组胺受体H1和H4在过敏性炎症中的作用：新型抗组胺药的研究

组胺在过敏性炎症中起关键性作用, 长期以来人们认为组胺释放引起的炎性反应是H₁受体介导的。H₁受体拮抗剂也称为抗组胺药, 用于治疗过敏性反应已很多年。但是在哮喘和慢性瘙痒症的病理状态下组胺的重要性可能被低估。已证明组胺的确在炎症和免疫调节疾病中起作用,特别是H₄受体的发现及其在多种免疫和炎性细胞中的表达,提示应重新评价组胺的作用,预示新型H₄受体拮抗剂将被发现,且H₁,H₄受体拮抗剂在许多炎性反应靶标上可能有协同作用。     

卡介苗多糖核酸注射液预防过敏性紫癜复发的82例临床观察

目的 观察卡介苗多糖核酸注射液预防过敏性紫癜(HSP)复发的临床效果及相关因素分析。方法　82例HSP患儿随机分为治疗组46例和对照组36例,33例健康儿童作为正常对照组。对照组常规治疗,治疗组加卡介苗多糖核酸注射液肌注,0.5 mg,1周2次,疗程为3个月。观察1年内病情的反复、复发率及测定治疗前、治疗3个月后血CD₃⁺,CD₄⁺,CD₈⁺,白介素-2(IL-2),γ-干扰素(IFN-γ),IgA水平。结果　HSP患儿治疗前血CD₃⁺,CD₄⁺,IL-2,IFN-γ水平均低于正常对照组(P<0.01),IgA明显上升(P<0.01),CD8+细胞水平各组间无明显差异(P>0.05),观察3个月后复查血CD₃⁺,CD₄⁺,CD₈⁺,IL-2,IFN-γ,IgA水平,发现治疗组的各项指标恢复较对照组明显(P<0.05或<0.01),1年复发率明显下降(P<0.05)。结论　卡介苗多糖核酸能调节HSP患儿免疫功能,能有效降低复发率。     

80例正常人体表标测Q-Tdp的观察

采用91导联体表电位标测法(BSPM)观察80例正常人Q-T_d^p(Q波起点到T波峰值间期的离散度),与同步12导联心电图Q-T离散度(Q-T_d)对照,探讨BSPM条件下测定Q-T_d的可行性。结果：① Q-T^p、Q-T_d^p、Q-T_c1d^p(Bazzett公式校正)、Q-T_c2d^p(Fridercia公式校正)分别为(292.69±37.75) ms、(36.77±7.40) ms、(40.23±9.04) ms和(40.11±7.73) ms;②Q-T_d^p与Q-T_d、Q-T_c1d^p与Q-T_c1d、Q-T_c2d^p与Q-T_c2d有良好的相关性;③3个年龄组(18～35岁、36～60岁、61～70岁)各参数间无显著性差异;④Q-T^p女性明显大于男性(P<0.05),其余各值男女性之间均无显著性差异。提示：BSPM测定 Q-T_d^p简便可行、较为准确,正常值可暂定为52 ms。     

M受体及相关选择性药物研究进展

毒蕈碱受体（M受体）是体内重要的G蛋白偶联受体之一,有M₁～M₅五种药理学亚型,各亚型在体内的分布和功能不同,受体蛋白结构和信号转导机制也有差异。对M受体、相关选择性药物及受体-配体作用位点的研究,将为设计以M受体各亚型为靶标的选择性药物提供帮助,对临床治疗多种M受体功能紊乱的疾病,如阿尔茨海默病等具有重要意义。     

血管紧张素Ⅱ受体2对心血管肾脏系统功能的影响

血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）1型（AT₁）受体在心血管和肾脏功能方面具有重要作用,但有关AngⅡ2型（AT₂）受体的效应知之较少。近年来,采用AT₂受体缺失小鼠对该受体进行了较为深入的研究。一方面,激活AT2受体能抑制细胞增殖、促进凋亡,此效应在发育和组织重构中具有重要地位;另一方面,在心脏、动脉和肾脏,AngⅡ通过激活AT₂受体刺激NO/cGMP,可能通过对抗AT₁受体介导的效应而发挥潜在的保护作用。     

