燕窝鉴别中的蛋白质电泳研究

目的：探讨SDS-PAGE和等电聚焦电泳应用于燕窝蛋白分离及燕窝鉴定中的可行性。方法：提取印尼燕窝、怀集燕窝及常作为伪品的明胶、银耳、猪皮的蛋白质,进行SDS-PAGE和等电聚焦电泳研究。结果：印尼燕窝与怀集燕窝在SDS-PAGE图谱上可见明显差异,而明胶、银耳和猪皮等伪品可见特征性蛋白条带。燕窝蛋白经等电聚焦电泳可见清晰的蛋白条带,且主要集中于酸性端。结论：SDS-PAGE和等电聚焦电泳均可获得燕窝蛋白质的特征性电泳图谱,用于鉴别不同品种燕窝及掺伪燕窝是可行的。     

采用聚丙烯酰氨凝胶电泳技术鉴别龟甲及其混伪品

目的:从蛋白水平上对龟甲药材及其混伪品进行鉴别,分析龟甲及其混伪品的差异。方法:本研究采用聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)技术对龟甲及其混伪品进行鉴别,并对龟甲的背甲与腹甲、不同批次正品龟甲药材进行对比分析。结果:对于同一品种的龟甲,其背甲与腹甲的蛋白质亚基相似,电泳得到的蛋白质条带几乎无明显差别;不同批次正品龟甲在一维电泳中显现出的蛋白亚基条带差异性很小,其电泳蛋白条带受产地、批次等因素影响较小;正品龟甲在14～19 kDa,有3条高丰度蛋白聚合在一起,这"二细一粗三聚合"的条带群,可以作为鉴别正品龟甲和其他龟甲混伪品的初步依据。结论:结果显示,SDS-PAGE电泳技术可以对龟甲及其混伪品药材进行初步的鉴别,利用蛋白条带的区别可对其进行区分。     

基于差异蛋白质鉴别僵蚕及其新型伪品

目的通过总蛋白含量、可溶性蛋白含量差异以及应用SDS-PAGE蛋白质电泳寻找差异蛋白质来鉴别僵蚕与伪品黑死蚕、空心僵蚕。方法采用SDS-PAGE法对僵蚕真品与伪品差异蛋白条带进行鉴别。结果发现僵蚕总蛋白含量不低于60.00%,可溶性蛋白含量不低于4.29%,伪品远低于上述指标,可作为僵蚕质量评价的检查项指标,辅助鉴别僵蚕与其伪品;僵蚕特有差异蛋白质(SP)的有无和含量差异,可有效鉴别上述两种新型伪品。结论本研究初步建立基于差异蛋白质的僵蚕真伪鉴别新方法,为下一步完善僵蚕质量标准,以及僵蚕的质量控制提供科学的依据。     

东南亚进口燕窝紫外光谱鉴别研究

目的探索进口燕窝真假鉴定技术。方法采用紫外光谱法鉴定燕窝真假。结果燕窝在(276±2)nm有特征波峰,(257±3)nm有特征波谷,A峰/A谷均在1.05~1.15范围内。银耳、猪皮等伪品均不具备燕窝的紫外光谱特征。结论紫外光谱法可用于鉴别进口燕窝真假。     

25种燕窝样品中唾液酸含量的测定与分析

目的: 研究分析燕窝样品中唾液酸的含量与品种的相关性,为燕窝质控提供参考。方法: HPLC测定燕窝样品中唾液酸的含量,以邻苯二胺盐酸盐为衍生化试剂,流动相乙腈-水(15:85),流速1.0 mL·min^-1,检测波长230 nm。结果: 25种燕窝中水分含量范围在9.13%~17.58%,唾液酸的含量范围在3.59%~15.22%。经实验方法检测,银耳、猪皮等伪品的唾液酸含量为零。结论: 该法简便、可靠、准确,可用于燕窝与银耳、猪皮等伪品区分的辅助手段;初步的数据显示,虽然白燕、血燕、黄燕中唾液酸的含量无显著性差异,但可为进一步的燕窝质量优劣研究提供参考。     

中国产燕窝总氮及氨基酸含量分析

对广东怀集、云南、海南等地产燕窝总氮量及氨基酸含量等进行分析,同时以印尼产燕窝对照,结果,两者含量相近。结论:中国产燕窝具有良好开发利用价值。     

利用不同电泳技术对东亚蝎毒素ITX 蛋白组分分离的研究

目的 :初步建立蝎毒素ITX(Immunotoxin)蛋白组分的电泳分离方法和蛋白质组表达谱。 方法 :阴极电泳(T=18%,C=6%)对蝎毒进行分离,Bio-Rad Quantity-one电泳软件分析条带;双向电泳技术:第一向为固相pH梯度等电聚焦,第二向电泳为垂直平板SDS-PAGE(T=18%)。在以上过程中分别对上样方式、等电聚焦程序等条件进行优化控制,利用PDQ7.1软件分析获得二维凝胶图像。 结果 :阴极电泳图谱显示蝎毒素ITX由7个蛋白组分组成;二维凝胶图谱显示蝎毒素ITX包含相对分子质量相同(约为5.8×10³)而等电点不同9种蛋白组分,其中酸性蛋白质4种,碱性蛋白质5种。 结论 :通过各种条件的优化,初步建立了ITX的阴极电泳和双向电泳方法,获得了分辨率和重复性较好的阴极电泳图谱和二维凝胶图谱。     

