IL-2协同肿瘤坏死因子对移植性鼻咽癌的抗瘤作用

目的:研究重组人肿瘤坏死因子(rhTNF-α)与重组白介素-2(rhIL-2)协同体内抗鼻咽癌效应及抗瘤机理.方法:利用我室建立的鼻咽癌细胞株(CNE3)制成裸鼠鼻咽癌模型,用rhTNF-α或与rhIL-2联合瘤内注射以观察抑瘤效应及荷瘤组织细胞的病理学、超微结构的改变,探讨其作用机理.结果:鼻咽癌裸鼠移植瘤经rhTNF-α治疗后肿瘤出现坏死、体积缩小、甚至消失.rhIL-2能增强rhTNF-α的抗瘤作用.组织病理学及超微结构观察发现,大多数癌细胞出现粗面内质网扩张;核碎裂、核溶解而消失.结论:rhIL-2增强rhTNF-α的抗瘤机理可能与IL-2诱导癌细胞表达TNF受体作用有关,本研究为临床在鼻咽镜下进行肿瘤局部注射TNF进行治疗提供实验依据.     

TNF—α对鼻咽癌放射增敏的体内实验研究

目的探讨TNF—α对鼻咽癌放射敏感性的影响。方法裸鼠体内移植瘤实验观察CNE-2Z、H5、S1放射后的体内增殖能力,采用HE染色观察各组裸鼠移植瘤组织坏死程度、核分裂指数、肺转移率和淋巴结转移率,免疫组织化学染色和图像分析法检测不同方法处理的s1裸鼠移植瘤组织中Caspase-3和Survivin的表达。结果鼻咽癌细胞CNE-2Z存在放射敏感性异质性,S1细胞是具有放射抵抗潜能的亚克隆株。TNF-α联合放射治疗对s1裸鼠移植瘤生长有明显抑制作用（P〈0．01）,TNF—α联合放射治疗组中瘤组织坏死程度、核分裂指数、肺转移率和淋巴结转移率与生理盐水联合放射治疗组比无明显差异（P〉0．05）。TNF—α联合放射治疗组S1裸鼠体内移植瘤细胞核中Caspase-3表达高于单独TNF—α处理组（P〈0．05）;各组S1裸鼠移植瘤细胞浆中Caspase-3及Survivin的表达无明显差异（P〉0．05）。结论TNF—α联合放射治疗可能通过影响胞核中Caspase-3表达抑制鼻咽癌裸鼠移植瘤生长。     

IL-2协同肿瘤坏死因子对移植性鼻咽癌的抗瘤作用

目的：研究重组人肿瘤坏死因子(rhTNF-a)与重组白介素一2(rhlL-2)协同体内抗鼻咽癌效应及抗瘤机理。方法：利用我室建立的鼻咽癌细胞株(CNE3)制成裸鼠鼻咽癌模型，用rhTNF-a或与rhlL-2联合瘤内注射以观察抑瘤效应及荷瘤组织细胞的病理学、超微结构的改变，探讨其作用机理。结果：鼻咽癌裸鼠移植瘤经rhTNF-a治疗后肿瘤出现坏死、体积缩小、甚至消失。rhlL-2能增强rhTNF-a的抗瘤作用。组织病理学及超微结构观察发现，大多数癌细胞出现粗面内质网扩张；核碎裂、核溶解而消失。结论：rhlL-2增强rhTNF-a的抗瘤机理可能与IL-2诱导癌细胞表达TNF受体作用有关，本研究为临床在鼻咽镜下进行肿瘤局部注射TNF进行治疗提供实验依据。     

细胞周期与鼻咽癌的放射增敏

目的探讨放射抵抗人低分化鼻咽癌的放射增敏。方法用流式细胞仪检测肿瘤坏死因子(TNFα)对CNE-2Z-S1细胞株的细胞周期同步化,应用克隆形成实验及裸鼠实验,于体外体内测定对S1细胞的放射增敏。结果TNFα使S1细胞的50%～80%阻滞在S期,并且呈剂量依赖性。S1细胞不加TNFα处理而直接于不同时间段去照射,其克隆存活率基本维持在35%～44%左右;而用TNFα处理12h后再照射,14～18h段的克隆存活率达最高峰,20～24h段的克隆存活率达最低峰。单次剂量单用TNFα治疗裸鼠移植瘤无效果,而TNFα+放射组的治疗效果却优于联合生理盐水+放射组(但无统计学意义)。结论TNFα能阻滞鼻咽癌细胞周期,达到细胞周期同步化的作用,从而使癌细胞放射敏感性显著增高。     

