生物化学和分子生物学检验与临床

骨转换生化指标在诊断原发性肺癌骨转移中的应用;乳腺癌血清蛋白质组与尿代谢物组协同分析研究;蛋白芯片技术筛选肝癌血清标志蛋白的初步研究[编者按]     

河南食管癌高发区同一患者食管癌手术前后血清蛋白质组变化分析

目的应用双向电泳和质谱技术分析食管癌患者手术前后血清中蛋白质变化情况，寻找用于食管癌早期诊断的特异标志物。方法双向电泳分离正常人及食管癌患者手术前后血清总蛋白，银染显色；ImageMaster2．DE软件分析得到其蛋白表达谱。结果正常人及食管癌患者手术前后血清电泳平均筛选出的蛋白点数目分别为655、662、677；术前组与正常对照组蛋白点的密度和分布差异不明显，术后组与术前及正常组比较发现7个蛋白点存在明显差异：6个蛋白点表达上调，1个蛋白点表达下调。选取其中3个蛋白点进行MALDI-TOF-MS鉴定，结果显示此3个点的蛋白分别为血清淀粉样蛋白-A、血清淀粉样蛋白和触珠蛋白。结论血清淀粉样蛋白-A、触珠蛋白等可能与食管癌变和／或肿瘤手术本身有一定的相关性，它们与食管癌变的关系尚需更多的研究来证实；本研究为食管癌血清蛋白质组图谱的建立提供了有益的信息资料。     

血清蛋白质组图谱的检测与识别是否有望成为临床癌症早期诊断的新方法？

使用蛋白质质谱技术发现可以早期确诊组织癌变的新肿瘤标记物是近年来癌症蛋白质组学研究的一个重要方向。高通量的蛋白质质谱技术的发展不仅为人们在蛋白质水平上全面了解组织癌变的分子机理提供了物质基础，也加速了组织特异的血清肿瘤标记物的发现。最近出现的基于蛋白芯片（ProteinChip）的SELDI-TOF质谱巧妙地将色谱分离和蛋白质谱两技术结合为一体，使其可以快速地分析各种生物样品中蛋白质组的组成。基于器官组织的生理状态变化会引起血清蛋白质组的改变的理论，人们试图使用SELDI-TOF质谱来检测组织特异的血清蛋白质组图谱，进而实现癌症的早期诊断。该技术已在前列腺癌、卵巢癌和乳腺癌的诊断研究中取得令人侧目的进展。作为一项引人关注的新型技术，它同时也引发了热烈的学术辩论。本文围绕SELDI-TOF技术原理、其在肿瘤标记物发现研究中的应用，使用血清蛋白质组图谱诊断癌症的研究进展和与其有关的学术辩论作简要综述。     

乙型病毒性肝炎、原发性肝细胞癌患者血清代谢组学研究

目的研究乙型病毒性肝炎、原发性肝细胞癌(HCC)患者及健康体检者代谢物变化。方法收集49例HCC、29例乙型肝炎DNA阴性、26例乙型肝炎DNA阳性患者血清作为病例组,收集46例健康体检者血清作为对照组,采用AvanceⅡ-600MHz核磁共振仪检测血清中小分子代谢产物,通过聚类分析筛选出各组的特征代谢物。结果与对照组比较,乙型肝炎DNA阴性组患者血清中有12种代谢物质差异有统计学意义(P0.05),乙型肝炎DNA阳性组患者血清中有15种代谢物质差异有统计学意义(P0.05);肝癌组患者血清中有21中代谢物质差异有统计学意义(P0.05),其中苯乙尿酸水平上升,其他代谢物下降。与DNA阳性组比较,乙型肝炎DNA阴性组患者血清中有14种代谢物质差异有统计学意义(P0.05)。结论核磁共振氢谱可有效筛查出2型肝炎、HCC患者之间有显著差异的血清代谢物,在无创诊断HCC方面具有广阔的应用前景。     

