视觉发育可塑性关键期后弱视大鼠视皮质c-fos的表达

目的 观察双眼形觉剥夺性弱视成年大鼠光照刺激诱导视皮质神经元c-fos表迭情况,探讨已过视觉发育可塑性关键期的弱视大鼠视皮质内视觉可塑性的存留程度.方法 14日龄SD大鼠共21只,随机分为无光照弱视组8只、光照弱视组8只和正常对照组5只,弱视组行双侧眼睑缝合术建立双眼形觉剥夺性弱视模型.饲养至100日龄后光照弱视组和对照组暴露于外界光线中0.5 h,无光照弱视组不接触光线.取材后采用Nissl染色法及电镜观察3组视皮质神经元的形态改变,并用免疫组化技术检测c-fos蛋白表达情况.结果 ①弱视组视皮质神经元比正常组体积变小:②超微结构显示:弱视组视皮质出现早期类凋亡改变的神经元;③光照弱视组视皮质内Ⅱ～Ⅳ层各层中c-fos免疫刚性神经元密度明显高于另外两组(P＜0.05).结论 双眼形觉剥夺性弱视成年大鼠视皮质经光照刺激诱导c-fos表达增加,提示已过视觉发育敏感期成年大鼠的视皮质仍存留一定程度的视觉可塑性.     

正常和双眼形觉剥夺大鼠发育过程中视皮层神经元NR1的表达

目的 在视觉发育可塑性关键期内,探讨双眼形觉剥夺对大鼠视皮层神经元N-甲基-D-天冬氨酸受体亚单位1(N-methyl-D-aspartate receptor 1,NR1)的影响。方法对出生后14、21和28 d龄正常、双眼形觉剥夺和去除剥夺大鼠视皮层脑片进行免疫细胞化学染色。结果 正常组大鼠睁眼后,视皮层NR1阳性神经元的相对密度随天龄增加而逐渐减小(P<0.05),双眼形觉剥夺和去除剥夺组大鼠视皮层的这一相对密度亦随天龄增加而逐渐减小(P<0.05)。结论在视觉发育可塑性关键期内,大鼠视皮层神经元NR1的表达呈年龄依赖性变化,不受双眼形觉剥夺影响。     

视觉发育可塑性关键期后弱视大鼠视皮质c-fos的表达

目的 观察双眼形觉剥夺性弱视成年大鼠光照刺激诱导视皮质神经元C-los表达情况，探讨已过视觉发育可塑性关键期的弱视大鼠视皮质内视觉可塑性的存留程度。方法 14日龄SD大鼠共21只，随机分为无光照弱视组8只、光照弱视组8只和正常对照组5只，弱视组行双侧眼睑缝合术建立双眼形觉剥夺性弱视模型。饲养至100日龄后光照弱视组和对照组暴露于外界光线中0．5h，无光照弱视组不接触光线。取材后采用Nissl染色法及电镜观察3组视皮质神经元的形态改变，并用免疫组化技术检测C-fos蛋白表达情况。结果 ①弱视组视皮质神经元比正常组体积变小：②超微结构显示：弱视组视皮质出现早期类凋亡改变的神经元；③光照弱视组视皮质内Ⅱ～Ⅳ层各层中C-fos免疫刚性神经元密度明显高于另外两组（P〈0．05）。结论 双眼形觉剥夺性弱视成年大鼠视皮质经光照刺激诱导c-los表达增加，提示已过视觉发育敏感期成年大鼠的视皮质仍存留一定程度的视觉可塑性。     

