人肝癌SMMC-7721细胞热休克反应时糖皮质激素受体mRNA减少机制初探

目的 探讨人肝癌SMMC-7721细胞热休克反应时糖皮质激素受体（GR）mRNA减少的机制。方法 利用聚合酶链反应（PCR）从大鼠GRcDNA质粒及人肝癌SMMC7721细胞基因组中扩增大鼠GR跨外显子3，4，5片段（与人GR跨外显子3，4，5片段同源性在89%以上）及人GR内含子E的DNA片段，构建转录质粒，并在体外进行转录，用地高辛标记反义RNA探针，进行细胞原位杂交，碱性磷酸酶底物NBT-BCIP显色。计算机图像分析系统进行扫描半定量分析。结果 人肝癌SMMC-7721细胞44℃培养1h后，用跨外显子和内含子探针杂交显色所得的积分灰度值均比未经热休克反应组低；加放线菌素D后热休克反应组，用跨外显子探针杂交显色所得的积分灰度值比单加放线菌素D组低，而用内含子探针杂交显色所得的积分灰度值比单加放线菌素D组高；加放线菌酮后热休克反应组，用跨外显子探针和内含子探针杂交显色所得的积分灰度值均比热休克反应组高。结论 热休克反应时GRmRNA转录过程受抑，GRmRNA前体成熟过程存在剪接障碍，GRmRNA降解加快。     

人周围血单个核及多形核白细胞糖皮质激素受体的测定及其临床意义

本文应用放射配体结合测定法,分别测定周围血单个核和多形核白细胞的糖皮质激素受体(GR),并对测定方法进行了检验。应用已建立的方法测定健康人75例、柯兴综合征10例、阿狄森病7例及席汉综合征8例GR的数目及亲和力。结果表明:多形核白细胞的GR明显高于单个核白细胞,两类白细胞GR间呈明显正相关;柯兴综合征和阿狄森病患者白细胞GR与健康人比较差异无显著性;席汉综合征患者白细胞GR明显低于健康人,亲和力在正常范围内,GR降低的机理及意义有待今后进一步探讨。     

内源性糖皮质激素分泌增多对内毒素血症大鼠血清TNF浓度的影响

本实验采用糖皮质激素(GC)合成抑制剂Trilostane抑制内毒素(LPS)血症大鼠内源性GC合成,观察大鼠内毒素血症时内源性GC升高对血清肿瘤坏死因子(TNF)的影响。实验共分:(A):正常对照组;(B)     

阴阳虚证与糖皮质激素受体关系的临床与实验研究

阴阳虚证与糖皮质激素受体关系的临床与实验研究     

长期运动训练后糖皮质激素受体的变化

为探讨长期运动训练后糖皮质激素受体的变化,本文以[~3H]—地塞米松为配体,用放射配体结合测定法研究了经过八十天游泳训练(1次/天、40—50分/次)大鼠的肝、脑胞液以及胸腺细胞糖皮质激素受体(GR)的变     

受体病理生理研究的概况

近年来,由于分子生物学的巨大成就,推动了病理学的研究逐渐深入到分子水平,分子病理学作为一门新的边缘学科已经日益引起病理及病理生理学家的重视,受体病理学作为分     

用Fura-2测定单个巨噬细胞内游离钙的条件的优化

Fura-2负载后用荧光显微镜成像系统研究单细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)应用已十分广泛,娄淑杰等[1]用此方法检测了PC12细胞内的[Ca2+]i,我们将娄淑杰等的方法应用于腹腔巨噬细胞(PEM),发现不尽理想,因此我们实验过程中对Fura-2的浓度进行了调整,另外PEM作为参与炎症的非兴奋细胞,其活化对[Ca2+]i有很大的影响,而细胞贴壁很可能导致活化,但测定方法又要求只能在贴壁细胞进行.因此,我们使用鼠尾胶缩短贴壁时间,并把检测用的PEM的贴壁时间控制在一定范围之内,取得了比较理想的结果.     

LPS致敏巨噬细胞产生O-2及其信号机制

目的：探讨LPS诱导的巨噬细胞(MΦ)致敏及其信号机制。方法：巨噬细胞样细胞株RAW264．7以10μg/L LPS预处理1h后洗去，再以1mg／L PMA、1μmmol／L fMLP、100μg／L LPS、1g／L Zyms和15mg／L MDP攻击1h，检测上清中超氧阴离子(O2^-)的产生，并用荧光显微成像系统检测细胞内游离钙离子浓度([Ca^2 ]i)，探讨[Ca^2 ]i与LPS致敏MΦ产生O2^-的关系。结果：LPS预处理后以上述刺激剂攻击1h均能不同程度致敏O2^-的产生，且致敏程度在一定范围内与LPS剂量和作用时间相关；细胞内静息态[Ca^2 ]i也呈LPS剂量和时间依赖性升高，均显著相关。且LPS预处理后用PMA攻击，细胞内瞬时[Ca^2 ]i升高幅度明显高于LPS未处理组。用A23187使细胞内[Ca^2 ]i升高可代替LPS致敏O2^-的产生，而预先用BAPTA和EGTA降低细胞内[Ca^2 ]i则可阻断LPS致敏O2^-的作用。结论：LPS可致敏MΦ产生O2^-；LPS预处理后细胞内静态[Ca^2 ]i的升高是LPS诱导O2^-致敏的重要原因。     

Studies on the homogeneity between high-and lowaffinity glucocorticoid receptor

The homogeneity between the high-and low-affinity glucocorticoid receptors(GR_H and GR_L)was testified by immunoaffinity chromatography using Mab N250(recognizing the immunogenic domain at the N terminal of GR_H)and Mab BuGR1(recognizing the DNA binding domain of GR_H).The specific binding peak of 0.98μmol/L[~3H]triamcinolone acetonide(TA)was higher than that of 52.50nmol/L[~3H]TA.The re-sult suggests that the antigenic determinants of GR_L are similar to those of GR_H.ThecDNA of rat liver GR_H was introduced into GR_H-and GR_L-negative mouse fibroblast cellline E82.A3 by calcium phosphate coprecipitation.A number of clones which expressGR_H were selected with G418(400μg/ml).The results of radioligand binding assay indicatethat GR_H gene is expressed successfully and GR_L also may be encoded by GR_H gene.     

失血后糖皮质激素受体,白细胞介素1的变化及二者的关系

本文观察不同失血后ＧＲ及ＩＬ－１的变化，并探讨二者的关系。大鼠分别接受假处理、１０％、２０％、３０％及４０％失血，不同处理后３ｈ肝、脑胞液ＧＲ随失血量增加而减少，血浆Ｌ－１性则相反，随失血量增加而增高；大鼠３０％失血后１－３ｈ，肝、脑胞液ＧＲ随休克时间延长而呈进行性减少，血浆ＩＬ－１活性变化之间，均呈显著的负相关。实验结果提示：失血后糖皮质激素受体减数调节，可能是血浆ＩＬ－１活性升高的重要原因。