续骨补肾方含药血清对成骨细胞增殖及骨形成蛋白-2,Ⅰ型胶原表达的影响

目的:探究续骨补肾方含药血清在骨折愈合过程中对成骨细胞增殖及BMP-2,Ⅰ型胶原mRNA表达的影响,进一步揭示其促进骨折愈合的具体机制,为临床推广提供实验依据。方法:分离培养大鼠成骨细胞并进行鉴定,传代备用并制备15%含药血清并分组(高、中、低剂量3个含药血清组和生理盐水组)+DMEM培养基;MTT法观察各组对成骨细胞增殖的影响;RT-PCR检测成骨细胞的Ⅰ型胶原、BMP-2 mRNA表达。结果:续骨补肾方含药血清组在24 h,48 h,72 h均可促进成骨细胞增殖,且在24 h低剂量组促进成骨细胞增殖作用最强;在72 h时,中剂量组促进成骨细胞增殖作用最强,差异有统计学意义。续骨补肾方含药血清各剂量组均可上调BMP-2,Ⅰ型胶原mRNA的表达(P0.05),且低剂量组作用最强。结论:续骨补肾方可促进成骨细胞增殖,增加BMP-2,Ⅰ型胶原mRNA的表达,促进骨折愈合,且低剂量是最佳剂量。     

补肾健脾活血方对成骨细胞增殖分化及BMP-2、Smad5影响的研究

目的:研究中药复方补肾健脾活血方对大鼠成骨细胞增殖分化及骨形成蛋白-2 (BMP-2)、Smad5表达的影响。方法:将60只3月龄雌性SD大鼠随机分为空白组、补肾健脾活血方组、阿仑膦酸钠组,每组20只。制备对应的含药血清后分别干预成骨细胞,采用细胞计数法(CCK-8)检测成骨细胞增殖活性,碱性磷酸酶染色(ALP)检测成骨细胞分化能力,实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测BMP-2、Smad5 m RNA表达,蛋白免疫印迹法检测BMP-2、Smad5蛋白表达。结果:干预12 h、24 h、48 h时,各组细胞活性逐渐增强,干预48 h后各组细胞活性均降低。干预48 h时,与空白组、阿伦磷酸钠组比较,补肾健脾活血方组细胞活性最强(P0.05)。补肾健脾活血方组成骨细胞ALP染色最深,明显深于空白组和阿仑膦酸钠组。与空白组比较,补肾健脾活血方组BMP-2、Smad5蛋白及mRNA表达升高(P0.05);阿仑膦酸钠组BMP-2 mRNA表达降低(P0.05)。与阿仑膦酸钠组比较,补肾健脾活血方组BMP-2、Smad5蛋白及mRNA表达升高(P0.05)。结论:中药复方补肾健脾活血方可以促进大鼠成骨细胞增殖分化,提高BMP-2、Smad5 mRNA和蛋白表达。     

二仙汤含药血清对过氧化氢诱导成骨细胞骨形成的影响

目的探讨二仙汤治疗骨质疏松症的可能作用机制。方法成骨细胞以5×103/孔接种于96孔板,分为正常组、模型组、戊酸雌二醇组和二仙汤高、中、低剂量组,每组6孔。除正常组外其余各组用含600μmol/L过氧化氢(H2O2)的完全培养基培养3h诱导成骨细胞骨形成模型。正常组用空白对照血清培养,戊酸雌二醇组给予8%戊酸雌二醇含药血清培养,二仙汤高、中、低剂量组分别给予8%、4%、2%二仙汤含药血清培养48h,检测成骨细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活力、钙结节生成以及骨形成蛋白2(BMP-2)和骨保护素(OPG)蛋白表达。另外以钙离子通道阻断剂Nifdipine(10μmol/L)进行干预,观察Nifdipine对H2O2刺激成骨细胞后细胞增殖、ALP活性及BMP-2、OPG蛋白表达以及Nifdipine干预下二仙汤含药血清对H2O2刺激成骨细胞后细胞增殖、ALP活性及BMP-2、OPG蛋白表达的影响。结果与正常组比较,模型组细胞增殖、ALP活性、钙结节及BMP-2表达降低(P0.05或P0.01)。二仙汤各剂量组能不同程度促进成骨细胞增殖,提高ALP活力和钙结节生成,促进BMP-2、OPG蛋白表达(P0.05或P0.01)。Nifdipine能提高H2O2刺激下成骨细胞BMP-2、OPG蛋白表达(P0.05或P0.01)。与Nifdipine组比较,二仙汤含药血清和Nifdipine合用则显著提高H2O2刺激下的成骨细胞增殖,降低BMP-2、OPG蛋白表达(P0.01)。结论二仙汤含药血清能明显改善氧化刺激对成骨细胞骨形成的影响,其机制可能与调节钙离子通道有关。     

