复方雪莲胶囊对Ⅱ型胶原诱导大鼠关节炎的治疗作用

目的: 考察复方雪莲胶囊对Ⅱ型胶原诱导的类风湿性关节炎大鼠的治疗作用,并探讨其作用机制。 方法: 采用大鼠足趾部皮内注射牛Ⅱ型胶原乳剂,建立胶原诱导的关节炎模型(collagen-induced arthritis, CIA),设正常对照组、模型组、风湿定胶囊组(0.1 g·kg^-1)、复方雪莲胶囊(0.05,0.1,0.2 g·kg^-1)3个剂量组,于造模第14天分组并开始灌胃给药,连续给药14 d。观察复方雪莲胶囊对CIA大鼠关节肿胀的治疗作用;取关节滑膜组织做病理学检查;并用酶联免疫(ELISA)法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、前列腺素E₂(PGE₂)的水平。 结果: 造模14 d后,模型大鼠的足趾肿胀明显,与正常对照组比较,有显著性差异(P<0.01)。复方雪莲胶囊组可明显减轻CIA大鼠的足肿胀度,与模型组比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01);各给药组关节滑膜组织病变与模型组比较明显改善;与模型组大鼠血清中TNF-α(51.3±16.8)ng·L^-1及PGE₂(683.3±174.7) ng·L^-1的水平比较,复方雪莲胶囊(0.1,0.2 g·kg^-1)剂量组大鼠血清中TNF-α[(24.5±13.9),(23.1±7.0)ng·L^-1]及PGE₂[(452.9±102.2),(466.8±88.4) ng·L^-1]的水平明显降低(P<0.01)。 结论: 复方雪莲胶囊对大鼠胶原性关节炎有一定的抑制作用,其作用机制可能与抑制炎症介质TNF-α及PGE₂的表达有关。     

赤雹果总有机酸解热作用及其机制

目的：观察赤雹果总有机酸（TOATDF）的解热作用,并探讨其机制。方法：SD大鼠ip 内毒素（LPS）100 μg·kg^-1制备大鼠发热模型。将模型大鼠随机分为 TOATDF 300,150,75 mg·kg^-1剂量组,阿司匹林150 mg·kg^-1对照组及模型组,另取10只大鼠作为正常对照。药后每1 h测量体温1次,连续6次。采用酶联免疫测定法（ELISA）法测定血清中前列腺素E₂（PGE₂）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白介素（IL）-1β及脑脊液中PGE₂表达水平。结果：TOATDF 300,150 mg·kg^-1剂量组大鼠各时间点的平均体温均低于模型组（P<0.05或 P<0.01）;75 mg·kg^-1组大鼠药后2~5 h体温明显低于模型组（P<0.05）;阿司匹林组药后1~5 h体温明显低于模型组。各给药组血清中TNF-α,PGE₂,IL-β及脑脊液中PGE₂的表达水平均显著低于模型模型组（P<0.05或P<0.01）,但高于正常对照组（P<0.05）。结论：TOATRF有明显的解热作用,并有一定的剂量-效应关系。其解热作用与抑制致热原诱发的PGE₂,TNF-α和IL-β等致热因子的产生或释放有关。     