Egr-1在单眼形觉剥夺性弱视幼猫视皮质中的表达及其意义

目的:探讨Egr-1在单眼形觉剥夺性弱视幼猫视皮质中的表达及其意义.方法:将30只3周龄健康幼猫随机分成形觉剥夺组与对照组,每组15只.饲养于自然光照下,将剥夺组幼猫通过黑色不透明遮盖布遮盖右眼.于遮盖前和遮盖后的第1、3、5周对所有幼猫行图形视觉诱发电位(PVEP)检查;遮盖后第5周PVEP检测完成后,处死幼猫,根据《猫解剖彩色图谱》,取视皮质,行HE染色和免疫组织化学检测,利用Image-Pro Plus统计并分析其阳性细胞数与平均光密度值.结果:PVEP检测显示,遮盖后第3周和第5周,剥夺组右眼P100波潜伏期高于剥夺组左眼(P<0.05)和对照组右眼(P<0.05),振幅下降(P<0.05).免疫组化显示,Egr-1在两组幼猫视皮质中均有阳性表达;遮盖5周后剥夺组视皮质中Egr-1阳性细胞数与平均光密度值均低于对照组(P<0.05).结论:单眼形觉剥夺性弱视会导致视皮质内的Egr-1蛋白表达量下降,促进弱视的发生发展.     

单眼形觉剥夺小鼠闪光视觉诱发电位与视知觉行为学的改变

目的探究单眼形觉剥夺小鼠闪光视觉诱发电位与视知觉行为学的改变。方法选择健康3周龄小鼠100只,检测fVEP;将35只小鼠随机分为单眼形觉剥夺组(25只)和正常对照组(10只)。单眼形觉剥夺组小鼠随机选择1只眼行褥式缝合,7 d后分别检测小鼠右眼及左眼fVEP,随后将单眼形觉剥夺组小鼠行反向缝合,将对照组小鼠单眼缝合,进行视知觉行为学实验。结果 (1)统计得出100只正常小鼠(200只眼)的fVEP N1波、P1波潜伏期及N1-P1振幅范围;(2)单眼形觉剥夺7 d后,部分小鼠剥夺眼较未剥夺眼fVEP的N1-P1振幅降低,差异有统计学意义(P<0.05);(3)在单眼形觉剥夺组中,fVEPN1-P1波振幅下降的小鼠视知觉行为学完成时间较对照组长,差异有统计学意义(P<0.05);N1-P1波振幅未下降的小鼠视知觉行为学完成时间较对照组长,差异无统计学意义(P>0.05)。结论验证了fVEP检测单眼形觉剥夺小鼠视功能的稳定可靠的指标是N1-P1波振幅降低;视知觉检测单眼形觉剥夺小鼠视功能结果与fVEP检测一致,二者相辅相成,同时运用这2种方法进行小鼠视功能检测,结果更为准... 更多     

双眼形觉剥夺对大鼠视皮层神经元电生理特性的影响

目的 研究形觉剥夺对发育过程中视皮层神经元突触电生理学影响,探索哺乳动物视觉发育可塑性的细胞水平机制。方法正常组和双眼形觉剥夺组Wistar大鼠61只,制作脑片并获得膜片钳全细胞记录。记录视皮层神经元的突触后电流(Postsynptre currents,PSCs)和诱发长时程增强(Lorg-term potentiation,LTP)。电生理记录结束后对所记细胞进行免疫组化染色。结果①双眼形觉剥夺组无反应型PSCs比例显著高于正常组(P<0.01);多突触反应型PSCs比例正常组显著高于双眼形觉剥夺组(P<0.01)。②双眼形觉剥夺组与正常组间相比,输入阻抗显著增高(P<0.01),静息电位较为去极化(P<0.01),EPSCs峰值显著降低(P<0.01)。③形觉剥夺组LTP诱发率显著低于正常组(P<0.05)。双眼形觉剥夺组组4周龄、5周龄的LTP增值显著高于正常组同周龄时(P<0.01,P<0.05)。结论①双眼形觉剥夺影响了静息突触向功能性突触的转化和神经网络的成熟。②双眼形觉剥夺可以在一定程度上影响神经元的突触传导功能。③双眼形觉剥夺在一定程度上降低视皮层神经元的可塑性,但可能保持了神经元对适宜刺激的反应能力。     

