延迟复苏增加失血性休克犬肺组织含水量和血管通透性

目的:研究延迟补液对失血性休克犬肺组织含水量和血管通透性的影响.方法:Beagle犬14只,先期无菌手术行颈动、静脉置管,24 h后从颈动脉放血造成失血性休克,总失血量为全身血容量的42%.随机分为延迟补液组(n=8)和立即补液组(n=6).失血后第1个24 h延迟补液组无治疗,立即补液组静脉输入3倍失血量的乳酸林格氏液.失血后24 h起两组犬均实施静脉补液.于失血前(0 h)和失血后第2、4、8、24、48 h和72 h测定动物非麻醉状态下的呼吸频率(RR)、动脉氧分压(PaO2)、血管外肺水指数(ELWI)和肺血管通透性指数(PVPI),于失血后72h或动物濒死前测定肺组织含水率.结果:失血后72 h延迟补液组死亡率为5/8(62.5%),而立即补液组为0.失血后8 h,延迟补液组MAP[(55.8±4.1)mmHg]和PaO2[(86.3±2.9)mmHg]分别比失血前降低46.2%和22.4%:ELWI[(168.8±12.1)mL]和PVPI(5.9±0.6)增加31.4%和78.8%.立即补液组MAP和PaO2显著高于延迟补液组;ELWI和PVPI显著低于延迟补液组(均P＜0.05).延迟补液组肺组织含水率[(88.37±2.73)%]显著高于立即补液组[(81.52±2.13)%,P＜0.05].结论:延迟补液显著增加失血休克动物肺血管通透性和肺组织含水量,加重肺脏功能障碍.     

卡巴胆碱对烧伤休克犬口服补液时胃排空和胃黏膜二氧化碳分压的影响

目的 研究卡巴胆碱对烧伤犬休克早期口服补液时胃排空和胃黏膜二氧化碳分压(PgCO2)的影响.方法 将24只成年雄性Beagle犬随机分为4组:35%总体表面积(TBSA)烧伤后口服葡萄糖一电解质液(GES)组及其卡巴胆碱干预组(35%TBSA GES组和35%TBSA GES/CAR组);50%TBSA烧伤后口服GES液组及其卡巴胆碱干预组(50%TBSA GES组和50%TBSA GES/CAR组),每组6只.采用凝固汽油燃烧法分别造成颈背部35%TBSA Ⅲ度烧伤和颈背部+胸腹部50%TBSA Ⅲ度烧伤.各组于烧伤后0.5 h开始按Parkland公式量和速率(4 ml·kg-1·1%TBSA-1,前8 h内补1/e量,后16 h内补另1/2量)口服补液;GES/CAR组于伤后0.5 h口服卡巴胆碱(20 μg/kg溶于GES中).烧伤后2、4、8和24 h测定胃排空率和PgCO2,并观察胃不耐受症状.结果 烧伤后各组犬胃排空率均显著低于伤前(P均＜0.05),伤后2 h 35%TBSA GES组降至51.5%.伤后4 h 50%TBSA GES组降至39.2%,之后逐渐恢复,但伤后24 h仍显著低于伤前(P均＜0.05).35%TBSA GES/CAR组伤后各时间点胃排空率均显著高于同烧伤面积GES组(P均＜0.05),平均提高15.0%,伤后8 h恢复至伤前水平;50%TBSA GES/CAR组于8 h起胃排空率显著高于同烧伤面积GES组,但伤后24 h仍低于伤前水平(P＜0.05).伤后各组犬PgCO2均较伤前显著升高(P均＜0.05),35%TBSA GES/CAR组伤后各时间点显著低于同烧伤面积GES组,50%TBSA GES/CAR组伤后4 h起显著低于同烧伤面积GES组(P均＜0.05).伤后各组犬出现呕吐等胃不耐受症状情况比较:50%TBSA GES组(83.3%,5/6)＞50%TBSA GES/CAR组(50.0%,3/6)＞35% TBSA GES组(16.7%,1/6)＞35%TBSA GES/CAR组(0,0/6).结论 卡巴胆碱能显著改善Beagle犬烧伤休克早期胃对GES的排空,降低PgCO2,提高口服液体复苏的效果.     

