异核苷掺入寡核苷酸的合成及其与互补序列的结合研究

目的合成异核苷掺入寡核苷酸并考察它们与互补序列的结合能力.方法采用DNA固相合成仪合成寡核苷酸,通过热变性实验考察双链的稳定性.结果合成了四条单异核苷掺入的寡核苷酸,热变性实验结果发现异核苷的引入降低了双链的稳定性,当异核苷处于寡核苷酸链的中央时,这种影响更为明显.异核苷6′-OH处于游离和烯丙基保护状态时的结果没有显著差异.结论寡核苷酸中的异核苷使链发生扭曲,从而导致双链稳定性降低.     

异鸟苷掺入的富鸟嘌呤寡核苷酸的合成

目的改进异鸟苷单体的合成路线,合成异鸟苷掺入的富鸟嘌呤的寡核苷酸.方法以6-O-苄基鸟嘌呤为原料,经环氧开环、催化氢化、水解还原制备异鸟苷,经多步反应后得到异鸟苷亚磷酰化产物,采用固相合成方法合成异鸟苷掺入的富含鸟嘌呤的寡核苷酸.结果与结论经环氧开环能够区域选择性地得到N9取代的单一产物,收率提高到40%,并成功地合成了异鸟苷掺入的富含嘌呤十六聚寡核苷酸.本合成路线具有区域选择性强、路线简单、易操作、收率高等优点.     

以二硫键连接尿嘧啶核苷C-5位肽缀合物的合成

为了方便快捷地制备嘧啶核苷-肽缀合物,我们发展了一种一釜合成的方法。从尿嘧啶核苷出发,经过4步制备了关键中间体5-乙酰巯亚甲基-2′,3′-二-O-异亚丙基尿苷（4）。在酸性条件下,脱除化合物4的乙酰基,同时游离的巯基与PySS-R（8,12,15,Py=2-吡啶基,R=氨基酸或肽）反应形成新的二硫键,即形成了尿苷与氨基酸或肽以二硫键连接的缀合物（9,13,2）。     

具有二肽结构的ADPR类似物的合成

为进一步探讨ADPR的生物学功能，本文设计并合成了用天门冬氨酸二肽代替焦磷酸结构的一类新型ADPR类似物。通过以5’-氨基腺苷或其模拟物为起始原料，采用类似于液相肽的合成方法，成功地构建了四个目标分子，其结构经。HNMR、HRMS等进行了鉴定。本研究为新型ADPR类似物的合成提供了一条便利途径。     

8－氯腺苷的抗肿瘤作用研究

采用国内合成的８－氯腺苷经体内、外实验研究，结果表明，用１００ｍｇ·ｋｇ￣（－１）·ｄ￣（－１）×７剂量，可使小鼠肝癌实体瘤Ｈ＿２２抑制率达７１．７％±１３．３％腹腔注射（ｉｐ）和６６．１％±４．４６％静脉注射（ｉｖ），使白血病Ｌ１２１０荷瘤小鼠的生命延长率达１２４．Ｏ％±２２．１％（ｉｐ）和１０４．２％±２０．１％（ｉｖ）。体外实验显示，８－氯腺苷对人白血病细胞系ＨＬ－６０和Ｋ＿５６２以及人胃癌细胞系ＭＧＣ８Ｏ－３均有明显抑制生长作用，其ＩＣ＿５０值分别为：１．８μｍｏｌ／Ｌ、４．２μｍｏｌ／Ｌ和１．５６μｍｏｌ／Ｌ。该药采用腹腔一次注射测定小鼠的ＬＤ＿５０为：１０２５．０±５２．４ｍｇ／ｋｇ；大鼠的ＬＤ＿５０为：７９３．４±７０．７ｍｇ／ｋｇ，表明其急性毒性很低。     

吗啡类似物的研究——4β-羟基-6-甲氧次甲氧基-9bβ-甲氧羰甲基六氢双苯骈呋喃的合成

本文描述了以中间体2-氧-3aα-(2′,3′-双甲氧次甲氧苯基)-7α-碘-八氢苯骈呋喃通过甲醇解制备4β-羟基-6-甲氧次甲氧基-9 bβ-甲氧羰甲基六氢双苯骈呋喃的方法,而确定了立体化学结构。     

地高辛甙元标记DNA探针的试剂研究

利用补骨脂素(Psoralen)在可见光照射下可与DNA双链结合的性质,Sheldon提出在DNA探针的末端连结一段双链DNA,用连有生物素的补骨脂素与其光反应则可在DNA探针的末端标记生物素。据报道其检测灵敏度可达1×10~4拷贝。我们在研究补骨脂素与双涟DNA光反应时发现,补骨脂素不仅可与双链DNA交联而且也可与单链DNA结合,与补骨脂     

3-(R)-(碱基)-4-(S)-羟基-5-(R)-羟亚甲基四氢呋喃的合成及抗肿瘤活性

目的：研究一系列３（Ｒ）单脱氧异核苷的合成和抗肿瘤活性。方法和结果：由Ｌ木糖出发,合成了环氧化物５（Ｒ）二甲氧甲基３（Ｓ）,４（Ｓ）环氧四氢呋喃４;在碱性条件下,利用嘌呤的Ｎ９位或嘧啶的Ｎ１位对环氧化物进行亲核进攻,得到一系列３（Ｒ）单脱氧异核苷５ａｄ和６ａｄ;并进行了体外抗肿瘤活性筛选。结论：其中３（Ｒ）单脱氧异核苷５ａｄ为首次报道;同已报道的３（Ｓ）单脱氧异核苷合成方法相比,路线缩短,收率提高。在体外抗肿瘤和端粒酶抑制活性筛选中,只有化合物６ａ显示了对ＢＩＵ细胞较弱的抑制活性,其余均未显示有意义的抗肿瘤活性和端粒酶抑制活性。     

9-β-D-腺嘌呤阿拉伯糖苷-5''''-单磷酸的合成

本文报告合成9-β-D-腺嘌呤阿拉伯糖苷-5＇-单磷酸的简化操作过程,总收率达32％。     

异核苷掺入和肽缀合修饰的寡核苷酸(英文)

人工合成的寡核苷酸, 包括反义寡核苷酸、干扰RNA等, 显示了优异的临床潜在应用价值。但要实现合成的寡核苷酸的广泛临床应用, 必须要克服一些障碍性问题, 如该类结构的不稳定性、非特异性作用及难以跨膜吸收等。本文综述了张礼和院士课题组在异核苷掺入及肽缀合寡核苷酸方面的研究成果。