GluRs介导的神经突触内级联反应对视神经元可塑性调节机制的研究进展Research progress in regulatory mechanism of synaptic cascade response based on GluRs in plasticity of optic neurons

谷氨酸（Glu）是视觉传导通路上神经元轴突末梢主要的兴奋类神经递质,借助不同亚型的谷氨酸受体（GluRs）广泛参与视神经元的生长、发育、分化和成熟等过程,在视觉信号传递和维持正常视功能方面具有至关重要的作用。在视功能可塑性调控机制中,突触后膜上的离子型谷氨酸受体（iGluRs）被激活,产生兴奋性突触后电位（EPSC）以提升视神经元的突触传递效率。代谢型谷氨酸受体（mGluRs）通过与不同类型的G蛋白偶联而激活神经突触内的级联反应过程,借助细胞内离子水平改变、信号通路增强和特定基因的转录表达途径,发挥对突触结构和功能重塑的间接调控作用。上述不同亚型的GluRs共同参与调节了视觉信号传递的长时程增强（LTP）和长时程抑制（LTD）过程。现结合近年来国内外相关研究进展,从大脑视皮层神经元突触膜上不同亚型的GluRs入手,阐述视觉剥夺后基于不同亚型GluRs介导的视觉可塑性级联反应机制,以期为今后弱视中枢发病机制的研究和有效的靶点治疗药物的开发指明新的方向。     

高血糖合并形觉剥夺性近视/弱视小鼠模型的建立

目的探讨高血糖合并形觉剥夺性近视/弱视小鼠模型的制备方法。方法选取1周龄的BALB/cJ小鼠30只,通过查随机数字表分为3组,每组10只:正常对照组、诱发高血糖组、诱发高血糖联合形觉剥夺性近视/弱视组。右眼睑缝和建立形觉剥夺性近视/弱视,腹腔多次小剂量注射链脲菌素(STZ)诱发高血糖。结果成功建立形觉剥夺性近视/弱视与高血糖小鼠模型;与对照组相比,诱发高血糖小鼠的血糖[高血糖组(20.66±3.51)mmol/L,高血糖合并形觉剥夺性近视/弱视组(21.05±5.91)mmol/L]、体质量均显著改变[对照组(26.90±4.38)g,高血糖组(18.02±3.90)g,高血糖合并形觉剥夺性近视/弱视组(15.87±5.61)g;P<0.01]。缝合眼睑小鼠右眼眼轴长度、屈光度[(3.348±0.018)mm,(9.05±1.42)D]与对照组[(3.310±0.041)mm,(11.80±2.24)D]相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论缝合眼睑联合STZ小剂量多次腹腔注射是一种可靠的制备高血糖合并形觉剥夺性近视/弱视小鼠模型的方法。     

单眼睑缝合1周建立形觉剥夺性弱视猫模型

目的比较正常组、模型组及对照组的图形视觉诱发电位(PVEP)和扫描视觉诱发电位(SVEP)视力,研究各组的视觉电生理表现,探讨单眼睑缝合1周是否可以建立形觉剥夺性弱视模型。方法分析三组PVEP的波形变化、潜时及完成一次诱发反应的时间;比较各组由SVEP得出的客观视力。结果①正常组PVEP由2个波峰组成“M型”(正向波向上),模型组及对照组出现波的分离—波形由多个波组成,而且完成一次反应的时间延长。②缝合侧的N75延迟,SVEP视力较正常组差且差别有统计学意义。③对照组未缝合侧视力恢复到正常水平而缝合侧视力仍差且与正常组有统计学差异。结论短期形觉剥夺的视觉电生理变化是弱视猫的一种表现,单眼睑缝合1周即可建立形觉剥夺性弱视猫的模型。     