骨碎补总黄酮对模拟失重下共育骨细胞中ALP活性及BMP-2和OPG基因表达影响

目的:通过观察骨碎补总黄酮对模拟失重共育骨细胞OPG和BMP-2基因表达的影响,探讨其在失重条件下骨丢失骨代谢的影响及其作用机制。方法:体外分离培养成骨细胞和破骨细胞,建立成骨-破骨细胞共育体系,利用回转器建立骨细胞失重模型;共育骨细胞中加入不同浓度骨碎补总黄酮血清培养液,在模拟失重下,48 h后,检测ALP活性,用RT-PCR法检测OPG和BMP-2基因表达。结果:与正常对照组比较,失重模型组成骨细胞在回旋48 h后细胞培养液中的ALP活性显著降低(P0.05);与失重对照组比较,含药血清组ALP活性和OPG和BMP-2表达均显著升高(P0.05)。结论:利用共育骨细胞实验研究成骨细胞、破骨细胞相互作用及影响,中剂量骨碎补能有效提高失重下共育成骨细胞增殖及分化,与浓度相关。     

左归丸、右归丸对成骨细胞骨硬化蛋白的影响

目的:观察左归丸、右归丸对体外培养的成骨细胞骨硬化蛋白(Sclerostin)及β连环蛋白(β-catenin)表达的影响。方法:成年SD大鼠灌胃法获得左归丸、右归丸含药血清。体外培养SD乳鼠颅骨成骨细胞,取第3代细胞分对照组、左归丸组、右归丸组,各组含药血清培养后分别测细胞增殖、Sclerostin和β-catenin蛋白表达。结果:与对照组比较,右归丸组在5d、7d、9d时细胞明显增殖,左归丸组在7d、9d时细胞显著增殖(P<0.01),与左归丸组比较,右归丸组在5d时细胞明显增殖(P<0.05)。右归丸组在24h、48hSclerostin蛋白表达较对照组增高(P<0.05),左归丸组在24h较对照组减少(P<0.05)。与右归丸组相比,左归丸组在24h、48h Sclerostin蛋白表达显著下降(P<0.01)。右归丸组β-catenin蛋白表达在48h时较对照组有显著增高(P<0.05),左归丸组β-catenin蛋白表达在24h、48h均显著高于对照组(P<0.01)和右归丸组(P<0.05)。结论:右归丸、左归丸对成骨细胞均具有显著的促增殖作用,而右归丸较左归丸作用更明显。左归丸可能是通过抑制Sclerostin蛋白的表达发挥促成骨作用,右归丸无抑制Sclerostin蛋白表达作用。     

杜仲叶对SD大鼠成骨细胞增殖及骨钙素表达水平的影响

目的研究不同浓度杜仲叶提取物对成骨细胞增殖及骨钙素表达的影响。方法取新生SD大鼠(24~48 h,6只)通过酶消化法分离出乳鼠原代成骨细胞;用碱性磷酸酶染色进行成骨细胞鉴定;先用无血清无酚红培养基饥饿SD大鼠成骨细胞2h后,再给予五组浓度梯度杜仲提取物(0,1,10,50,100 mg/ml)对SD大鼠成骨细胞进行干预、其中以浓度为0 mg/ml设为对照组,继续培养48 h后用MTT方法检测细胞增殖情况;同上步骤,用Western bolt分别检测五组浓度杜仲叶影响骨钙素(OC)的表达水平。结果碱性磷酸酶染色后的SD大鼠成骨细胞呈紫红色;MTT法结果显示:与对照组相比,杜仲叶提取物对成骨细胞的增殖具有促进作用(P0.05),且具有浓度依赖性,其中浓度以50 mg/ml最为显著(P0.01)。Western bolt结果示各加药组与对照组比较,骨钙素蛋白表达水平均有显著的升高(P0.05),同时也具有一致的浓度依赖性。结论杜仲叶提取物通过影响骨钙素表达对成骨细胞增殖具有促进作用,并具有浓度依赖性。     

