超顺磁性纳米氧化铁颗粒标记胰腺癌细胞的MR分子成像

目的 探讨超顺磁性纳米氧化铁颗粒（SPION）靶向标记胰腺癌细胞（BxPC-3）行MR分子成像的可行性。方法 制备黏蛋白1（MUC1）靶向修饰的探针MUC1-SPION（靶向组）,并以牛血清蛋白（BSA）制备非靶向探针BSA-SPION（非靶向组）。采过噻唑蓝（MTT）法测试不同MUC1-SPION浓度下（铁浓度为0、6.25、12.50、25、50、100、200 μg/ml）的细胞毒性。并分别于铁浓度为50、100、200 μg/ml条件下,对靶向组及对照组与BxPC-3细胞共同孵育2 h后的细胞悬液进行MR成像,测定横向弛豫时间（T2）,计算T2强化率。以普鲁士蓝染色观察靶向探针与细胞结合情况。结果 MTT法细胞毒性实验显示,不同MUC1-SPION浓度下BXPC-3细胞增殖率差异无统计学意义（F=1.74,P=0.183）。铁浓度50、100、200 μg/ml条件下,2组间T2值和T2强化率的差异均有统计学意义（P均<0.05）。普鲁士蓝染色显示靶向组的蓝染颗粒更多。结论 MUC1-SPION对BxPC-3细胞具有良好的靶向性,以SPION靶向标记BxPC-3细胞进行MRI安全、可行。     

多功能复合纳米材料Fe-Cur-KB靶向β淀粉样蛋白:构建与体外MR成像

目的 构建可特异性结合阿尔茨海默病（AD）病理标志物β淀粉样蛋白（Aβ）的磁性纳米粒子,观察其用于早期诊断AD的潜力。方法 采用溶剂蒸发法构建以Aβ为靶向基团,携带姜黄素（Cur）颗粒、KB探针及四氧化三铁的磁性纳米材料,观察其粒径、形态、水动力粒径和Zeta电位、体外MR成像表现、细胞毒性及透过血脑屏障（BBB）能力,并验证其体外结合Aβ能力。结果 所构建的Fe-Cur-KB磁性纳米材料携带负电荷,Zeta电位约-17.3 mV,水动力粒径约26.93 nm,体外MR显像能力良好。不同浓度Fe-Cur-KB纳米溶液对马-达二氏犬肾（MDCK）细胞存活率无明显影响（P>0.05）。实验组光密度（OD）高于对照组（P<0.05）。碱性磷酸酶与普鲁士蓝共染结果表明,该纳米材料可与Aβ斑块特异性结合。结论 Fe-Cur-KB磁性纳米材料具有良好的生物相容性和稳定性,体外MR显像能力及透过BBB并与Aβ靶向结合能力,可作为MR显像剂用于早期诊断AD。     

构建及应用针对非小细胞肺癌整合素αvβ3受体靶向性纳米分子探针:体外实验研究

目的 构建以整合素α_vβ₃为靶点的纳米分子探针,探讨其理化、生物学特征及对非小细胞肺癌A549细胞靶向性MR成像能力。方法 构建以精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸多肽（RGD）为靶向基团的分子探针RGD-Gd@BSA,检测其T1弛豫率、水合动力学直径、Zeta电位、分散稳定性和细胞毒性,并比较RGD-Gd@BSA（靶向组）和Gd@BSA（非靶向组）与肺癌A549细胞的靶向能力。结果 线性拟合获得RGD-Gd@BSA的T1弛豫率为18.615 L/（mmol·s）,明显高于Gd-DTPA的3.404 L/（mmol·s）;RGD-Gd@BSA探针呈类球形,平均水合动力学直径为（99.52±2.62）nm;Zeta电位为（-11.07±0.42）mV,在溶液中分散稳定。Gd³⁺浓度为0.15、0.30、0.60、1.20和2.40 μmol/L的RGD-Gd@BSA溶液中,人胚肾293T细胞的存活率分别为81.74%、86.80%、69.83%、78.41%和66.95%。共聚焦显微镜成像可见靶向组细胞具有比非靶向组更高的荧光强度;靶向组细胞悬液的T1WI相对信号强度高于非靶向组。结论 纳米分子探针RGD-Gd@BSA具备稳定的理化特性、较好的生物相容性、较高的T1弛豫率和对肺癌A549细胞的靶向性,具有作为用于非小细胞肺癌特异性诊断的纳米分子探针的价值。     