基于质谱技术应用CLINPROT系统建立乳腺癌诊断模型

目的应用液体蛋白芯片-飞行时间质谱技术(CLINPROT)系统筛选乳腺肿瘤患者血清中潜在的肿瘤标志物,并基于差异蛋白建立乳腺癌诊断预测模型。方法收集病理确诊的乳腺癌患者血清标本43例及健康女性血清标本24例,并随机分为建模组和验证组。应用ClinProt Tools系统对建模组中的乳腺癌患者和健康女性血清进行差异蛋白的筛选,建立差异蛋白质图谱,应用ClinProTools v3.0软件建立乳腺癌诊断预测模型,而后利用该诊断模型对验证组血清标本进行分组验证,初步评估该模型的诊断效能。结果通过分析病例组和对照组质谱峰信息,得到24个具有明显差异的蛋白峰(P0.05)。根据遗传算法选取表达差异最显著的3个蛋白质建立乳腺癌诊断预测模型,该模型对建模组乳腺癌的识别能力为91.67%。后利用验证组标本对该模型的诊断效能进行评估,结果显示其对验证组乳腺癌识别准确率为85.7%。结论利用ClinProt Tools v3.0软件成功建立并评估了乳腺癌诊断预测模型,为乳腺癌诊断提供了新的途径。     

代谢组学对急性心力衰竭患者诊断价值的研究

目的通过代谢组学方法分析急性心力衰竭(acute heart failure,AHF)患者与对照组代谢组学差异,寻找新的代谢标志物,并对其诊断的价值进行验证。方法本研究为单中心病例对照研究。纳入人群为2018年01月至2019年06月河南省人民医院急诊入院的89例AHF患者,对照组为年龄、性别进行匹配的80例同期无心衰和舒张功能障碍人群。收集研究对象空腹股动脉血样本,进行定性定量处理,建立正交偏最小二乘方-判别分析模型,进行代谢物的诊断分析。结果与对照组相比,AHF组更多伴有冠心病、高血压、糖尿病、房颤、吸烟史,肌酐、尿素、脑利钠肽(B-type Natriuretic Peptide,BNP)、心率水平偏高,左室射血分数、血钠、白蛋白水平偏低。对AHF和对照组进行代谢物分析,发现两组代谢差异显著,其中腺嘌呤、N乙酰-L-谷氨酸、假尿苷、γ-谷氨酰半胱氨酸对AHF的诊断具有一定的价值,诊断AHF的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.995、0.932、0.920、0.900,BNP诊断AHF的AUC值为0.978。结论AHF组和对照组代谢存在显著差异,差异代谢物涉及多种物质;与BNP相比,腺嘌呤、N乙酰-L-谷氨酸、假尿苷、γ-谷氨酰半胱氨酸对AHF具有相似的诊断价值。     

唾液蛋白指纹图谱在乳腺癌诊断中的应用

目的:检测乳腺癌患者唾液蛋白质,筛选特异的蛋白质标记物,构建用于乳腺癌早期诊断的唾液蛋白质指纹图谱模型。方法:应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术测定91例唾液标本(其中乳腺癌47例,健康人44例)的蛋白质质谱,建立乳腺癌诊断模型。结果:乳腺癌患者与健康对照样本检测到311个蛋白质峰,其中32个蛋白质峰在两组间差异有统计学意义。获得分子量为4849.31,5224.96,3439.02和3559.89Da4个蛋白质组成的模板,可将乳腺癌与正常人正确分组,47例乳腺癌有37例被准确诊断,34例健康人被准确排除,灵敏度78.7%(37/47);特异度为77.2%(34/44)。结论:表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术建立乳腺癌癌唾液蛋白质指纹图谱模型为早期筛查及诊断乳腺癌提供了一种特异性强、敏感性高的新方法,值得进一步研究和应用。     

