MMP-1，MMP-9，TIMP-1在盆腔器官脱垂患者阴道壁组织中的表达及意义

目的 探讨盆腔器官脱垂（POP）患者阴道壁组织中基质金属蛋白酶-1（MMP-1）及基质金属蛋白酶-9（ MMP-9）和组织金属蛋白酶抑制物-1（TIMP-1）的表达,分析其与POP发生的关系.方法 随机选取25例在我院治疗的有完整随访资料的女性POP患者为POP组,选取同期30例非POP患者为对照组.于术中取患者阴道壁组织,采用免疫组化的方法观察MMP-1及MMP-9和TIMP-1的表达.结果 POP组MMP-1及MMP-9的表达较对照组升高,差异有统计学意义（P＜0.05）;TIMP-1的表达低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 POP患者盆底支持结构的改变与阴道壁组织中的胶原代谢有关,联合检测MMP-1及MMP-9和TIMP-1对POP的诊断和治疗具有重要的临床意义.     

骨巨细胞瘤中MMP-9和TIMP-3的表达及临床意义

【目的】研究骨巨细胞瘤组织中基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）及其特异性抑制剂金属蛋白酶组织抑制因子-3（tissue inhibitor of metalloproteinase-3,TIMP-3）的表达及临床意义。【方法】用免疫组化SP法检测45例骨巨细胞瘤组织中MMP-9、TIMP-3的表达情况,以CD31标记检测微血管密度（micro vessel density,MVD）。【结果】骨巨细胞瘤组织中MMP-9、TIMP-3阳性率分别为100%和91%,MMP-9表达与MVD水平存在正相关性（χ^2=14.812,P=0.001）,而且两者在复发组均显著高于非复发组（χ^2=18.250,P=0.000;t=-8.14,P=0.000）,但TIMP-3在两组的表达在统计学上无明显差异,此外MMP-9、TIMP-3及MVD与组织学分级无关。【结论】MMP-9、TIMP-3表达的不平衡可能会加速肿瘤血管形成并影响骨巨细胞瘤的复发。     

动脉粥样硬化患者血液中基质金属蛋白酶-9及其抑制物-1的基因表达

目的通过检测动脉粥样硬化（AS）患者血液中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）与基质金属蛋白酶抑制物-1（TIMP-1）的基因表达水平,探讨AS发生的分子机制及预测因子。方法 AS患者120例为动脉硬化组,72例正常体检者为对照组。用实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测其血液中MMP-9和TIMP-1 mRNA表达水平。结果 MMP-9和TIMP-1的RT-PCR产物序列与GenBank上人MMP-9 mRNA和TIMP-1基因片段完全一致。动脉硬化组的MMP-9基因表达水平高于对照组MMP-9基因表达水平,但差异无统计学意义（P〉0.05）。动脉硬化组的TIMP-1基因表达水平低于对照组TIMP-1基因表达水平,差异有统计学意义（P〈0.05）。MMP-9/TIMP-1基因表达定量比值,动脉硬化组高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 AS患者TIMP-1基因表达水平的降低与MMP-9/TIMP-1基因表达定量比值升高可能是AS发生的分子机制之一,二者一起可以作为AS发生的预测因子。     

Oncol2012: 甲状腺癌和血液中MMP-2，MMP-9，TIMP-1和TIMP-2水平之间的相关性

目的：探讨外周血基质金属蛋白酶-2（MMP-2）,基质金属蛋白酶9（MMP-9）,基质金属蛋白酶组织抑制因子-2（TIMP-2）抑制剂,基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）抑制剂的表达水平和甲状腺癌的相关性。方法：使用RT-PCR与ELISA法检测30例甲状腺癌患者,27例甲状腺良性疾病患者,25例健康志愿者外周血中的MMP-2,MMP-9,TIMP-2,TIMP-1 的表达水平。结果：MMP-2,MMP-9,TIMP-2,TIMP-1在甲状腺癌患者外周血中的表达水平均显着高于良性甲状腺疾病患者和健康志愿者（P <0.05）。然而,良性甲状腺疾病患者和健康志愿者之间无显着差异（P> 0.05）。两种检测方法对于甲状腺癌的准确率为83.33%。结论：测定外周血中的MMP-2,MMP-9,TIMP-2和TIMP-1表达水平对甲状腺癌的确诊是有帮助的,尤其对于术前的评估更加重要。     