卡巴胆碱对烧伤休克犬肠内补液时肠组织缺血／再灌注损伤的影响

目的 探讨卡巴胆碱(CAR)对烧伤休克期肠内补液时肠缺血/再灌注损伤的保护作用.方法 18只成年雄性Beagle犬被随机分为3组,每组6只.采用凝固汽油燃烧法造成50%总体表面积(TBSA)Ⅲ度烧伤模型.伤后无治疗(不补液组)或于伤后30 min开始从十二指肠造口分别输入葡萄糖-电解质溶液(GES组)或含CAR的GES(20 μg/kg CAR溶于GES,GES/CAR组),伤后8 h内输液量依据Parkland公式计算.检测伤前和伤后1、2、4、6、8 h小肠黏膜血流量(IMBF)及血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.伤后8 h处死动物,取空肠组织用干湿重法测定小肠组织含水量;并测定一氧化氮合酶 (NOS)、丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)、黄嘌呤氧化酶(XOD)水平.结果 各组伤后IMBF均显著降低,TNF-α显著升高;伤后4 h起GES组IMBF显著高于不补液组,6 h后显著低于GES/CAR组(P均<0.01);不补液组与GES组TNF-α含量差异无统计学意义,但伤后2 h和4 h均显著高于GES/CAR组(P均<0.01).伤后8 h GES组NOS、MDA、MPO和XOD均显著高于不补液组,而GES/CAR组分别比GES组低26.0%、17.1%、50.0%和19.2%,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).GES/CAR组肠组织含水量也显著低于GES组(P<0.01).结论 CAR能有效减轻烧伤犬肠内补液时肠组织缺血/再灌注损伤,机制可能与增加肠黏膜血流,抗炎和抑制XOD活性,减少炎症因子和氧自由基生成有关.     

卡巴胆碱对烧伤犬肠内补液时肠黏膜血流量和吸收效率的影响

目的 研究卡巴胆碱对50%总体表面积(TBSA)Ⅲ度烧伤休克Beagle犬肠内补液时肠黏膜血流量和吸收效率的影响.方法 成年雄性Beagle犬18只,采用凝固汽油燃烧法造成约(51.2±2.6)%TBSAⅢ度烧伤,伤后0.5 h开始按Parkland公式量和速率补液.随机将动物均分为静脉输葡萄糖一电解质液(GES)组(VGES)、肠内输GES组(EGES)和肠内输GES/卡巴胆碱组(EGES/CAR,含0.25 μg/kg卡巴胆碱的GES).在动物清醒状态下观察两个肠内补液组伤后8 h内小肠黏膜血流量(IBF)、水和Na+的吸收速率,以及3组动物血浆Na+浓度、血浆容量(PV)和伤后8 h小肠组织Na+-K+-ATP酶活性的变化.结果 伤后两个肠内补液组水和Na+的吸收速率均较伤前显著降低(P均＜0.05),EGES/CAR组自伤后1.5 h和2.5 h起显著高于EGES组(P均＜0.05),但8 h两组均低于伤前和按Parkland公式补液速率(P＜0.05).EGES组对肠内补液不耐受(腹泻)发生率为83%,显著高于EGES/CAR组的50%.伤后8 h EGES/CAR和EGES组输入肠内的液体仅有47.1%和63.8%被吸收;EGES/CAR组吸收液体总量和吸收率显著多于EGES组.伤后各组IBF均较伤前显著降低;伤后8 h已恢复到伤前水平(P＞0.05);EGES/CAR组IBF伤后2 h起高于EGES组(P＜0.05),但两个肠内补液组伤后8 h仍显著低于伤前和VGES组水平(P均＜0.05).3组伤后8 h小肠黏膜Na+-K+-ATP酶活性比较:VGES组＞EGES/CAR组＞EGES组(P＜0.05).两个肠内补液组伤后8 h内的血浆Na+浓度和PV均显著低于VGES组(P均＜0.05),但伤后4 h起EGES/CAR组显著高于EGES组(P均＜0.05).结论 50%TBSAⅢ度烧伤早期IBF和Na+-K+-ATP酶活性显著降低,肠内补液的吸收效率显著低于按Parkland公式输入速率,不能维持静脉补液的血浆Na+浓度和PV;而卡巴胆碱能增加IBF和Na+-K+-ATP酶活性,提高肠内补液的吸收速率、PV和血浆Na+浓度,改善口服补液的疗效.     