三种伪品燕窝的鉴别

<正> 燕窝为雨燕科动物金丝燕属金丝燕Gouocaliaesculente L 及多种同属燕类,用吐出的唾液并带有少量羽绒毛混合凝结于悬崖哨壁所筑成的窝巢。又称燕窝菜、燕蔬菜、燕菜、燕根等。主含各种蛋白质,十多种氨基酸和多糖类成分。其性味甘平。归肺、胃、肾经。有养阴润燥,益气补中,化痰止咳之功效。主产于印尼、泰国、缅甸、日本等;我国福建、广东沿海等地亦有多量出产。 由于本品货源紧缺,一些不法商贩造假坑害消费者。近年,我们收到燕窝检品五种,经检验有三种系伪品。伪品(1)掺有白银耳和明胶,伪品(2)为浮皮,伪品(3)为未确定药材。现将三种伪品与正品进行对照鉴定。 1 性状鉴别 正品:呈黄白色、灰黄色或棕黄色不整齐的半月形,长约6.3～10cm,宽3～5cm中间凹陷成窝,附于岩石一侧平坦。表面粘液凝成的扁条状物,较整齐地顺行而又互相交叉地排列呈丝瓜络状。质硬而脆,半透明、角质状。用水浸泡后柔软,膨胀约3～5倍,咀嚼爽口,气微,味微咸。     

FTIR结合化学计量学法鉴别燕窝的真伪

目的建立红外光谱结合化学计量学法鉴别燕窝的真伪。方法采用傅立叶红外变换光谱法(FTIR)采集28个不同产地血燕、白燕、黄燕窝及6个猪皮、银耳赝品的红外图谱,并应用SIMCA-P+12.0、SPSS 16.0对其数据进行聚类分析,考察不同样品间的区分程度。结果不同品种燕窝均有非常相似的红外特征图谱,结合主成分和聚类分析,可将28个真品燕窝与6个伪品完全区分开。结论该方法能简便、快速、无损地鉴别燕窝的真伪。     

阿胶及其伪品的IFE研究

应用等电聚焦电泳（Isoelectricfocusingelectrophoresis简称IFE）技术，对阿胶及其伪品进行鉴别分析。结果表明，清晰的电泳谱带既可用于鉴别药材真伪，也可用于确定样品所含主要蛋白质的等电点（PI），从而为中药材及其制剂的鉴别、产生、贮藏提供定量参考数据。     

体视镜在燕窝鉴别中的应用

目的:研究体视镜在燕窝鉴别中的可行性。方法:观察白燕碎、血燕盏、银耳碎及涂胶白燕盏在体视镜下的特征区别。结果:体视镜可区分燕窝碎与伪品银耳,主要区别在于两者的透明度及表面纹理:体视镜还可根据燕窝的表面纹理及绒羽的存在状态识别出涂胶燕窝。讨论:体视镜可用于燕窝的鉴别,尤适于在研究初期对大量商品作普查时使用。     

不同寄主的管花肉苁蓉可溶性蛋白的电泳分析

目的:对5个管花肉苁蓉材料进行鉴别,探索可溶性蛋白电泳指纹图谱与鉴定之间的关系,同时为建立中药材电泳图谱库提供材料。方法:研究了不同寄主的5个管花肉苁蓉材料的可溶性蛋白在SDS-PAGE条件下的电泳特性。结果:不同寄主的管花肉苁蓉可溶性蛋白的SDS-PAGE图谱分辨率高,重现性强,其多态性条带为55.56%。结论:各个材料的电泳图谱可以相互区别。不同寄主管花肉苁蓉可溶性蛋白的SDS-PAGE图谱可作为种间鉴定的依据。     

