鸳鸯精对小鼠精子质量影响的实验观察

我们在临床应用发现自拟经验方“鸳鸯精”治疗精子减少症取得显著疗效 [1 ] ,为进一步明确疗效 ,通过本动物实验 ,观察该药物对生精障碍小鼠睾丸生精功能的影响。1　材料与方法1.1　动物 :清洁级 ICR雄性小鼠 4 5只 ,体重 2 5～ 30 g,福建中医学院实验动物中心提供。随机分为正常组 10只、模型组10只、鸳鸯组 15只、五子组 10只。1.2　药物　鸳鸯精组成 :黄精、黄芪、黄柏、土茯苓、淫羊藿、蜈蚣等 ,由福州三利得营养保健品厂提供。五子衍宗丸汤 :药物及剂量按 1995年中国人民共和国药典规定。上述 2种药物水提至生药 2 kg/ L。1.3　造模 …     

温胆降脂口服液对成年大鼠血脂和腹腔脂肪含量的影响

1　材料与方法 1.1　药物　温胆降脂口服液含生药 1 g/L,由济南 铁路中心医院制剂室提供。绞股蓝总苷片每粒 20 mg 由陕西安康中药厂生产。 1.2　动物　成年雄性 SD 大鼠 2 0 只，体重(230±20)g，由上海市医学实验动物中心提供。 1.3　分组与给药　20 只大鼠随机分成两 组。实验组（温胆降脂口服液组），每日灌饲温胆降脂口服液（4867 g/kg体重）；对照组（绞股蓝总苷组），每日灌饲绞股蓝总苷片（17.035 g/ kg 体重）。 1.4　方法　实验开始时，先服高 脂饲料 14 d，形成高脂模型，后连续用药 21 d。用药期间，两组大鼠均以高脂饲料加药物饲养，自由饮水，饲养环境相同。实验前、用药前及用药第21天对两组动物逐只称重， 采血，分离血清，测定 TG 及 TC［1，2］，并于用药第21天采血后将动物处死，解 剖，测定腹腔脂肪量。     

益脾补肾方改善肥胖2型糖尿病小鼠生精功能障碍作用及机制

目的 观察益脾补肾方改善肥胖2型糖尿病小鼠生精功能障碍的作用，并探讨其作用机制。方法将30只4周龄健康C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组、模型组、益脾补肾方低剂量组（低剂量组）、益脾补肾方高剂量组（高剂量组）、二甲双胍组，每组6只。对照组给予普通饲料，其余各组给予高脂饲料喂养16周，建立肥胖2型糖尿病小鼠模型。低、高剂量组给予益脾补肾方2、4 g/（kg·d），二甲双胍组给予二甲双胍200 mg/（kg·d）灌胃，模型组和对照组灌胃等量的生理盐水，连续灌胃30天。干预前后进行口服葡萄糖耐量试验（OGTT）和胰岛素耐量试验（ITT），计算曲线下面积（AUC）；观察睾丸形态，测量小鼠重量并计算睾丸脏体比；HE染色观察睾丸形态变化；检测精子参数以及空腹血糖（FBG）;ELISA法检测血清中睾酮（T）水平；比色法检测血清中总超氧化物歧化酶（T-SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的变化；Western Blot检测脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B(Akt)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)表达。结果 对照组小鼠睾丸组织结构清晰，生精小管内各级生精细胞排列整...     

参芪补心丸对心肌缺血模型大鼠VEGF、bFGF的影响

<正>1实验材料药物:参芪补心丸,黑龙江省中医研究院制剂室制备,批号:140202;心通口服液,鲁南厚普制药有限公司生产,批号:00313081。试剂:血管由皮生长因子(VEGF)试剂盒、成纤维细胞生长因子(b FGF)试剂盒,武汉博士德生物。动物:健康Wistar大鼠60只,体重(200±20)g,雌雄各半,由哈尔滨医科大学第二附属医院实验动物中心提供,批号:SCXK(黑)2013-001。2方法动物造模及分组:采用喂养法建立大鼠心肌缺血模型。大鼠适应性喂养7天,普通饲料喂养,自由饮水。7天后将大鼠随机分为6组,每组10只:空白对照组、模型对照组、心通口服液组以及参芪补心丸高、中、低剂量组。除空白对照组外,其余各组均喂饲高     