制备anti-EGFR-PEG-SPIO靶向纳米分子探针对肺腺癌细胞行体外靶向MR成像

目的 探讨anti-EGFR-PEG-SPIO纳米分子探针对表皮生长因子受体（EGFR）高表达肺腺癌细胞的靶向性及利用MRI对其监测的可行性。方法 制备anti-EGFR靶向纳米分子探针（anti-EGFR-PEG-SPIO）及非靶向纳米分子探针（PEG-SPIO）,行电镜（TEM）观察,并测量水合粒径及弛豫率等表征。之后将不同Fe浓度（0、10、20、40、60、80 μg/ml）的anti-EGFR-PEG-SPIO和PEG-SPIO分别与H460细胞孵育2 h后,进行体外MR成像,观察其T2WI信号强度及信号强度变化率。行H460细胞普鲁士蓝染色和电镜观察细胞摄取Fe情况。结果 不同Fe浓度anti-EGFR-PEG-SPIO及PEG-SPIO探针分别与H460细胞孵育2 h后,前者显示H460细胞的信号强度随Fe浓度的升高而明显减低,Fe浓度为60 μg/ml时,相对于0、10、20、40、80 μg/ml,信号强度变化率约为-58.2%、-82.7%、-94.4%和-98.3%;而后者显示H460细胞信号强度减低相对不明显。普鲁士蓝染色及TEM结果显示anti-EGFR-PEG-SPIO的H460细胞内可见大量铁颗粒沉积,而PEG-SPIO的肿瘤细胞内仅可见少量铁颗粒沉积。结论 自行制备的anti-EGFR-PEG-SPIO分子探针对H460肺腺癌细胞具有靶向效应,采用3.0T MR扫描仪可对其进行监测。     

荷钆硬脂酰壳寡糖的制备及其在胰腺癌成像中的应用

目的 制备荷钆硬脂酰壳寡糖（COSSA-DTPA-Gd）,评价其胶束性质、细胞毒性、体外弛豫率和在胰腺肿瘤中的MR成像效果。方法 利用酰化反应合成硬脂酰壳寡糖,再枝接螯合剂DTPA并与Gd³⁺螯合得到最终产物。采用电镜和激光粒度仪等测定产物胶束性质;噻唑蓝法测定产物细胞毒性;在MR上测定体外弛豫率,评估其在原位胰腺肿瘤成像强化中的效果。结果 合成的COSSA-DTPA-Gd在水中可自发形成胶束,临界胶束浓度为（5.12±0.43）μg/ml,外观近似球形,粒径（58.3±5.7）nm,带正电荷,含钆量为330.31 μmol/g。产物的细胞毒性与市售对比剂马根维显相似（P>0.05）,24 h内细胞存活率>85%。COSSA-DTPA-Gd的体外纵向弛豫率为8.23 mM^-1·s^-1,静注后对胰腺肿瘤的成像效果优于马根维显,肿瘤周边首先强化,肿瘤内部渐进性强化。结论 COSSA-DTPA-Gd胶束对比剂对胰腺肿瘤具有良好的成像效果。     

心脏MR T2* mapping技术定量评价2型糖尿病患者左心室心肌改变

目的 探讨心脏MR T2^* mapping技术定量评价2型糖尿病（T2DM）患者心肌改变的临床价值。方法 对54例T2DM患者（T2DM组）及43名健康志愿者（正常对照组）采用T2^* mapping技术行心脏MR检查。测量并比较2组间左心室各节段心肌及各支冠状动脉供血区心肌T2^*值的差异。结果 T2DM组左心室第6、15、16节段T2^*值低于正常对照组（P均<0.05）,2组间其余各节段心肌T2^*值差异均无统计学意义（P均>0.05）。T2DM组冠状动脉左回旋支（LCX）供血区心肌T2^*值低于正常对照组（P=0.035）,2组间左前降支（LAD）及右冠状动脉（RCA）供血区心肌T2^*值差异均无统计学意义（P均>0.05）。结论 T2^* mapping技术可用于定量评价T2DM患者左心室心肌改变,有助于早期发现糖尿病心肌病。     

