江西不同产区车前子药材的HPLC指纹图谱及其多成分化学模式识别分析

目的:建立车前子HPLC指纹图谱检测方法,结合化学模式识别方法对江西不同产区车前子样品进行分析,并测定其中5种有效成分的含量,为科学评价和有效控制该药材的质量提供参考。方法:利用HPLC检测34批车前子药材,采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2012版)进行相似度评价,以其色谱峰信息为数据来源,利用化学模式识别方法综合分析江西道地药材车前子的质量,对筛选并指认出的5个有效成分京尼平苷酸、大车前苷、毛蕊花糖苷、木犀草苷、异毛蕊花糖苷进行定量分析。结果:江西不同产区车前子样品的相似度均 0. 86,说明江西不同产区车前子相似度良好。利用正交偏最小二乘法-判别分析能较好地区分不同产区车前子药材,且可判断与车前子质量相关性较强的化学成分。5种有效成分的含量在不同产区车前子中仍存在一定差异,其中尤以大车前苷的含量差别较大。结论:建立的车前子HPLC指纹图谱特征性强,结合化学模式识别方法可有效的评价车前子质量并区分其不同产区,可为该药材的质量控制提供参考依据。     

肠外翻技术快速发现车前子吸收成分群的研究

目的:建立快速发现车前子吸收成分群的肠外翻模型,为选择车前子质量控制指标提供依据.方法:采用大鼠肠外翻模型,收集3个浓度车前子提取物给药后不同时间的肠囊液样品,用HPLC和LC-MS"进行检测分析,并计算其有效成分京尼平苷酸的累积吸收量.结果:车前子中6种成分均可进入肠囊,在90 min后能全部检测到;不同浓度车前子中京尼平苷酸在各肠段均为线性吸收,R<'2>均大于0.9,符合零级吸收速率;京尼平苷酸在空肠、回肠中的吸收速率常数(K<,a>)随着车前子提取物浓度增加而增加(P<0.05),符合被动吸收.结论:肠囊对药物成分吸收有选择性,回肠与空肠相比可更多、更快地给出吸收成分信息,选择肠外翻法90 min的样品检测车前子吸收成分比较适宜.     

基于UPLC-Q-TOF/MS法分析车前子生品和盐炙品化学成分研究

目的：利用超高效液相串联四级杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF/MS）法分析车前子及其盐炙品的成分,比较盐炙前后药物化学成分种类和含量的变化,探究车前子炮制前后药效变化的物质基础。方法：ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱;流动相：0.1%乙酸水-甲醇体系梯度洗脱;ESI离子源;负离子模式;基于Markerlynx分析软件,利用主成分分析法（PCA）和正交偏最小二乘判别法（OPLS-DA）分析车前子盐炙前后指纹图谱的差异。结果：盐炙品中京尼平苷酸、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷的含量相对生品高。京尼平苷酸和毛蕊花糖苷可作为化学标记物区分生品与盐炙品。结论：基于UPLC-Q-TOF/MS法建立了车前子炮制前后的化学成分分析方法。车前子盐炙后有效成分含量增加。本实验的研究成果对于研究车前子盐炙的炮制原理具有重要意义,同时也为车前子盐炙品药效物质基础的阐明提供了重要依据。     

大粒车前子中苯乙醇苷类化合物对树突状细胞的调控研究

目的:探讨大粒车前子中苯乙醇苷类化合物对小鼠骨髓来源树突状细胞(DCs)功能调节的影响,为进一步阐明大粒车前子的免疫调节活性提供依据.方法:采用细胞因子诱导法,从Balb/cj小鼠骨髓细胞贴壁分离获得单核细胞,加入含10%胎牛血清、10μg·L~(-1)重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)及重组小鼠白细胞介素_4(rmIL-4)的RPMI1640完全培养基培养,在培养第6天,实验组加入车前子苯乙醇苷类化合物(10,50,100 mg·L(-1)),对照组加入RPMI 1640或LPS(1mg·L~(-1)),流式细胞仪检测DCs表面分子CD11c,CD86,MHC Ⅱ和CD80的表达以及各组DCs吞噬功能的变化.结果:车前子毛蕊花苷和异毛蕊花苷能够提高DCs表面分子CD11c,CD86,MHC Ⅱ和CD80的表达;空白组DCs的吞噬功能很强(45.39%),车前子毛蕊花苷和异毛蕊花苷组DCs吞噬功能都明显下降(分别为37.27%,30.40%,33.45%和40.15%,37.59%,31.07%).结论:车前子苯乙醇苷类化合物能促进小鼠骨髓来源的DCs表型及功能的成熟.     

