人永生化成骨细胞hFOB1.19恶性转化的研究

目的 建立人胚永生化成骨细胞系(hFOB1.19)的恶性转化模型, 作为骨肉瘤癌变过程细胞分子生物学研究的模型.方法 通过克隆形成率实验确定N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine, MNNG)对hFOB1.19细胞转化浓度后,以MNNG作启动剂,佛波酯(12-0-Te-tradecanoyl phorbol 13-acetate, TPA)作促进剂对hFOB1.19细胞进行转化,90 d后通过细胞形态、DNA含量分析、软琼脂集落形成试验和裸鼠体内致瘤试验鉴定细胞恶性转化程度.结果 经MNNG和TPA协同处理hFOB1.19细胞90 d后,细胞中出现形态异常的转化灶,转化灶细胞失去接触抑制; 高倍体细胞数,转化组(81.08%) 高于对照组(55.03%);软琼脂克隆形成率明显增加;转化细胞在裸鼠皮下成瘤,病理组织学证实为低分化骨肉瘤.结论 模拟人体细胞发生恶性转化的过程,建立了人胚永生化成骨细胞系的恶性转化模型.     

白介素-8对SKOV3细胞系卵巢癌干样细胞特性的影响

目的:研究白介素-8(IL-8)能否促成人卵巢癌SKOV3细胞系细胞肿瘤干细胞样细胞特性.方法:用添加或未添加重组人IL-8(rhIL-8:10.0 ng/mL)的干细胞条件培养基处理SKOV3细胞.肿瘤球形成和琼脂集落形成试验测定球形成率和集落形成率.蛋白质印迹分析肿瘤干细胞标志蛋白CD133和CD44表达水平.结果:rhIL-8(10.0 ng/mL)显著地增高SKOV3细胞肿瘤球形成率和琼脂集落形成率.此外,rhIL-8(10.0 ng/mL)上调SKOV3细胞CD133和CD44蛋白表达.结论:rhIL-8具有促进SKOV3细胞肿瘤干细胞样细胞特性作用.     

人成骨细胞株HOS TE85致瘤性转化的研究

目的建立人成骨细胞株HOS TE85致瘤性转化的模型, 作为骨肉瘤癌变过程细胞分子生物学研究的模型.方法通过克隆形成率实验确定N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N′-nitro-N-nitrosoguanidine, MNNG)对HOS TE85细胞转化浓度后,以MNNG作启动剂,佛波酯(12-0-Te-tradecanoyl phorbol 13-acetate, TPA)作促进剂对其进行转化,66 d后通过细胞形态、软琼脂集落形成实验和裸鼠体内致瘤实验鉴定细胞转化程度.结果经MNNG和TPA协同处理HOS TE85细胞66 d后,细胞中出现形态异常的转化灶,转化灶细胞失去接触抑制;转化细胞凝集性增强;软琼脂克隆形成率明显增加;转化细胞在裸鼠皮下成瘤,病理组织学证实为低分化骨肉瘤.结论模拟人体细胞发生恶性转化的过程,建立了HOS TE85的恶性转化模型.     

c－Ha－ras反义DNA及其衍生物对转化细胞恶性表型的逆转

应用突变ｃ－Ｈａ－ｒａｓ质粒ＤＮＡ转化小鼠Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２纤维细胞，发现细胞获得恶性表型。本文合成了反义ＤＮＡ（ｏｌｉｇｏ），它与ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因前４个密码子及其上游正链序列互补；并发现ｏｌｉｇｏ可有效地抑制恶性转化细胞内ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因表达、细胞在软琼脂中集落形成以及细胞在裸鼠体内的致瘤作用。补骨脂素修饰ｏｌｉｇｏ后，其生物学活性增强。     

c—Ha—ras反义DNA及其衍生物对转化细胞恶性表型的逆转

应用突变ｃ－Ｈａ－ｒａｓ质粒ＤＮＡ转化小鼠Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２纤维细胞，发现细胞获得恶性表型。本文合成了反义ＤＮＡ，它与ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因前４个密码子及其上游正链序列互补；并发现ｏｌｉｇｏ可有效地抑制恶性转化细胞内ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因表达、细胞在软琼脂中集落形成以及细胞在裸鼠体内的致瘤作用。补骨脂素修饰ｏｌｉｇｏ后，其生物学活性增强。     