剪切波弹性成像评估重型β-地中海贫血患儿肝脏超铁负荷:与肝脏MR T2*值及血清铁蛋白的相关性

目的 观察剪切波弹性成像（SWE）评估重型β-地中海贫血（β-TM）患儿超铁负荷的价值,及其参数与肝脏MR T2^*值及血清铁蛋白的相关性。方法 回顾性分析96例β-TM患儿及100名健康儿童（对照组）,根据是否接受造血干细胞移植（HSCT）将患儿分为HSCT组（n=41）或无HSCT组（n=55）,比较3组SWE参数;采用Spearman相关分析观察肝脏剪切波速度（LSWV）与肝脏MR T2^*值及血清铁蛋白、杨氏模量与肝脏MR T2^*值及血清铁蛋白的相关性。结果 HSCT组、无HSCT组LSWV及杨氏模量均高于对照组（P均<0.001）;HSCT组与无HSCT组LSWV及杨氏模量差异均无统计学意义（P均>0.05）。β-TM患儿SWE参数与MR T2^*值均呈中度负相关（r=－0.501,P<0.05;r=－0.514,P<0.05）、与血清铁蛋白均呈低度正相关（r=0.488,P<0.05;r=0.470,P<0.05）。结论 SWE可用于评估β-TM患儿肝脏超铁负荷;SWE参数与MR T2^*值呈负相关、与血清铁蛋白呈正相关。     

靶向癌胚抗原载药纳米超声造影剂体外抑制卵巢癌细胞生长

目的 制备靶向癌胚抗原（CEA）载药相变型PLGA纳米粒（Ab-PTX-NPs）,探讨该纳米粒的体外寻靶及抑制肿瘤细胞生长的效能。方法 乳化溶剂挥发法联合碳二亚胺法制备靶向CEA载紫杉醇纳米粒（Ab-PTX-NPs）,采用马尔文粒径分析仪检测其粒径大小。采用高效液相色谱法检测紫杉醇包封率及载药量,恒温摇床透析法检测该纳米粒体外释药特征。激光共聚焦显微镜及流式细胞术观察该纳米粒体外寻靶情况,CCK-8试剂检测卵巢癌细胞存活率。结果 制备的Ab-PTX-NPs粒径为（397.70±99.95）nm,紫杉醇包封率及载药量分别为（67.26±4.15）%和（6.31±0.39）%。抗CEA单克隆抗体与纳米粒连接率为（92.74±5.75）%。共聚焦显微镜下观察到靶向组卵巢癌SKOV3细胞周围见较多造影剂黏附,流式细胞术测得靶向组细胞平均荧光强度明显高于其余各组（P<0.05）,CCK-8试剂法测得靶向组在24 h时,细胞存活率高于纯药组（P<0.05）,而低于无靶组（P<0.05）,当48 h时,靶向组与纯药组细胞存活率差异无统计学意义（P>0.05）。结论 成功制备靶向CEA载药相变型PLGA纳米粒,该纳米粒经低功率聚焦超声治疗仪（LIFU）致相变后可明显增强超声显影,且载药量高,释药快,靶向能力强。     