玉郎伞提取物对大鼠急性肺损伤的影响

目的：探讨玉郎伞（YLS）提取物对大鼠急性肺损伤（ALI）的影响。方法：将Wistar大鼠随机分为7组,分别为正常组,模型组,阳性对照组（地塞米松,3 mg·kg^-1）,玉郎伞水提物（TYLS）高、低剂量组（按生药量计60,30 g·kg^-1）,YLS总黄酮（FYLS）高、低剂量组（0.1,0.05 g·kg^-1）,每组动物连续灌胃给药7 d,于末次给药后30 min,采用腹腔注射20%酵母混悬液5 mL·kg^-1 2次诱发大鼠急性肺损伤模型。最后测定肺组织的湿干比重（W/D）和肺组织髓过氧化物酶（MPO）的活性,免疫组化法测定大鼠肺组织中核因子-κB p65（NF-κB p65）的表达、ELISA法测定肺组织白介素-1β（IL-1β）的含量,并HE染色观察肺组织病理形态改变。结果：与正常组比较,模型组肺W/D和MPO活性增大、肺组织IL-1β含量增加、NF-κB p65表达升高（均P<0.01）,肺组织有炎性病理改变。与模型组比较,TYLS高、低剂量组（4.31±0.15）,（4.72±0.35）及FYLS高剂量组（4.74±0.23）肺W/D低于模型组（5.01±0.33）（P<0.05,P<0.01）;TYLS高剂量组及FYLS高剂量组的肺MPO活性为（1.000±0.304）,（0.956±0.139）U·g湿片^-1,肺IL-1β含量为（265.58±47.05）,（222.31±53.99）ng·L^-1,肺组织细胞NF-κB p65阳性率为（51.00±8.62）%,（48.88±11.80）%,均比模型组明显降低（P<0.05,P<0.01）;另外,从组织病理学角度上看,TYLS及FYLS组肺损伤程度也有所减轻,以高剂量组较为明显。结论：预先给予TYLS或FYLS可明显减轻ALI大鼠肺组织炎症反应及肺水肿程度,其机制可能是通过干扰NF-κB途径从而抑制IL-1β生成。     

郑氏一号熏洗药对急性软组织损伤大鼠IL-1β、PGE2的影响

目的：观察郑氏一号熏洗药对小鼠的抗炎作用以及对急性软组织损伤大鼠病理组织变化及局部组织白细胞介素1β、 前列腺素E₂含量影响。方法：成年SD大鼠及昆明种小鼠按实验需要分别随机分为赋形剂对照组,郑氏一号熏洗药低、中、高剂量组（0.013,0.026,0.053 g·mL^-1）,云南白药酊组（0.01 g·mL^-1）,采用小鼠热板刺激诱发疼痛,醋酸扭体、大鼠蛋清性足肿胀和棉球性肉芽肿等急、慢性炎症模型,观察本品抗炎镇痛作用;采用打击法建立大鼠急性软组织挫伤模型,分别应用相应药物予以治疗,并于造模后2,4,6 d取材,采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测损伤局部骨骼肌组织白介素1β（IL-1β）、前列腺素E₂（PGE₂）的含量。结果：郑氏一号熏洗药可明显降低小鼠热板刺激及醋酸所致疼痛反应（P<0.05）,可显著抑制大鼠蛋清性足肿胀和棉球性肉芽组织增生（P<0.05）;能显著抑制大鼠急性软组织损伤后受伤局部 IL-1β和PGE₂含量的升高（P<0.01）。结论：郑氏一号熏洗药具有明显的抗炎镇痛作用,是通过抑制受伤局部 IL-1β,PGE₂含量升高来实现,可能是其治疗软组织损伤的疗效机制之一。     

金莲花总黄酮解热作用及对TNF-α,IL-1β和PGE2含量的影响

目的：观察金莲花总黄酮（Flavonoids from Trollius ledebouri Reichb,FTLR）解热作用。方法：选取连续3天基础体温在38.5~39.0 ℃ 的家兔,随机取6只作为正常对照组,其余家兔耳缘静脉注射细菌内毒素250 ng·kg^-1发热模型,取药后1.5 h体温上升>1 ℃ 的家兔30只。按体温分层随机分为发热模型组、FTLR 200,100,50 mg·kg^-1剂量组,阿司匹林组100 mg·kg^-1组,灌胃给药,发热模型组ig等容积蒸馏水。药后1,2,3及4 h分别测体温1次。采用ELISAE法测定血清中TNF-α和IL-1β及脑脊液中PGE₂表达水平。结果：FTLR 200及100 mg·kg^-1剂量组及阿司匹林组家兔各时间点的平均体温明显均低于模型对照组（P<0.01）;50 mg·kg^-1组家兔药后2~4 h体温低于对照组（P<0.05）;各给药组血清中TNF-α和IL-1β及脑脊液中PGE₂的含量均低于模型对照组（P<0.05或P<0.01）。结论：FTLR有明显的解热作用,并有明显的剂量依赖关系。其解热作用机制与抑制细菌内毒素引起的TNF-α,IL-1β和PGE₂等致热因子的合成或释放有关。     

