水流动力学注射——一种新型的体内基因转移技术

基因治疗是向靶细胞或靶组织中导入外源基因，以纠正或补偿基因的缺陷，关闭或抑制异常表达的基因，从而达到治疗的目的。其中基因转移技术是基因治疗成败的关键。用于基因转移的载体主要有病毒和非病毒两类。病毒载体转导基因进入目的细胞的效率很高，但是往往要求复杂的实验室制备和纯化过程，而且其引起的免疫反应和副作用也是不容忽视的。     

肺癌EB病毒LMP1基因片段的检测及变异株的意义初探

目的：研究EB病毒LMP1基因与肺癌的关系，并对其变异株进行分析。方法：应用多聚酶链反应检测了40例肺癌EBV－LMP1基因片段，并对其进行克隆及测序分析。结果：40例肺癌标本中，11例（27．5％）阳性；对11例EBV－LMP1 DNA阳性产物用限制性内切酶StyI酶切消化，发现9例与标准病毒完全一致，2例不同，提示EBV－LMP1基因有变异存在。结论：EB病毒的感染及LMP1基因片段的变异在肺癌的发生、发展中可能发挥着一定的作用。     

p16／MTSI基因缺失在骨髓增生异常综合征发病中作用的研究

目的 探讨多肿瘤抑制基因(p16／MTSI)缺失与骨髓增生异常综合征(MDS)发病的关系。方法 采用PCR技术．对30例MDS的p16／MTSI基因缺失情况进行了分析。结果 30例MDS患者未见有p16基因缺失。结论 提示p16基因缺失和MDS的发病关系不大。     

成人T细胞白血病N－ras基因点突变的研究

成人Ｔ细胞白血病（ＡＴＬ）由人类Ⅰ型嗜Ｔ细胞病毒（ＨＴＬＶ－Ⅰ）引起，但其发病机理仍不清楚。我们应用逆转录－多聚酶链反应结合直接序列分析检测１０例ＡＴＬ患者的Ｎ－ｒａｓ基因，结果在一例ＡＴＬ发现Ｎ－ｒａｓ６１位点突变（ＣＡＡ→ＣＴＡ），说明ＨＴＬＶ－Ⅰ感染之后有多种因素参与ＡＴＬ的发病。     

myc拮抗基因Mad1、Mxi1和Rox在白血病细胞中的表达和突变

目的分析Madl、Mxil和Rox基因突变在白血病发病中的作用。方法利用逆转录．聚合酶链反应（1iT-PCR）、单链构象多态性（SSCP）分析及DNA序列分析技术检测了26例初治急性白血病（AL）患者、30名健康对照者和7种白血病细胞株中Madl、Mxil和Rox基因表达及突变情况。结果liT-PCR检测结果显示所有标本中均可检测到Madl、Mxil和Rox基因的表达；SSCP分析结果显示所有标本中有4个位点发生多态性改变：Madl中2个位点，Mxil和Rox中各1个位点。DNA序列分析显示所有标本中有9个位点发生错义突变：Madl中2个位点均发现于初治AL患者；Mxil中4个位点，其中3个位点发现于初治AL患者，1个位点发现于KGl细胞株；Rox中3个位点均发现于初治AL患者。26例初治AL患者Madl、Mxil和Rox基因的突变发生分别为2例、3例和3例。结论首次在AL患者细胞中发现Madl、Mxil和Rox基因突变，提示Madl、Mxil和Rox基因的突变可能与白血病的发病有关。     

输卵管妊娠患者生殖道巨细胞病毒检测与基因分析

目的 分析输卵管妊娠患者巨细胞病毒感染及基因型的关系。方法 ELISA法检测125例输卵管妊娠患者和42例行附件切除术的无异位妊娠史的卵巢囊肿患者(对照组)血清中抗巨细胞病毒IgM，生殖道组织以巢式聚合酶链反应(nested—PCR)测定巨细胞病毒糖蛋白gBn基因并测序分析基因型。结果 抗巨细胞病毒IgM阳性18例(14％)，对照组阳性1例(2％)。巨细胞病毒gBn基因阳性25例(20％)，对照组2例，巨细胞病毒检出率明显高于正常对照组，两组间差异有显著性意义。gBn基因分型为gBnl型3／16例(19％)，2型1／16例(6％)，3型11／16例(69％)，1／3混合型1／16例(6％)，未见4型，gBn基因型分布以gBn3型为主(χ^2＝12．286，P＝0．O06)。结论 输卵管妊娠患者存在巨细胞病毒感染，gBn基因型分布以gBn3型为主，输卵管妊娠患者巨细胞病毒感染可能与其发生有关。     

DJ-1与帕金森病

帕金森病（PD）是一种常见的神经系统变性疾病，在65岁或以上人群中的患病率为1-2％。大多数PD病因目前仍不明确，但许多与PD有关的基因突变已见报道。特别是其中罕见的单基因遗传的致病基因将有助于我们理解包括常见的多基因遗传的PD的发病机制。最近报道的DJ-1基因与常染色体隐性遗传的PD有关。现就DJ-1最新研究进展作一综述。     

