.05)。正常对照组外周血淋巴细胞CD19、CD80、CD86、CD40的表达分别为(9.38±0.92)%,(2.57±0.44)%,(1.86±0.32)%,(7.34±1.22)%;而 SAA 患者分别为(11.12±2.26)%,(5.17±0.68)%,(5.98±0.96)%,(8.85±2.49)%,CD80~+细胞、CD86~+细胞比例明显高于正常对照(P 值分别为<0.05和0.01)。正常对照外周血 B 淋巴细胞 CD80、CD86、CD40的表达分别为(28.22±3.56)%,(8.04±0.66)%,(81.6±6.48)%;而 SAA患者分别为(23.06±3.73)%,(20.46±2.78)%,(81.57±5.29)%,SAA 患者 B 淋巴细胞上 CD86表达明显高于正常对照组(P<0.05)。结论 SAA 患耆 pDC 亚群明显异常,与 Th1细胞激活有关的pDC1明显增多,这种变化与 SAA 病情密切相关。SAA 患者 T 细胞活化所需要的共刺激信号 B7-2途径处于高度激活状态,这可能是导致 T 细胞异常激活的机制之一。     

肝母细胞瘤细胞凋亡和增殖状况及其相关基因表达的研究

目的探讨肝母细胞瘤细胞凋亡和增殖状况及其相关调控基因p53和Bcl-2在各肿瘤中表达的意义。方法应用原位末端标记及免疫组化技术检测了38例肝母细胞瘤中细胞凋亡及增殖细胞核抗原(PCNA),p53和Bcl-2蛋白表达。结果肝母细胞中的凋亡细胞数120.6±24.52及增殖细胞数257.64±29.64均显著高于对照组(19.57±1.32,18.28±1.25,均P<0.001),p53和Bcl-2的表达率(分别为57.8%、36.8%)其表达强度也显著高于对照组(分别为0,17%,P<0.05),代表细胞增殖活性的PCNA在各型肝母细胞瘤中差异明显(P<0.01),而凋亡细胞数的差异无意义,细胞凋亡密度高的肿瘤预后较好。结论肝母细胞凋亡与增殖平衡调控异常在肝母瘤的发生、发展中可能起重要作用,突变型p53及Bcl-2蛋白均具有抑制细胞凋亡,促进细胞增殖的作用。     

RNA干扰骨髓基质细胞衍生因子表达对共培养Jurkat细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨阻抑骨髓基质细胞衍生因子(SDF1)表达对与其共培养的Jurkat细胞增殖、凋亡的影响。方法脂质体介导SDF1特异性RNA干扰质粒转染培养的急性白血病骨髓基质细胞,G418筛选阳性克隆(A组),采用ELISA法检测SDF1表达变化;与Jurkat细胞共培养,绘制生长曲线并计算倍增时间,用流式细胞术检测细胞周期,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺失末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡,免疫细胞化学检测增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl2、Bax、Fas、FasL表达。以未转染急性白血病骨髓基质细胞(B组)及正常骨髓基质细胞(C组)作为对照。结果A组骨髓基质细胞培养上清SDF1含量为(384±41)pg/ml,较B组[(2474±271)pg/ml]、C组[(1324±154)pg/ml]明显降低。与之共培养的Jurkat细胞,A组与B组、C组比较,细胞增殖速度减缓,倍增时间延长(A组42h,B组29h,C组33h);细胞周期分析G0/G1期细胞比例增多[A组(28.47±2.39)%,B组(19.43±2.80)%,C组(27.15±2.07)%],S期细胞减少[A组(25.57±1.90)%,B组(74.48±3.23)%,C组(60.99±2.33)%],G2/M期细胞增多[A组(45.96±3.24)%,B组(6.09±1.96)%,C组(11.86±1.98)%];细胞凋亡率增加[A组(15.2±0.8)%,B组(5.4±0.7)%,C组(9.5±0.4)%];PCNA、Bcl2、Fas表达减少,Bax、FasL表达增多。结论阻抑SDF1表达在一定程度上抑制与骨髓基质细胞共培养的Jurkat细胞的增殖活性,并促进其凋亡。     