贫铀对人肾小管上皮细胞的毒性作用

目的　阐明贫铀 (depleteduranium ,DU)对人肾小管上皮细胞 (humankidneycell,HKC)的急性毒性作用及损伤部位 ,为救治提供依据。方法　将 0 0 63～ 0 5 0 0mg ml的DU溶液作用于HKC ,研究细胞超微结构、存活率的变化 ,多种酶含量的改变及HGPRT基因突变的频率。结果　 0 0 63～ 0 5 0 0mg ml浓度的DU可引起HKC细胞结构改变 ,存活率显著下降 ;溶酶体酶NAG含量随DU浓度的增加而增加 ;其他酶含量也发生变化 ;HGPRT基因突变的发生率显著高于正常对照组 ,并呈二项式相关关系。加入苯乙酸、亚硒酸钠使上述指标变化不大。结论　DU可引起细胞活力降低 ,损伤细胞膜、线粒体、溶酶体等 ,使细胞抗氧化能力下降 ;HGPRT基因突变率与DU浓度之间呈相关关系 ;加入恶性转化的抑制剂亚硒酸钠和苯乙酸 ,不会显著增加DU的毒性作用     

外源性mIκBα基因抑制肝癌细胞HepG2的生长

目的观察核转录因子的抑制基因mIκBα在肝癌细胞株HepG2的表达及对该细胞株生长的影响。方法将由293包装细胞产生的含mIκBα的Ad腺病毒上清(Ad-mIκBα)和含包装载体的腺病毒上清(Adv)感染HepG2细胞,观察感染后HepG2细胞的绿色荧光蛋白(GFP)表达和mIκBα蛋白表达,并观察细胞的平板集落形成数、软琼脂集落形成能力、细胞生长曲线、裸鼠成瘤实验。结果肝癌细胞感染腺病毒后GFP表达阳性,感染含mIκBαAd腺病毒的肝癌细胞有mIκBα蛋白表达;HepG2/Ad-mIκBα细胞形成的集落数明显比HepG2/Adv和HepG2细胞形成的集落数少(P<0.05);HepG2细胞、HepG2/Adv细胞在软琼脂内存活,并形成桑椹样细胞集落,而HepG2/Ad-mIκBα细胞在软琼脂上无生长;细胞生长曲线显示HepG2/Ad-mIκBα细胞生长速度较HepG2/Adv、HepG2亲本细胞有所减慢,但饱和密度无显著性差异。裸鼠接种4周后HepG2/Ad-mIκBα细胞成瘤率为80%,HepG2/Adv细胞成瘤率为100%,肿瘤形成率无显著性差异,HepG2/Ad-mIκBα细胞形成的肿瘤的体积比HepG2/Adv细胞形成的肿瘤的体积明显减小(P<0.05)。结论mIκBα基因可以抑制HepG2肝癌细胞的生长。     

人大肠癌NSY42129肺高转移株建立及其生物学特性

NSY 42129细胞株是从大肠癌患者肝转移灶瘤细胞建立起来的。该细胞株经皮下接种,在5只裸鼠体内肿瘤形成率为100%,并全部发生肺转移。该细胞株在体外呈贴壁和多复层克隆样生长,在10%NBSRPMI 1640培养液和塑料或玻璃瓶皿中的克隆(集落)形成率为50%,在半固体培养基(双层琼脂)中为15%。在抗肿瘤的药敏实验或筛选抗肿瘤药物中、该细胞株可以代替双层琼脂人癌细胞集落实验。     

亚砷酸钠诱导 HaCaT细胞恶性转化实验

目的探讨低浓度亚砷酸钠（NaAsO2）对人永生化但无致癌性的皮肤角质细胞株（HaCaT）的影响。方法（1）细胞培养：HaCaT细胞株常规培养,隔日换液,4 d传代;（2）细胞毒性实验：MTT法检测细胞毒性,确定最佳染毒剂量;（3）细胞转化实验：HaCaT细胞在含0．05 ppm NaAsO2培养液中连续传代培养40代（约160 d）,细胞培养期间,倒置显微镜下观察每代细胞形态的变化并采集图片,MTT法检测细胞增殖能力,半固体琼脂实验检测细胞克隆形成率。结果NaAsO2处理细胞形态学、增殖能力及非停泊依赖性能力均发生变化,主要表现为多核巨细胞,倍增时间缩短,在半固体琼脂培养基上形成集落及克隆形成率明显增加。结论NaAsO2处理的细胞发生恶性转化,砷诱导体外细胞恶性转化模型建立成功。     