卡巴胆碱对大鼠烫伤休克期肠内补液时肠道的影响

目的 研究拟胆碱药卡巴胆碱对大鼠烫伤休克期肠内补液时肠道局部炎症反应和肠组织损伤的影响,为烧伤休克胃肠道补液研究提供依据.方法 38只雄性Wistar大鼠,采用沸水法(100℃,10 s)造成背部35%TBSAⅢ度烫伤.随机分为不复苏组(单烫组,n=8)、葡萄糖-电解质溶液(glucose electrolyte solution)复苏组(GES组,n=10)、卡巴胆碱治疗组(CAR组,n=10)和GES+卡巴胆碱复苏组(GES/CAR组,n=10).两液体复苏组大鼠在烫伤后30 min将GES经十二指肠造口匀速泵入,按Parkland公式设定补液速率,即烫伤后第一个24 h补液总量4 ml·1%TBSA-1·kg-1,前8 h匀速补一半.CAR组和GES/CAR组大鼠在伤后30 min将CAR以60μg·kg-1溶于0.5 ml生理盐水中一次注入十二指肠.所有大鼠在烫伤后4 h处死,取空肠组织测定一氧化氮合酶(N0s)、一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量和髓过氧化物酶(MPO)活性,同时测定血浆二胺氧化酶(DAO)活性,采用组间方差分析统计比较各组上述指标的差别.结果 GES组的肠组织NOS、NO、TNF-α、MPO和血浆DAO水平与单烫组差异无统计学意义;GES/CAR组各指标较GES组均明显降低[NOS(1.276±0.39I vs.(1.818±0.436),P＜0.01;NO(0.925±0.402)vs.(1.561±0.379),P＜0.01;TNF-α(0.87±0.13)vs.(1.94±0.47),P＜0.01;MPO(0.465±0.092)vs.(0.832±0.214),P＜0.01;DAO(0.732±0.192)vs.(1.381±0.564),P＜0.01],CAR组各指标也较单烫组和GES组明显降低(P＜0.05或P＜0.01).结论 卡巴胆碱能减轻烫伤休克大鼠肠内液体复苏时的肠道局部炎症反应和组织损伤,其作用机制可能与其兴奋胆碱能神经N受体,抑制促炎因子释放的作用有关.     

卡巴胆碱对烧伤休克口服补液时肠屏障功能的影响

目的 研究拟胆碱药卡巴胆碱对犬烧伤休克口服补液时肠屏障功能的影响.方法成年雄性Beagle犬20只,采用凝固汽油燃烧法造成35% TBSA Ⅲ度烧伤,烧伤后随机分为延迟复苏(DR)组、口服葡萄糖-电解质溶液(GES)组、口服卡巴胆碱(CAL)组、口服葡萄糖-电解质溶液 卡巴胆碱(GES CAL)组.GES按Parkland公式(4 mL?kg-1?1% TBSA-1)经胃管输注,卡巴胆碱20 μg/kg溶于10 mL生理盐水中,分别于伤后30 min和4 h经胃管注入.烧伤24 h后各组均给予静脉输注5%葡萄糖生理盐水液进行延迟复苏.测定各组动物伤前及伤后2、4、8、24、48、72 h血浆二胺氧化酶(DAO)活性、D-乳酸(D-LA)含量和D-木糖(D-XY)含量.结果烧伤后DR组血浆DAO、D-LA和D-XY显著高于另外三组(P＜0.01,P＜0.05).各治疗组间比较,GES CAL组血浆DAO伤后2 h和4 h显著低于GES组和CAL组(P＜0.05),GES CAL组D-XY伤后8 h和24 h显著低于GES组和CAL组(P＜0.05).结论卡巴胆碱对犬烧伤休克口服补液时肠屏障功能有保护作用.     