血清蛋白组学的最新研究以及应用现状

目的：了解可应用于疾病早期诊断、病程检测以及药物筛选等方面的血清蛋白组学技术的最新进展与应用现状。资料来源：检索Medline1995-01／2005-03与血清蛋白组学技术与应用相关的文章。检索词“proteomics，serum”，并限定文章语言种类为英文。同时检索万方数据库2002-01／2004—12关于血清蛋白组学技术与应用文章，限定文章语言种类为中文，检索词“蛋白质组，血清”。资料选择：选取关于血清蛋白组学技术及应用的相关文献。纳入标准为：①随机对照研究。②实验或临床研究包含平行对照组。排除重复性研究和综述类文章。资料提炼：收集到81篇关于血清蛋白组学及应用的文章。17篇符合纳入标准，排除的64篇为重复性研究和综述类文章。资料综合：蛋白质组是对蛋白质表达模式和对蛋白质功能模式的研究。①二维凝胶电泳是血清蛋白质组学中的重要技术，它的分离能力强．目前采用固相化的pH梯度提高了对蛋白质分析的盲区（疏水性强、低丰度、低分子量蛋白质）检出。②多维液相分离技术可检出在二维凝胶电泳前处理中丢失的蛋白。同时可对蛋白质分析的盲区分离分析。易获得完整蛋白质且直接用于质谱分析。但其分离能力还不高。③基质辅助激光解吸电离／飞行时间质谱测量法和电子喷雾电离质谱测量法是常用的生物质谱，常于其他技术联用分析。但很难区分同源性极高的蛋白。④蛋白质芯片与表面增强的激光解吸离子化质谱技术与飞行质谱相结合，可用于对血清及组织粗样品中的蛋白质直接进行检测。⑤蛋白质芯片在临床研究方面的应用进展最快。但在保持所有蛋白质的活性及构象。模拟体内蛋白质与其他生物大分子的相互作用等还需要技术方面的突破。⑥生物信息学是蛋白质组研究不可缺少的技术。通过比较质谱分析结果与蛋白质数据库中的氨基酸序列可实现蛋白质的鉴定。结论：①血清中的蛋白质常常是疾病的诊断标志，是获得生物标志分子的丰富资源之一。②血清蛋白质组学技术进一步发展，有助于了解蛋白质结构、功能和复杂的信号传导，揭示健康与疾病状态下细胞内的蛋白质组的变化。③二维凝胶电泳、多维液相分离系统、蛋白质芯片等研究技术均存在一定的局限性，而多种技术的联合应用。相互补充，将会极大地促进分子生物学领域的发展。     

蛋白质组技术研究人血清功能蛋白质的新进展

在人血清蛋白质组的组成、结构与功能研究领域中,目前已拓展一种较为完善的非在线双向凝胶电泳分离与质谱鉴定联用分析技术，可同时鉴定人血清中490种蛋白质，使医学科学家从当初对人血清单个蛋白质结构与功能的研究模式跨入对人血清蛋白质组研究的新阶段。     

肺癌血清蛋白质指纹图谱诊断模型的建立

目的建立肺癌血清蛋白质指纹图谱诊断模型,探讨其对肺癌的诊断价值。方法收集127例肺癌患者、108例正常人血清标本,随机分成训练组(肺癌89例、正常人68例)与测试组(肺癌38例、正常人40例),应用表面增强激光解吸/电离-飞行时间-质谱(SELDI-TOF-MS)检测其蛋白质指纹图谱。用BioMarker Pattern软件分析训练组中肺癌与正常人血清中的差异蛋白后,建立肺癌诊断的最优分类树模型,然后用测试组血清标本盲法验证该模型的诊断效率。结果分类树诊断模型由质荷比分别为5 808、5 971和7 780的3种蛋白质组成。盲法验证显示,该模型诊断肺癌的准确率为92.3%,敏感性与特异性分别为92.1%(35/38)和92.5%(37/40)。结论肺癌血清蛋白质指纹图谱诊断模型较以往的传统方法具有更高的敏感性与特异性,值得进一步研究。     