体素内不相干运动MRI评估MR引导下高强度聚焦超声消融子宫肌瘤中期治疗效果

目的 观察体素内不相干运动（IVIM）MRI评估MR引导下高强度聚焦超声（HIFU）消融治疗子宫肌瘤的中期效果。方法 分别于MR引导下HIFU治疗前及治疗后6个月对23例单发子宫肌瘤患者行多b值MR扫描,对所得图像提取3组数据分别进行拟合：①b ≤ 100 s/mm²（b=0、25、50、75、100 s/mm²）,采用单指数模型拟合得到ADC;②b ≤ 200 s/mm²（b=0、25、50、75、100、150、200 s/mm²）,以单指数模型拟合得到ADC;③b ≤ 1 000 s/mm²（b=0、25、50、75、100、150、200、500、800、1 000 s/mm²）,采用双指数IVIM模型拟合获得真扩散系数（D）、假性扩散系数（D^*）和灌注分数（f）。观察并比较MR引导下HIFU治疗前及治疗后6个月子宫肌瘤IVIM参数变化。结果 b ≤ 100 s/mm²图像显示MR引导下HIFU治疗6个月后ADC较治疗前明显下降（P=0.015）;b ≤ 200 s/mm²时,治疗后6个月ADC稍下降但不明显（P=0.145）;b ≤ 1 000 s/mm²图像显示治疗后D明显上升（P<0.001）、f明显下降（P=0.001）,而D^*无明显变化（P=0.187）。结论 利用IVIM MRI可较好地评估MR引导下HIFU消融治疗子宫肌瘤的中期效果。     

超声靶向辐照微泡造影剂介导重组腺相关病毒转染肾癌细胞的研究

目的 以聚乙二醇-聚乳酸羟基乙醇酸-聚赖氨酸(mPEG-PLGA-PLL)阳离子复合物为骨架,构建携带Cy3-siRNA的载基因纳米粒子。探讨超声和(或)微泡造影剂SonoVue促进载Cy3-siRNA 纳米粒子转染鼠源性视网膜色素上皮(RPE)细胞的可行性。方法 采用复乳法制备载Cy3-siRNA纳米粒,检测其粒径、包封率及体外释放情况。在不同的纳米粒子浓度(0.05~0.5mg/ml)和孵育时间下(10min,1~24h),检测载Cy3-siRNA 基因纳米粒子在RPE细胞中的内化过程。载Cy3-siRNA 基因纳米粒子与培养的RPE细胞一起孵育,不同超声辐照条件下,利用倒置荧光显微镜、流式细胞仪观察测定细胞10min瞬态转染和24h稳态转染效果,MTT法检测48h后细胞增殖情况。筛选超声和(或)微泡造影剂介导载Cy3-siRNA纳米粒子转染RPE细胞的最佳转染条件。结果 动态光散射测量纳米粒子的平均直径是(150±20)nm;Zeta电位通过多普勒电泳光散射测量纳米粒子电位为(13±3)mV,高效液相色谱测得包封率为93.3%,28天后纳米粒子的释放率为78.6%。纳米粒子的内化程度随着浓度的增加而增加,在0.45mg/ml时达到了一个平台期,Cy3-siRNA 转染率为(87.0±5.6)%。孵育时间延长,转染率增高,接触时间为12h时,转染率最高。当纳米粒子浓度达到0.5mg/ml时,仍未发现细胞毒性作用。超声声强为0.5W/cm²,辐照时间60s,工作周期50%时,可以提高纳米粒子的转染率达56.3%(P=0.008)。单纯微泡组,微泡浓度为20%时,也可提高纳米粒子在RPE细胞中的转染率(P=0.012)。但是,超声联合微泡组未进一步提高基因的转染(P=0.68)。结论 超声声强为0.5W/cm²,辐照时间60s,工作周期50%时,可以提高纳米粒子的转染率。微泡浓度为20%时,也可提高纳米粒子在RPE细胞中的转染率。超声或微泡造影剂SonoVue可以促进载Cy3-siRNA纳米粒子转染RPE细胞。     