口服补液对犬50%TBSA烧伤休克期循环氧动力学指标的影响

目的 研究口服补液对50%TBSA烧伤休克期循环氧动力学指标的影响,为提高烧伤休克口服补液的复苏效果提供依据.方法 成年雄性Beagle犬18只,先期无菌手术行颈动、静脉置管,24 h后用凝固汽油燃烧法造成50%体表面积Ⅲ度烧伤.随机分为不补液组(n=6)、口服补液组(n=6)和静脉补液组(n=6).伤后第一个24 h不补液组无治疗,口服补液组和静脉补液组根据Parkland公式分别从胃内或静脉输注葡萄糖-电解质溶液;伤后24 h起三组均实施延迟静脉补液.测定动物非麻醉状态下的平均动脉压(MAP)、红细胞压积(HCT)和血乳酸(LAC)含量,抽取动脉和混合静脉血测定动、静脉氧分压和血氧含量.计算氧供量(DO2)、氧耗量(VO2)和氧摄取(Oext),并统计3 d死亡率.结果 不补液组伤后8 h MAP比伤前降低77.1%,HCT和血乳酸分别升高48.5%和533.7%;DO2,VO2和Oext水平伤后进行性降低,24 h内动物全部死亡.两补液组上述指标逐渐恢复,伤后72 hMAP和HCT恢复至伤前(P＞0.05),但血乳酸水平仍显著高于伤前(P＜0.01).伤后24 h内同期比较,口服补液组MAP,DO2,VO2和Oext水平显著高于不补液组(P＜0.01),但低于静脉补液组;血乳酸低于不补液组,但高于静脉补液组(P＜0.01).伤后24 h起Do2与静脉补液组差异无统计学意义(P＞0.05),但VO2和Oext仍显著低于静脉补液组(P＜0.01).72 h死亡率:不补液组100%、口服补液组50%(3/6),而静脉补液组为零.结论 50%TBSA烧伤休克期采用口服补液能显著改善动物循环氧动力学指标,减轻高乳酸血症,降低动物的病死率.     

肺血管通透性指数用于急性呼吸窘迫综合征患者的预后评估

目的探讨使用脉搏指数持续心输出量监测(PiCCO)技术测得的血管外肺水指数(EVLWI)、肺血管通透性指数(PVPI)对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者的预后进行评估。方法回顾性分析50例行PiCCO监测的明确诊断为ARDS患者的临床资料,根据预后分为死亡组与存活组,分别记录患者一般情况,0 h、24 h、72 h的血流动力学参数,比较EVLWI和PVPI在各时间点的差异,与氧合指数的关系。结果存活组APACHEⅡ评分、血乳酸水平均低于死亡组(P<0.05),存活组的氧合指数高于死亡组;分层分析提示当EVLWI≥12 ml/kg时EVLWI与PaO2/FiO2呈明显负相关,当PVPI≥5时PVPI与PaO2/FiO2呈明显负相关;死亡组患者在起病后0 h、24 h、72 h的PVPI均较存活组明显增高。结论 PVPI可以作为急性呼吸窘迫综合征患者严重程度的评估指标之一,EVLW和PVPI指导下的液体限制治疗可能是ARDS的有效治疗手段。     