M4受体阻滞剂MT3抑制豚鼠形觉剥夺性近视的探讨

目的 探讨高度选择性M4受体阻滞剂MT3对豚鼠形觉剥夺性近视的抑制作用及其潜在作用机理。方法 3周龄豚鼠随机分为三组：对照组、形觉剥夺组、形觉剥夺 MT3组。实验前后使用带状光检影测量屈光度，A超测量眼生物学参数，RT-PCR检测视网膜和脉络膜中TGF-β2的mRNA相对表达量。结果 与对照组右眼相比，形觉剥夺 MT3组豚鼠右眼形成了-1.44 ?0.50 D相对近视（右眼-左眼），玻璃体腔和眼轴长度分别延长0.10 ?0.02 mm和0.14 ?0.07 mm（P=0.001，P<0.001，P<0.001），但近视量、玻璃体腔和眼轴长度增加量均显著小于单纯形觉剥夺组（P<0.001，P<0.001，P<0.001）。单纯形觉剥夺可引起视网膜和脉络膜TGF-β2的mRNA相对表达量下调（P<0.001，P=0.014）；而玻璃体腔注射MT3可导致形觉剥夺眼视网膜和脉络膜TGF-β2的mRNA相对表达量上调（P<0.001，P<0.001）。结论 MT3能抑制豚鼠形觉剥夺性近视的形成，其可能通过上调视网膜和脉络膜中TGF-β2的mRNA水平而发挥作用。     

血管活性肠肽在单眼视觉剥夺性弱视幼猫 外侧膝状体中的表达

目的 比较视觉剥夺性弱视幼猫和正常幼猫外侧膝状体中血管活性肠肽（VIP）的表达差异,探 讨外侧膝状体中VIP 在弱视发病中的意义。方法 健康3 周龄幼猫30 只,排除屈光介质混浊及眼底异常。 随机分为对照组和剥夺组,每组15 只,均饲养在光照充足环境中。麻醉剥夺组幼猫后,予以黑色不透光眼罩 遮盖右眼。定期行图形视觉诱发电位（PVEP）检测。6 周龄时经PVEP 检测弱视模型复制成功后,根据猫脑 Sinder 立体定位图,切取对照组及剥夺组幼猫的右侧外侧膝状体,分别行VIP 免疫组织化学和VIP mRNA 原 位杂交。利用数据分析软件统计阳性细胞数和阳性细胞数平均光密度值。结果 6 周龄时,剥夺组右眼P100 波 潜伏期较对照组右眼和剥夺组左眼延长（P <0.05）,而振幅降低（P <0.05）。剥夺组VIP 免疫组织化学和VIP mRNA 原位杂交的阳性细胞数及阳性细胞平均光密度值降低（P <0.05）。结论 视觉剥夺导致外侧膝状体中 VIP 表达下降,VIP 减少又影响外侧膝状体中神经元功能的正常表达,表明VIP 在视觉发育中有重要作用。     

左旋多巴对形觉剥夺性弱视幼猫图形视觉诱发电位的影响

目的观察左旋多巴对形觉剥夺弱视幼猫图形视觉诱发电位的影响.方法 40只4周龄幼猫分为正常组、单眼剥夺组、对照组、左旋多巴组,每组10只,通过单眼眼睑缝合制备形觉剥夺的弱视模型,观察不同干预条件下各组图形视觉诱发电位（PVEP）的P100波的峰时及振幅的变化.结果剥夺组、对照组剥夺眼P100波峰时值延长,振幅降低,与正常组及对侧眼比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,左旋多巴组双眼P-VEP各项指标与正常组比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）.结论左旋多巴能缩短弱视眼的P100波峰时及提高P100波的振幅,能促进弱视眼传导和感觉功能的改善.     