内皮抑素抑制黑色素瘤浸润转移的实验研究

【目的】研究内皮抑素对小鼠B16黑色素瘤中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及组织基质金属蛋白酶抑制剂-2（TMP-2）表达的影响,并阐述相关分子机制。【方法】建立小鼠B16黑色素瘤动物模型,分为内皮抑素实验组和空白对照组,构建组织芯片,应用免疫组化方法检测两组肿瘤组织MMP-9、MMP-2及TIMP-2的表达。【结果】MMP-2、MMP-9和TIMP-2在实验组与对照组间的表达差异均具有统计学意义（t=15．002,t=9．852,t=12．893,P〈0．05）。【结论】内皮抑素影响黑色素瘤组织表达MMP-2和MMP-9,抑制肿瘤生长和局部浸润转移。     

Exendin-4对2型糖尿病大鼠肾组织MMP-9与TIMP-1表达的影响

目的：观察Exendin-4对2型糖尿病大鼠肾组织基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制物-1（TIMP-1）表达的影响.方法：采用高糖高脂饮食结合小剂量链脲佐菌素（STZ）腹腔注射的方法,建立2型糖尿病大鼠模型.将成模大鼠随机分为糖尿病组,exendin-4低、中、高剂量组,并设立正常对照组.给药6wk后,采用免疫组化方法检测各组大鼠肾组织中MMP-9,TIMP-1的蛋白表达.结果：糖尿病组MMP-9,TIMP-1的表达较正常对照组明显增强（P〈0.01）;exendin-4各组较糖尿病组MMP-9,TIMP-1表达减弱（P均〈0.01）.结论：Exendin-4对2型糖尿病大鼠有一定的肾脏保护作用,其机制可能部分是通过下调2型糖尿病大鼠肾组织MMP-9和TIMP-1的表达来实现的.     

白藜三醇对房颤所致猪心房组织中MMP-1、MMP-9、TIMP-1表达的影响

目的 研究白藜三醇对心房纤颤（简称房颤）猪心房组织基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）蛋白表达的影响,探讨白藜三醇抗心肌纤维化作用及可能机制.方法 18只小家猪通过起搏器植入法建立猪房颤模型,随机分为3组（每组6只）：对照组、房颤组、白藜三醇干预组（2.5 mg·kg^-1·d^-1）.苏木精-伊红染色、Masson染色法观察心房组织形态学和间质纤维化,Western blotting法检测心房组织中MMP-1、MMP-9、TIMP-1蛋白表达水平.结果 与对照组相比,房颤组MMP-1、MMP-9显著增加（P＜0.05）,而TIMP-1则显著降低（P＜0.05）;与房颤组相比,白藜三醇干预组MMP-1、MMP-9显著降低（P＜0.05）,而TIMP-1则显著增加（P＜0.05）.结论 白藜三醇可能通过调节心肌组织中MMP-1、MMP-9、TIMP-1的表达而发挥抗心肌纤维化的作用.     