人鼻咽癌自发性高淋巴道转移模型的建立及生物学特性研究

目的在裸鼠体内建立人鼻咽癌自发性高淋巴道转移模型,并研究该癌细胞的有关生物学特性。方法将鼻咽癌单克隆细胞株（ＣＮＥ２ＺＨ５）移植于裸鼠皮下,待裸鼠发生转移时,取其淋巴结转移灶癌细胞再次移植裸鼠皮下传代,重复传９代后,观察各代裸鼠的转移率和转移途径;各代癌细胞体外增殖能力、癌细胞生长因子和受体表达的变化;裸鼠体内移植瘤增殖指数及瘤重和体积倍增时间的变化。结果癌细胞在裸鼠体内传９代后,各代裸鼠的淋巴结转移率一直稳定在８５％以上,且转移途径较为单一;各代癌细胞的体内外增殖能力不断增强。结论建立了人鼻咽癌自发性高淋巴道转移模型;鼻咽癌细胞在裸鼠体内演进中转移能力和增殖能力均不断增强,两者关系密切     

复方黄连对NF-κB活化相关基因在鼻咽癌移植瘤组织表达活性的影响

目的 探讨复方黄连抑制鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤生长的分子机制。方法 应用高通量互补DNA(cDNA)表达芯片杂交以及逆转录-聚合酶链式反应技术，分析复方黄连处理后CNE1和HNE1鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤组织NF-κB活化相关基因信使RNA(mRNA)的表达。结果 复方黄连在抑制移植瘤生长的同时，尚可改变包括TRAF5、TRAF6、TRAP2、p67、p68激酶、IxBα以及LAP-1在内的一些NF-κB活化相关基因在鼻咽癌移植瘤组织的表达。其中，IκBα和TRAF6基因的表达为上调，其余基因的表达均为下调。结论 复方黄连对鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用，可能与其调节移植瘤组织NF-κB的表达活性有关。     

加减八珍汤对人鼻咽癌6-10B裸鼠移植瘤生长抑制作用及瘤体组织中cyclinD1表达水平影响

目的:构建人鼻咽癌6-10B裸鼠移植瘤模型,给予该模型鼠加减八珍汤处理,通过HE染色、RT-RCR及Western blot,探讨该方对鼻咽癌裸鼠移植瘤生长及增殖能力的影响。方法:将10只建模成功的鼻咽癌裸鼠随机分为实验组和对照组,分别给予加减八珍汤(浓度150 mg/mL)和0.9%生理盐水各0.2 mL灌胃,每天两次,共14 d。观察裸鼠瘤体积的变化至第21天,显微镜观察移植瘤组织病理变化特点,RT-RCR及Western blot检测移植瘤组织中cyclinD1的表达。结果:HE染色证实人鼻咽癌6-10B裸鼠移植瘤建模成功。RT-PCR和Western blot检测结果表明加减八珍汤可显著下调cyclinD1 mRNA和蛋白质的表达(P0.05),抑制癌细胞的增殖,延缓肿瘤的生长。结论:在裸鼠体内,加减八珍汤能抑制人鼻咽癌细胞6-10B的增殖,从而达到抑制鼻咽癌组织生长的作用。     

rh-TNFα单用及与化疗药物合用对消化道癌细胞系的杀伤作用

观察重组人肿瘤坏死因子α(rh—TNFα)及其与化疗药物合用对五株消化道癌细胞的细胞毒作用,结果发现,rh—TNFα对五种细胞株均有不同程度的细胞毒效应。随着浓度的增高,其作用呈递增趋势。其中尤以对213细胞和C1184细胞的作用为明显(P<0.05);当rh—TNFα与5—Fu或PYM或MMC合用时,其细胞毒作用明显增强(P<0.05)。提示rh—TNFα对几种消化道癌细胞具有较广谱的杀伤活性,对临床试验治疗具有一定的参考价值。     