产科新生儿不同部位经皮测黄报警预值的可靠性观察

目的对比观察产科新生儿不同部位经皮胆红素（TCB）报警预值的可靠性。方法132例产科新生儿采取随机数字分组法分为正常产组和剖宫产组各66例,新生儿均于产后第4天同一时间点应用KJ8000经皮测黄仪分别测量额、胸、腹、额胸、额胸腹TCB值,TCB〉12．9mg／dl者,取得亲属同意抽取静脉血检测血清胆红素（SB）,对比分析不同部位TCB及其与sB值的差异。结果两组分别有17例或21例达到TCB报警预值。两组TCB或sB相同方法及相同部位比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;两组TCB不同部位对比,额部值最低、胸部值最高,且与其他部位同组对比差异均有统计学意义（P〈0．01）;两组sB值对比差异无统计学意义（t=1．53,P〉0．05）,与不同部位TCB对比均以胸部数值差异无统计学意义（P〉0．05）,而与其他部位TCB两组差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论正常产与剖宫产新生儿术后sB对比差异无意义;TCB动态监测以胸部结果更接近SB。     

韶关市农村留守儿童孤独感状况调查

目的了解广东省韶关市农村地区留守儿童孤独感现状及其影响因素。方法对韶关市某地区两所农村小学3～6年级学生中的489名留守儿童采用儿童孤独量表和自编调查表进行问卷调查。结果17．6％留守儿童存在孤独感，不同性别孤独感发生率无差异性，不同年龄及不同年级间孤独感发生率差异均有极显著性（P〈0.01）；随年级增加，孤独感发生率呈下降趋势（X^2趋势=5．970，P〈0.05）。留守儿童孤独感与健康状况、学习成绩、学习困难程度、父母教育方式、父母间关系和老师教育方式等因素显著相关（P〈0.01～0．05）。结论农村地区留守儿童中存在一定程度的孤独感问题，老师和家长应以正确的态度和方法对待留守儿童，以减少其孤独感的发生。     

超声评价放疗对颈动脉溃疡斑块形成的影响

目的 探讨超声在评价放疗对颈动脉溃疡斑块形成的影响的价值。方法 回顾性收集经病理学证实为头颈部肿瘤、放疗前后的颈动脉超声资料以及其他基线资料完整的患者93例,比较放疗前后放疗侧颈动脉和非放疗侧颈动脉粥样硬化斑块和溃疡斑块的总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积。结果 放疗前后颈动脉超声检查的平均间隔时间为（6.1±1.9）年;放疗前放疗侧斑块总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、溃疡斑块的总数量、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积与非放疗侧比较差异均无统计学意义（P均>0.05）;放疗后放疗侧斑块总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、溃疡斑块的总数量、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积均较非放疗侧加重,差异有统计学意义（P均<0.05）。结论 放疗可导致头颈部肿瘤患者颈动脉粥样硬化斑块的形成和进展,且斑块具有易损性特点。     

护理干预对提高中风患者生活质量的效果观察

目的探讨提高中风患者生活质量的护理方法。方法将50例中风患者随机分为对照组23例和实验组27例,对照组给予针灸内科常规护理,实验组在此基础上给予心理护理和康复训练。结果两组患者治疗护理后日常生活活动(ADL)能力和贝克抑郁量表(BDI)评分均有好转,但实验组疗效明显优于对照组(P<0.05)。结论实施针对性心理护理和康复训练可明显提高中风患者的治疗效果。     

中国人四肢瘫日常生活能力评定量表的信度研究

目的研究四肢瘫日常生活能力评定量表评测四肢瘫患者的重测信度及观察者间信度。方法由1位评定者应用四肢瘫日常生活能力评定量表对20例四肢瘫患者进行评定,评定后1周内再次对该患者进行评定;另1位评定者在第1位评定者初次评定后2 d内对该患者进行评定。结果第1位评定者两次评定总分的组内相关系数为0.994(P<0.01);第1位评定者与第2位评定者评定总分的组内相关系数为0.971(P<0.01)。结论四肢瘫日常生活能力评定量表具有良好的重测信度及观察者间信度。     

肇庆市居民颈椎病流行病学调查

目的 :调查肇庆市居民颈椎病发病情况及相关问题。方法 :通过分层随机抽样选择该市区18～70岁居民5000人为研究对象 ,入户或至单位询问调查。结果 :该市居民颈椎病发病率为8.11% ,男女差异无显著性 ,随着年龄的增长 ,发病率逐渐增加。经多因素分析 :体位姿势不正确、情绪紧张、潮湿、疲劳是发病的主要诱因。结论 :该病严重影响肇庆市居民的健康 ,做好防治应从早做起 ,综合防治。     