钙离子拮抗剂对大鼠心肌梗死后心肌细胞凋亡的影响

目的探索钙离子拮抗剂对缺血后心肌细胞凋亡的影响.方法结扎大鼠冠状动脉(冠脉)造成心肌梗死;实验组动物冠脉结扎前和术后3 h分别经口腔内滴注和腹腔注射钙离子拮抗剂Adalat 1 mg/kg和0.4 mg/kg,缺血对照组给安慰剂;正常对照组行假手术不结扎冠脉,给安慰剂.术后6 h测定左室功能,并取心脏标本作原位缺口末端标记法(TUNEL)原位细胞凋亡和Fas、Bcl-2蛋白免疫组织化学(组化)染色,高倍镜下计算细胞凋亡指数.结果实验组和缺血对照组的左室收缩压、左室舒张末压和压力改变速度(dp/dt)无显著差异,3个指标分别为76.7±7.5/8.0±6.1 mm Hg比74.9±11.1/11.6±8.3 mm Hg,P>0.05;(777.3±128.6)mm Hg/s比(761.8±136.4)mm Hg/s,P>0.05;但均低于正常对照组[94.9±7.5/2.8±3.2 mm Hg,P<0.001;(1 131.5±112.8)mm Hg/s,P<0.001];实验组和缺血对照组心肌缺血区TUNEL染色阳性,实验组心肌细胞凋亡指数显著低于缺血对照组(0.201±0.053比0.261±0.045,P<0.05),在缺血周边的心肌区Fas和Bcl-2蛋白免疫组化染色阳性,而正常对照组3种染色均阴性.结论缺血可诱导心肌细胞凋亡及Fas和Bcl-2基因的表达;钙离子拮抗剂具有抑制心肌细胞凋亡的作用.     

PLK1基因缄默在K562细胞凋亡中的作用

目的观察缄默PLK1基因的短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)对K562细胞内PLK1表达和细胞凋亡的影响,探讨PLK1在白血病发病中的作用,寻找更为有效的白血病治疗途径。方法设计合成针对PLK1基因1416~1436位点的shRNA片段,并将其克隆于绿色荧光蛋白的表达载体pEGFP-H1中,命名为pEGFP-H1/PLK1。通过电穿孔转染法将其导入K562细胞中,分为对照组、pEGFP-H1空载体转染组和pEGFP-H1/PLK1shRNA重组质粒转染组,转染后24,48h,分别通过RT-PCR和Western blot检测各组细胞PLK1基因和蛋白水平的变化,以MTT方法测各组细胞的增殖活性,比色法检测各组细胞的半胱天冬酶3(caspase-3)蛋白酶活性,并通过流式细胞仪检测各组细胞的凋亡和G2/M期转变情况。结果PLK1mRNA相对水平(与内参的灰度比值)对照组为1.25±0.07,空载体转染24,48h组分别为1.21±0.08和1.23±0.09,shRNA重组质粒转染24,48h组分别为0.52±0.04和0.25±0.02,shRNA重组质粒转染组较其他两组明显降低(P<0.01)。各组细胞PLK1的蛋白水平变化趋势与PLK1mRNA表达相似。相应地,对照组、空载体转染48h组、shRNA重组质粒转染24,48h组的凋亡率分别为(8.3±0.6)%、(8.7±0.7)%、(49.7±3.8)%和(82.3±6.9)%,后两者与前两组之间差异有统计学意义(P<0.05)。此外,与对照组和空载体转染组相比,shRNA重组质粒转染组的细胞增殖能力明显下降(P<0.05),且位于G2/M期的细胞较对照组和空载体转染组显著增加。以上结果均于转染后48h时较明显(P<0.05)。结论构建的shRNA能明显抑制转染细胞PLK1的表达和增殖,并可促进转染细胞的凋亡,并使停留于G2/M期的细胞显著增加。     