2型糖尿病大鼠心脏MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的变化与糖尿病心肌病变关系

目的探讨2型糖尿病(T2DM)大鼠心脏基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)、基质金属蛋白酶组织抑制物2(TIMP-2)的变化及其在糖尿病心肌病变(Diabetic Cardiomyopathy,DC)发病中的意义。方法高脂食物喂养、小剂量链脲菌素诱导2型糖尿病大鼠模型。正糖高胰岛素嵌铗技术(EICT)检测两组大鼠胰岛素抵抗情况,葡萄糖输注速率(GIR)表示胰岛素抵抗;测定大鼠体重(BW)、心脏重量(HW)和计算HW/BW;RT-PCR测定两组大鼠MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的mRNA水平,免疫组化法检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2和Ⅰ、Ⅲ胶原蛋白水平。结果糖尿病大鼠GIR明显低于正常对照组(P0.01)。糖尿病大鼠心脏:HW和HW/BW明显高于正常对照组(P0.05),Ⅰ、Ⅲ型胶原明显增多(P0.01),MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的mRNA表达增加(P0.01),MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的蛋白含量增加(MMP-2、TIMP-1:P0.05;TIMP-2:P0.01);MMP-2、MMP-9与TIMP-1蛋白水平比值及MMP-2与TIMP-2蛋白水平比值均显著降低。结论 T2DM大鼠心脏MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2增加,MMPs/TIMPs比值降低,心脏Ⅰ、Ⅲ型胶原明显增多;心脏MMPs/TIMPs表达改变与心脏间质纤维化有关。     

基质金属蛋白酶-9和基质金属蛋白酶组织抑制物-3在反复体外受精-胚胎移植助孕失败患者子宫内膜中的表达

目的：检测基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）和基质金属蛋白酶组织抑制物-3（tissue inhibitor of metalloproteinase-3,TIMP-3）在反复体外受精-胚胎移植（in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET）助孕失败患者子宫内膜中的表达,并探讨MMP-9、TIMP-3与胚胎着床的关系及可能机制。方法：应用免疫组织化学SP法,检测40例反复IVF-ET助孕（≥3次）失败者（实验组）及40例经1次IVF-ET助孕即妊娠者（对照组）的黄体中期内膜MMP-9和TIMP-3表达。结果：MMP-9在实验组的表达明显低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;而TIMP-3在两组间表达的差异不具有统计学意义（P >0.05）。结论：MMP-9在黄体中期子宫内膜的表达降低可能会通过影响胚胎着床而导致反复IVF-ET助孕失败的发生。     

MMP-7、MMP-9及其抑制剂TIMP-3在骨性关节炎患者膝关节滑膜中的表达和意义

目的 探讨基质金属蛋白酶(MMP-7、MMP-9)及金属蛋白酶组织抑制物(TIMP-3)在骨性关节炎患者膝关节滑膜中的表达和意义.方法 对40例膝关节滑膜标本应用SABC免疫组化法显色MMP-7、MMP-9及TIMP-3在病变组和正常组的表达,并用HE染色观察细胞形态.结果 MMP-7、MMP-9及TIMP-3的表达在正常关节滑膜与重度骨性关节炎患者膝关节滑膜中的表达有显著差异(P<0.05).结论 MMP-7、MMP-9及TIMP-3的表达是骨性关节炎重要的标志性诊断指标.     

肝硬化脾行脾次全切除术前后脾脏基质金属蛋白酶及其抑制剂的表达

目的 了解肝硬化充血性脾肿大伴脾亢时行脾次全切除术前后脾脏基质金属蛋白酶及其抑制剂的表达变化。方法 用60％CCl4加5％乙醇制作大鼠肝纤维化模型，然后行脾次全切除术，用原位杂交和免疫组化的方法观察手术前后脾脏中膜型基质金属蛋白酶－1（MT1－MMP）、基质金属蛋白酶2（MMP2）、基质金属蛋白酶抑制剂－1（TIMP1）的表达。结果 原位杂交显示，脾脏中MT1－MMP、MMP2、TIMP1 mRNA的表达主要在血管内皮和血窦内皮细胞、成纤维细胞及网状细胞中，多位于红髓、脾索和脾小梁。蓝紫色阳性物质分布于胞质中。图像分析表明手术前后比较无明显差异（P＞0.05)。MMP9的免疫组化染色显示，棕黄色的阳性物质主要分布在红髓和边缘带的吞噬细胞和中性粒细胞中，图像分析表明手术前后比较均无统计学差异（P＞0.05)。结论 脾次全切除术后保留的残脾其纤维化程度未见加重。     