三七皂甙对烧伤延迟复苏大鼠肺血管通透性的调控

目的:观察三七皂甙对烧伤延迟复苏大鼠的肺血管通透性的影响及对肿瘤坏死因子α、白细胞介素10、髓过氧化物酶、内皮素1及其反馈调节的一氧化氮的调控。方法:实验于2003-07/2005-05在长海医院烧伤中心实验室完成。选用36只健康成年SD大鼠制备烧伤和烧伤休克延迟复苏模型,雌雄不限,体质量200～220g。随机数字表法分为假烫组、烫伤组、治疗组,每组12只。烫伤组以100℃水烫背部13s,造成大鼠30%体表总面积Ⅲ度烧伤(病理证实)。假烫组以38℃水模拟烫伤过程;治疗组伤后半小时腹腔注射三七皂甙(100mg/kg);烫伤及治疗组均于伤后6h腹腔注射乳酸林格液进行延迟复苏,总量按Parkland公式计算。伤后24h检测肺脏含水量、血管通透性及髓过氧化物酶活性的变化,血浆中肿瘤坏死因子α、白细胞介素10、内皮素1及一氧化氮的浓度水平。结果:36只大鼠均进入结果分析。①烫伤后24h,烫伤组的肺组织含水量显著高于假烫组和治疗组[(82.04±2.05)%,(76.85±2.18)%,(79.91±1.76)%,P<0.01,P<0.05]。②烫伤组的肺血管通透性、肿瘤坏死因子α和白细胞介素10的水平均显著高于假烫组与治疗组[(457.86±43.33),(49.46±10.16),(313.05±19.30)mg/L;(612.30±75.03),(32.68±9.33),(298.91±19.40)μg/L;(221.39±33.14),(6.99±1.84),(103.14±26.17)mg/L,P均<0.01],治疗组的各项指标显著高于假烫组(P<0.01)。③烫伤组的髓过氧化物酶活性显著高于假烫组和治疗组[(578.27±56.43),(106.80±9.94),(312.03±31.41)U/g,P<0.01]。④烫伤组的内皮素1高于假烫组及治疗组[(295.25±44.25),(60.08±11.65),(157.53±26.78)μg/L;P<0.01];治疗组的一氧化氮浓度高于假烫组与烫伤组[(4.25±0.59),(2.24±0.64),(3.18±0.72)mg/L,P<0.05,P<0.01],烫伤组内皮素1/一氧化氮浓度高于假烫组及治疗组[(96.85±24.20)×10-6,(27.67±4.86)×10-6,(38.15±10.62)×10-6,P<0.01]。结论:大鼠烧伤后,早期使用三七皂甙,可调控烫伤大鼠分泌肿瘤坏死因子α、白细胞介素10、内皮素1及一氧化氮和髓过氧化物酶活性,减轻肺组织的水肿,从而减轻烧伤早期脏器损害。     

血管外肺水指数和肺毛细血管渗透性指数在肺水肿诊断中的意义

目的 探讨血管外肺水指数(EVLWI)、肺毛细血管渗透性指数(PVPI)在诊断及动态监测肺水肿时的临床价值.方法 选择40例行脉搏轮廓曲线连续心排血量(PiCCO)监测的肺水肿患者,根据入院时的病史、症状、体征、辅助检查及血流动力学变化将患者分为急性心源性肺水肿(ACPE)组(15例)和急性呼吸窘迫综合征(ARDS)组(25例).记录入院时各指标并行相关性分析,再于置入气管插管0、24和72 h 时记录存活与死亡患者EVLWI、胸内血容量指数(ITBVI),并计算PVPI值.结果 ①置管0 h 时ARDS组PVPI显著高于ACPE组(P＜0.01).②相关性分析显示:ACPE组PVPI与氧合指数(PaO2/FiO2)、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、EVLWI、ITBVI、中心静脉压(CVP)均无显著相关性(P均＞0.05);EVLWI与PaO2/FiO2(r=-0.672,P＜0.01)、APACHEⅡ评分(r=0.412,P＜0.05)、ITBVI(r=0.636,P＜0.05)有一定相关性.ARDS组PVPI与EVLWI(r=0.904 P＜0.01)、PaO2/FiO2(r=-0.554,P＜0.01)、APACHEⅡ评分(r=0.390,P＜0.05)均显著相关;EVLWI与PaO2/FiO2(r=-0.602,P＜0.01)、APACHEⅡ评分(r=0.457,P＜0.05)、PVPI(r=0.904,P＜0.01)具有一定相关性.③绘制PVPI受试者工作特征曲线(ROC曲线),曲线下面积(AUC)为0.956±0.019(P＜0.01);选取PVPI的截断点为2.23时,其敏感性为92.0%,特异性为93.3%.④根据预后,将患者分为存活组及死亡组,ACPE和ARDS存活组的EVLWI均逐渐下降(P＜0.05和P＜0.01);ACPE死亡组PVPI有增高趋势(P＜0.01).结论 将EVLWI、PVPI(截断点2.23)用于鉴别静水压性和通透性肺水肿,以及评估病情严重程度和预后有一定的临床意义.     