实验性大鼠急性脑缺血细胞凋亡与相关蛋白表达的关系

目的：研究大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡及p53，Bcl-2蛋白家族表达的变化，并探讨它们在细胞凋亡中的作用。方法：实验在华北煤炭医学院形态实验室完成。54只大鼠用随机数字表法随机分成3组：脑缺血组(42只)、假手术组(6只)和正常组(6只)。脑缺血组又分为7组：即缺血2h再灌注1，3，6，12，24，48和72h组(n=6)。采用线栓法制作局灶性脑缺血再灌注模型，用TUNEL法检测细胞凋亡的变化，用免疫组化法检测p53，Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果：①缺血2h再灌注1h皮质区可见凋亡细胞[(7．83&;#177;1．72)个／高倍视野]，24～48h达高峰[(43．33&;#177;5．20)个／高倍视野，(48．50&;#177;6．25)个／高倍视野]，72h开始下降[(26．67&;#177;3．56)个／高倍视野](P&;lt;0．05，P&;lt;0．01)；缺血2h再灌注1h皮质区可见p53蛋白阳性细胞[(14．35&;#177;1．92)个／高倍视野]，24h达高峰[(48．00&;#177;6．42)个／高倍视野]，48h后开始下降[(31．00&;#177;6．60)个／高倍视野](P&;lt;0．05，P&;lt;0．01)；缺血2h再灌注1h皮质区可见Bcl-2蛋白阳性细胞[(28．62&;#177;6．80)个／高倍视野]，3h达高峰[(56．50&;#177;7．87)个／高倍视野]，6h后开始下降[(45．00&;#177;6．63)个／高倍视野](P&;lt;0．01)；缺血2h再灌注1h皮质区可见Bax蛋白阳性细胞[(45．83&;#177;4．07)个／高倍视野]，24h达高峰[(61．00&;#177;8．88)个／高倍视野]，48h开始逐渐下降[(45．83&;#177;6．49)个／高倍视野](P&;lt;0．05，P&;lt;0．01)。②缺血再灌注后不同时间点细胞凋亡数与p53及Bax蛋白的阳性表达数呈正相关(r=0．843，P&;lt;0．001；r=0．840，P&;lt;0．001)，与Bcl-2蛋白的阳性表达数呈负相关(r=-0．387，P&;lt;0．05)。结论：大鼠脑缺血再灌注后，缺血周边区发生明显的细胞凋亡，同时伴有p53及Bax蛋白表达增加及Bcl-2表达降低，p53及Bax蛋白表达对细胞凋亡起促进作用，而Bcl-2蛋白表达则对细胞凋亡起抑制作用。     

多器官功能障碍综合征患者外周血单个核细胞SOCS-1/3表达及与预后的关系研究

目的 了解外周血单个核细胞(PBMCs)中细胞因子信号转导抑制因子-1/3(SOCS-1/3)表达与多器官功能障碍综合征(MODS)预后的关系.方法 选择32例MODS患者和24例健康志愿者.采用淋巴细胞分离密度梯度离心法分离PBMCs,分别以逆转录-聚合酶链反应及蛋白质免疫印迹法检测PBMCs中SOCS-1/3的mRNA及蛋白表达,分析其与预后及MODS评分的关系.结果 MODS组SOCS-1 mRNA表达与正常组比较差异无统计学意义(0.526±0.044比0.466±0.047,P＞0.05),而SOCS-1蛋白表达显著高于与正常组(0.814±0.045比0.479±0.021,P＜0.05);MODS组中死亡者SOCS-1 mRNA表达显著低于存活者(0.487±0.032比0.532±0.028,P＜0.05),蛋白表达显著低于存活者(0.787±0.029比0.838±0.040,P＜0.05);MODS患者SOCS-1的mRNA及蛋白表达与MODS评分均呈显著负相关(r1＝-0.731,r2=-0.526,P均＜0.01).MODS组SOCS-3 mRNA表达显著高于正常组(0.993±0.415比0.461±0.046,P＜0.05),SOCS-3蛋白表达显著高于正常组(0.458±0.033比0.403±0.024,P＜0.05);MODS组中死亡者SOCS-3 mRNA表达显著高于存活者(1.245±0.408比0.805±0.326,P＜0.05),蛋白表达显著高于存活者(0.486±0.021比0.425±0.016,P＜0.05);MODS患者SOCS-3 mRNA表达与MODS评分呈正相关,但不显著(r＝0.468,P＞0.05),SOCS-3蛋白表达与MODS评分呈显著正相关(r=0.783,P＜0.01).结论 MODS中SOCS-1表达可能起到保护组织避免损伤的作用,其表达减少可能提示患者预后不良;SOCS-3的表达可能起损伤作用或增加组织对损伤的易感性,其表达增加可能提示病情严重及预后不良.     