间充质干细胞多模态示踪方法的应用

目的 合成具备MR显像和基因传输功能的纳米载体,探讨载体对间充质干细胞（MSCs）的基因传输功能及其联合生物发光成像（BLI）和MRI对MSCs双模态示踪的能力。方法 合成三元共聚物聚乙二醇-聚天冬氨酸（聚乙烯亚胺）-超顺磁性氧化铁纳米颗粒载体（PAI/SPION）;利用凝胶阻滞实验分析载体携带质粒（pDNA）的能力;电位及粒度测定仪测量载体复合pDNA后的粒径和电位;采用大鼠股骨骨髓分离培养MSCs;采用流式细胞仪、激光共聚焦显微镜评估PAI/SPION/pDNA对MSCs的基因转染效率;联合BLI和MRI双模态示踪MSCs。结果 成功合成了载体PAI/SPION。氨基与质粒磷酸根的摩尔比（N/P）=3.0时,PAI/SPION可完全复合pDNA。N/P=12时,粒径趋于稳定,为（74.8±8.1）nm,电位为（12.2±1.5）mV,载体对MSCs的基因转染率为（71.2±2.3）%。激光共聚焦显微镜下,胞浆内可见大量表征PAI/SPION的绿色荧光和表征pDNA的红色荧光,且MSCs生物发光强度最高,T2^*WI标准化信号强度最低。结论 本研究成功合成了MRI可视的基因传输载体PAI/SPION;载体可高效传输pDNA至大鼠MSCs,且可成功联合BLI和MRI双模态示踪MSCs。     

多功能靶向纳米载体的制备及其对神经母细胞瘤的靶向性和MRI示踪性观察

目的 制备集靶向siRNA传递及MRI显像功能于一体的多功能靶向纳米载体,并验证其对神经母细胞瘤的靶向性及MRI示踪性.方法 制备PEG-PEI-SPION,scAbGD2 -PEG-PEI-SPION并检测其基本特性.利用凝胶阻滞检测纳米载体与siRNA的复合能力;以CLSM及MRI验证纳米载体的靶向性.结果 PEG-PEI-SPION,scAbGD2-PEG-PEI-SPION平均粒径分别为(60.0±2.3)nm及(90.0±7.8)nm.氮磷比(N/P)≥2.2时siRNA与PEG-PEI-SPION,scAbGD2 -PEG-PEI-SPION完全复合.CLSM实验及MRI结果证实scAbGD2-PEG-PEI-SPION具有靶向性.结论 scAbGD2-PEG-PEI-SPION对神经母细胞瘤具有靶向传递siRNA及MRI显影的功能.     

磁性氧化铁纳米颗粒与脂质体介导EGFP基因转染内皮祖细胞的比较研究

目的评价精氨酸包裹的超顺磁性氧化铁纳米颗粒（nano-Fe2O3-arginine）及脂质体作为基因载体在针对外周血来源的内皮祖细胞转染中的可行性,并对两者的转染效率进行比较。方法将nano-Fe2O3-arginine及LipofectamineTM2000作为基因载体连接绿色荧光蛋白pcDNA3.1（＋）/EGFP质粒在体外转染兔外周血来源的内皮祖细胞,荧光显微镜观察转染结果并计算转染效率;转染后48h采用MTT比色法测定这两种载体对内皮祖细胞增殖和功能的影响以了解其细胞毒性。结果LipofectamineTM2000作为基因载体将报告基因转染至兔外周血内皮祖细胞内并成功表达,用荧光显微镜可观察到发绿色荧光的细胞,转染效率达38.3%;而nano-Fe2O3-arginine转染组在荧光显微镜仅能观察到少量绿色荧光细胞,转染效率不到5%;两种载体对内皮祖细胞的增殖活性未见明显影响。结论脂质体作为载体转染内皮祖细胞的效率明显高于精氨酸包裹的超顺磁性氧化铁纳米颗粒,脂质体可较为有效安全地转染基因至内皮祖细胞,从而为内皮祖细胞联合基因治疗疾病奠定了基础。     

Molecular weight-dependent gene transfection activity of unmodified and galactosylated polyethyleneimine on hepatoma cells and mouse liver