31例误诊哮喘原因分析

目的通过对中央气道不全性梗阻和支气管结核、术后痰栓形成误诊为支气管哮喘的分析,探讨误诊原因及正确诊断的方法。方法对误诊为支气管哮喘的3l例患者的临床资料进行分析。结果临床特征以刺激性咳嗽为主,其次为活动后胸闷、气促,肺部闻及哮鸣音,胸部影像学多无特征性改变或极易漏诊,支气管舒张试验阳性率低,诊断前缺乏气管镜及病理检查,均误诊为支气管哮喘。结论中央气道不全梗阻性病变或炎性病变包括支气管结核、术后痰栓形成时原发疾病症状不典型,肺部影像学检查无异常表现或极易漏诊,故该类以表现为咳嗽、喘息、活动后胸闷,进而出现严重呼吸困难的患者常被误诊为支气管哮喘,延误诊治。支气管镜及病理检查再结合肺CT是鉴别诊断的重要方法。     

血液透析患者家庭护理提供者的生活质量调查

目的:了解江汉油田血液透析(血液透析)患者家庭护理提供者(护理者)的生活质量。方法:对60例血液透析患者的家庭护理提供者进行一般情况和生活质量综合评定问卷(QOLI-74)调查,并进行相关性和多因素回归分析。结果:家庭护理提供者各维度的主观生活满意度与其客观指标相关,但也与其需求、年龄、文化程度、与患者的关系有关。结论:客观状态是影响主观生活满意度的重要因素,同时应考虑护理者的需求、年龄、文化程度、与患者的关系对护理者主观生活满意度的影响。     

乳腺叶状肿瘤的影像分析

目的 分析乳腺叶状肿瘤的X线钼靶摄片和超声表现.方法 收集经手术病理证实的19例乳腺叶状肿瘤,术前均行超声检查,其中15例行X线钼靶摄片,回顾分析其临床特点和影像学表现.结果 19例乳腺叶状肿瘤中,良性8例,交界性6例,恶性5例.15例患者X线钼靶摄片中病灶均为高密度孤立肿块影,呈圆形(8例)或浅分叶状(7例),边界清晰(10例)或部分不清(5例),部分肿块周边见"晕"征(4例).超声检查6例发现囊性变,6例表现为后方回声增强.病灶为圆形(8例)、浅分叶状(8例)或有角状突起(3例).所有病例均未发现腋下转移淋巴结及周围组织浸润等恶性征象.结论 认识乳腺叶状肿瘤的病理类型和临床特点,结合影像表现综合分析,可提高术前诊断率.     

胰腺癌治疗的Cochrane系统评价证据

目的评价胰腺癌治疗的Cochrane系统评价证据,以及纳入系统评价的临床随机对照试验（RCT）的方法学质量。方法检索Cochrane Library数据库（2009年第4期）中有关胰腺癌治疗的系统评价,并运用RewMan5.0.21对所纳入研究的偏倚进行评估。结果共检索到胆道支架置入术姑息治疗梗阻型胰腺癌的系统评价、放化疗治疗不能手术的进展期胰腺癌的系统评价共2篇系统评价,共纳入79个RCT。依照Cochrane协作网推荐的质量评价方法,对所纳入RCT的偏倚进行评估,表明均存在不同程度的偏倚,方法学质量普遍较低。结论 Cochrane系统评价是公认的最高质量的研究证据,但目前缺少足够强度的证据来支持胆道支架置入术姑息治疗梗阻型胰腺癌的疗效。其他治疗手段的疗效如胰腺癌围手术期的营养支持治疗等还需要通过进一步的完成系统评价来评估。建议推行临床试验透明化,实施临床试验注册制度以及按照CONSORT声明严格规范RCT的报告,以便于总结胰腺癌治疗的临床证据。