米非司酮抗人子宫内膜癌裸鼠移植瘤作用的实验研究

目的；观察米非司酮抗人子宫内膜癌裸鼠移植瘤的作用，为临床应用提供依据。方法；将裸鼠分为米非司酮、三苯氧胺、米非司酮＋三苯氧胺、对照４组，用药前观察移植瘤生长情况，是镜观察移植瘤，测定裸鼠血清雌二醇。结果；米非司酮抗癌作用与一三苯氧胺相似，二者联合作用增强。米非司酮使癌细胞坏死，内质网及线粒体肿胀，使裸鼠血清雌二醇升高。结论：米非司醇有抗子宫内膜癌作用，与三苯胺联合作用增强。     

TNFα对LAK细胞抗胃癌效应的影响

目的： 观察体外TNFα联用IL-2培养LAK细胞的抗胃癌作用及TNFα预处理后胃癌细胞对LAK细胞敏感性的变化。方法: 以不同浓度TNFα与IL-2配伍培养LAK细胞, 并做TNFα的单抗阻断试验, 用LDH释放法检测LAK细胞抗癌活性;以TNFα预处理胃癌细胞, 检测LAK细胞抗瘤活性。结果: TNFα在低浓度IL-2下增加LAK活性,使IL-2诱导同等LAK活性的浓度下降约10倍;TNFα预处理使LAK对其抗瘤活性提高约9％。结论: TNFα可增加IL-2诱导的LAK抗胃癌活性;TNFα预处理可使胃癌细胞对LAK的敏感性增加。     

鼻咽癌细胞株裸鼠移植瘤中癌细胞增生凋亡及其相关基因的表达

目的：研究鼻咽癌细胞株ＣＮＥ１、ＣＮＥ２裸鼠移植瘤中癌细胞增生、凋亡及其与肿瘤生长速度的关系,探讨移植瘤中肿瘤细胞凋亡的机理。方法：将鼻咽癌细胞株ＣＮＥ１、ＣＮＥ２分别接种于裸鼠皮下,并连续在体内传９代。对每一代肿瘤组织进行ＨＥ染色,ＴＵＮＥＬ法（原位细胞死亡末端标记法）检测原位细胞凋亡及免疫组化法检测ＰＣＮＡ、ｂｃｌ２、ｂａｘ和ｐ５３的表达。结果：ＣＮＥ２移植瘤生长速度快于ＣＮＥ１移植瘤;ＣＮＥ２移植瘤内肿瘤细胞分裂指数和细胞增生指数明显高于ＣＮＥ１移植瘤,而细胞凋亡却相对较少;移植瘤组织中的凋亡主要表现为“皱缩性坏死”和“凋亡小体”的形成;所有移植瘤组织中都有ｐ５３蛋白积聚和ｂａｘ过表达,但却未见ｂｃｌ２的表达。结论：ＣＮＥ１和ＣＮＥ２细胞株移植于裸鼠皮下后,生长速度的差异是由于肿瘤细胞增生凋亡比例不同所致;裸鼠移植瘤组织中瘤细胞的死亡主要表现为凋亡,凋亡的途径可能是不依赖于野生型ｐ５３,而由ｂａｘ所介导的     

蜂毒素对人肝癌细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用

目的 探讨蜂毒素对人肝癌细胞移植瘤在BALB/C裸鼠体内生长的影响.方法 建立人肝癌BEL-7402细胞裸鼠皮下移植瘤模型,观察瘤内注射蜂毒素对肝癌细胞移植瘤在裸鼠体内生长的影响.应用HE染色观察肿瘤组织形态学变化,采用免疫组织化学法检测肝癌组织微血管密度(MVD),酶联免疫吸附法检测裸鼠血清白细胞介素-8(IL-8)的水平,Western blotting法检测裸鼠肝癌组织中血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达情况.结果 荷瘤裸鼠瘤内注射蜂毒素剂量为40、60、80μg/kg时的抑瘤率分别为44.64%、62.86%、73.73%,药物处理组肿瘤体积明显小于模型组(P<0.01).光镜下见蜂毒素各组肿瘤组织出现片状坏死,肿瘤间质内可见肿瘤血管,并有血管破坏现象.蜂毒素可明显降低裸鼠肝癌组织微血管密度,药物处理组IL-8和VEGF的表达显著低于模型组(P<0.01).结论 蜂毒素能够明显抑制人肝癌细胞裸鼠移植瘤的生长,其作用机制可能与下调IL-8和VEGF的表达,抑制肿瘤血管生成有关.     