Criteria for the safety of transfusion of colloidal solutions in patients with acute lung lesions

The prospective study explored the hemodynamic effects of colloidal solution replacement therapy and the criteria for its safety in patients with acute lung parenchymatous lesions (ALPL) attended by hypoalbuminemia and coagulopathy. There were 68 observations of the effects of colloidal solutions: 20% albumin solution (n=25), freshly frozen plasma (FFP) (n=20), 6% hydroxyethylated starch (HES) 130/0.4 9:1 (n=23). The colloidal solutions were infused at a constant rate; the infusion was stopped until pulmonary wedge pressure (PWP) was 25% greater than its baseline value. Before and after infusion, the parameters of central hemodynamics and oxygen transport, extravascular lung water index (ELWI), pulmonary vascular permeability index (PVPI), and colloid-osmotic pressure (COP) were measured. The infusion volumes were 3.8 +/- 0.4, 13.7 +/- 1.4, and 13.4 +/- 1.3 ml/kg for 20% albumin solution, 6% HES 130/0.4, and FFP, respectively. The PWP-COP gradient increased in all groups. After FFP infusion, there was an increase in ELWI and lung shunt. After 20% albumin solution, there was a delayed increase in ELWI. There was no rise in ELWI after 6% HES administration. In the 20% albumin solution group, the increased ELWI was recorded in patients who had positive baseline PWP-COP gradients (p < 0.05). A combination of higher PVPI and a positive PWP-COP value causes a greater increase in ELWI after 20% albumin solution infusion than in the normal PVPI group. In patients with ALPL, FFP infusion may lead to an increase in the accumulation of extravascular lung water. A negative preinfusion PWP-COP gradient is a safety criterion for the infusion of 20% albumin solution in patients with ALPL. The increased PVPI in combination with a positive PWP-COP gradient is an aggravating factor.     

脓毒性休克早期液体复苏对血管外肺水的影响及相关因素研究

目的探讨脓毒性休克早期液体复苏对血管外肺水（EVLW）的影响及相关因素研究。方法选择20例脓毒性休克早期存在血容量不足[即胸内血容量指数（ITBVI）〈750ml／m^2]的患者，给予血定安快速液体复苏至ITBVI〉850ml／m^2为复苏终点，采用单指示剂热稀释法测定的血管外肺水指数（EVLWI），根据入选时EVLWI监测值将患者分为EVLWI≤7ml／kg（n=8）及EVLWI〉7ml／kg（n=12）两组，监测液体复苏前（Tb）及复苏结束后即刻（T0）、1h（T1）、2h（T2）、4h（T4）血流动力学、EVLWI、氧合指数（PaO2／FiO2）等指标的变化。结果①两组患者在达到液体复苏终点后T0、T1、T2时ITBVI、全心舒张末期容积指数（GEDVI）、心排血指数（CI）、每搏指数（SI）、中心静脉压（CVP）均明显增高（P〈0.05或P〈0.01），但T4与Tb相比差异均无显著性（P均〉0．05）；两组同时间点ITBVI、GEDVI、CI、SI、CVP比较差异均无显著性（P均〉0．05）。②与Tb相比，两组在T0、T1、T2、T4时EVLWI、PaO2／FiO2均无明显改变（P均〉0．05），但EVLWI〉7ml／kg组在各相同时间点PaO2／FiO2均显著低于EVLWI≤7ml／kg组（P均〈0．05）；③在早期复苏过程中EVLWI与ITBVI、GEDVI、CI、SI、CVP均无明显相关性（P均〉0．05），与PaO2／FiO2具有负相关性（r=-0．765，P〈0．01），与肺毛细血管渗透性指数（PVPI）呈正相关（r=0．678，P〈0．01）；④20例患者中28d内死亡6例（占30％），死亡患者复苏前后EVLWI均显著高于存活患者（P均〈0．05），但复苏前后EVLWI变化值（△EVLWI）比较差异无显著性（P〉0．05）。结论脓毒性休克早期进行液体复苏可使ITBVI、GEDVI、CI、SI、CVP增加，但不影响EVLW及氧合。EVLWI的升高可能与PVPI增加有关，与PaO2／FiO2呈负相关，并与患者预后密切相关。     