p38MAPK和COX-2mRNA在创伤后多器官功能障碍综合征患者外周血中的表达

目的 探讨创伤后多功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)患者外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)与p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)mRNA的表达以及与MODS病情变化的关系.方法 选择符合1995年中华医学会急诊分会危重病专业组制定的MODS病情分期诊断标准和1991年Knaus提出急性生理和慢性健康评分Ⅲ(APACHE Ⅲ)的患者40例,其中男22例,女18例;与患者年龄、性别相匹配的健康对照组40名.用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测PBMCs培养上清液COX-2与p38MAPK含量;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测PBMCs中COX-2与p38MAPK的mRNA表达.并分析它们的表达与APACHEⅢ评分的相关性.结果 MODS组患者PBMCs的COX-2与p38MAPK含量及两者的mRNA表达均显著高于健康对照组(均P<0.05);MODS死亡患者PBMCs的COX-2与p38MAPK含量及两者的mRNA表达与存活患者比较,差异具有统计学意义(均P<0.05);相关分析显示,PBMCs培养上清液中COX-2与p38MAPK含量呈正相关(r=0.614 7,P<0.01);患者 PBMCs的COX-2和p38MAPK mRNA表达与APACHEⅢ评分呈正相关(r1=0.500 9,P1<0.05,r2=0.531 6,P2<0.05).结论 COX-2与p38MAPK参与了MODS的发病过程,而且可作为判断MODS预后的辅助指标.

Abstract：

Objective To explore the expression of COX-2 and p38MAPK in patients with trauma MODS. Methods Forty MODS patients were evaluated. The levels of peripheral blood mononuclear cells COX-2 and p38MAPK in MODS patients and 40 normal controls was detected by enzyme linked immunosor-bent assay (ELISA). RT-PCR was used to measure the COX-2 mRNA and p38MAPK mRNA expression of in PBMCs. ANOV and correlation analysis were used in statistical analysis. Results The levels of COX-2 and p38MAPK of PBMCs and the mRNA expression in MODS group were higher than in control group (all P <0.05). The levels of COX-2 and p38MAPK of PBMCs and the mRNA expression in dead group were higher than in survival group( all P <0.05). The levels of COX-2 and p38MAPK of PBMCs were positively correlated, (r =0.6 147, P<0.01). The expression of COX-2 mRNA, p38MAPK mRNA of PBMCs and APACHE I scoring were positively correlated (r1 =0.5 009, P1 <0.05,r2 =0. 5 316, P2 <0. 05). Conclusions COX-2 and p38MAPK of PBMCs take part in the onset of MODS, and may service as index to judge the prognosis of MODS.     