Genistein对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响

目的　观察PTK抑制剂Genistein对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法　对 3 0例裸鼠建立人卵巢癌皮下移植瘤模型 ,共分为 5组 :对照组 (含 0 0 4%DMSO的生理盐水 ) 0 2mg kg ,Genistein治疗组 0 4mg kgGenistein治疗组 (皮下注射 ) ,Cisplatin( 4mg kg ,静脉推注 )治疗组 ,Genistein与Cisplatin联合治疗组。观察不同药物治疗后第 7、14、2 1、2 8d各组裸鼠皮下移植瘤生长情况及裸鼠体重的变化 ,并进行病理组织学检查。结果　 0 .4mg kgGenistein皮下注射 ,对SKOV3裸鼠移植瘤的生长有明显抑制作用 ,与对照组相比 ,瘤体重量降低 ,肿瘤体积减小 ,坏死面积显著增加 ,但对裸鼠体重无明显影响。应用 0 4mg kgGenistein与 4mg kgCisplatin(静脉推注 )联合处理SKOV3裸鼠移植瘤有增强抑制作用。结论　Genistein具有抑制人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的作用 ;Genistein与化疗药物联合应用可增强抑瘤作用     

茶多酚对人鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用

目的：通过观察茶多酚在体内对人鼻咽癌细胞的抑制作用,探讨其可能的抗癌机制。方法以人鼻咽癌细胞株HONE1建立裸鼠皮下移植瘤模型,以茶多酚腹腔注射干预,在观察抑瘤率基础上,以实时荧光定量PCR及Western blot法分别检测裸鼠移植瘤VEGF在mRNA及蛋白水平上的表达变化。结果茶多酚具有显著抑制鼻咽癌细胞 HONE1移植瘤生长的作用,与模型对照组相比,低、高剂量茶多酚组体内抑瘤率分别为18．82％、47．66％,呈浓度相关性（P＜0．05）;荧光定量 PCR及Western blot结果示,茶多酚可下调VEGF的mRNA和蛋白表达水平,且呈浓度依赖性,其中高剂量组变化明显,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论茶多酚对人鼻咽癌HONE1细胞裸鼠移植瘤的生长具有明显抑制作用,机制可能与调节VEGF表达,从而抑制肿瘤血管生成等作用有关。     

米非司酮抗人子宫内膜癌裸鼠移植瘤作用的实验研究

目的：观察米非司酮抗人子官内膜癌裸鼠移植瘤的作用，为临床应用提供依据。方法：将裸鼠分为米非司酮、三苯氧胺、米非司酮＋三苯氧胺、对照４组，用药并观察移植瘤生长情况，电镜观察移植瘤，测定裸鼠血清雌二醇。结果：米非司酮抗癌作用与三苯氧胺相似，二者联合作用增强。米非司酮使癌细胞坏死，内质网及线粒体肿胀，使裸鼠血清雌二醇升高。结论：米非司酮有抗子宫内膜癌作用，与三苯氧胺联合作用增强。     

重组人血管内皮抑素联合放疗对CNE1鼻咽癌裸鼠皮下移植瘤生长及其VEGF、MMP-2和MMP-9 mRNA表达的影响

目的探讨重组人血管内皮抑素（恩度）联合放疗对人鼻咽癌细胞株1（CNE1）鼻咽癌裸鼠移植瘤的生长及血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）mRNA表达的影响。方法建立人鼻咽癌细胞裸鼠模型,成瘤后随机分为4组,对照组、恩度组、放疗组和恩度＋放疗联合组,分别进行恩度与放疗干预,观察各组移植瘤的生长速度和瘤体大小的变化。4周后处死裸鼠摘取瘤体,应用RT-PCR检测各组瘤体组织中的VECF、MMP-2和MMP-9 mRNA的表达变化。结果联合组对鼻咽癌移植瘤的生长有显著抑制作用,且明显强于其他三组（均P〈0.05）;联合组中VECF、MMP-2和MMP-9的表达与另外三组相比均显著下调（均P〈0.05）;VEGF与MMP-2及MMP-9的表达呈正相关（均P〈0.01）。结论恩度联合放疗能明显抑制CNE1鼻咽癌移植瘤的生长,恩度对鼻咽癌裸鼠抑制瘤具有放疗增敏作用,这种作用可能与VEGF、MMP-2和MMP-9表达下调有关。     