脾脏调节性树突细胞对烫伤小鼠炎症反应及预后的影响

目的 观察调节性树突细胞(DCregs)对烫伤所致全身炎症反应及动物早期死亡率的影响.方法 采用MiniMACS免疫磁性分离系统从100只正常BALB/c小鼠脾脏分离纯化DCregs,以获得其亚群CDllclowCD45RBhigh DCs.制备15%总体表面积Ⅲ度烫伤小鼠模型.取20只小鼠,烫伤即刻腹腔注射不同剂量DCregs(1×105/ml、5×10/ml、10×105/ml),观察动物48 h死亡率,以确定最佳DCregs干预剂量.另取70只小鼠,按随机数字表法分为正常对照组(7只)、假烫伤组(21只)、烫伤组(21只)和DCregs治疗组(21只).烫伤组伤后即刻腹腔注射林格液1 ml抗休克治疗;DCregs治疗组则给予含10×105/ml CD11clowCD45RBhighDCs的林格液1 ml治疗.分别于烫伤后12、24、48 h无菌取血,采用流式细胞术检测树突细胞的表型表达及血浆炎症因子水平.结果 10×105/ml DCregs治疗组小鼠死亡率较烫伤组及1×105/ml、5×105/ml DCregs治疗组均显著下降(0%比80%、80%、60%,均P＜0.01).10×105/ml DCregs治疗组小鼠伤后12、24、48 h血浆白细胞介素-6(IL-6)水平(ng/L:98.76±10.02、57.835±6.83、13.29±1.07)显著低于烫伤组(156.32±12.85、84.50±9.29、23.04±2.53,均P＜0.01),血浆巨噬细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平(ng/L:102.79±9.88、42.56±5.90、12.96±1.34)显著低于烫伤组(168.23±23.85、83.39±8.41、42.92±4.96,均P＜0.01),血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平(ng/L:16.84±1.92、16.62±1.28、10.26±1.10)亦显著低于烫伤组(24.16±4.93、24.25±4.01、17.91±1.82,均P＜0.01).结论 严重烫伤后腹腔注射脾脏DCregs可能通过有效控制促炎因子的产生而明显降低动物早期死亡率.

Abstract：

Objective To observe the effect of regulatory dendritic cells (DCregs) on burn injury induced proinflammatory cytokine production and mortality rate after a single intraperitoneal injection of CD11clowCD45RBhigh DCs to injured mice. Methods DCregs were isolated and purified from spleen of 100 normal BALB/c mice to procure CD11clowCD45RBhigh DCs by MiniMACS. Mice were subjected to a 15% total body surface area (TBSA) burn injury on the back. Twenty mice were used, and splenic DCregs (1×105/ml, 5×105/ml, 10×105/ml) were given to them to investigate the protective effect of DCregs against lethality at postburn hours (PBH) 48, and to decide the optimal dosage of intervention. Another group of 70 mice were used, and they were divided into normal control group (n=7), sham burn injury group (n= 21), burn injury group (n = 21), and DCregs treatment group (n = 21). The mice in burn injury group received intraperitoncally 1 ml of Ringer solution for resuscitation. 10×105/ml of CD11clowCD45RBhigh DCs were added to lactated Ringer solution for intraperitoneal injection in DCregs treatment group. Seven animals of each group were sacrificed at PBH 12, 24 and 48, respectively, and blood samples were collected aseptically for measurement of cytokine levels in plasma and phenotype expressions on DCs by flow cytometry. Results Treatment with 10×105/ml DCregs showed a significant decrease in mortality rate compared with burn injured mice and burn injured mice given lower doses of DCregs (1×105/ml, 5×105/ml DCregs, 0% vs. 80%, 80% and 60%, all P＜0. 01). A single intraperitoneal injection of 10×105/ml DCregs to burn injury mice showed a significant decrease in plasma interleukin-6 (IL-6, ng/L: 98. 76 ±10.02, 57. 83 ±6. 83, 13.29 ±1.07) compared with burn injury mice (156.32 ± 12. 85, 84. 50 ±9. 29,23.04±2. 53) at PBH 12, 24 and 48 (all P＜0. 01). Similarly, in 10×105/ml DCregs treatment group,plasma macrophage chemoattractant protein-1 (MCP-1) levels (ng/L: 102.79 ±9. 88, 42. 56 ±5. 90,12. 96±1. 34) were markedly lower than those in burn injury group (168. 23±23. 85, 83. 39±8. 41, 42. 92±4. 96) at PBH 12, 24 and 48 (all P＜0. 01). A single intraperitoneal injection of 10×105/ml DCregs to burn injury mice showed significant reduction in plasma tumor necrosis factor-α (TNF-α) levels (ng/L: 16. 84±1.92, 16. 62±1.28, 10. 26±1. 10) compared with burn injury mice (24. 16±4. 93, 24.25±4. 01, 17. 91±1.82) at PBH 12, 24 and 48 (all P＜0. 01). Conclusion DCregs may effectively improve the outcome of mice with severe burn injury through a single intraperitoneal injection of DCregs accompanied by lowering excessive inflammatory reaction.     