β2受体对心肌梗死大鼠心肌细胞钠钙交换电流调控

 【目的】研究β₂肾上腺素受体(β₂受体)对心肌梗死大鼠心肌细胞钠钙交换电流(INCX)调控作用的信号转导途径。【方法】 雄性健康Wistar大鼠30只,随机分为正常对照和心肌梗死(MI)组,制作MI模型。采用经典的酶分离心肌细胞方法,应用全细胞膜片钳技术记录INCX,予以β₂受体激动剂salbutamol、cAMP激动剂forskolin、抑制性cAMP类似物Rp-cAMPS、 PKA抑制剂H89及Gi蛋白抑制剂后记录INCX的变化。【结果】 在正常和梗死后4周心肌细胞,forskolin可使INCX电流密度升高108.9%和70.3%(P < 0.05),抑制性cAMP类似物Rp-cAMPS可抑制salbutamol升高INCX电流密度的作用 (P < 0.05), PTX能增大salbutamol的作用,INCX电流密度较单独予以salbutamol升高36.8%和50.6%(P < 0.05), H89可抑制salbutamol升高INCX电流密度的作用(P < 0.05)。【结论】 β₂受体激动可能通过Gi-cAMP-PKA途径参与调节INCX。     

肾移植术后环孢素A血药浓度监测及其体内吸收评价

目的 探讨肾移植术后稳定患者口服微乳化环孢素A(CsA-ME)的剂量与其血药浓度谷值(C₀)和给药后2 h的血药浓度(C₂)的关系及其随时间的变化趋势,从而评价CsA-ME的体内吸收过程。方法 采用荧光免疫偏振法(FPIA)对92例肾移植患者术后不同时间内测定全血中环孢素A的C₀和C₂浓度,并分别与每位患者每日每千克体重的用药剂量(ND)相比,得出其相应的浓度(即C₀/ND,C₂/ND)。计算C₂/C₀比值并对所得数据进行统计分析。结果 肾移植患者术后1~3个月内,C₀/ND和C₂/ND均增加。C₀/ND从(43±15)增加到(56±20) (ng·mL^-1)/(mg·kg^-1),C₂/ND从(129±62)增加到(212±80) (ng·mL^-1)/(mg·kg^-1),表明药物的吸收逐渐增加。但术后3~12个月内,C₂/ND维持原有水平,C₀/ND则逐渐降低为48±15 (ng·mL^-1)/(mg·kg^-1),C₂/C₀比值则从4.5±1.9逐渐增加至5.2±2.3,表明药物在体内的消除代谢逐渐增加。术后3~12个月内,C₂/ND的个体间变异系数明显小于C₀/ND的个体间变异系数。结论 肾移植患者服用CsA-ME在术后3~12月内,其环孢素A在体内的累积清除率逐渐增加,表明术后一年内单纯用C₀作为监测指标已不能准确预测CsA-ME在体内的药物暴露总量,应结合C₂监测对于提高个体化的治疗将更有临床意义。     

2-芳基咪唑并［1，2-a］吡啶-3-乙酰胺衍生物的合成与抗焦虑活性研究

目的 寻找水溶性较好、抗焦虑活性较强的新型化合物。方法 设计合成2-芳基咪唑并［1,2-a］吡啶-3-乙酰胺类化合物,通过体外苯二氮卓受体竞争结合实验及小鼠高架迷宫行为实验,评价化合物的体内外抗焦虑活性,分析化合物的构效关系。结果与结论 共合成28个新型化合物,通过¹H-NMR和 MS确证其结构,其中I8和I10水溶性良好。苯二氮受体竞争结合实验结果表明,化合物Ⅰ₁、Ⅰ₈、Ⅰ₁₀ 、Ⅰ₁₃ 、Ⅰ₁₉ 与苯二氮卓受体的亲和力与阳性对照药物Ro5-4864相当,在浓度为100 nmol/L时,其对放射性配体与受体结合的抑制率分别为87%、89%、85%、89%和76%,而Ro5-4864为82%。对水溶性及活性均较好的化合物Ⅰ₈和Ⅰ₁₀ 进行小鼠抗焦虑活性评价结果表明,其具有明显的体内抗焦虑作用。     

羊心脏浦肯野纤维膜钠泵活动的测量

采用细胞内Na⁺选择电极方法,先以不同频率电刺激驱动羊心脏浦肯野纤维标本,使细胞内Na⁺活度(aⁱN+a)上升到不同高度,在停搏即刻测量Na⁺逐出速率(d(a_Naⁱ)/dt)。进而将所测得d(a_Naⁱ)/dt值相对于各时刻a_Naⁱ作相关曲线(SP-IS:Sodium Pump-Internal Sodium),比较其斜率可以了解膜钠泵活动的相对强弱。这种方法可以较迅速、简便地在生理状态下反复测算膜钠泵活动速率。进而用外差法找到相关曲线与纵坐标交点(Na_ia⁺),它反应了静息态时Na⁺内流速率。还观察了pH值变化、高或低K⁺,高或低Ca²⁺及Mn²⁺、异丙基肾上腺素等对膜钠泵活动速率的影响。     