补肾活血方对大鼠骨折模型的愈合作用及对BMP-2、VEGF及TGF-β1表达的影响

目的观察补肾活血方对大鼠骨折模型的愈合作用及对骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、血管内皮生长因子(VEGF)及转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。方法将60只SPF级雄性SD骨折模型大鼠随机分为模型组、中药组和阳性组,模型组给予0.9%氯化钠注射液灌胃,中药组给予补肾活血方灌胃,阳性组给予伤科接骨片灌胃。分别于2周和4周后比较各组大鼠骨组织HE染色、血液流变学指标、ELISA法检测血清炎症因子表达水平和BMP-2、VEGF及转化生长因子β1表达水平,RT-PCR检测BMP-2、VEGF及转化生长因子β1mRNA表达水平。结果模型组骨组织可见破裂、不完整的软骨、纤维性骨痂、炎性细胞浸润、血管生成增多,少量骨小梁形成,大量成骨细胞和成软骨细胞,干预后中药组和阳性组炎性细胞减少,软骨形态有所恢复,纤维性骨痂、软骨细胞减少。干预后中药组和阳性组血浆黏度、全血黏度高切和红细胞聚集指数明显低于模型组,且第4周,中药组显著低于阳性组(P 0.05)。干预后中药组和阳性组血清IL-6和TNF-α水平明显低于模型组,IL-10水平明显高于模型组,且第4周,中药组显著低于阳性组(P 0.05)。干预后中药组和阳性组血清BMP-2、VEGF和TGF-β1及其骨组织mRNA水平明显高于模型组,中药组明显高于阳性组,第4周中药组和阳性组血清BMP-2和TGF-β1及其骨组织mRNA水平明显低于第2周,血清VEGF及其骨组织mRNA水平明显高于第2周(P 0.05)。结论补肾活血方可促进大鼠骨折模型的愈合,其机制可能与改善血液流变学指标,减轻炎症反应,提高BMP-2、VEGF和TGF-β1水平表达有关。     

通淋汤对尿毒症患者血管钙化因子BMP-2,OPG表达的影响

目的探究通淋汤对尿毒症患者血管钙化因子骨形态发生蛋白-2(BMP-2)和骨保护蛋白(OPG)表达的影响。方法将80例尿毒症患者随机分为对照组与观察组,每组40例。对照组给予血液透析等常规治疗,观察组在对照组基础上给予通淋汤口服治疗,观察2组治疗效果、用药安全性及治疗前后血清BMP-2、OPG水平及营养指标变化。结果治疗组显效率显著高于对照组(P<0.05)。治疗后,2组血清BMP-2、OPG水平均显著降低(P均<0.05),且观察组水平显著低于对照组(P均<0.05);2组前白蛋白、白蛋白、转铁蛋白、总胆固醇及血红蛋白水平均显著升高(P均<0.05),且观察组上述指标水平均显著高于对照组(P均<0.05)。2组均未发现明显不良反应。结论通淋汤治疗尿毒症患者有利于抑制血管钙化因子BMP-2、OPG表达,改善患者营养不良状况,且安全性好,值得推广应用。     