SIRS与MODS患者外周血单核细胞环氧化酶与血小板活化因子的关系研究

目的了解环氧化酶（COX）和血小板活化因子（PAF）在全身炎症反应综合征（SIRS）与多器官功能障碍综合征（MODS）患者发病机制中的作用。方法选择28例符合美国胸科医师协会／危重病医学会（ACCP／SCCM）提出的SIRS和MODS诊断标准患者，其中SIRS组13例，MODS组15例，另以与息者年龄、性别相匹配的11名健康体检者作为正常对照组。采用淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离外周血单核细胞（PBMCs）；用酶联免疫吸附法（ELISA）检测PBMCs中COX-2含量与血小板活化因子乙酰水解酶（PAF—AH）活性；用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法检测PBMCs中COX-2与PAF—AH的mRNA表达。结果MODS组患者PBMCs中COX-2含量、PAF—AH活性及两者的mRNA表达均显著高于正常对照组和SIRS组（P均〈0．05），正常对照组与SIRS组间差异无显著性，死亡患者高于存活息者（P均〈0．05）；3组PBMCs中COX-2含量与PAF—AH活性间呈正相关关系（r=0．329，P〈0．05）。死亡息者的外周血白细胞计数、淋巴细胞计数、氧合指数与存活患者比较差异均无显著性，血糖、血肌酐则明显高于存活息者（P〈0．05和P〈0．01），CO2总含量（TCO2）、动脉血pH值均明显低于存活息者（P均〈0．01）。结论COX-2与PAF—AH参与了MODS的发病过程，而且可作为判断SIRS与MODS预后的参考指标；血糖、肌酐、TCO2、pH可作为判断病情及预后的其他参考指标。     

核转录因子-κB及其抑制因子mRNA表达对多器官功能障碍综合征预后判断的作用

目的 观察核转录因子-κΒ(NF-κΒ)及其抑制因子(IκB)的mRNA表达水平在多器官障碍综合征(MODS)患者预后评估中的作用.方法 将43例MODS患者按预后分为存活组(28例)和死亡组(15例),选择同期10例健康体检者作为对照.于入院当日使用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定血中单核/粒细胞NF-κΒ mRNA及IκB-α mRNA的表达水平,并比较存活组与死亡组各项数值.结果 MODS患者NF-κΒ mRNA表达水平明显高于正常对照组(1.35±0.53比0.74±0.25,P＜0.01),而IκB-α mRNA表达水平明显低于正常对照组(1.24±0.60比1.97±0.71,P＜0.01).死亡组NF-κΒ mRNA表达水平与存活组比较差异无统计学意义(1.27±0.37比1.39±0.60,P＞0.05),而IκB-α mRNA表达水平则明显低于存活组(0.94±0.46比1.40±0.61,P＜0.05).相关分析显示,IκB-α mRNA表达水平与急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分呈明显负相关(r=-0.340,P＜0.05);且当IκB-α mRNA表达水平截断点为1.34时,其约登指数在各截断点中最高,为0.51,特异度为90.72%,敏感度为60.75%.结论 IκB mRNA表达水平可用来判断MODS患者的预后.     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞干扰素诱导的蛋白10mRNA表达的临床价值

目的 探讨外周血单个核细胞（PBMCs）干扰素诱导的蛋白10（IP-10）mRNA表达与系统性红斑狼疮（SLE）活动的关系。方法 用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测46例SLE患者、20例类风湿关节炎（RA）患者、11例非SLE肾损伤患者及20名正常健康人PBMCSIP-10mRNA表达。结果 SLE活动组PBMCSIP-10mRNA表达水平与非活动组间的差异有统计学意义（P〈0．01），活动性狼疮肾炎（LN）组与无肾损伤组之间PBMCSIP-10mRNA表达水平的差异亦有统计学意义（P〈0．05），而RA组和非SLE肾病组患者与正常对照组水平相近似（P〉0．05）。血清IP—10水平与PBMCSIP-10mRNA表达高度正相关（r=0．8971，P〈0．01）。PBMCSIP-10mRNA表达水平与狼疮病活动指数（SLEDAI）评分呈正相关（r=0．6837，P〈0．01），与肾SLEDAI评分亦高度正相关（r=0．7260，P〈0．01）。结论 SLE活动时期PBMCSIP-10mRNA表达增加，与SLE疾病活动状况相关，尤其与LN的活动状况密切相关。     