高糖对人类肾小球系膜细胞PKC及MMPs/TIMPs的影响

目的：研究体外高糖环境下人类肾小球系膜细胞(NHMC)中PKC激活或使用PKC抑制剂干预后 MMP2,9/TIMP1,2的表达,探讨PKC与MMPs/TIMPs信号转导在糖尿病肾病发生发展中的作用。方法：将NHMC分4组： N组（对照组,5 mmol/L葡萄糖）;H组（高糖组,30 mmol/L葡萄糖）;P组（抑制剂组,30 mmol/L葡萄糖+10-5mol/L白屈菜红碱）;M组(甘露醇组,5 mmol/L葡萄糖+25 mmol/L甘露醇)。分别于上述4种不同成分培养基中进行细胞培养,第24,48,72 h用MTT法测定NHMC增殖;并于培养后第24,48 h收集细胞,抽提mRNA及蛋白质,用ELISA方法测定胞膜、胞核蛋白质PKC活性。用RT-PCR和Western 印迹方法检测MMP2,9, TIMP1,2 mRNA和蛋白质的表达。结果：高糖组细胞膜和胞核部分的PKC活性较对照组明显升高(P＜0.01), MMP2,9, TIMP1,2 mRNA及蛋白质的表达较对照组明显上升(P＜0.01);而MMP-9/TIMP-1, MMP-2/TIMP-2比值较对照组明显下降(P＜0.05)。 高糖加PKC抑制剂白屈菜红碱后,MMP2,9, TIMP1 mRNA及蛋白质表达较对照组明显升高 (P＜0.01),但MMP9/TIMP1, MMP2/TIMP2比值较高糖组明显升高(分别P＜0.05,P<0.01)。PKC活性与MMP-2/TIMP-2及MMP-9/TIMP-1的蛋白质比值均呈负相关(分别r=-0.651,r=-0.702,均P＜0.05)。结论：高糖可刺激人类肾小球系膜细胞PKC活化,在DN中PKC活化与MMP2,9/TIMP1,2的表达水平有密切关系。     

葡萄胎组织MMPs与TIMPs表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶（MMPs）及其抑制物（TIMPs）在葡萄胎组织中的表达水平及其临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应方法测定35例葡萄胎（6例发生恶变，列为葡萄胎恶变组，29例为葡萄胎未恶变组）和18例正常绒毛组织（正常绒毛组）中MMP-7、MMP-9、TIMP-1及TIMP-2 mRNA表达水平。结果葡萄胎恶变组MMP-9／TIMP-1 mRNA比值高于正常绒毛组和葡萄胎未恶变组（F=3．62；q=3．82、3．57；P〈0．05）；MMP7、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2 mRNA在各组中的表达差异无显著性（P〉0．05）。经Pearson相关性分析显示，在所有组织中MMP-9与MMP-7表达呈正相关（r=0．985，P〈0．01）。结论葡萄胎组织中MMP-9／TIMP-1比值对预测葡萄胎恶变有一定的作用，可为临床预防性化疗提供依据。     