薏苡仁酯对人鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤的放射增敏作用

目的：探讨薏苡仁酯(coixenolide,CXL)对人鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤辐射效应的影响。方法：将该肿瘤细胞株CNE-2Z移植到裸鼠,成瘤后经CXL预处理再进行γ射线外照射。结果：CXL以量效方式提高移植瘤的放射敏感性。与对照组比较,肿瘤生长缓慢,放射损伤修复时间延长。放射增敏率7．19％～26．28％。结论：CXL对人鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤具有放射增敏作用。     

金黄色葡萄球菌感染对鼻咽癌裸鼠移植瘤增殖活性的影响

目的探讨金黄色葡萄球菌感染对鼻咽癌裸鼠移植瘤细胞增殖活性的影响及其可能机制。方法 24只BALB/c雌性裸鼠接种人鼻咽癌细胞HNE2,建立鼻咽癌裸鼠移植瘤模型。随机分成移植瘤模型对照组、移植瘤感染组和移植瘤治疗组,再从感染组裸鼠尾静脉注射金黄色葡萄球菌,制备鼻咽癌裸鼠移植瘤感染模型。造模后,每3天测量肿瘤大小,绘制生长曲线,15天后处死裸鼠,处死后称量瘤体重量,并对瘤体进行HE染色、增殖细胞核抗原(PCNA)及细胞凋亡检测。结果感染组裸鼠感染金黄色葡萄球菌后,瘤体迅速增大,重量明显增加,瘤体内增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞数明显增多,增殖指数(PI)升高。同时发现金黄色葡萄球菌感染鼠的瘤体内细胞凋亡指数明显下降。结论金黄色葡萄球菌感染能增强鼻咽癌裸鼠移植瘤增殖活性。     

EGCG对鼻咽癌细胞株裸鼠移植瘤的放疗增敏作用以及对Survivin表达的影响

目的研究凋亡抑制基因Survivin的表达与EGCG对鼻咽癌CNE-2裸鼠移植瘤放疗增敏作用的关系。方法将低分化鼻咽癌细胞CNE-2接种于4~6周龄的雌性裸鼠皮下,待移植瘤生长至4~6 mm时,随机分为4组,分别采用NS、EGCG[50 mg/(kg.w)]、放疗(15 Gy)、EGCG给药24 h后再行放疗等方法分别处理各组裸鼠,处理前后分别测量裸鼠移植瘤的短径、体积。21 d后处死裸鼠,取出肿瘤并称重,将肿瘤组织分成两份,分别用来进行病理切片TUNEL染色以及RT-PCR检测Survivin mRNR的表达。结果EGCG+放疗对裸鼠移植瘤的生长抑制最为明显,肿瘤生长抑制率为89.3%,消退率为40.0%。与对照组EGCG组、放疗组相比,EGCG+放疗组的凋亡指数均明显增加(P<0.05),同时,伴有Survivin mRNR的表达显著下降(P<0.05)。结论EGCG对鼻咽癌裸鼠移植瘤可能具有放疗增敏作用,这种作用可能与凋亡抑制基因Survivin的表达下调有关。     

人胃粘液腺癌裸鼠移植瘤模型的建立及其生物学特性的研究

将手术切除的原发性人胃癌新鲜组织移植于裸鼠皮下获得成功,并已经传至15代。建立的人胃粘液腺癌裸鼠移植瘤模型(GC—916)具有移植成功率高,带瘤时间长的特点。总移植成活率99％,移植瘤生长潜伏期14天,裸鼠最长带瘤存活时间为160天,平均带瘤存活时间为89天,经组织学、组织化学、免疫病理学和超微结构观察,证实裸鼠移植瘤保持了原发人体肿瘤的结构和功能,移植传代的胃癌细胞具有表达突变型P_(53)蛋白及产生癌胚抗原的特性。该移植瘤模型的建立为进一步研究人胃癌的基础理论和临床治疗提供了较理想的实验动物模型。