艾灸对雷公藤甲素在佐剂性关节炎大鼠体内代谢的影响

1　实验材料1.1　实验动物 :健康实验用 Wistar雄性大鼠 ,体重为 2 0 0±2 0 g,由南京中医药大学实验动物中心提供。1.2　实验药物 :雷公藤甲素标准品及药用雷公藤甲素由中国科学院南京皮肤病研究所提供。1.3　实验仪器 :岛津 L C- 4A高效液相色谱仪 (日本岛津公司生产 )及天平等由南京中医药大学针灸研究所提供。2　实验方法2 .1　分组 :选 Wistar雄性大鼠 6 4只 ,随机分为 6组 (每组一笼群养 ,自由饮水、摄食 ,室温 2 2± 3℃ ) ,即对照组 8只 ,造模组 8只 ,治疗 A组 (雷公藤甲素灌胃 ) 12只 ,治疗 B组 (雷公藤甲素灌胃 ,于早上灌胃后…     

补肾法对雷公藤多苷片致大鼠生殖功能损伤保护作用的研究

目的:研究补肾法对雷公藤多苷片致大鼠生育功能损伤的保护作用。方法:将24只SPF级4~5周龄SD雄性大鼠随机分为4组:空白组(蒸馏水)、雷公藤多苷组(30mg/kg·d~(-1))、六味地黄丸组(六味地黄丸1g/kg·d~(-1)+多苷30mg/kg·d~(-1))、肾气丸组(肾气丸1g/kg·d~(-1)+多苷30mg/kg·d~(-1))。持续混悬液灌胃4周后,处死大鼠,留取睾丸组织,并称取重量,计算脏器指数;采用HE染色观察组织形态学变化,免疫组化法检测睾丸C-kit蛋白的表达。结果:与空白组比较,雷公藤多苷组大鼠睾丸重量、脏器指数、C-kit的表达均明显下降(P0.01);六味地黄丸组、肾气丸组与雷公藤多苷组相比可以明显提高C-kit蛋白表达(P0.05);空白组大鼠睾丸重量、脏器指数、生精细胞数、C-kit蛋白表达较六味地黄丸组、肾气丸组高,差异不具有统计学意义(P0.05);肾气丸组大鼠睾丸重量、脏器指数、C-kit蛋白表达高于六味地黄丸组,但差异不具有统计学意义(P0.05);HE染色比较:空白组睾丸组织病理形态正常,雷公藤多苷组睾丸组织中细胞排列紊乱,各级生精细胞明显减少,精子量减少,六味地黄丸组与肾气丸组睾丸损伤较雷公藤多苷组轻。结论:温补肾气及填补肾精法对雷公藤多苷所致雄性生殖损伤皆具有修复作用,可能与促进睾丸C-kit蛋白的表达,进而促进精原细胞的增殖分化有关。     

大白鼠输精管结扎术后乳倍膏治疗观察

<正> 结扎输精管后,有少数会出现结节、附睾管内精子淤积和肉芽肿等合并症。近年来用乳倍膏治疗痛性结节337例,有效率达98.4～99.2%,为探讨乳倍膏治疗作用机制,我们进行了实验研究。材料与方法实验用170～190g雄性大白鼠作集束输精管结扎。术后15天用乳倍膏外敷阴囊皮肤(乳倍膏的组成为乳香、五倍子、没药、大黄……等)。用药时间分别为10天(对照组3只,药物组4只),15天(对照组18只,药物组17只)。用药后杀死动物,取“结节”以及部分动物睾丸、附睾,用10%福尔马林固定,石腊切片,H·E染色,部分切片作革兰氏阴、阳性细菌染色。     