少阳生骨方含药血清对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

目的:探讨少阳生骨方对BMSCs成骨分化的影响,并初步探究其可能的作用机制。方法:以不同浓度少阳生骨方含药血清(0.035、0.07、0.14、0.28、0.56 g/mL)干预BMSCs,MTT法检测细胞增殖。将BMSCs分为少阳生骨方含药血清组(含药血清组)、对照组(无药血清组)、经典诱导组(阳性对照),碱性磷酸酶染色测定成骨活性,茜素红染色鉴定矿化结节形成,免疫组化检测各组中BMP-2、Runx2蛋白表达水平。结果:0.28、0.56 g/kg灌胃少阳生骨方含药血清对BMSCs有显著的促增殖作用(P0.05),少阳生骨方含药血清诱导7、14天能显著增加BMSCs碱性磷酸酶活性、矿化结节数及成骨相关蛋白BMP-2、Runx2阳性表达(P0.05)。结论:少阳生骨方能诱导BMSCs成骨分化,其机制可能与上调BMP-2、Runx2蛋白的表达有关。     

壮骨胶囊含药血清对小鼠成骨细胞增殖 及碱性磷酸酶、骨钙素合成的影响

目的观察壮骨胶囊含药血清对小鼠成骨细胞(MC3T3-E1细胞)增殖、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)合成的影响,探讨壮骨胶囊对骨代谢、骨形成机制的作用。方法壮骨胶囊由射干、白芍等组成。实验分为对照组、壮骨胶囊高、中、低剂量组(4.3、2.15、1.08 g生药/kg),给药组灌胃给予Wistar大鼠壮骨胶囊,对照组给于等体积水,连续给予7 d后,采血离心制备对照组空白血清及含药组血清;以小鼠成骨细胞MC3T3-E1为研究对象,用空白血清及含药血清处理体外培养的MC3T3-E1成骨细胞,采用CCK8法检测成骨细胞增殖能力,IFCC速率法测定ALP活性,酶联免疫法测定BGP分泌量。结果壮骨胶囊含药血清各剂量组对体外培养的MC3T3-E1细胞增殖有显著的促进作用,高、中剂量组48 h可促进成骨细胞增殖(同对照组比较,P 0.05),高、中、低剂量组72 h均能促进成骨细胞增殖(同对照组比较,P 0.01,P 0.05);高、中剂量组含药血清作用于MC3T3-E1细胞72 h后,ALP活性、BGP分泌量较对照组明显提高(P 0.01,P 0.05)。结论壮骨胶囊含药血清具有促进骨形成作用,这可能与其促进成骨细胞增殖,增加成骨细胞ALP的合成和BGP的分泌,从而改善骨代谢有关。     

加味除湿蠲痹汤联合椎弓根椎体截骨术治疗强直性脊柱炎后凸畸形湿热痹阻证的临床观察

目的:观察加味除湿蠲痹汤联合椎弓根椎体截骨术治疗强直性脊柱炎后凸畸形湿热痹阻证的临床疗效。方法:90例患者被随机分为对照组和观察组,各45例。对照组给予椎弓根椎体截骨术+雷公藤多苷,观察组给予椎弓根椎体截骨术+加味除湿蠲痹汤,疗程均为6个月。分别观察两组巴氏强直性脊柱炎病情活动指数(BASDAI),活动度衡量指数(BASMI),影像学指标,中医证候,血清促炎因子,抑炎因子,骨代谢指标[骨特异性碱性磷酸酶(BALP),抗酒石酸酸性磷酸酶异构体-5b(TRACP-5b),骨形态发生蛋白-2(BMP-2),骨钙素(BGP)],骨化相关蛋白[骨形态发生蛋白-7(BMP-7),Dickkopf相关蛋白-1(DKK-1),基质金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2),骨硬化蛋白(SOST)]。比较两组临床疗效,随访至少12个月复发率及安全性指标。结果:观察组总有效率97.73%(43/44),高于对照组的80.95%(34/42)(χ²=5.172,P<0.05)。治疗后与对照组比较,观察组BASDAI,BASMI,影像学指标,中医证候,促炎因子,TRACP-5b,BMP-7,TIMP-2水平明显降低(P<0.05),抑炎因子,BALP,BMP-2,BGP,DKK-1,SOST水平明显升高(P<0.05)。随访至少12个月,观察组复发率4.65%(2/43),低于对照组的26.47%(9/34)(χ²=4.261,P<0.05)。两组术后并发症发生率比较差异无统计学意义;观察组不良反应发生率2.27%(1/44),低于对照组的38.64%(17/44)(χ²=5.763,P<0.05)。结论:加味除湿蠲痹汤联合椎弓根椎体截骨术治疗强直性脊柱炎后凸畸形湿热痹阻证疗效明显。     