To optimize a receptor-mediated and cell-selective gene transfer with polyethyleneimine (PEI)-based vector, we synthesized three galactosylated PEIs (Gal-PEI) with different molecular weights (PEI₁₈₀₀, PEI_10,000, and PEI_70,000) and investigated their potential as a targetable vector to asialoglycoprotein receptor-positive cells. All PEI derivatives formed complexes with plasmid DNA (pDNA), whereas the particle size of the complex became smaller on increasing the molecular weight of PEI. Transfection efficiency in HepG2 cells with PEI was highest with PEI₁₈₀₀; efficiency was next highest with PEI_10,000, although the cellular association was similar. After galactosylation, Gal₁₉-PEI_10,000/pDNA and Gal₁₂₀-PEI_70,000/pDNA showed considerable agglutination with a galactose-recognizing lectin, but Gal₉-PEI₁₈₀₀ did not, suggesting that galactose units on the Gal₉-PEI₁₈₀₀-pDNA complex are not sufficiently available for recognition. Gal₁₉-PEI_10,000-pDNA and Gal₁₂₀-PEI_70,000-pDNA complexes showed galactose-inhibitable transgene expression in HepG2 cells. Transfection efficiency was greatest with Gal₁₉-PEI_10,000/pDNA, a result that highlights the importance of obtaining a balance between the cytotoxicity and the transfection activity, both of which are found to be a function of the molecular weight of PEI. After intraportal injection, however, Gal₁₅₃-PEI_70,000/pDNA having a low N/P ratio was most effective, suggesting that additional variables, such as the size of the complex, are important for in vivo gene transfer to hepatocytes.     

携带人肝细胞生长因子的腺病毒转染人骨髓间充质干细胞及超顺磁性氧化铁标记细胞体外MR成像

目的 评价携带人源化绿色荧光蛋白(hrGFP)-人肝细胞生长因子(hHGF)的腺病毒载体对人永生化骨髓间充质干细胞UE7T-13生物学特征的影响,并探讨对超顺磁性氧化铁(SPIO)标记细胞进行体外MR成像的可行性。 方法 构建和包装携带hrGFP-hHGF基因的腺病毒载体;以hrGFP-hHGF腺病毒转染UE7T-13细胞,检测细胞中hrGFP表达阳性率、hHGF mRNA及细胞上清液中hHGF水平;检测hrGFP-hHGF腺病毒对H₂O₂诱导细胞凋亡的影响。以SPIO标记UE7T-13细胞,检测标记后细胞内铁含量、细胞增殖及分化能力;对不同铁浓度SPIO标记的细胞行MRI。结果 成功构建hrGFP-hHGF腺病毒载体,将其转染UE7T-13细胞48 h后hrGFP阳性表达率达93.17%,hHGF mRNA表达提高3075.63倍,细胞上清液中hHGF水平显著升高,随后下降,于第14天仍高于hrGFP腺病毒转染细胞。hrGFP-hHGF腺病毒可抑制H₂O₂介导的细胞凋亡。SPIO标记后细胞铁染色阳性率达100%,细胞铁含量明显高于未标记细胞;SPIO标记不影响细胞增殖及分化能力;T2WI信号随标记铁浓度增高而降低。 结论 hrGFP-hHGF腺病毒载体可抑制H₂O₂介导的细胞凋亡;SPIO能高效标记细胞,不影响细胞增殖及分化能力,可用于细胞体外MR成像。     

高分辨率磁共振成像辅助腹腔镜低位直肠癌手术的效果分析

目的 分析高分辨率磁共振成像（MRI）辅助腹腔镜低位直肠癌的手术效果。方法 回顾性分析2018年1月－2020年1月该院收治的118例低位直肠癌患者的临床资料，所有患者均采用腹腔镜手术治疗，术前行高分辨率MRI检查的为MRI组（n = 52），术前未行高分辨率MRI检查的为非MRI组（n = 66）。以术后病理检查结果为金标准，比较高分辨率MRI检查对低位直肠癌患者T分期、N分期和环周切缘受累的诊断效果，并比较两组患者围手术期各指标和排便情况。结果 高分辨率MRI T分期的诊断率为84.62%（44/52）。其中，T₁期和T₄期的诊断正确率为100.00%；T₂期诊断正确率为85.71%（18/21），误诊的3例为T₃期，为过低分期；T₃期诊断正确率达77.27%（17/22），误诊的5例为T₂期，为过高分期。高分辨率MRI N分期的诊断率为73.08%（38/52）。其中，N₀期诊断正确率达66.67%（16/24），误诊的8例为N₁期，为过低分期；N₁期诊断正确率达71.43%（15/21），误诊的6例有5例为N₀期（过高分期），1例为N₂期（过低分期）；N₂期7例诊断正确率达100.00%。高分辨率MRI对环周切缘受累的诊断率为94.23%（49/52）。其中，环周切缘未受累与环周切缘受累诊断正确率达100.00%。MRI组患者的手术时间、第1次排便时间和每次排便时间短于非MRI组，术中出血量和日排便次数少于非MRI组，差异均有统计学意义（P < 0.05）。结论 高分辨率MRI能够较好地诊断低位直肠癌患者的T分期、N分期和环周切缘受累情况，并可缩短腹腔镜的手术时间，减少术中出血量，改善术后排便情况。     