基于Th17/IL-17A信号通路探究二冬消渴方缓解2型糖尿病相关干眼大鼠眼表炎症的机制

目的：通过检测糖尿病相关干眼大鼠角膜及泪腺组织中的辅助性T细胞17(Th17)/白细胞介素-17A(IL-17A)信号通路中相关炎症因子表达情况，初步探讨二冬消渴方治疗糖尿病相关干眼的抗炎机制。方法：将60只SD雄性大鼠(共120只眼)，随机分为空白组，模型组，二冬消渴方低剂量组、中剂量组、高剂量组和普拉洛芬组，每组各10只(20眼)。高脂饲料喂养4周后腹腔注射链脲佐菌素(STZ,30 mg/kg)建立2型糖尿病动物模型，检测动物双眼角膜泪膜破裂时间(BUT)、荧光素染色(FL)及酚红棉线测试(Prtt)，第12周检测结果证实糖尿病相关干眼动物模型建立成功。二冬消渴方各剂量组分别予不同剂量(5.5、11、22 g/kg)二冬消渴方灌胃，普拉洛芬组给予普拉洛芬滴眼液点眼，各组均连续治疗28 d。分别于实验第0、8、12、14、16周对各组实验动物的FL、BUT、Prtt及随机血糖进行检测。实验第16周处死各组实验动物后，分别取下角膜及泪腺。使用苏木精-伊红(HE)染色法观察各组大鼠角膜及泪腺病理改变；免疫荧光及实时荧光定量PCR(qPCR)检测各组大鼠角膜和泪腺组织中转化生长因子-β(T...     

雄黄灌胃给药对雄性大鼠精子质量的影响

目的观察雄黄对雄性成年大鼠精子质量的影响。方法利用部分雄黄灌胃给药生殖毒性Ⅰ段试验雄性大鼠进行精子质量分析。将SD雄性大鼠50只随机分为阴性对照组、阳性对照雷公藤多苷组（10 mg/kg）及雄黄低、中、高剂量组（50、125、250 mg/kg）。各给药组连续灌胃给予相应药物6周,每日1次。给药结束后,取大鼠一侧附睾用计算机辅助精子分析系统（CASA）做精子的数量、活力、运动能力检查,并取睾丸、附睾做HE染色,观察组织病理学变化。结果阳性对照雷公藤多苷组精子活率、精子活力、有效精子数、精子密度及各项运动参数（除鞭打频率外）均明显低于阴性对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）。雄黄各剂量组精子活率、活力、有效精子数、精子密度及各项运动参数与阴性对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,且各剂量组间差异亦无统计学意义（P〉0.05）。组织病理学观察显示,阳性对照雷公藤多苷组的睾丸局部生精小管萎缩,生精细胞减少,附睾管腔内可见大量降解的生精细胞及细胞碎片,精子细胞减少,静纤毛缩短。雄黄高剂量组附睾、睾丸未见明显组织学病理改变。结论雄黄对雄性大鼠的精子没有明显的毒性作用。     

益精方对腹腔注射环磷酰胺大鼠性激素及雄激素受体的影响

环磷酰胺（Ｃｙｔｏｘａｎ，ＣＴＸ）是治疗许多免疫性疾病（如难治 性肾病、系统性红斑狼疮等）的有效药物，而ＣＴＸ引起的对性 腺的副作用，限制了该药在临床上的应用。中药益精方对防 治环磷酰胺致性腺抑制有较好的作用。为了进一步探讨其 疗效和作用机理，本实验从雄激素及受体（ＡＲ）水平，观察益 精方对腹腔注射ＣＴＸ雄性大鼠的影响。 １　材料与方法 １．ｌ　实验动物及饲养　雄性ＳＤ大鼠，６周龄（１２０～１４０ｇ），由 浙江省实验动物中心提供。分笼饲养，每笼１０只，给予颗粒 饲料喂养，自由饮水。 ］，２实验药品与主要试…     