双骨三子胶囊联合补肾健骨胶囊治疗骨质疏松性骨折60例

目的:探讨双骨三子胶囊联合补肾健骨胶囊治疗骨质疏松性骨折的临床疗效及对碱性磷酸酶(ALP),骨钙素(BGP)和骨形态发生蛋白(BMP-2)的影响。方法:将118例患者随机按住院前后顺序分为对照组58例和观察组60例。对照组采用碳酸钙D3咀嚼片,0.6 g·d-1,女性绝经患者加用阿仑膦酸钠片,10 mg·d-1。观察组在对照组治疗的基础上加服双骨三子胶囊,3粒/次,3次/d,和补肾健骨胶囊,4粒/次,3次/d,口服。两组疗程均为6个月。记录骨折愈合时间和骨痂生长情况;评价治疗前后腰背部疼痛情况,测量治疗前后股骨颈的骨密度,检测治疗前后血清ALP,BGP和BMP-2水平。结果:经Ridit分析,观察组临床骨折愈合疗效优于对照组(P0.05);治疗后观察组股骨颈的骨密度高于对照组(P0.01),腰背部疼痛评分均低于对照组(P0.01);治疗后2月观察组骨痂生长情况评分高于对照组(P0.01);观察组平均骨折愈合时间为(10.4±2.2)周,短于对照组的(13.2±2.6)周(P0.01);治疗后观察组血清ALP水平低于对照组(P0.01),BGP和BMP-2水平高于对照组(P0.01)。结论:补肾健骨胶囊联合双骨三子胶囊治疗骨质疏松性骨折能促进骨折的愈合,缩短骨折愈合时间,增加骨密度,减轻疼痛,并能调节患者ALP,BGP,BMP-2水平。     

羊胎素对体外骨髓基质细胞的增殖和向成骨细胞分化的影响

目的探讨羊胎素对体外培养的SD大鼠骨髓基质细胞(Marrow Stroma Cells,MSCs)的影响。方法用MTT法检测MSCs的增殖;PNPP偶氮法检测MSCs碱性磷酸酶(ALP)的活性;细胞ALP染色观察成骨细胞的形成。结果在含羊胎素原液的0.625%,1.25%,2.5%和5%时对体外培养的SD大鼠MSCs有明显的促进增殖的作用(P<0.01);在含羊胎素原液的2.5%及5% 成骨诱导剂时,ALP的活性明显高于诱导剂对照组(P<0.05),而在含羊胎素原液的2.5%和5%浓度组,ALP的活性明显高于空白对照组及诱导剂对照组(P<0.001);细胞ALP染色呈强阳性,加药组颜色明显深于对照组和诱导剂对照组。结论羊胎素对体外培养的SD大鼠MSCs的增殖和向成骨细胞分化具有明显的促进作用。     

蓝光照射联合茵栀黄颗粒治疗新生儿黄疸的疗效观察及安全性分析

目的:分析蓝光照射联合茵栀黄颗粒治疗新生儿黄疸对血清γ-谷丙氨酰基转移酶、碱性磷酸酶的影响及安全性。方法:选取2016年1月至2018年12月吴江区第一人民医院收治的新生儿黄疸患儿100例作为研究对象,按照随机数字表法随机分为对照组和观察组,每组50例。对照组均单独予以蓝光照射治疗,观察组在对照组基础上加用茵栀黄颗粒进行联合治疗,比较2组临床疗效、血清γ-谷丙氨酰基转移酶水平、碱性磷酸酶水平以及不良反应发生率。结果:观察组临床疗效明显优于对照组,2组比较差异有统计学意义(P 0. 05);观察组血清γ-谷丙氨酰基转移酶水平、碱性磷酸酶表达水平明显低于对照组,2组比较差异有统计学意义(P 0. 05);观察组各类不良反应总发生率明显低于对照组,2组比较差异有统计学意义(P 0. 05)。结论:针对新生儿黄疸进行临床治疗时,蓝光照射联合茵栀黄颗粒的使用可明显提高临床疗效,改善血清γ-谷丙氨酰基转移酶水平、碱性磷酸酶水平,提高患儿临床治疗安全性,推广价值显著。     