肝豆汤对Wilson病模型铜负荷大鼠肝脏Wnt/β-catenin信号通路的调控作用

目的：探讨肝豆汤对铜负荷大鼠肝脏中分泌型糖蛋白（Wnt）/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路的调控作用及机制。方法：SD大鼠115只随机分为正常组（20只）、造模组。造模组予以1 g·kg^-1·d^-1的硫酸铜饲料及0.02 mL·g^-1·d^-1的0.185%硫酸铜溶液连续喂养12周;造模成功大鼠随机分为模型组（45只）,肝豆汤组（25只）和青霉胺（PCA）组（25只）;模型组、肝豆汤组和PCA组分别予以0.02 mL·g^-1·d^-1生理盐水,0.4 g·kg^-1·d^-1的中药肝豆汤和0.09 g·kg^-1·d^-1青霉胺灌胃,连续4周,末次灌胃后取各组大鼠肝脏组织检测：电感耦合等离子体原子发射光谱法（ICP-AES）检测各组大鼠肝铜含量;苏木素-伊红（HE）染色观察各组大鼠肝脏组织病理改变,免疫组织化学法检测肝脏组织氧化应激相关蛋白的表达,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝组织中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达水平。结果：ICP-AES法结果显示,与正常组比较,模型组大鼠肝脏铜含量显著升高（P<0.01）;肝豆汤可降低铜负荷大鼠肝脏铜含量（P<0.05）,PCA可显著降低模型组大鼠肝脏铜含量（P<0.01）;HE染色结果显示,与正常组比较,模型组大鼠肝脏组织镜下可见肝细胞大小不一、排列紊乱,部分肝索丧失;肝豆汤组和PCA组细胞损伤程度较模型组明显降低;免疫组化结果显示：肝豆汤和PCA可显著降低模型组8-羟基脱氧鸟苷（8-Hydroxyguanosine）,硝基酪氨酸（Nitrotyrosine）蛋白表达量（P<0.01）;Western blot结果显示,肝豆汤和PCA可使铜负荷大鼠肝脏内Wnt通路相关蛋白β-连环蛋白（β-catenin）,磷酸化糖原合成激酶3β（glycogen synthase kinase-3,p-GSK3β）,原癌基因（cellular myelocytomatosis oncogene,c-Myc）蛋白表达量显著增加（P<0.01）。结论：肝豆汤可通过促进过量铜排出减轻高铜诱导的肝脏损伤,并通过激活肝脏Wnt/β-catenin信号通路促进损伤的肝组织代偿性自愈以达到减轻高铜诱导氧化应激损伤的治疗效果。     

穿山龙总皂苷调控巨噬细胞M1/M2极化治疗痛风性关节炎的作用机制

目的 阐明巨噬细胞 M1/M2极化在尿酸钠晶体诱导大鼠痛风性关节炎（GA）模型中的作用,揭示穿山龙总皂苷治疗GA的抗炎分子机制。方法 雄性SD大鼠72只,随机分为4组,分别为正常组、模型组、穿山龙总皂苷组（160 mg·kg^-1）,塞来昔布组（43.3 mg·kg^-1）,每组18只。采用单尿酸钠晶体双侧注射大鼠踝关节方法建立大鼠GA模型。苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠踝关节滑膜组织病理学改变。免疫组化法检测踝关节滑膜组织 CD68,白细胞介素-4（IL-4）,诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和转化生长因子-β₁（TGF-β₁） 蛋白表达的变化。结果 HE染色结果显示模型组造模后第3天炎症最为明显,疾病处于急性期。第5天炎症有所缓解,第8天仍有炎症表现但接近正常组。穿山龙总皂苷组和塞来昔布组均可改善滑膜组织病理表现,穿山龙总皂苷组效果更为明显。免疫组化结果显示,与正常组比较,给药3 d,5 d和8 d时模型组 CD68和iNOS表达显著升高（P<0.01）;与模型组比较,给药3 d时穿山龙总皂苷可明显降低CD68和iNOS表达（P<0.05,P<0.01）,给药5 d和8 d时穿山龙总皂苷可显著降低CD68和iNOS表达（P<0.01）。与正常组比较,给药3 d时,模型组IL-4和TGF-β₁表达显著升高（P<0.01）,给药5 d和8 d时,模型组IL-4表达显著降低（P<0.01）,给药5 d时,模型组TGF-β₁表达显著降低（P<0.01）;与模型组比较,给药5 d和8 d时,穿山龙总皂苷可显著升高IL-4和TGF-β₁表达（P<0.01）。结论 穿山龙总皂苷可通过调控巨噬细胞 M1/M2极化对GA发挥潜在治疗效果。     