基于氧化及Caspase-3凋亡探讨益肾种子方防治大鼠睾丸损伤机制研究

目的 探讨益肾种子方通过抗氧化及其诱导的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白水解酶（Caspase）-3凋亡途径防治奥硝唑所致的大鼠睾丸损伤的作用机制。方法 将30只雄性SD大鼠随机分为5组，空白组、模型组、益肾种子方低、中、高剂量组，每组6只。除空白组外，均采用奥硝唑800 mg/（kg·d）灌胃制造睾丸损伤模型。中药组在造模的同时，分别予益肾种子方低、中、高剂量灌胃[3.37、6.93、13.86 g/（kg·d），每天1次]，连续灌胃28天。干预后取材HE染色观察睾丸及附睾结构变化、测量睾丸组织中活性氧（ROS）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）含量；免疫组织化学染色分析睾丸组织Caspase-3表达。结果 与空白组比较，模型组睾丸组织生精细胞不同程度损伤、减少，附睾组织有不同程度破坏和精子的减少，睾丸组织中ROS、MDA含量升高，SOD、CAT含量降低（P<0.01），免疫组化显示Caspase-3表达增多。与模型组比较，益肾种子方干预后睾丸生精细胞完整性有所恢复，Caspase-3明显减少；益肾种子方中剂量组ROS、MDA含量降低（P<0.0...     

腺嘌呤诱发睾丸功能损害肾阳虚模型的研究

本文报道用含0.5%腺嘌呤饲料喂养大白鼠,引起睾丸组织萎缩,大部分曲细精管退行性变化,各级精细胞变性,数量减少,3β-羟基类固醇脱氢酶活性显著降低,血中睾丸酮含量亦明显降低,造成一种新型的睾丸功能损害肾阳虚实验动物模型。可用于男性不育症的研究。     

加味聚精食疗汤对少精、弱精症大鼠附睾中精子质量影响的实验研究

目的：探讨加味聚精食疗汤对少精、弱精症大鼠附睾中精子质量改善的作用机理。方法：50只SD大鼠随机分为5组各10只，除正常组大鼠外，其余大鼠均予雷公藤多甙（GTW）灌胃造模，其中造模组10只，造模结束后立即处死，鱼鳔组予加味聚精食疗汤灌胃，五子组予五子衍宗片灌胃，对照组仅予正常饮食，不予任何药物。结果：造模组的精子密度、a级精子及精子总活率（即a＋b＋c级）与正常组比较，差异有显著性意义（P〈0．05）；鱼鳔组、五子组、对照组的精子密度、a级精子及精子总活率与正常组比较，差异有显著性意义（P〈0．05）。鱼鳔组、五子组的精子密度高于对照组，差异有显著性意义（P〈0．05）；鱼鳔组的精子密度高于五子组，差异有显著性意义（P〈0．05）。结论：加味聚精食疗汤能够较好的改善少精、弱精症大鼠附睾中的精子质量，提高临床疗效。     

赤芍注射液穴位注射治疗脑血管意外的实验研究

1 赤芍注射液抗大鼠血栓形成的作用1.1 实验材料 动物:Wistar大鼠医动字第19-022同济医科大学实验动物学部。雄性200～300g。药品:赤芍注射液:10％,湖北中医学院附院制剂室;复方丹参注射液:宜昌民康药业有限公司。批号95112026(生药1.5g/ml)1.2 实验方法 取大白鼠30只,随机分3组,赤芍注射液组,丹参注射液组,生理盐水组。各组大白鼠称重,腹腔注射戊巴     