Asperosaponin VI, a saponin component from Dipsacus asper wall, induces osteoblast differentiation through bone morphogenetic protein-2/p38 and extracellular signal-regulated kinase 1/2 pathway

Osteoporosis is a reduction in skeletal mass because of the loss of osteoblastic activity or an increase in osteoclastic activity. The survival of osteoblast cells plays a crucial role in the development of osteoporosis. Asperosaponin VI (ASA VI) is a kind of saponin in the medicinal herb Dipsacus asper Wall which has long been used as an antiosteoporosis drug. The assay of cell proliferation, alkaline phosphatase (ALP) activity and measurement of mineralized matrix, showed that ASA VI exhibited a significant induction of proliferation, differentiation and mineralization in MC3T3-E1 and primary osteoblastic cells. Induction of differentiation by ASA VI was associated with increased bone morphogenetic protein-2 (BMP-2), indicating that BMP-2 is essential in ASA VI to mediate osteoblast maturation and differentiation. In addition, ASA VI may induce differentiation by increasing the activity of p38 and ERK1/2. In conclusion, ASA VI may induce osteoblast maturation and differentiation, and then increase bone formation via increasing BMP-2 synthesis, and activating p38 and ERK1/2.     

葛根素对低氧高二氧化碳性肺动脉高压大鼠右心室Apelin/APJ系统的影响

目的 探讨葛根素防治慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压大鼠右心室肥大的效应是否与新的小分子活性肽Apelin及其受体(APJ)有关.方法 清洁级SD雄性大鼠30只,随机分为对照组、低氧高二氧化碳模型组和葛根素组.放免法测定血浆与右心室组织匀浆的Apelin-36水平,RT-PCR检测右心室组织Apelin与APJ mRNA表达.结果 右心室与左心室加室间隔的质量比[RV/(LV s)]:模型组明显高于对照组(P<0.01),而葛根素组明显低于模型组(P<0.01);平均肺动脉压(mPAP):模型组明显高于对照组(P<0.01),而葛根素组明显低于模型组(P<0.05);平均颈动脉压(mCAP)各组间比较无显著统计学意义(P>0.05).血浆Apelin-36水平:模型组明显高于对照组(P<0.01),葛根素组又高于模型组(P<0.05).右心室肌匀浆Apelin-36水平:模型组明显高于对照组(P<0.05),葛根素组又明显比模型组高(P<0.01).右心室肌Apelin mRNA水平:模型组明显低于对照组(P<0.05),而葛根素组显著高于模型组(P<0.01).右心室肌APJ mRNA:模型组低于对照组(P<0.05),而葛根素组高于模型组(P<0.05).结论 葛根素防治低氧高二氧化碳性肺动脉高压大鼠右心室肥大的机制可能部分与调节Apelin/APJ系统有关.     

启膈散与顺铂对食管癌细胞EC9706低氧下生长抑制及其miR-21,PDCD4和PTEN表达的影响

目的:观察低氧下启膈散和顺铂抑制食管癌细胞增殖的协同效应,从miR-21及其靶基因角度探讨其机制。方法:制备含药血清,噻唑蓝(MTT)比色法检测启膈散和顺铂单用或联合应用对食管癌细胞EC9706增殖的影响,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测启膈散和顺铂单用或两者联合应用对食管癌细胞miR-21,程序死亡蛋白4(PDCD4),磷酸酶和张力蛋白类似物(PTEN)mRNA表达的影响,免疫印迹法(Western blot)检测PDCD4,PTEN蛋白表达。结果:启膈散在浓度为8%,10%与1 mg·L-1顺铂合用具有协同作用,其两药相互作用系数(CDI)分别为0.90,0.94。顺铂高浓度组,联合高、低浓度组miRNA-21表达量明显低于空白组(P0.05);联合高、低浓度组miRNA-21表达量显著低于同浓度顺铂组(P0.01),且联合高浓度组低于联合低浓度组(P0.05)。顺铂高浓度、启膈散组PDCD4 mRNA表达量明显低于空白组(P0.05),而联合高、低浓度组PDCD4,PTEN mRNA表达量明显高于空白组(P0.05);联合高、低浓度组PDCD4,PTEN mRNA明显高于同浓度顺铂组(P0.01),且联合高浓度组PTEN mRNA表达高于联合低浓度组(P0.01)。与空白组比较,联合高、低浓度组PTEN蛋白表达明显升高(P0.05),且联合高、低浓度组PTEN蛋白显著高于同浓度顺铂组(P0.01);顺铂高、低浓度组,联合高、低浓度组PDCD4明显高于空白组(P0.05),联合高浓度组明显高于同浓度顺铂组和联合低浓度组(P0.05,P0.01)。结论:启膈散含药血清和顺铂在抑制食管癌细胞EC9706增殖方面具有协同作用,其机制可能与通过抑制miR-21表达从而升高PDCD4和PTEN基因表达相关。     