圆苞车前子微量元素及其氨基酸含量分析

采用火焰原子吸收分光光度法、等离子体发射光谱法测定了圆苞车前子中11种人体必要的微量元素含量，并用氨基酸分析仪测定了圆苞车前子中17种氨基酸的含量，其中有6种人体必须的氨基酸。     

车前子糖醛酸含量的分析

目的:测定并比较不同产地3种车前子糖醛酸含量。方法:分光光度法。结果:大车前子糖醛酸高于车前子及平车前子。结论:不同种、不同产地车前子糖醛酸含量差异明显。     

车前子指纹图谱研究及其2种指标成分的测定

目的 建立不同产地车前子药材的高效液相色谱指纹图谱并测定京尼平苷酸和毛蕊花糖苷2种指标成分的量。方法 Zorbax sbaq-C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈-0.5%的醋酸水溶液,体积流量1.0 mL/min,检测波长254 nm,采用梯度洗脱,建立车前子HPLC指纹图谱。结果 建立了车前子的指纹图谱,确立13个共有峰,京尼平苷酸和毛蕊花糖苷质量分数均值为0.794 3%和0.664 2%。结论 本研究建立的指纹图谱与指标成分测定相结合分析方法快速,可用于评价车前子的质量,并为下一步建立车前子配方颗粒的质量控制方法提供依据。     

车前子及车前草中毛蕊花糖苷与异毛蕊花糖苷的含量比较

目的:分析比较车前子及车前草中毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷含量差异,为车前质量控制与临床用药提供实验依据。方法:采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC),Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-0.1%甲酸水溶液(40∶60),同时测定车前子及车前草中毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷的含量,流速0.6 m L·min-1,柱温25℃,检测波长330nm。结果:车前子与车前草中毛蕊花糖苷质量分数分别为9.70,0.32 mg·g-1,异毛蕊花糖苷质量分数分别为1.28,1.51 mg·g-1。结论:车前子中毛蕊花糖苷含量高于车前草,异毛蕊花糖苷含量低于车前草,临床应合理用药,并建议车前增加异毛蕊花糖苷为质控指标。     

车前子中苯乙醇苷化合物抗氧化活性研究

采用PCL和FRAP两种不同的抗氧化活性体外评价体系,对车前子80%乙醇提取物以及从中分离得到的两个苯乙醇苷单体化合物,麦角甾苷和异麦角甾苷的抗氧化活性进行了系统研究。研究结果表明:车前子80%乙醇提取物,麦角甾苷和异麦角甾苷都具有良好的抗氧化活性,而且证明车前子80%乙醇提取物的抗氧化活性主要来自这2个化合物的贡献。     

车前子多糖含量的分析

目的：测定并比较不同产地3种车前子多糖含量。方法：分光光度法。结果：大车前子多糖含量高于车前子及平车前子。结论：不同种、不同产地车前子中多糖含量差异明显。     

高效液相色谱法同时测定暑热宁口服液中葛根素和绿原酸的含量

目的:建立不同检测波长下同时测定暑热宁口服液中葛根素和绿原酸液相色谱方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱:Xterra MS18 5μm 46×250nm;流动相:乙睛-0.3%磷酸溶液(10∶90);流速:1.0 m L/min;检测波长:250nm、327 nm;柱温:35℃;进样量20μL。结果:葛根素在进样量为1.2824~12.824μg内与峰面积线性关系良好,Y=9.70e﹢007X+1.73e+005(r=0.9999),加样回收率(n=9)为95.6%~99.6%,RSD为1.44%。绿原酸在进样量为1.360~13.60μg内与峰面积线性关系良好,Y=3.20e﹢006X+5.60e﹢005(r=0.9997),加样回收率(n=9)为99.2%~103.4%,RSD为1.9%。结论:该方法简便快速,结果准确,可以有效控制暑热宁口服液中葛根素和绿原酸的含量。     

高效液相色谱法同时测定伤科胶囊中3种皂苷的含量

目的:建立高效液相色谱法同时测定伤科胶囊中3种皂苷的含量。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为ODS柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相A为乙腈,B为0.05%磷酸溶液,梯度洗脱,条件为:0~18 min(20~35∶80~65),18~23 min(35~20∶65~80),25 min(20∶80);流速为1.0 m L/min,检测波长203 nm。结果:三七皂苷R1进样量在0.7758~24.8256μg(r=0.9997)、人参皂苷Rg1进样量在0.852 0~27.264 0μg(r=0.999 8)、人参皂苷Rb1进样量在0.6432~20.5824μg(r=为0.999 9)范围内线性关系良好,方法重复性及回收率均符合要求。结论:本法操作简便快捷、结果准确可靠,重复性好,适用于伤科胶囊中3种皂苷含量的测定。     

反相高效液相色谱法测定益心宁神片中五味子醇甲和五味子乙素

目的用高效液相色谱法测定益心宁神片(五味子,灵芝,人参茎叶总皂苷和藤合欢)中五味子醇甲和五味子乙素。方法采用Hypersil BDS C18柱(4.6 mm×200 mm,5μm);流动相甲醇-水(65∶35)。体积流量1.0 mL/min。检测波长210 nm。柱温40℃。进样量20μL。结果五味子醇甲和五味子乙素在0.5～20μg范围内,峰面积和进样量呈良好的线性关系。回归方程分别为Y=1 102 625.000 9X-199.714 0,r=1.000 0;Y=2 635 670.830 5X+24 809.150 2,r=0.999 9。结论本法灵敏度高,方法简单,结果准确,适用于益心宁神片中五味子醇甲和五味子乙素的同时测定。     