苓桂术甘汤对非酒精性脂肪肝相关肝细胞癌模型小鼠肝脂肪酸代谢重编程的影响

目的 从肝脂肪酸代谢重编程角度探讨苓桂术甘汤治疗非酒精性脂肪肝相关肝细胞癌（NAFLD-HCC）的可能作用机制。方法 将60只C57BL/6小鼠随机分为正常组、脂肪肝组、脂肪肝相关肝癌组以及苓桂术甘汤低、中、高剂量组，每组10只。脂肪肝相关肝癌组及苓桂术甘汤低、中、高剂量组小鼠采用腹腔注射二乙基亚硝胺和高脂饲料喂养相结合方式建立NAFLD-HCC模型；脂肪肝组小鼠采用高脂饲料喂养建立非酒精性脂肪性肝病模型；正常组予普通饲料喂养。造模成功后，苓桂术甘汤低、中、高剂量组小鼠分别给予苓桂术甘汤4.875、9.750、19.500 g/（kg·d）灌胃，正常组、脂肪肝组、脂肪肝相关肝癌组小鼠每天给予10 ml/kg生理盐水灌胃，各组均连续灌胃30天。检测各组小鼠血脂含量[包括甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）]及肝脏游离脂肪酸（FFA）含量，HE及油红O染色观察小鼠肝脏组织病理学改变；检测各组小鼠血清甲胎蛋白（AFP）、癌胚抗原（CEA）含量及肝脏肿瘤增殖抗原Ki-67蛋白表达，肝脏脂蛋白脂肪酶（LPL）、白细胞分化抗原36 ...     

生精散治疗大鼠弱精子症的实验研究

目的研究生精散对大鼠弱精子症的治疗作用。方法采用雷公藤多甙制备弱精子症大鼠模型,通过计算机辅助精子分析系统观察生精散对精子活率、活力、密度以及各种运动速度和运动方式等功能指标的影响。实验动物按体重随机分为正常对照组、雷公藤多甙组、生理盐水组及生精散小、中、大剂量组,每组5只。正常对照组每日给予正常饮食,共42d;生理盐水组给予生理盐水1mL／d,共28d;雷公藤多甙组每日灌胃雷公藤多甙20mg／kg,共4周;生精散小[0．01g／（只·d）]、中[0．02g／（只·d）]、大[0．03g／（只·d）]剂量组灌胃生精散,共14d。结果雷公藤多甙组大鼠精子的活率、活力、密度以及直线运动速度（VSL）、平均路径速度（VAP）和曲线运动速度（VCL）等功能指标均较正常对照组和生理盐水组显著降低。睾丸组织HE染色显示,雷公藤多甙组大鼠生精小管内各级精母细胞和精子细胞数明显减少,生精细胞排列紊乱。生精散大、中、小剂量组均可显著提高模型大鼠精子的活率、活力、密度和运动速度（VSL、VAP、VCL）;而对精子的运动方式,生精散大剂量组可以改善鞭打频率和平均移动角度。结论雷公藤多甙可以诱导稳定的弱精子症大鼠模型,生精散具有提高弱精子症大鼠精子的密度、活力、活率及运动速度的作用。     

“五子四物瓜石汤”对雷公藤多苷所致雄性大鼠生殖系统毒性的对抗作用及其机制研究

目的 研究自拟中药复方“五子四物瓜石汤”（WT）对雷公藤多苷（GTW）所致雄性大鼠生殖系统毒性的对抗作用及其机制。方法 雄性大鼠分别ig大，中，小剂量的WT与固定剂量的GTW，连续给药80d，以单独igGTW或NS为对照，观察各组雄性大鼠睾丸脏器指数，精子精，精子活率，睾丸病理结构的变化。并用免疫放射分析法（IRMA）测定各组雄性大鼠血清性激素水平。结果 与单用GTW组比较，大或中剂量WT可使睾丸重量明显增加，精子精明显升高，精子活率显著提高，其中大剂量WT可完全对抗GTW对生殖上皮的损害，使睾丸结构完全正常，血清睾酮维持了正常水平。结论 “五子四物瓜石汤”能显著对抗雷公藤多苷对雄性大鼠生殖系统的毒性作用，其对抗作用与WT保护睾丸生精上皮免受GTW的损害，并使血清睾酮水平维持于正常有关。     

鹿茸生精丸对大鼠睾丸附睾组织质量及血浆睾酮含量影响的实验研究

目的观察鹿茸生精丸对大鼠睾丸、附睾组织质量及血浆睾酮含量的影响,并探讨其作用机制。方法Wistar健康雄性大鼠30只,随机分为3组,各10只。治疗组予鹿茸生精丸药液,阳性对照组予五子衍宗丸药液,阴性对照组予0.9%氯化钠注射液。各组均每次2 mL灌胃,每日1次,连续15日。给药第16日,用睾酮放射免疫方法测定,计算每mL血浆中睾酮含量。然后摘取各组睾丸与附睾组织称湿质量。结果治疗组附睾组织湿质量及血浆睾酮含量较阴性对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组比阳性对照组各指标也有所增高,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论鹿茸生精丸具有雄激素样作用。     