汉坦病毒的基因组检测和基因分型

汉坦病毒属至少包括６个血清型汉滩病毒、汉坦病毒、普马拉病毒、希望山病毒、泰国病毒和索托帕拉亚病毒，本文综术 基因组检测和基因分型研究进展。     

115例抗-HEV E2-IgM、IgG阳性感染者HEV RNA检测与基因分型研究

目的对戊型肝炎暴发人群中115例抗-HEV E2-IgM、IgG阳性感染者进行病毒RNA检测和基因分型研究，探讨其临床意义。方法对收集的暴发人群中115例抗．HEV E2-IgM、IgG均阳性人员血清和23例戊型肝炎患者粪便标本，采用通用引物进行逆转录-酶链聚合反应（RT-PCR）扩增戊型肝炎病毒Ⅰ、Ⅳ型基因片段，并进行测序和同源进化分析。结果从被检血清中扩增出8例戊型肝炎病毒阳性RNA基因片段，阳性毒株之间核苷酸同源性在97．3％～100％之间，进化树分析提示阳性毒株与戊型肝炎病毒基因Ⅳ型距离最近，与日本株和中国原型株的同源性分别为93．3％～95．3％和86．7％～87．3％；粪便标本中未能检测到戊型肝炎病毒RNA。结论本次急性戊型肝炎暴发流行由戊型肝炎病毒基因型Ⅳ型导致，暴发毒株与日本株有更近的亲缘关系；高灵敏度引物和取样时机是提高戊型肝炎病毒RNA检出率的前提。     

急性白血病细胞SHIP基因的突变分析

SHIP(SH2 domain containing inositol 5′-phosphatase)基因主要在造血细胞表达，并在造血细胞的发生发育中发挥关键的负调节作用。本研究旨在评价SHIP基因突变在白血病发病中的作用。利用RT—PCR、SSCP及DNA序列分析技术检测了32例急性髓细胞白血病、9例急性淋巴细胞白血病及正常对照骨髓或外周血标本中SHIP基因表达及突变情况。RT—PCR显示所有标本中都有SHIP基因表达，22％(7／32)AML和12％(1／9)ALL标本中存在SHIP基因的突变，其中1例AML患者发病时标本同时存在2个错义突变，而完全缓解(CR)后消失，而且其发病时的白血病细胞在体外随着IL—3的刺激其Akt的磷酸化明显增加。结论：本研究首次发现急性白血病细胞中SHIP基因突变，提示SHIP基因的突变可能与白血病发病有关；在造血细胞中，它很可能做为一个抑癌基因通过负性调节P13K／Akt信号通路发挥作用。     

单基因糖尿病的早期识别与精准治疗

单基因糖尿病（monogenic diabetes,MD）涵盖了广泛的异质性疾病，包括新生儿糖尿病、青少年发病的成人型糖尿病和综合征型糖尿病，明确基因诊断有助于实现精准治疗。随着临床医生逐渐重视对分类不明确的糖尿病进行分子遗传学的筛查，MD确诊患者日渐增多。但目前MD治疗往往是超说明书用药，相关指南或共识对具体用药时机和剂量阐述甚少，如何实施精准治疗成为临床面临的新挑战。本文梳理MD的临床与分子遗传学特征，重点阐述对几种有特效治疗方法的MD如何实施个体化治疗及遗传咨询。     

系统性红斑狼疮遗传易感性研究进展

系统性红斑狼疮(SLE)的发病机理复杂，研究发现SLE是一种多基因复合性疾病，并存在遗传异质性，遗传因素在SLE易感性方面起重要作用。目前已知与人类SLE易感性有关的基因有：人类白细胞抗原(HLA)基因、补体基因、FC受体(FCR)基因、凋亡相关基因等。通过对这些基因的研究，有利于阐明SLE分子发病机制，并进一步指导临床基因诊断和基因治疗。本文就SLE的遗传易感性研究进展进行综述。     

基因疫苗——疫苗的新希望

近几年发展起来的基因免疫接种技术导致了基因疫苗的庭生，基因疫苗既具有重组亚单位疫苗的安全性，双具有减毒活疫苗诱导全方位免疫应签的高效力，在病毒感染性疾病和肿瘤等的防治中有着广阔的应用前景本文对基因疫苗的庭生、作用机理和优点等作一简述。     

巨细胞病毒致病研究新进展

人类巨细胞病毒（Human cytomegalo virus HCMV）属病毒科亚属，又称疱疹病毒5型，核心为双股线形DNA病毒。巨细胞病毒（CMV）具有高度种属特异性和潜伏一活化的特性。侵入人体状况有下列几种：（1）潜伏状态，病毒基因整合到宿主基因组内，不表达病毒抗原和装配病毒颗粒随细胞基因复制而转移到子代细胞内。（2）产毒感染，病毒在宿主细胞内复制，引起细胞病变，形成宿主细胞核内和胞浆包涵体，致细胞溶解死亡。     