加味人参乌梅汤调控腹泻大鼠GABA能信号通路的系统效应

目的 研究加味人参乌梅汤对腹泻模型大鼠结肠组织中γ-氨基丁酸（GABA）能信号通路相关调控因子的影响,进一步揭示加味人参乌梅汤益气生津止泻的作用机制。方法 从48只SD幼龄大鼠中随机抽取12只作为正常组,其余大鼠以番泻叶泻下、劳倦力竭及饮食失宜等复合因素造模14 d。造模成功后,随机分为模型组、西药组及中药组,每组12只。正常组与模型组给予生理盐水灌胃（20 mL·kg^-1）,西药组给予妈咪爱灌胃（0.7 g·kg^-1）,中药组给予加味人参乌梅汤灌胃（35 g·kg^-1）,均1次/d,连续干预7 d。每日观测记录大鼠一般情况、稀便率及腹泻指数。获取大鼠结肠标本,采用免疫组化法（IHC）检测大鼠结肠GABA蛋白积分吸光度表达;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B2（Akt2）、磷酸化（p-）Akt及白细胞介素-1β（IL-1β）的含量,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠结肠PI3K、Akt2及γ-氨基丁酸A型受体β₂亚基（GABRB2） mRNA和蛋白的表达水平。结果 与正常组比较,模型组大鼠一般情况明显变差,稀便率及腹泻指数差异无统计学意义,GABA蛋白表达明显升高（P<0.05）,PI3K、Akt2、p-Akt及IL-1β表达含量明显升高（P<0.05,P<0.01）,PI3K、Akt2、GABRB2 mRNA及蛋白表达均极显著升高（P<0.01）。与模型组比较,中药组、西药组大鼠一般情况明显好转,稀便率及腹泻指数显著下调（P<0.01）,中药组、西药组PI3K、Akt2、p-Akt及IL-1β含量均明显下调（P<0.05）,中药组PI3K、Akt2、GABRB2 mRNA均明显下调（P<0.05,P<0.01）,GABA、PI3K及GABRB2蛋白表达明显下调（P<0.05,P<0.01）;西药组PI3K及Akt2 mRNA和PI3K蛋白表达均明显下降（P<0.05）。结论 加味人参乌梅汤能通过调节腹泻大鼠结肠GABA能信号通路,减少肠上皮细胞中Cl^-向肠腔流动,改善腹泻模型大鼠结肠水液代谢失衡状态,进而发挥其益气生津止泻效应。     

壮骨1号方对大鼠骨性关节炎的抗损伤作用研究

目的：观察壮骨1号方对骨性关节炎的抗损伤作用。方法：选SD大鼠,以泊洛沙姆载药体加载木瓜蛋白酶制成温敏型原位凝胶控释剂,按照0.05 mL（1.6 U）/关节剂量,双侧膝关节注射,50 ℃环境下作用2 h复制大鼠骨性关节炎模型。实验分为正常对照、模型对照组（等容蒸馏水）、壮骨关节丸（1.10 g·kg^-1）组与壮骨1号方（2.20,1.10,0.55 g·kg^-1）治疗组,氨基葡糖（0.03 g·kg^-1）阳性药对照组,ig每天1次,连续治疗8周。用酶联免疫吸附（ELISA）法测定关节液中基质金属蛋白酶-3（MMP-3）及其组织金属蛋白酶抑制因子-１（TIMP-1）含量,计算MMP-3/TIMP-1;观察关节软骨病理组织学变化并进行图像分析。结果：治疗8周后,模型组大鼠关节液中MMP-3/TIMP-1为0.092±0.010,与正常组0.062±0.011差异有统计学意义（P<0.05）,用壮骨1号方2.20,1.10,0.55 g·kg^-1剂量治疗8周后,MMP-3/TIMP-1明显降低,分别为0.060±0.016,0.060±0.028,0.057±0.027,与模型组比差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。病理图像分析显示模型组大鼠软骨坏死面积为（37 734±11 504）μm²,与正常组（0.00±0.00）μm²比较差异有统计学意义（P<0.01）,壮骨1号方2.20,1.10 g·kg^-1治疗8周后,关节软骨坏死面积为（26 601±6 506）,（27 061±10 425）μm²,与模型组比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论：壮骨1号方具有一定的抗软骨损伤作用,能延缓骨性关节炎的病程进展。     