基质金属蛋白酶在脑白质疏松症血-脑脊液屏障机制中的实验研究

目的 分析基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制物(TIMPs)的mRNA在脑组织的表达,探讨血-脑脊液屏障(BBB)损伤致脑白质疏松症(LA)发生的作用机制。方法 18只5月龄雄性自发性高血压(SH)大鼠为实验组,同龄7只雄性Wistar大鼠为对照组。取大鼠脑组织,应用HE染色及免疫组织化学染色,观察其病理变化及髓鞘碱性蛋白(MBP)、神经中丝(NF)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。取大鼠脑白质组织,使用Real-time PCR技术,检测MMP-9、MMP-2和金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)mRNA的表达水平。结果 HE染色显示,SH大鼠脑白质区神经元和少突胶质细胞数量减少,星形胶质细胞反应性增生。实验组较对照组GFAP表达增加,而MBP和NF表达减少。实验组大鼠脑白质区TIMP-1、MMP-9和MMP-2 mRNA表达水平升高。其中,TIMP-1与MMP-2 mRNA升高显著(P＜0.05),而MMP-9 mRNA表达两组无显著性差异(P＞0.05)。结论 5月龄SH大鼠可作为脑白质疏松症的实验动物模型。MMPs导致的BBB破坏可能是脑白质疏松症的发病机制之一。     

2型糖尿病患者血清基质金属蛋白酶及其组织抑制物检测的临床意义

目的:探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制物(TIMPs)检测的临床意义。方法:采用ELISA法分别测定100例未经治疗T2DM患者(T2DM组)和100例健康体检者(对照组)血清MMP-2、MMP-9和TIMP-1水平,并进行对比分析。结果:T2DM组的MMP-2、MMP-9、TIMP-1水平明显高于对照组(P<0.01)。结论:T2DM患者MMP-2、MMP-9和TIMP-1明显增加,可能反映了T2DM患者细胞外基质(ECM)代谢异常,可将其作为糖尿病相关血管活性异常的间接标志物。     

SUBTOTAL SPLENECTOMY IN CIRRHOTIC PATIENTS

lve cirrhotic patients underwent subtotal splenectomy. The operative technique involved pre- servation of anatomic segments and suture of an omental patch to the residual spleen. With knowledge on segmental vascular anatomy in splenomegaly, sub- total splenic resection can be readily accomplished with ease and safety. Follow-up of the 12 patients showed that the preserved spleen had normal uptake of 51Cr denatured erythrocyte isotope, high grade serum IgM, and effect of alleviating fever after splenectomy. Splenic scan and clinical immunologic survey revealed the functional capacity of splenic remnant, and the lower percentage of "pocked" RBCs, an important clue to eusplenia. Thus, the normal function and size retained of the residual spleen were saved. If long-term follow-up confirms the value of segmental splenectomy, it may become an adjuvant treatment in lowering portal hyperten sion in cirrhotic patients.     

大鼠急性心肌梗死后心室基质重构的机制研究

目的制作大鼠急性心肌梗死模型,研究心肌梗死后基质重构相关细胞因子的表达,尤其是MMPs、TIMPs及MMPs/TIMPs随梗死时间变化对大鼠心肌基质重构的影响。方法采用冠状动脉结扎法建立大鼠的急性心肌梗死模型。MMPs和TIMPs免疫组化染色、观察心肌梗死后基质的变化及基质金属蛋白酶系统的表达。结果 MMPs和TIMPs免疫组化染色：与假手术组相比较,模型组MMP-2、TIMP-2的表达均随梗死时间的延长而增加,两者在梗死后2周均达高峰,后有所下降,但4周时仍高于假手术组（P〈0.01）,其中MMP-2的表达水平总体上高于TIMP-2的表达水平。结论大鼠急性心肌梗死后,MMP-2、TIMP-2的表达均随梗死时间的延长而增加,两者均于2周达高峰后有所下降,但4周时仍高于假手术组。     