大鼠肠上皮细胞系IEC-6的恶性转化研究

目的建立N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍（N-methyl-N’-nitro-N-nitrosoguanidine，MNNG）、佛波酯（12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate，PMA）对大鼠肠上皮细胞系IEC-6的恶性转化模型。方法通过克隆形成率实验确定MNNG、PMA对IEC-6细胞转化浓度，对IEC-6细胞进行分阶段多次干预。用软琼脂集落形成实验和裸鼠体内致瘤实验鉴定细胞恶性转化程度。结果经MNNG、PMA多次处理IEC-6细胞至24次后，细胞生长速度加快，排列紊乱，失去接触抑制，出现复层生长，并可在软琼脂上生长，且呈剂量反应关系，但在第24次之前的细胞则不能在软琼脂上生长。转化细胞在裸鼠体内形成瘤，病理组织学证实为低分化肠上皮细胞癌。结论MNNG、PMA具有使IEC-6细胞发生恶性转化的能力。     

金窪七朗<素问考>与丹波元简<素问记闻>

金窪七朗生卒年月不详,原名鳌城公观,后改名金窪七朗.著<素问考>,全四册,不分卷,日本武田科学振兴财团杏雨书屋藏书,大阪オリエント出版社影印出版,小曾户洋于书末撰解说.     

PCR—SSP检测HLA—B27基因的方法及临床意义

目的：建立快捷、特异的PCR－SSP检测HLA－B27基因的方法。方法：以钾缓冲液提取50－200μl外周血中的DNA，设计序列特异性的HLA－B27引物进行PCR扩增检测HLA－B27基因，结果与淋巴细胞毒方法（MLCT）相对比。结果：所设计引物可扩增出目的基因片段，钾缓冲液提取DNA可满足PCR要求，全部检测过程可在6h内完成。在225例门诊和住院患者中，HLA－B27阳性率在PCR方法和MLCT方法分别为77．3％和68．0％，两者的一致率为83．6％，在88例肯定的脊柱关节病（SpAs)住院患者中，HLA－B27阳性率在PCR方法为92．1％，在MLCT方法为81．8％，两者的一致率为89．8％。结论：PCR方法检测HLA－B27较MLCT方法敏感，特异和快捷，标本用量少、采集和保存方便，便于大量样本的临床和流行病学研究。     

计算机辅助、CT导向血肿碎吸治疗高血压脑出血

目的 :为探索高血压脑出血安全有效的治疗方式。方法 :对 5 2例基底节区高血压脑出血患者 ,出血量在2 5ml～ 6 5ml。采用计算机辅助、立体定向与CT结合定位 ,局麻经颞部钻孔放置特制血肿螺旋抽吸针 ,在间断负压作用与生理盐水反复冲洗和螺旋针芯搅动下将血肿大部清除。术后立即复查CT确定残留血肿量 ,决定是否进行进一步的血肿腔尿激酶 (UK)溶解治疗。结果 :35例血肿手术清除达 80 %以上 ,术后不必进行血块溶解治疗 ,10例血肿清除在 5 0 %～ 80 %之间 ,7例血肿清除小于 5 0 % ,术后继续进行血肿腔血块溶解治疗。死亡 8例 ,死亡率 15 .4 % ,优良 36例 ,优良率 70 %。结论 :计算机辅助、CT引导立体定向高血压脑出血血肿碎吸术是治疗中等出血量出血的安全有效的方法     

200例肿瘤CT诊断与病理诊断对比分析

将２００例ＣＴ诊断为肿瘤的患者手术后进行病理组织学诊断，两者的诊断符合率为９０．５％，ＣＴ误诊率为９．５％。对误诊的原因进行了分析，强调在肿瘤诊断中ＣＴ与病理诊断互补性的重要意义。     

B超联合宫腔镜及腹腔镜诊治宫内节育器并发症的临床研究

目的探讨B超联合宫腔镜及腹腔镜在宫内节育器（IUD）并发症诊治中的临床应用价值。方法回顾性分析酒泉市人民医院妇产科在2000年1月至2007年12月间，应用B超联合宫腔镜及腹腔镜处理32例IUD异常的情况。结果使用B超及宫腔镜，对有并发症的32例IUD进行诊断，32例具有异常或异位的IUD成功地由宫腔镜和腹腔镜取出，其中24例移位、变形、嵌顿、断裂、尾丝脱落残留在宫腔的IUD以宫腔镜取出，8例异位盆腹腔的IUD在腹腔镜下取出，其中3例腹腔镜术中同时进行B超实时监测。无术中、术后并发症的发生。结论B超联合宫腔镜及腹腔镜诊断处理IUD并发症具有诊断明确、手术成功率高、创伤小的优点，是一种集检查、诊断和手术治疗为一体的微创性手术。因此，我们认为对于IUD并发症的诊治，B超联合宫腔镜及腹腔镜是最佳诊治手段，应首选。