下瘀血汤通过Wnt/β-catenin和TGF-β1/Smad信号串联干预肾纤维化大鼠的机制

目的 观察下瘀血汤对腺嘌呤致肾纤维化大鼠的保护作用及其对Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）和转化生长因子-β₁（TGF-β₁）/Smad信号通路的影响。方法 50只SPF级SD雄性大鼠随机分为正常组,模型组,氯沙坦组（9 mg·kg^-1）,下瘀血汤低、高剂量组（2.43,4.86 g·kg^-1）,采用腺嘌呤灌胃（250 mg·kg^-1）诱导肾纤维化大鼠模型,造模连续24 d,随后给予相应药物,给药连续30 d。采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定血肌酐（SCr）和尿素氮（BUN）水平;苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠肾脏组织病理改变情况;马松（Masson）染色观察大鼠肾脏胶原沉积情况;免疫组化法（IHC）和蛋白免疫印迹法（Western blot）测定大鼠肾脏Wnt5a,Wnt5b,β-catenin,TGF-β₁,Smad4,Smad7蛋白表达水平。结果 与正常组比较,模型组大鼠SCr和BUN水平显著升高（P<0.01）,给予下瘀血汤干预后SCr和BUN水平显著降低（P<0.01）;HE和Masson染色结果显示,与正常组比较,模型组大鼠肾间质损伤严重且肾间质胶原大量沉积,给予下瘀血汤干预后肾间质损伤减轻,胶原物质沉积减少;IHC和Western blot结果显示,与正常组比较,模型组大鼠肾脏Wnt5a,β-catenin,TGF-β₁表达上调（P<0.01）,Wnt5b,Smad7表达下调（P<0.01）,给予下瘀血汤干预后Wnt5a,β-catenin,TGF-β₁表达下调（P<0.01）,Wnt5b,Smad7表达上调（P<0.01）,且下瘀血汤低、高剂量组间差异无统计学意义。结论 下瘀血汤对腺嘌呤致肾纤维化大鼠具有保护作用,其机制与抑制Wnt/β-catenin和TGF-β₁/Smad信号通路串联相关。     

化风丹中As2S2及As2O3的含量测定

目的:建立化风丹中不溶性砷盐和可溶性砷盐的含量测定方法,为该制剂的质量控制提供参考。方法:采用滴定法和紫外分光光度法分别测定18批化风丹中二硫化二砷和三氧化二砷的含量。结果:建立的二硫化二砷含量测定方法重复性好,平均加样回收率97.61%,RSD 2.0%。三氧化二砷在4~16μg与吸光度线性关系良好,平均回收率97.77%,RSD2.1%。18批化风丹中二硫化二砷质量分数0.012~0.021 3 g·g-1,平均质量分数0.018 4 g·g-1,差异系数13.3%;三氧化二砷质量分数75.24~124.55μg·g-1,平均质量分数92.99μg·g-1,差异系数15.3%。结论:建立的含量测定方法简单、准确,为化风丹质量标准提升提供实验依据。不同批次化风丹中二硫化二砷和三氧化二砷含量差异较大。     

不同产地雄黄及其炮制品中二硫化二砷和可溶性砷含量比较

目的:比较研究不同产地雄黄及其炮制品中主成分As2S2及可溶性砷盐As2O3的含量差异。方法:采用2010年版《中国药典》雄黄项下的滴定法测定不同产地雄黄及其炮制品中As2S2的含量,采用AFS-230E型原子荧光光度计检测上述样品中可溶性砷盐As2O3含量。结果:不同产地的雄黄及其炮制品中As2S2,As2O3含量存在显著差异。雄黄炮制后,炮制品中As2S2含量均提高,As2O3含量均明显降低。除吉林和江苏2个产地的的雄黄及其炮制品中As2S2含量<90.0%,其余样品均符合药典规定;且雄黄炮制品中As2O3含量均能控制在1.7 mg.g-1以下。结论:研究结果可为指导雄黄临床合理用药提供参考依据。     