大剂量盐酸氨溴索对肺外型急性呼吸窘迫综合征患者血管外肺水及氧合功能的影响

目的 研究大剂量盐酸氨溴索对肺外型急性呼吸窘迫综合征（ARDS）患者血管外肺水（ELWI）及氧合功能的影响.方法 将68例符合ARDS诊断标准的患者分为治疗组（35例）与对照组（33例）.治疗组予以盐酸氨溴索1005 mg/d静脉注入,3h完成,对照组予以等容量的生理盐水静脉滴注3h,连续治疗7d.比较两组患者治疗前、治疗后3、5、7d动脉氧分压和氧饱和度（SaO2）,氧合指数、心脏指数（CI）、血管外肺水指数（ELWI）和血管通透性指数（PVPI）的变化以及机械通气时间、停留ICU时间、住院时间.结果 两组患者治疗后动脉氧分压、SaO2以及氧合指数均有不同程度的升高,ELWI、PVPI均有下降,且治疗组在治疗后5、7d较对照组改善更为明显（P均＜0.05）.此外,治疗组患者机械通气时间、停留ICU时间以及住院时间均比对照组显著降低（P均＜0.05）.结论 大剂量盐酸氨溴索可以降低ARDS患者肺血管通透性及血管外肺水,改善氧合功能,降低机械通气时间和住院时间.     

异丙酚对失血性休克复苏大鼠应激激素和免疫平衡的影响

目的 观察异丙酚对失血性休克复苏后大鼠应激激素、细胞因子的影响及对重要脏器的保护作用.方法 雄性Wistar大鼠66只被随机分为对照组、失血性休克复苏组和异丙酚治疗组.制备失血性休克复苏动物模型后,异丙酚组经股静脉输注异丙酚10 mg-1·kg-1.h-1,休克复苏组输注等量生理盐水.休克复苏组和异丙酚组分别于术后30、60、120、180和240 min取6只大鼠,采集腹主动脉血及肺和小肠组织标本,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆皮质醇、γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)水平,光镜下观察肺和小肠组织病理学改变,并行组织病理学评分.结果 与对照组比较,休克复苏组大鼠血浆皮质醇水平明显降低(P均<0.01);IFN-γ和IL-4呈进行性升高,IFN-γ/IL-4比值随病程进展逐渐下降(P均<0.01);肺和小肠组织损伤明显,病理学评分显著增加[肺:(3.09±0.56)分比(0.31±0.25)分,小肠:(7.6l±1.20)分比(0.86±0.72)分,P均<0.013).异丙酚组低皮质醇血症程度降轻,IFN-7和IL-4升高程度降低,IFN-γ/IL-4比值下降趋于减缓(P<0.05或P<0.01);肺和小肠组织损伤明显减轻,病理学评分显著降低[肺:(1.27±0.40)分,小肠:(3.69±1.28)分,P均<0.013.结论 异丙酚可减轻失血性休克复苏大鼠的低皮质醇血症,调节炎症反应,保护重要脏器.