基于ND2基因序列的燕窝DNA条形码鉴别

目的:利用DNA条形码鉴定技术,快速、准确地鉴别不同种类及产地的燕窝,为该药材的质量评价提供参考。方法:提取不同产地及品种燕窝的DNA,对烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氧酶亚单位2(ND2)部分序列进行扩增和测序,利用软件MEGA6.0进行序列比对,分析变异位点,计算Kimura-2参数遗传距离,构建邻接(neighbor-joining,NJ)系统发育树。结果:NJ系统发育树显示31个官燕窝样品均与爪哇金丝燕Aerodramus fuciphagus聚为1支;1个毛燕窝样品与大金丝燕A.maximus聚为1支。但官燕窝中经细胞色素b(Cytb)鉴定生物基原为爪哇金丝燕亚种(淡腰金丝燕A.fuciphagus germani)的8个样品单独聚为1支,支持率82%,并在该段ND2序列表现为2个位点的差异,表明该段ND2序列可鉴别爪哇金丝燕的亚种。结论:ND2条形码可用于快速、准确地鉴别燕窝的生物基原。     

肉苁蓉属4种肉苁蓉可溶性蛋白的SDS-PAGE电泳分析

目的对肉苁蓉属4个种进行鉴别。方法采用可溶性蛋白质SDS-PAGE凝胶电泳。结果肉苁蓉属4个种的SDS-PAGE图谱存在显著差异,其多态性条带为81.82%。结论各个种的电泳图谱可以相互区别,肉苁蓉属可溶性蛋白的SDS-PAGE图谱可作为种间鉴定的蛋白指纹图谱。     

Proteins: Neglected active ingredients in edible bird's nest

Edible bird’s nest (EBN) is a kind of natural invigorant with a long history of consumption in Asia, especially in China. EBN is formed by mixing the saliva of swiftlets (Aerodramus) with feathers and other components during the breeding season. Proteins are the most important nutrient in EBN. By studying proteins in EBN, we can not only elucidate their components at the molecular level, but also study their bioactivities. Therefore, it is of great significance to study the proteins in EBN. Previous research on the proteins in EBN was preliminary and cursory, and no one has summarized and analyzed the proteins in EBN and correlated the bioactivities of these proteins with the biological functions of EBN. This article focused on the proteins in EBN, listed the proteins identified in different proteomic studies, and introduced the sources, structures and bioactivities of the most frequently identified proteins, including acidic mammalian chitinase, lysyl oxidase homolog 3, mucin-5AC, ovoinhibitor, nucleobindin-2, calcium-binding protein (MW: 4.5 × 104) and glucose-regulated protein (MW: 7.8 × 104). The properties of these proteins are closely related to the bioactivities of EBN. Therefore, this article can provide inspiration for further research on the efficacy of EBN.     

SDS─PAGE测定青葙子及其混淆品蛋白质分子量

应用SDS—PAGE技术对青葙子及混淆品苋菜子、鸡冠花种子的蛋白质进行了对比分析研究，结果表明，它们蛋白质的SDS—PAGE图谱存在明显差异，并由此确定了各样品特征蛋白质的分子量，此值可作为鉴别青葙子及混淆品的定量参考数据。     

燕窝DNA提取方法研究

燕窝为宜药宜膳的珍贵药材,其质量与产地和出产环境密切相关。现有的燕窝鉴别方法可在一定程度上鉴别燕窝与其伪品,但无法确定燕窝的基原和产地等质量问题。DNA分子标记技术可以有效地解决这个难题,即从燕窝中得到高质量的DNA以用于后序的PCR和测序。由于燕窝中存在较多内源及外源性污染,其DNA提取技术的难点主要在于摆脱燕窝中的唾液酸糖蛋白干扰和外源性DNA的污染。本文针对燕窝DNA提取方法的优化进行了研究,采用高盐的SDS裂解燕窝样品,氯仿和CTAB去蛋白,低温异丙醇沉淀DNA技术。成功建立了一种简便、高效、稳定的燕窝DNA提取方法。采用本法得到的燕窝DNA可以成功用于燕窝遗传树的建立,而相关燕窝的基原也从而得到了确定。     

SDS-PAGE鉴别金钱白花蛇及其混伪品

应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ技术对金钱白花蛇（Ｂｕｎｇａｒｕｓ ｍｕｌｔｉｃｉｎｃｔｕｓ ｍｕｌｔｉｃｉｎｃｔｕｓ）及其混伪品水赤链游蛇（Ｎａｔｒｉｘ ａｎｎｕｌａｒｉｓ）的蛋白质成分进行分析,结果表明,它们的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ图谱存在明显差异,并由此确定了二者蛋白质成分的分子量,为金钱白花蛇的鉴别提供了依据。     

马鹿茸的X射线衍射Fourier指纹图谱鉴定

目的:建立中药材马鹿茸的鉴定分析新方法.方法:采用粉末X射线衍射Fourier指纹图谱鉴定法.结果:通过应用粉末X射线衍射Fourier指纹图谱鉴定法对3个马鹿茸和1个花鹿茸中药材进行分析鉴定,获得了马鹿茸的对照X射线衍射Fourier指纹图谱及特征标记峰值.结论:表明X射线衍射Fourier指纹图谱鉴定法可用于中药材马鹿茸的鉴定.