乌索酸体外通过激活Nrf2信号通路抑制人肝星状细胞的增殖和细胞外基质相关基因的表达

目的 乌索酸（Ursolic acid，UA）具有抗肝纤维化作用，但是其机制尚不完全清楚。由于肝纤维化与氧化应激有关，因此本文通过对乌索酸抗氧化作用的研究以阐释其抗肝纤维化机制。方法 实验用实时定量聚合酶链反应（real time polymerase chain reaction, RT-PCR）法和Western blot法检测氧化应激状态下LX2中α平滑肌肌动蛋白（alpha muscle actin，α-SMA）、Ⅰ型胶原（collagen type I，COL1A1）、Ⅲ型胶原（collagen type III，COL3A1）、基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase 2，MMP2）和基质金属蛋白酶组织抑制因子（tissue inhibitor of metalloproteinase 1，TIMP1）mRNA和蛋白表达的变化以及UA对这些变化的影响；通过测定还原型谷胱甘肽（glutathione，GSH）和丙二醛（malondialdehyde，MDA）的含量以观察UA的抗氧化作用，并检测了核因子E2相关因子2（NF-E2-related factor 2，Nrf2）及其下游基因血红素加氧酶（heme oxygenase 1，HO1）蛋白表达的变化，探察UA抗肝纤维化作用的可能机制。结果 实验结果显示H₂O₂可引起LX2的活化和氧化应激，使细胞中的ECM mRNA表达增加。UA可抑制LX2的活化，减少细胞外基质（extracellular matrix，ECM）的表达，显著升高GSH含量，降低MDA含量，并增加Nrf2的转核和HO1的表达。结论 实验结果提示UA通过激活Nrf2信号通路发挥抗氧化作用从而抑制LX2的活化和ECM的产生。     

胡桃楸青皮萃取物对内源性H2O2诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用研究

目的探讨胡桃楸青皮萃取物对内源性H2O2诱导血管内皮细胞凋亡的影响。方法建立10 m U葡萄糖氧化酶(GOX)催化生成内源性H2O2损伤内皮细胞模型。1将细胞分成空白对照组、10 m U GOX组及实验组(10 m U GOX与25 mg/L、50 mg/L、100 mg/L浓度的萃取物共培养)共5组,分别进行相应干预,观察不同剂量胡桃楸青皮萃取物对血管内皮细胞形态学及细胞增殖影响。2将细胞分成空白对照组、10 m U GOX组、10 m U GOX+50 mg/L萃取物混合培养组,分别进行相应干预。采用Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡的形态学改变;Annexin/PI双标记染色后进行流式细胞双色分析,检测内皮细胞凋亡率。结果1与空白对照组比较,10 m U GOX组,10 m U GOX组与25 mg/L、50 mg/L、100 mg/L混合培养组细胞存活率差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);10 m U GOX组与25 mg/L、50 mg/L、100 mg/L混合培养组细胞存活率明显高于10 m U GOX组(P<0.05,P<0.01)。2 Hoechst 33258荧光染色及早期凋亡率分析显示,与空白对照组比较,10 m U GOX组细胞凋亡率显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);与10 m U GOX组比较,10 m U GOX+50 mg/L萃取物组细胞凋亡率显著升高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论胡桃楸青皮萃取物对内源性H2O2损伤的血管内皮细胞有保护作用,进一步研究表明胡桃楸青皮萃取物对内源性H2O2诱导的内皮细胞凋亡有抑制作用。     