Ocular higher-order aberrations features analysis after corneal refractive surgery

Background  The recent studies have shown that visual performance might be affected by the ocular aberration after the corneal refractive surgery, and try to minimize it. This study was to investigate the effects of photorefractive keratectomy (PRK) and laser in situ keratomileusis (LASIK) on the higher order of wavefront aberration and analysis of their characteristics.
Method  This prospective study involved 32 eyes with similar refractive powers (-5.0 D to -6.0 D preoperatively). LASIK and PRK were performed with the same parameters of 6 mm diameter optical zone and 7 mm diameter transition zone ablation. Wavefront aberrations were tested using a ray tracing technique preoperatively and 3 months postoperatively. Three measurements were obtained for each condition; the root mean squared wavefront error (RMS), values for overall wavefront aberrations and each order of the Zernike aberrations were analyzed using the Matlab software. The 2-tailed t test was used for statistical analysis.
Results  Overall higher order aberrations were increased from (0.550.26) µm preoperatively to (0.930.37) µm for PRK and (0.790.38) µm for LASIK postoperatively. This was a 1.69 fold increase in the PRK group (t=3.95, P<0.001) and a 1.43 fold increase in the LASIK group (t=2.60, P<0.05). At 3 months, the mean RMS value for higher-order (3rd to 6th) were significantly increased compared with the corresponding preoperative values (P<0.05). The fourth order aberrations, spherical like aberration, were dominant by a 2.64 fold in PRK and a 2.31 fold in LASIK. Different influences of the PRK group and LASIK group were shown in the various zernike components. The statistically significant differences were seen in C₄⁰, C₄⁺⁴, C₅⁺¹, C₅⁺³, C₅⁺⁵ and C₆⁺² of the PRK group and C₃^-3, C₄⁰, C₅^-5, C₅⁺⁵, C₆^-2 of the LASIK group, which represents a 7.42, 3.58, 9.21, 2.72 and 5.3 fold increases in PRK group, and 6.40, 10.80, 11.06, 3.47 and 6.09 fold increases in LASIK group, respectively. C₃^-3 in LASIK was higher and C₅⁺¹ and C₅⁺³ were lower than those in the PRK group. C₄⁰ (spherical aberration) values were similar between PRK and LASIK, however, C₃^-1 and C₃¹ (coma) in LASIK were higher than those in PRK, but these differences are of no statistical significance.
Conclusions  PRK and LASIK may increase ocular higher-order aberrations, but they both have their own features. The difference between the two types of surgery may be correlated with the change of the corneal shape, the conversion of biodynamics, the healing of the corneal cut, and re-structured corneal epithelium and/or the stroma.

     

促肾上腺皮质激素释放因子Ⅰ型受体：抗抑郁药物的新靶标

抑郁和焦虑患者常伴随应激激素调节失常,这与下丘脑神经肽促肾上腺皮质激素释放因子（CRF）和精氨酸加压素分泌过多密切相关。CRF主要通过激动促肾上腺皮质激素释放因子Ⅰ型（CRF₁）受体诱导抑郁或焦虑样症状,众多研究表明CRF₁受体是新型抗抑郁药的潜在靶标。目前已研发出很多基于此靶标的非肽类小分子化合物,但只有一部分进入临床试验,包括NBI-30775/R121919和NBI-34041等。值得注意的是,此类化合物显效与动物的应激水平和自身焦虑程度有关,即CRF1受体拮抗剂可在不影响下丘脑-垂体-肾上腺轴基础活性情况下对抗CRF介导的病理性应激反应,从而提示其副作用可能较低。总之,小分子CRF₁受体拮抗剂可能成为治疗应激相关精神疾病的新方法。本文重点综述CRF₁受体作为新靶标在抑郁症治疗中的潜在应用。     

内皮素受体拮抗剂治疗肺动脉高压的临床应用进展

内皮素(ET)-1是强有力的内源性血管收缩剂，在肺动脉高压的发病机制中发挥重要作用。ET受体分为两种类型：ET_A和ET_B。本文综述近年来非选择性ET受体拮抗剂和选择性ET_A受体拮抗剂治疗肺动脉高压的临床应用进展。证明ET受体拮抗剂可以改善肺动脉高压患者的运动耐量，降低肺血管阻力，增加心输出量，改善心功能。其主要副作用是血清转氨酶增高。     