MRI 梯度回波T2 加权序列对脑内海绵状血管瘤的诊断价值

目的　通过分析比较自旋回波 (SE)序列和梯度回波T2 WI(准T2 序列T 2 )序列对脑内海绵状血管瘤 (CA)的显示能力 ,以探讨T 2 技术对CA的诊断价值。方法　对 18例CA病人采用SE和T 2 序列进行MRI检查 ,观察两者对CA病灶的检测能力。结果　SE序列共检出 2 3个CA病灶。而T 2 序列则比前者多发现 2 0个CA病灶。T 2 序列能更准确识别邻近蛛网膜下腔的皮层下和缺血灶附近的小CA病灶。结论　CA病人MRI检查时 ,常规SE序列与T 2 相结合 ,能更全面准确地提供诊断信息。     

Water-soluble lipopolymer as an efficient carrier for gene delivery to myocardium

Water-soluble lipopolymer (WSLP), which consisted of polyethylenimine (PEI, 1800 Da) and cholesterol, was characterized as a gene carrier to smooth muscle cells and myocardium. Acid-base titration showed that WSLP had a proton-buffering effect. The size of WSLP/plasmid DNA (pDNA) complex was around 70 nm. WSLP/pDNA complex was transfected to A7R5 cells, a smooth muscle cell line. WSLP showed the highest transfection at a 40/1 N/P ratio. WSLP has higher transfection efficiency than PEI (1800 and 25 000 Da), SuperFect, and lipofectamine. In addition, WSLP has less cytotoxicity than PEI (25 000 Da), SuperFect, and lipofectamine. Since WSLP has cholesterol moiety, it may utilize cellular cholesterol uptake pathway, in which low-density lipoprotein (LDL) is involved. An inhibition study with free cholesterol or low-density lipoprotein (LDL) showed that transfection was inhibited by cholesterol or LDL, suggesting that WSLP/pDNA complex is transfected to the cells through the cholesterol uptake pathway. To evaluate the transfection efficiency to myocardium, WSLP/pDNA complex was injected into the rabbit myocardium. WSLP showed higher transfection than PEI and naked pDNA. WSLP expressed the transgene for more than 2 weeks. In conclusion, WSLP is an efficient carrier for local gene transfection to myocardium, and useful in in vivo gene therapy.     

Development of lysine-histidine dendron modified chitosan for improving transfection efficiency in HEK293 cells

Chitosan has potential as a biocompatible gene carrier. However, its gene transfection efficiency is low because of its slow endosomal escape rate. Histidine has buffering capacity in the pH range of endosomes/lysosomes. The structure of dendron consists of a central core with several chains radiating from it and many histidines could be conjugated on the surface, increasing the efficiency of histidine modification. The purpose of this study is to increase the gene transfection efficiency of chitosan by promoting its endosomal escape property. We developed fourth-generation lysine-histidine (KH) dendrons that can provide 8 histidines in one dendron molecule. Chitosan-dendron (Chi13k-D) was synthesized using 2-iminothiolane to form the linkage; this was confirmed by NMR and the ninhydrin test. The buffering range, as measured by pH titration, was broader in the Chi13k-D group than in chitosan. Enhanced endosomal escape of Chi13k-D/pDNA complexes was confirmed using fluorescence-labeled endosomes and pDNA. The intralysosomal pH of Chi13k-D/pDNA was also higher than that of chitosan/pDNA. The gene transfection efficiency of Chi13k-D/pDNA was higher than that of chitosan/pDNA in HEK293 cells. These results suggest that KH dendron modification could provide high buffering capacity, which would increase the gene transfection efficiency of chitosan.