健脾补肾方对家兔激素性股骨头坏死模型脂质代谢的影响

目的:探讨健脾补肾方防治疗激素性股骨头坏死的作用机制。方法:采用激素性股骨头坏死(SINFH)模型,以蒸馏水作为空白对照,观察各实验组治疗后的病理形态学变化,并对各实验组血脂指标进行动态监测。结果:健脾补肾方能明显改善家兔SINFH模型组织形态学,12周时股骨头标本HE染色证明各治疗组空骨陷窝率和髓腔脂肪面积与模型组比较差异显著或非常显著(P0.05或P0.01);健脾补肾方可纠正激素造成的脂质代谢紊乱状况,各治疗组与模型组比较,在治疗后的4周和(或)8周和(或)12周,各项血脂指标差异显著或非常显著(P0.05或P0.01)。结论:健脾补肾方对SINFH的防治机理可能与纠正激素造成的脂质代谢紊乱有关。     

丹参多酚酸盐对过氧化氢所致乳鼠心肌细胞凋亡的影响

[目的]研究丹参多酚酸盐(Salvianolate)对过氧化氢(H_2O_2)所致乳鼠心肌细胞凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。[方法]于无菌环境下分离并培养乳鼠心肌细胞72 h后随机分为空白对照组、H_2O_2组、丹参多酚酸盐(50、100和200 mg/L)+H_2O_2组,每组设8个复孔;给药干预24 h后,检测培养液中谷草转氨酶(AST)、磷酸肌酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)含量,四甲基噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,通过流氏细胞术(Flow Cytometry)检测细胞凋亡状况并计算凋亡率;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测AKT m RNA和bcl-2 m RNA、Bax m RNA表达并计算bcl-2/Bax表达比值,Western blotting法检测细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、核转录因子-κB(NF-κB)表达并进行半定量分析,测定细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量。[结果]与H_2O_2组比较,丹参多酚酸盐(100、200 mg/L)+H_2O_2组培养液中AST、CPK、LDH含量显著降低,细胞存活率显著升高,细胞凋亡率显著降低。细胞中细胞中AKT m RNA、bcl-2 m RNA表达显著上调,Bax m RNA表达显著下调,bcl-2/Bax表达比值显著升高,caspase-3、NF-κB表达显著下调,SOD、CAT活性显著升高且MDA含量显著降低,上述差异均具有统计学意义(P0.05或P0.01)。[结论]丹参多酚酸盐对H_2O_2所致乳鼠心肌细胞凋亡具有抑制作用。     

大豆异黄酮对去卵巢大鼠学习记忆和海马谷氨酸细胞及NR2B受体的影响

目的：通过建立H₂O₂诱导心肌细胞氧化应激损伤模型,观察番茄红素（lycopene）对心肌细胞的保护作用。方法：将原代培养的乳鼠心肌细胞随机分为正常组、模型组（H₂O₂）、番茄红素低剂量组（2.5 μmol·L^-1）、番茄红素中剂量组（5 μmol·L^-1）、番茄红素高剂量组（10 μmol·L^-1）。番茄红素与心肌细胞孵育4 h后,再加入H₂O₂,24 h后MTT法测定细胞存活率,比色法测定细胞培养上清液中乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）的含量和细胞超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）及丙二醛（MDA）含量,荧光电子显微镜下观察细胞核的形态变化,采用Western blot方法检测细胞凋亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）的变化。结果：与正常组比较,模型组心肌细胞存活率降低,心肌细胞LDH和CK释放量增加,SOD,CAT活性降低,MDA含量增加（P<0.01）,呈现出凋亡细胞的特征,Caspase-3的表达增高（P<0.01）。番茄红素高剂量组与模型组比较,心肌细胞的存活率增加（86.36±2.54）%,（54.15±10.97）%,P<0.01,H₂O₂所致乳鼠心肌细胞LDH释放量降低（319.53±23.48）,（495.27±31.57）U·L^-1,P<0.01,CK释放量降低（279.29±32.91）,（397.01±29.36）U·L^-1,P<0.01,SOD活性增高（47.94±2.64）,（37.19±5.78）U·mg^-1,P<0.01,CAT活性增高（34.95±4.67）,（16.35±4.84）U·mg^-1,P<0.01,MDA含量降低（14.27±2.43）,（20.11±2.09）μmol·g^-1,P<0.01,细胞核形态改善,Caspase-3的表达降低（1.40±0.20）,（1.94±0.22）,P<0.05。结论：番茄红素对H₂O₂所致乳鼠心肌细胞氧化应激损伤有明显保护作用。     