Signal peptide and denaturing temperature are critical factors for efficient mammalian expression and immunoblotting of cannabinoid receptors

Many researchers employed mammalian expression system to artificially express can-nabinoid receptors, but immunoblot data that directly prove efficient protein expression can hardly be seen in related research reports. In present study, we demonstrated cannabinoid receptor protein was not able to be properly expressed with routine mammalian expression system. This inefficient ex-pression was rescued by endowing an exogenous signal peptide ahead of cannabinoid receptor pep-tide. In addition, the artificially synthesized cannabinoid receptor was found to aggregate under rou-tine sample denaturing temperatures (i.e., ≥95°C), forming a large molecular weight band when analyzed by immuno-blotting. Only denaturing temperatures ≤75°C yielded a clear band at the pre-dicted molecular weight. Collectively, we showed that efficient mammalian expression of cannabi-noid receptors need a signal peptide sequence, and described the requirement for a low sample dena-turing temperature in immuno-blot analysis. These findings provide very useful information for effi-cient mammalian expression and immuno-blotting of membrane receptors.     

Endocannabinoids anandamide and its cannabinoid receptors in liver fibrosis after murine schistosomiasis

This study examined endogenous carmabinoid （ECB）-anandamide （AEA） and its cannabinoid receptors （CBR） in mice liver with the development ofschistosomajaponicum. Mice were infected with schistosoma by means of pasting the cercaria onto their abdomens. Liver fibrosis was pathologically confirmed nine weeks after the infection. High performance liquid chromatography （HPLC） was employed to determine the concentration of AEA in the plasma of mice. Immunofluo-rescence was used to detect the expression of CBR1 and CBR2 in liver tissue. Morphological examination showed typical pathological changes, with worm tubercles of schistosoma deposited in the liver tissue, fibrosis around the worm tubercles and infiltration or soakage of inflammatory cells. Also, CBR1 and CBR2 were present in hepatocytes and hepatic sinusoids of the two groups, but they were obviously enhanced in the schistosoma-infected mice. However, the average optical density of CBR1 in the negative control and fibrosis group was 13.28±7.32 and 30.55±7.78, and CBR2 were 28.13±6.42 and 52.29±4.24 （P〈0.05）. The levels of AEA in the fibrosis group were significantly increased as compared with those of the control group. The concentrations of AEA were （0.37±0.07） and （5.67±1.34） ng/mL （P〈0.05）. It is concluded that the expression of endocannabinoids AEA and its cannabinoid receptor CBR were significantly increased in schistosoma-infected mice. Endogenous endocannabinoids may be involved in the development of schistosoma-induced liver fibrosis.     

大鼠肾脏α_1-肾上腺素受体和血管紧张素Ⅱ受体亚型表达水平随增龄的改变

目的研究α1-肾上腺素受体(α1-adrenergic receptor,α1-AR)和血管紧张素Ⅱ受体(angiotensinⅡreceptor,ATR)各亚型在增龄过程中蛋白水平的变化。方法采用蛋白质免疫印迹(Western blotting)分别对3月龄(青年组)、12月龄(中年组)、18月龄(老年前期组)和24月龄(老年组)Wistar大鼠肾脏α1-AR和ATR亚型蛋白水平进行测定。结果在α1-AR的亚型中,α1A-AR的表达水平随增龄逐渐下调(P<0.01);α1B-AR和α1D-AR的表达在各年龄组差异无统计学意义。在ATR的亚型中,AT1R表达水平在老年前期组和老年组均较青年组显著下调(P<0.01),中年组与青年组相比差异无统计学意义;AT2R的表达水平在老年组较青年组显著上调(P<0.01),青年组、中年组和老年前期组之间差异无统计学意义。结论肾脏α1-AR和ATR的表达水平随增龄而变化,α1A-AR的下调可能与肾脏在衰老过程中的功能减退相关;AT1R下调可能有利于肾脏在衰老过程中维持其正常的生理功能;AT2R在老年期表达上调,有利于拮抗AT1R的作用、消除随增龄出现的血管收缩功能增强的不利影响。     