The hypotensive effect of BMY 7378 involves central 5-HT1A receptor stimulation in the adult but not in the young rat

BACKGROUND: Stimulation of central 5-hydroxytryptamine-1A (5-HT(1A)) receptors produces hypotension and bradycardia. We describe BMY 7378 (8-[2-[4-(2-methoxyphenyl)-1-piperazinyl]ethyl]-8-azaspiro[4.5]decane-7,9 dione) effects in cardiovascular function and [(3)H] 8-OH-DPAT (8-hydroxy-2-(di-n-propyl-amino) tetralin) binding sites in rat brain of different ages. METHODS: BMY 7378 was administered to anesthetized male Wistar rats (1, 3 and 6 months old) and blood pressure and heart rate were continuously recorded. Saturation of [(3)H] 8-OH-DPAT binding to 5-HT(1A) sites in brain membranes was determined. RESULTS: Basal diastolic blood pressure increased with age, 85 +/- 2, 106 +/- 3, and 113 +/- 2 mmHg for 1-, 3- and 6-month-old rats, respectively (p <0.05 among groups). BMY 7378 induced significant dose- and age-dependent hypotension. The selective 5-HT(1A) receptor antagonist, WAY 100635 (N-[2-[4-(2-methoxyphenyl)-1-piperazinyl]ethyl]N-(2-pyridinyl) cyclohexanecarboxamide), antagonized BMY 7378 effects in 6 month-old but not in younger rats. [(3)H] 8-OH-DPAT binding sites decreased in hippocampi and brainstem with maturation. CONCLUSIONS: Data suggest that BMY 7378 is a hypotensive agent in the rat, but that its actions are mediated, in part, by central 5-HT(1A) receptor stimulation in the adult and by a nonserotonergic mechanism in the young rat.     

正常和剥夺性弱视大鼠视皮质NOS阳性神经元的生后发育变化

目的：探讨NO参与正常视觉发育可塑性的分子机制及视觉剥夺对NO的表达所产生的影响。方法：正常和剥夺性弱视大鼠分别在不同时限(P14～P45)测定视皮质17区的NOS阳性神经元组织切片下的表达。结果 用光镜下计数和计算机图形分析系统得出。结果：正常大鼠视皮质17区中的NOS阳性神经元，P14时数量最多，到P21时神经元胞体截面积最大，树突分枝最复杂。剥夺对侧与同期正常鼠及剥夺同侧比较无显著性差异。结论：在视觉发育关键期，NOS在正常发育大鼠及剥夺性弱视大鼠视觉中枢中成短暂的高水平表达。单跟剥夺不会影响NOS在皮质17区的表达。     

Regeneration of functionally active rat brain muscarinic receptor in vitro after inhibition with methylmercury chloride]

The effect of methylmercury on muscarinic receptors and the regeneration of functionally active muscarinic receptor in vitro by antagonists were investigated. The result showed that methylmercury chloride (MMC) inhibited the binding of [3H] QNB to muscarinic receptor of rat brain-lysed synaptosomes, with IC50 values of 4.18 mmol/L. Regeneration of functionally active rat brain muscarinic receptors after inhibition with methylmercury was achieved by 2,3-dimercapto-1-propanesulfonc acid, Na salt (DMPS) dithiothreitol (DTT), glutathione (GSH) and Cysteine. Blocking the sulfhydryl groups is suggested to be the molecular mechanism of inhibition of brain muscarinic receptors by methylmercury. Our results provide evidence that thiols chelate out mercuric cations that tightly bound to sulfhydryl groups in muscarinic receptor binding sites and regenerate [3H] QNB binding activity.     