淫羊藿总黄酮对成骨细胞增殖的影响

为探索中药淫羊藿防治骨质疏松症的作用机理，采用血清细胞培养的方法，观察淫羊藿总黄酮对动物成骨细胞增殖的影响。结果显示淫羊藿总黄酮能明显促进成骨细胞数量增殖(P＜0．05)，增加碱性磷酸酶活性(P＜0．01)，降低培养基中钙含量(P＜0．05)。由此推测淫羊藿具有较强的防治骨质疏松症的作用。     

淫羊藿苷对骨髓间充质干细胞骨向诱导的实验研究

目的通过研究淫羊藿苷(icariin,ICA)对骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BM-SCs)增殖和骨向分化能力的影响,并观察其促BMSCs骨向分化过程中对细胞因子转化生长因子β1(TGF-β1)、骨形成蛋白-2(BMP-2)表达的影响,分析可能的作用途径,为阐释其防治骨质疏松(osteoporosis,OP)的作用机理提供实验依据,并为以TGF-β1、BMP-2作为筛选防治OP药物进行实验研究。方法以碱性磷酸酶(ALP)等指标确定干预药物不同浓度梯度中最佳促BMSCs骨向分化剂量;分组实验,通过检测诱导分化过程中ALP和钙化结节等指标的表达,来观察其对BMSCs骨向分化能力的影响;采用ELISA法检测骨向分化过程中TGF-β1、BMP-2的表达。结果(1)ICA最佳促BMSCs骨向分化浓度为1×10-9mol/L。ICA10-9组能促进成骨指标的表达和TGF-β1和BMP-2分泌增加;(2)能促BMSCs骨向分化能力的ICA各诱导组均伴随TGF-β1和BMP-2分泌增加。结论ICA能促进BMSCs骨向分化;在BMSCs骨向分化过程中,上调TGF-β、BMP-2的表达量可能是各干预药物促进BMSCs骨向分化的作用机制之一。     

人参皂苷Rg5调控lncRNA-PCAT12抑制胃癌细胞生长实验研究

目的:探讨人参皂苷Rg5通过抑制长链非编码RNA-PCAT12(lncRNA-PCAT12)抑制胃癌(GC)细胞增殖与迁移的价值。方法:对数生长期的人胃癌SNU-1 细胞分为四组,A组,B组与C组加入0.03,0.06,0.09 μmol/L Rg5处理,对照组加入5% DMSO进行处理。MTT法检测细胞增殖、双染法检测细胞凋亡、划痕实验检测细胞迁移、实时定量PCR检测lncRNA-PCAT12表达。结果:处理后24、48、72 h,对照组中lncRNA-PCAT12表达水平和癌细胞增殖指数高于各实验组(P<0.05),C组均低于B组与A组(P<0.05)。实验各组细胞凋亡率均比对照组高(P<0.05),C组比B组与A组高(P<0.05)。转染48 h后,实验各组细胞迁移距离都小于对照组(P<0.05),而C组小于其他两个实验组(P<0.05)。结论:人参皂苷Rg5能通过抑制lncRNA-PCAT12的表达,且高浓度的效果更显著,可通过抑制GC细胞增殖与迁移,促进其凋亡,从而发挥抑癌作用。