MMPs/TIMPs在甲状腺乳头状癌细胞中的表达与作用的研究

目的:探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)患者癌细胞中基质金属蛋白酶(matrix metallo-proteinases,MMPs)和金属蛋白酶的组织抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMPs)蛋白的表达水平,探讨MMPs/TIMPs与甲状腺乳头状癌发生、发展之间的相互关系。方法:应用ELISA方法检测甲状腺正常组织和乳头状癌癌细胞培养液中MMP-2、MMP-9以及TIMP-1、TIMP-2的分泌水平;采用MTS掺入试验检测在rhMMP-2或抗MMP-2中和抗体的作用下,甲状腺正常组织细胞和乳头状癌癌细胞增殖水平。结果:甲状腺乳头状癌癌细胞分泌MMP-2、MMP-9水平提高,而分泌TIMP-1、TIMP-2水平降低,MMPs与TIMPs的比值升高特别显著;MMP-2对甲状腺乳头状癌癌细胞有明显的促增殖作用,抗MMP-2单克隆抗体能明显地抑制癌细胞生长。结论:MMPs与TIMPs的比值有望作为预测甲状腺乳头状癌生长和转移的一项检测指标。     

全反式维甲酸与弹性蛋白酶对肺组织破坏的干预作用

目的 采用胚肺成纤维细胞三维立体培养技术,直接观察全反式维甲酸(RA)和中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)对肺的主要成分之一胶原组织降解的干预作用.方法 在胚肺成纤维细胞三维立体培养过程中加入细胞因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)]来诱导基质金属蛋白酶(MMPs)的表达,同时加入RA或NE干预MMPs及其组织抑制因子(TIMPs)的表达;用明胶酶谱法测定MMP-2、MMP-9,用Western blotting法测定MMP-1、MMP-3及TIMP-1、TIMP-2,同时在培养5 d后测定胶原的含量及面积大小.结果 TNF-α和IL-1β诱导在立体胶原内培养的胚肺成纤维细胞产生MMP-1、MMP-3和MMP-9,但是只引起少量胶原降解(P＞0.05),同时加入NE,结果导致胶原几乎完全降解(P＜0.01).NE使MMP-1、MMP-2、MMP-3和MMP-9由非活化的形式转化为分子量较小的活化形式,同时,清除TIMP-1和TIMP-2.RA抑制了MMP-1的表达及MMP-3、MMP-9的活化,并削弱了NE对TIMP-1、TIMP-2的清除作用,进而抑制了胶原的降解.胶原降解后基质发生强烈收缩.结论 MMPs可直接降解肺内胶原和其他间质组织,导致肺组织破坏;NE通过活化MMPs引起或加速细胞外基质的破坏;MMPs与NE的协同作用可能是肺气肿等肺组织破坏的机制.RA通过抑制MMPs的表达与活化对抗NE对肺组织的破坏作用.     

下瘀血汤含药血清对脂多糖诱导活化的RAW264.7细胞表达MMP2,9/TIMP1,2的调控作用

目的:观察下瘀血汤药物血清对脂多糖(LPS)诱导活化后RAW 264.7细胞表达基质金属蛋白酶(MMP-2,9)及基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP-1,2)的影响,以探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法:100 g/L LPS刺激RAW264.7细胞,ELISA法分别测定0.5 h,1 h,2 h,4 h,6 h,12 h细胞培养上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,选择模型时间点;生化法测定RAW264.7细胞培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)含量,分析10%和20%的正常大鼠血清和下瘀血汤药物血清的细胞毒性;Western blot法检测RAW 264.7细胞MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的蛋白表达。结果:与10%浓度的正常大鼠血清相比,10%下瘀血汤药物血清对RAW264.7细胞的无毒性作用。LPS刺激细胞培养1 h时,细胞培养上清中TNF-α含量开始增加;4 h时达到最高;6 h时开始下降。与相应时间点正常组相比,4 h、6 h模型组RAW 264.7细胞MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2蛋白表达均显著升高(P0.01);与相应时间点模型组相比,4 h、6 h下瘀血汤药物血清组上述指标均降低,其中6 h组RAW 264.7细胞MMP-2蛋白表达、4 h与6 h细胞MMP-9、TIMP-1和TIMP-2蛋白表达显著降低(P0.01)。结论:下瘀血汤可能通过抑制枯否细胞(KCs)活化,抑制其MMP2,9/TIMP1,2的表达而发挥抗肝纤维化的作用。