Effects of propranolol on β- Adrenergic receptor of experimental acute myocardial infarction in rats

Summary By using receptor autoradiography to observe the distribution and density of receptors, the effects of propranolol, a β-blocker, on β-adrenergic receptor of experimental acute myocardial infarction (AMI) were studied. One week after ligation of proximate left anterior descend (LAD) coronary artery, [³H] DHA binding sites were markedly decreased in both infarctregion and non-infarct region. After treatment of propranolol (100 μg/kg), the [³H] DHA binding sites were obviously increased in the infarct region, and they were further decreased in the non-infarct region. The ratio of [³H] DHA binding sites of the infarct region to non-infarct region was from 0. 24 at LAD ligation to 0. 87 after propranolol treatment, which was close to 0. 97 of control group (sham operation). The results indicated that the propranolol acted directly on myocardial β- adrenergic through the receptor regulation of the balance of β-receptors between the infarct region and non-infarct region, and improvement of the myocardial consonation and contraction synergism, thereby protecting the heart affected by AMI.     

针刺干预对单眼视觉剥夺模型大鼠视皮层方位柱“漂移”和异常重组的调节作用及其脑功能机制

探讨针刺干预对大鼠单眼视觉剥夺后视皮层方位柱“漂移”和通道重组的影响，初步阐明其作用机制。     

Determination of the Molecular Weight of Photoaffinity Labeled Glucocorticoid Receptor in Scalded Rat Liver Cytosol

Previous work in our laboratory showed that,after scalding,there wasnot only a decrease of rat liver cytosol [~3H]-Dexamethasone specific binding sitesbut also an increase of apparent dissociation constant of [~3H]-Dex and change ofsedimentation coefficient of glucocorticoid receptor.The present study was carriedout using photoaffinity labeling of glucocorticoid receptor in rat liver cytosol.Itwas found that there was no significant difference between molecular weights ofglucocorticoid receptor of normal and scalded rats determined by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis.Our result suggests that chnage ofsedimentation coefficient is not due to alteration of molecular weight ofglucocorticoid receptor binding subunit.     

Serotonin (5-HT1c) receptors in pig choroid plexus.

It is very important to find suitable reaction conditions to attain a high specific binding (specific/total binding) in the receptor binding study. Membrane homogenates of pig choroid plexus are known to have exclusively serotonin (5-hydroxytryptamine, 5-HT) receptor of the subtype 5-HT1c. In this study, we used the membrane preparation of pig choroid plexus tissue and the specific binding of [3H]5-HT was 72-84% to serotonin receptor subtype 5-HT1c, as defined by the inhibition of 1 uM 5-HT, when a radioligand concentration of 0.5 nM of [3H]5-HT was used in the assay. Analysis of the properties of specific [3H]5-HT binding in pig choroid plexus tissue membrane preparation revealed linear Scatchard plots. In Tris-HCl buffer without CaCl2, pargyline or ascorbic acid, high average of affinity dissociation constant (Kd) of 1.3 +/- 0.2 nM (SEM, n = 4) and also a high average of receptor density (Bmax) of 284 +/- 12 fmol/mg of protein were found. Pig choroid plexus proves to be a good material for 5-HT1c receptor binding study.     

D-半乳糖致衰老大鼠脑海马外周型苯二氮(艹卓)受体改变及其与认知行为的相关研究

目的观察海马突触体外周型苯二氮革受体(PBR)水平对大鼠空间学习和记忆能力的影响.方法SD大鼠随机分为对照组和D-半乳糖组.D-半乳糖组动物连续皮下注射D-半乳糖(100mg/kg,每日1次)56次,对照组注射生理盐水.利用Morris水迷宫测试动物学习记忆能力后制备海马突触体,测定PBR最大结合容量(Bmax)和平衡解离常数(KD).结果与对照组比较,D-半乳糖组动物学习记忆能力降低(P＜0.001),KD无显著变化.D-半乳糖组Bmax(177.2 fmol/mg±26.7fmol/mg)低于对照组(296.7 fmol/mg±33.5 fmol/mg)(P＜0.001),海马突触体[3H]PK11195特异性结合活性与迷宫试验动物逃避潜伏期(r=-0.854)、平台象限游泳时间(r=0.845)及距离(r=0.851)显著相关(P＜0.001).结论海马突触体PBR表达量可能与大鼠空间学习和记忆有关.