Bcl-2、p16、p53及Ki-67在子宫平滑肌肿瘤中的表达及临床意义

目的分析Bcl-2、p16、p53及Ki-67在子宫平滑肌肿瘤中的表达情况及其临床意义。方法选取2018年2月至2020年2月我院收治的150例子宫平滑肌肿瘤患者作为观察组,另选取同期150例健康志愿者作为对照组。采用免疫组化法检测组织中Bcl-2、p16、p53及Ki-67蛋白的表达情况。比较Bcl-2、p16、p53及Ki-67蛋白在两组患者中的表达情况及其在良、恶性子宫平滑肌肿瘤中的表达情况及诊断价值。结果观察组Bcl-2、p16、p53、Ki-67阳性表达率均高于对照组(P<0.05)。恶性组p16、p53、Ki-67阳性表达率高于良性组,Bcl-2阳性表达率低于良性组(P<0.05)。p16在良、恶性肿瘤鉴别诊断中价值最高,其次为p53、Ki-67、Bcl-2。结论Bcl-2、p16、p53及Ki-67蛋白在良、恶性子宫平滑肌肿瘤中的表达存在差异,其中,p16在良、恶性肿瘤中的鉴别诊断价值最高。     

Expression of Fas (CD95) and Fas ligand on peripheral blood mononuclear cells in critical illness and association with multiorgan dysfunction severity and survival

OBJECTIVE: This was an exploratory study with three goals: a) to quantify the expression of the apoptotic receptor Fas and its ligand (FasL) on peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) in patients with, or at risk for, multiple organ dysfunction syndrome (MODS); b) to compare this expression with the respective expression in matched controls; and c) to explore the association with MODS severity and survival. DESIGN: Repeated-measures correlational and cross-sectional design. SETTING: The surgical, medical, and the trauma/burn intensive care unit of an academic institution. PATIENTS: Thirty-five adult, critically ill patients meeting the diagnostic criteria for systemic inflammatory response syndrome (SIRS) with MODS, or at risk for MODS, were followed for 14 days. Thirty-five non-SIRS controls matched with patients for age, gender, and race comprised the control group. INTERVENTIONS: Peripheral blood sampling every 48 hrs. MEASUREMENTS/MAIN RESULTS: T cells were considerably depleted in SIRS/MODS patients (p <.001), and Fas and FasL expression on PBMCs (flow cytometric analysis) was elevated significantly compared with controls (p <.001). In contrast to controls, non-T cells were the major sources of Fas and FasL in SIRS/MODS patients (p <.01). Expression of Fas and FasL exhibited a bimodal correlation with severity (p <.03). High severity patients demonstrated increasing Fas and FasL expression with increasing severity in contrast to declining expression in moderately severe patients. Fas and FasL measurements were significantly and positively associated with the likelihood of survival (p <.05). CONCLUSIONS: Dysregulation in the expression of apoptotic receptors Fas and FasL, at least in PBMCs, may be involved in the pathophysiology of SIRS, the related lymphocytopenia, and the onset of MODS and the related morbidity and mortality rates.     

多器官功能障碍综合征患者高级氧化蛋白产物的表达及其临床意义

目的 探讨高级氧化蛋白产物(AOPP)在多器官功能障碍综合征(MODS)发病中的作用及临床意义.方法 选择全身炎症反应综合征(SIRS)和MODS患者各90例.采用分光光度计法测定患者静脉血中C-反应蛋白(CRP)和AOPP的浓度;同时对MODS患者进行急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅲ(APACHE Ⅲ)评分,追踪患者1个月内的生存或死亡情况;分析CRP和AOPP浓度与器官功能障碍程度和病情转归的关系.以同期90例与患者年龄、性别相匹配的健康体检者作为健康对照组.结果 MODS组患者血CRP[(22.22±4.32)mg/L3和AOPP[(130.66±18.08)μmol/L]浓度均显著高于健康对照组[(2.38±0.89)mg/L和(33.20±5.32)μmol/L3和SIRS组[(5.32±1.22)mg/L和(48.58±6.03)μmol/L],差异均有统计学意义(P均<0.05),健康对照组与SIRS组间差异无统计学意义.MODS组中死亡患者(47例)血CRP和AOPP浓度显著高于存活患者(43例,P均<0.05);MODS患者血CRP、AOPP浓度与APACHE Ⅲ评分E(98.66±20.87)分]均呈高度正相关(rl=0.469,r2=0.528,P均<0.01).血CRP、AOPP浓度随衰竭器官数增加而明显升高(P均<0.05),AOPP浓度与CRP呈高度正相关(r=0.448,P<0.01).结论 AOPP可能参与了MODS的发病过程,AOPP浓度异常增高反映MODS患者体内存在严重氧化应激状态,可作为判断MODS患者器官功能障碍程度和预后的重要指标.     