荧光脂质体法研究芍药甘草汤对磷脂酶A2的抑制效应及其配伍作用

目的 采用荧光脂质体研究芍药甘草汤对磷脂酶A2(PLA2)的抑制效应及其配伍作用.方法 以磷脂酰胆碱和胆固醇等为主要材料,采用薄膜分散法-超声-膜挤出-葡聚糖凝胶柱色谱分离-冷冻干燥的联用技术制备包封羧基荧光素的脂质体;利用PLA2能水解磷脂破坏脂质体造成羧基荧光素渗漏的原理,将药物、PLA2和荧光脂质体共同温孵,检测从脂质体渗漏的羧基荧光索的荧光强度,该强度反映药物对PLA2的抑制强度.结果 芍药甘草汤、甘草、甘草酸和对照药氯丙嗪对PLA2活性均具有较强的抑制作用,白芍抑制作用较弱,而芍药苷几乎无抑制作用;芍药甘草汤复方对PLA2的抑制作用强于单味甘草和白芍.结论 芍药甘草汤对PLA2具有较强的抑制活性,白芍与甘草具有协同作用.     

基于配伍理论的芪麝方对神经根压迫模型大鼠背根节神经元磷脂酶A2及前列腺素E2表达的影响

目的：观察芪麝方拆方后不同配伍组别不同给药时长对神经根压迫模型大鼠背根节神经元（DRG）内磷脂酶A₂（PLA₂）、前列腺素E₂（PGE₂）含量表达的影响,并进一步探讨芪麝方的配伍规律。方法：选用3月龄SPF级SD雄性大鼠352只,随机分为11组,,根据芪麝方及阳性对照药成人每日常用剂量及芪麝方处方配比并按“动物体表面积比率换算等剂量方法”换算给药剂量,每天灌服1次,各组别分别于给药1,2,3,4周取背根节,应用ELISA法检测神经根组织中PLA₂和PGE₂的含量。测定结果应用SPSS 18.0进行统计学比较,通过差异对比找出引起炎症变化的敏感组分。从而揭示芪麝方各配伍组分抑制炎症的相互作用规律。结果：模型组与正常组比较,两炎症因子水平显著高于正常组,并在4周内变化趋势稳定,进一步验证了该模型的稳定性。不同给药时长不同配伍组别相对于模型组均能显著降低模型大鼠背根节中PLA₂,PGE₂含量（P<0.01）,其中不同组别之间抑制炎症的程度各有不同（P<0.05）,说明各配伍组分间存在协同作用。结论：统计结果显示复方中君药起到主导药效的作用,臣、佐、使对君药有协同增强疗效的作用,其他各组别虽作用效果明显,但尤以全方配伍效果最佳,说明全方配伍的科学性和合理性。为制剂的科学配伍提供了数据依据。     

Induction of apoptosis in HepG2 cells by solanine and Bcl-2 protein

The nightshade (Solanum nigrum Linn.) has been widely used in Chinese traditional medicine as a remedy for the treatment of digestive system cancer. The anti-tumor activity of solanine, a steroid alkaloid isolated from the nightshade has been demonstrated. To observe the effect of anti-tumor and mechanism of solanine. The MTT assay was used to evaluate the IC(50) on the three digestive system tumor cell lines. The effect on the morphology was observed with a laser confocal microscopy; the rate of apoptosis and the cell cycle were measured using flow cytometry (FCM); the expression of Bcl-2 protein was measured by Western blot. The results show that the IC(50) for HepG(2), SGC-7901, and LS-174 were 14.47, >50, and >50 microg/ml, respectively; the morphology of cells in the negative control was normal; for the treated groups, typical signs for apoptosis were found. The rate of apoptosis in HepG(2) cells induced by solanine was found to be 6.0, 14.4, 17.3, 18.9, and 32.2%, respectively. Observation of the cell cycle showed that cells in the G(2)/M phases disappeared while the number of cells in the S phase increased significantly for treated groups. Western blot showed that solanine decreased the expression of Bcl-2 protein. Therefore, the target of solanine in inducing apoptosis in HepG(2) cells seems to be mediated by the inhibition in the expression of Bcl-2 protein.