磷酸鞘胺醇受体在四氯化碳引起的肝纤维化小鼠肝脏的表达

目的研究四氯化碳(CCl4)引起的肝纤维化小鼠肝组织中的磷酸鞘胺醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)受体1、2、3(S1P1-3)mRNA和蛋白含量的变化。方法制备小鼠CCl4肝纤维化模型,采用实时荧光定量聚合酶链反应方法测定小鼠肝组织S1P1-3mRNA表达情况;采用免疫印记(Western blotting)方法测定小鼠肝组织S1P1-3蛋白表达情况。结果CCl4诱导小鼠肝纤维化2周或4周后,与对照组相比,小鼠肝组织的S1P1mRNA的表达差异无统计学意义,而S1P2、S1P3mRNA的表达显著上调(P<0.05);与之相对应,S1P1的蛋白表达差异无统计学意义,而S1P2、S1P3的蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论在CCl4引起的小鼠肝纤维化形成过程中,S1P、S1P在mRNA和蛋白水平均显著上调,表明S1P相关受体在肝纤维化发生过程中起重要作用。     

阴虚动风证帕金森病异动症大鼠大麻素CB1受体变化及复方地黄方的干预作用

目的 探讨阴虚动风证帕金森病(PD)异动症(LID)大鼠纹状体内大麻素CB1受体的表达及复方地黄方的干预作用.方法 采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)偏侧损毁黑质制备帕金森病大鼠模型,进一步腹腔注射左旋多巴+苄丝肼(50 mg/kg 左旋多巴和12.5 mg/kg苄丝肼)制备LID大鼠模型,并随机分为LID组、复方地黄方组,另取正常对照组、假手术组大鼠为对照,每组6只.分别在4周、6周进行神经行为学检测后,处死大鼠并取纹状体,应用Western blot法测定各组大鼠纹状体内大麻素CB1受体的表达情况.结果 LID大鼠随造模时间延长,AIM评分呈增加趋势(P<0.05),旋转启动时间呈缩短趋势(P>0.05),旋转持续时间呈增加趋势(P<0.01),剂峰旋转圈数呈减少趋势(P>0.05),复方地黄方可改善上述变化.LID大鼠大麻素CB1受体表达增加,且随造模时间延长呈现减少趋势(P<0.01),而复方地黄方干预后大麻素CB1受体的表达呈现逐渐增加的趋势(P<0.01).结论 LID模型大鼠大麻素CB1受体的含量明显升高,其变化能够较好的反映阴虚动风证的严重程度,复方地黄方干预LID模型大鼠可能是通过激活纹状体内大麻素CB1受体,抑制兴奋性氨基酸(主要是谷氨酸)的释放和诱导细胞发生级联反应来减弱神经元的兴奋性,从而起到减轻L-dopa的兴奋毒性的作用.     

前列环素信号通路的研究进展

前列环素（PGI₂）是前列腺素家族的重要成员,由花生四烯酸在血管内皮细胞环氧合酶和前列环素合酶的作用下生成。PGI₂与细胞膜上组织特异性的G蛋白偶联受体前列环素受体相结合,激活腺苷酸环化酶,增加cAMP的含量,激活蛋白激酶A,从而发挥舒张血管、抑制血小板聚集、抑制血管平滑肌细胞增殖和迁移等作用。高浓度时,PGI₂可与一种核受体过氧化物酶体增殖物激活受体相互作用,调节心血管系统多种生理功能,如血管新生等。本文就PGI₂合成和信号转导通路的研究进展进行综述。     

大麻素受体激动剂WIN55212-2对体外大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨大麻素受体激动剂WIN55212-2对体外大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法在Lange-ndorff灌流的体外大鼠心脏上,低流速(0.5~0.6 ml/min)灌注以制备全心缺血模型。低流速灌注(缺血)210 min后,开始以正常流速复灌60 min。WIN55212-2组于低流速灌注前15 min持续给予WIN55212-2直至缺血末。WIN55212-2 AM251和WIN55212-2 AM630组分别在低流速灌注前30 min给予AM251、AM630,作用15 min后,再分别给予WIN55212-2直至缺血末。观察复灌后左心室发展压(LVDP)、左心室最大上升、下降速率(±dp/dtmax)。同时,测定复灌末冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)释放量。结果WIN55212-2能显著地恢复缺血再灌注后的心功能,使缺血再灌注末期冠脉流出液中LDH和CK的释放量显著降低。这些作用能被CB1受体阻断剂AM251或CB2受体阻断剂AM630阻断。结论WIN55212-2对体外大鼠心肌缺血再灌注损伤有保护作用,该作用是通过CB1受体和CB2受体介导的。