基因治疗的安全性、有效性和稳定性原则

以病毒和非病毒为载体的体细胞基因治疗是一种富有前景的治疗人类疾病的方法。它已从初步的动物实验发展至临床试验。基因治疗应用的载体和靶基因主要集中于非病毒载体、病毒载体和单个靶基因或单基因。每个载体系统有其优点和缺陷。然而，当前人类疾病基因治疗应用的限制主要是转基因方法的潜在风险、相对低效率和靶基因的胞内稳定性。因此，安全性、有效性和稳定性是人们常常遇到的基因治疗的三个问题．也是人们应遵守的基因治疗的三个原则。     

血管紧张素Ⅰ转换酶基因多态性与脑梗死的相关性研究

目的 探讨中国人群血管紧张素Ⅰ转换酶(ACE)基因插入／缺失(I／D)多态性和脑梗死的相关性。方法 用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性的方法检测242例脑梗死和283例正常对照的ACE基因多态性，多元Loglstic回归模型分析其与脑梗死的相关性。结果 经年龄、性别、饮酒、吸烟、文化程度、糖尿病、高血压调整后，ACE基因与脑梗死、高血压、糖尿病无显著相关；高血压导致脑梗死发病危险性显著增加(OR=7．28，P=0．000)；ACE基因ID／DD基因型和高血压对脑梗死的发生有明显交互作用，显著增加脑梗死的危险性(交互作用系数=1.62，OR=7．29)，为2型交互作用中的超相乘模型。结论 ACE基因I／D多态性与脑梗死发病无相关性，但ACE基因ID／DD基因型和高血压对脑梗死有交互作用，增加脑梗死的危险性。     

急性白血病细胞造血细胞磷酸酶基因的突变分析

造血细胞磷酸酶(HCP)在造血细胞发育、增殖及受体介导的有丝分裂信号传导通路中发挥关键的负调节作用，在motheaten小鼠中其突变可导致粒一单核细胞严重的过度聚积和功能紊乱。本研究旨在评价HCP基因突变在急性白血病发病中的作用。利用RT-PCR，SSCP及DNA序列分析技术检测了41例急性白血病、8株白血病细胞系及50例正常对照骨髓或外周血标本中HCP基因表达及突变情况。RT-PCR显示所有标本中都有HCP基因表达，仅在1例急性淋巴细胞性白血病细胞中发现一错义突变，发生在HCP基因氨基末端的SH2结构域；此外。分别在HCP基因的69，85，86和266密码子存在多态性。结论：HCP基因突变在急性白血病中较少见，在白血病发病中可能起较小作用，需进一步研究澄清。     

肿瘤抑制基因p53.p16与脑肿瘤

探索肿瘤抑制基因ｐ５３、ｐ１６变异在脑肿瘤发病中的意义。方法２３例脑肿瘤病人原发肿瘤标本用免疫组化ＬＳＡＢ法行肿瘤抑制基因Ｐ５３Ｐ１６蛋白检测。结果：星形细胞瘤Ⅰ级９例，ｐ１６蛋白４例表达３０％以下，５例不表达，ｐ５３蛋白３例表达３０％以下。     

p16/MTS1基因缺失在骨髓增生异常综合征发病中作用的研究

目的 探讨多肿瘤抑制基因(p16/MTS1)缺失与骨髓增生异常综合征(MDS)发病的关系。方法 采用PCR技术,对30例MDS的p16/MTS1基因缺失情况进行了分析。结果 30例MDS患者未见有p16基因缺失。结论 提示p16基因缺失和MDS的发病关系不大。     

泛素相关蛋白1基因与肿瘤抑制基因p16在急性白血病中的表达研究

为了探讨泛素相关蛋白1(UBAP1)基因和肿瘤抑制基因(p16)在急性白血病中的表达水平及二者的相关性,采用实时荧光定量PCR技术检测68例急性白血病患者和22例对照者骨髓细胞中ubap1基因和p16基因的mRNA的表达水平。结果发现,在急性白血病中ubap1基因呈高表达,p16基因呈低表达,与对照组相比较有显著性差异(p0.01)。然而,进一步分组比较发现,ubap1基因仅在成人急性髓系白血病的M4和M5亚型中的表达有统计学意义(p0.05),p16基因除成人FAB分型的M1和M2亚型外,其余组差异均有统计学意义(p0.05);而ubap1基因和p16基因的mRNA表达水平在染色体预后分组间差异无统计学意义(p0.05)。ubap1基因和p16基因的表达水平在对照组中呈显著负相关(r=-0.827,p0.01),在病例组中无相关性(r=0.065,p0.05)。结论:ubap1基因高表达与p16基因低表达可能同时参与急性白血病的发病,其中ubap1基因高表达主要影响AML中M4和M5亚型的发病,这一发现为进一步探讨急性白血病发病机制及靶向治疗提供重要的理论依据。