脂汰清对高脂血症兔血清微量元素锌、铜、镁影响的观察

目的：探讨脂汰清对高脂血症兔血清微量元素锌、铜、镁的影响。方法：选取 60 只普通级新西兰雄性兔为实验对象,体质量 1.5 ~ 2.0 kg,随机选择普通级新西兰雄性兔 10 只作为空白组,予以普通饲料进行喂养;其余均按照高脂饲料配方 1 进行喂养,6 周后,将其制成高脂血症模型,再将其随机分为 4 组,模型组、脂汰清治疗组、洛伐他汀对照组和山楂精降脂片对照组。从第 7 周开始,正常组开始使用全价营养的饲料进行喂养,其余各组改采用高脂饲料进行喂养。同时,脂汰清治疗组、洛伐他汀对照组和山楂精降脂片对照组分别给予相应的溶化药物,空白组和模型组给予生理盐水。连续灌胃 11 周后,取各组兔耳中央动脉血进行检测其血清中微量元素锌、铜、镁的含量。结果：模型组和空白组兔子血清中的锌、铜、镁均呈降低的趋势;脂汰清治疗组兔子血清中锌、铜、镁的含量略比模型组高,且铜和镁的含量均超过了空白组,但差异无统计学意义（P 〉 0.05）。山楂精降脂片对照组兔子血清中镁的含量较其他各组均有明显升高,差异有统计学意义（P 〈 0.05）。结论：脂汰清颗粒对血清中微量元素锌、铜、镁的调节作用不明显。     

雷公藤多苷片对Ⅱ型胶原诱导性关节炎雄性大鼠生殖毒性的影响

为了解雷公藤多苷片对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)雄性大鼠生殖系统的影响作用,该实验将50只SD雄性大鼠随机分为正常对照组(Con),模型组(CIA),雷公藤多苷片临床等效剂量1,2,4倍剂量组(9,18,36 mg·kg~(-1)),每组10只,首次免疫后当天开始灌胃给药,每天1次,给药42 d。分别于第21,42天取材,计算睾丸和附睾脏器指数;光镜下观察睾丸和附睾组织病理形态学改变;采用计算机辅助精子分析技术观察附睾组织中精子计数、精子畸形率及精子动力学参数;ELISA法检测血清中睾酮(T)及一氧化氮合酶(NOS)及芳香化酶(CYP19A1)的含量变化;免疫组织化学法观察睾丸、附睾组织凋亡通路相关蛋白Bax和Bcl-2的表达。结果表明,与Con组比较,CIA组能显著增加睾丸生精小管病变及精子畸形率、降低平均路径速度,其他未见显著变化;与CIA组比较,给药42 d,雷公藤多苷片4倍临床等效剂量可明显降低睾丸指数(P0.01),各剂量组均可降低附睾指数(P0.05);雷公藤多苷片各剂量组均可造成睾丸和附睾不同程度的组织病理学损伤,出现睾丸内生精小管病变比例变大,生精小管内各级生精细胞总数减少等,同时,能降低精子数、升高精子畸形率、使各精子动力学参数异常等,这些变化均随给药剂量和时间的增加而严重;4倍剂量雷公藤多苷片均能显著降低血清性激素T及雄激素合成关键酶NOS的含量(P0.05或P0.01),但对CYP19A1作用不明显;2倍和4倍剂量雷公藤多苷片均能提高睾丸和附睾组织中促凋亡蛋白Bax的表达,降低Bcl-2表达(P0.05,P0.01或P0.01)。综上表明,临床等倍和以上剂量雷公藤多苷片给药21 d就可造成CIA雄性大鼠生殖器官明显的毒性反应,并一定程度降低血清性激素T及雄激素合成关键酶NOS水平,引起睾丸和附睾组织中凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2含量的异常变化,相关机制有待进一步的研究阐明。