可变波长同时测定泸州龙眼没食子酸和鞣花酸的含量

目的:建立同时测定泸州龙眼肉、核、皮中没食子酸和鞣花酸含量的HPLC方法.方法:依利特Sino Chrom ODSBP (4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1％磷酸溶液,梯度洗脱,改变波长测定(0～ 11.5 min,215 nm,测定没食子酸;11.5～25 min,255 nm,测定鞣花酸),柱温30℃,流速1 mL· min-1,进样量10 μL.结果:没食子酸在0.229 ～2.29 μg,鞣花酸在0.412 5 ～4.125 μg峰面积与进样量有良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率(n=9)分别为98.27％( RSD 0.63％),98.31％ (RSD 0.88％).结论:该方法灵敏、准确、重复性好,可用于泸州龙眼中没食子酸和鞣花酸的含量测定.     

HPLC-ELSD 测定蛇胆川贝散生产过程西贝母碱的含量变化

目的: 检测蛇胆川贝散生产过程中西贝母碱含量的变化,为生产工艺和质量控制提供实验依据。方法: 用Agilent TC-C₁₈ (4.6 mm×250 mm, 5 μm)色谱柱,以乙腈- 0.02%二乙胺水溶液系统为流动相,流速1.0 mL ·min^-1;蒸发光散射检测器的漂移管温度40 ℃,气体流速2.4 L ·min^-1,增益1。结果: 西贝母碱在进样量1.032~20.64 μg与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 97), 方法回收率为98.90% (RSD为2.89%)。蛇胆川贝散原料药灭菌前后及制剂成品中含量分别为0.333 6,0.318 6,0.293 0 mg ·g^-1。结论: 本方法快速、简便、准确、重复性好, 能快速准确测定制剂过程中的原料药、灭菌后中间品和制剂成品的含量,为本品质量控制提供依据。     

HPLC法测定苦参洗剂中苦参碱的含量

目的:建立苦参洗剂中苦参碱含量的测定方法。方法:采用HPLC法,色谱柱为kromasil C18柱(4.6 mm×250 mm,50μm);流动相:甲醇-水-3%磷酸溶液(80∶5∶12);流速为:1.0 mL/min;检测波长:220 nm;进样量:10μL;柱温:40℃。结果:苦参碱的HPLC进样量在0.12-2.0μg.mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系,平均回收率为98.03%,RSD%为1.36%。结论:采用HPLC法测定苦参洗剂苦参碱的含量简便可行准确,且可操作性好,可用于其质量控制。     

GC法测定禹州漏芦中α-三联噻吩含量

目的:建立禹州漏芦中α-三联噻吩的气相色谱含量测定方法.方法:采用GC法,色谱柱为DA-INOWAX聚乙二醇毛细管柱(0.25 μm ×0.25 mm,30 m),FID检测器;载气为氮气,进样口温度、柱温、检测器温度均为240℃,不分流进样,进样量1μL,柱流量1.9 mL·min-1.结果:在此条件下,禹州漏芦中α-三联噻吩在0.1429 ～1.4290 g·L-1呈良好线性关系,r=0.9996,平均回收率98.56％,RSD 0.77％ (n =6).结论:该方法准确、简便、重复性好,可用于禹州漏芦中α-三联噻吩的含量测定.     

思的明胶囊中梓醇含量的高效液相色谱测定

目的 建立高效液相色谱法(HPLC)测定思的明胶囊(SDM)中梓醇含量.方法 色谱柱为 Hypersil C_(18)(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相为水-乙腈(99∶1);流速为1.0 ml·min~(-1);检测波长为210 nm;进样量 20 μl.结果 建立的含量测定方法中,梓醇含量在0.4～2.4 μg 范围内线性关系良好(r＝0.999 8),平均加样回收率为99.75%,RSD＝0.53%.结论 该方法准确、稳定、可靠,可用于 SDM 胶囊的含量测定.     

HPLC法测定天元颗粒中天麻素的含量

目的 测定天元颗粒中天麻素的含量.方法 样品采用甲醇回流提取,经中性氧化铝柱用80%乙醇洗脱收集;色谱柱:Diamonsil C18柱(250 mm×4.6mm,5μm),流动相:乙腈-0.15%磷酸水溶液(1:99),检测波长:220 nm,流速:1 mL/min,柱温:30℃.结果 天麻素在0.376～2.632 μg之间线性关系良好,r=0.9999 95(n=7),平均回收率99.09%,RSD为1.5%(n=6).结论 该法准确、重复性好,可用于天元颗粒制剂及天麻药材的含量测定及质量控制.     

HPLC测定防风通圣丸中2个色原酮苷类成分含量

目的:建立防风通圣丸中2个色原酮苷类成分的含量测定方法.方法:采用HPLC法,对防风通圣丸中的升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷进行定量分析.kromasil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相甲醇-乙腈-0.1％磷酸(24:12:64);检测波长254 nm.结果:升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷分别在0.0125 ～0.250,0.0108 ～0.216 μg(r ＞0.9999)线性关系良好,平均回收率＞96.75％,RSD＜ 1.65％.结论:该研究同时进行升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷的定量分析,可作为防风通圣丸的质量控制标准.