多器官功能障碍综合征患者外周血白三烯B4与p38丝裂原活化蛋白激酶的变化

目的　探讨多器官功能障碍综合征( MODS)患者外周血白三烯B4( LTB4)与p3 8丝裂原活化蛋白激酶( p3 8MAPK)含量的变化及与MODS病情的关系。方法　对2 6例MODS患者进行病情评分,采用酶联免疫吸附法( ELISA)检测血中LTB4与p3 8MAPK含量,并与1 2例健康体检者进行对照。比较MODS患者MODS评分与外周血L TB4和p3 8MAPK的相互关系,及MODS组死亡与存活患者的MODS评分、外周血LTB4与p3 8MAPK含量。结果　MODS患者血清LTB4含量为( 92 3 .96±3 0 8.65) ng/L,明显低于健康对照组( 2 453 .3 1±40 0 .93 ) ng/L( P<0 .0 5) ;MODS患者血清中p3 8MAPK含量为( 1 93 .83±1 0 6.3 2 ) ng/L,与健康对照组( 1 2 4.3 6±84.50 ) ng/L比较差异无显著性( P>0 .0 5)。MODS组中死亡患者的血清L TB4含量为( 4 44 .98±2 0 6.3 0 ) ng/L,明显低于存活患者的( 1 3 3 4 .51±53 0 .3 5) ng/L( P<0 .0 5) ;p3 8MAPK含量为( 2 72 .0 8±2 0 7.3 7) ng/L ,明显高于存活患者( 1 1 5.59±57.99) ng/L ( P<0 .0 5)。结论　MODS晚期病理生理变化与一般炎症反应有所不同。外周血L TB4与p3 8MAPK可作为MODS病情严重程度及预后判断指标。     

B细胞激活因子在支气管哮喘患者的变化及意义

目的 探讨B细胞激活因子(B cell activating factor，BAFF)在支气管哮喘(简称哮喘)发病中的作用。方法 采用酶联免疫吸附测定法检测31例健康成人(对照组)和43例哮喘急性发作期和缓解期患者治疗前后血清BAFF水平，采用实时定量-PCR法检测外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs) BAFF mRNA表达水平，分析二者之间的相关性。采用SPSS11.5统计学软件处理数据，计量资料采用正态性检验，非正态分布资料用中位数(最小值-最大值)表示。患者年龄用x±s表示，计量资料血清BAFF水平和BAFF mRNA以中位数(最小值-最大值)表示，应用Kruskal-Wallis法比较3组间BAFF水平的差异，若差异显著, 则采用Mann-Whitney U检验作两两比较。采用Pearson直线相关分析进行相关性分析。P<0.05为差异有统计学意义。 结果 血清BAFF水平和PBMCs BAFF mRNA表达水平在急性发作期患者高于缓解期患者和对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)，而缓解期患者与对照组相比，差异无统计学意义(P>0.05)；急性发作期和缓解期哮喘患者血清BAFF水平和PBMCs BAFF mRNA表达水平呈正相关(分别r=0.456，P<0.05和r=0.523，P<0.05)。结论 血清BAFF水平和PBMCs BAFF mRNA表达水平在急性发作期哮喘患者明显增高，其动态变化与病情变化有关。