茶树油对乙酰胆碱酯酶的抑制作用

许多除虱制剂通过抑制乙酰胆碱酯酶(AChE)产生杀虱及其虫卵作用。茶树油是治疗头虱的外用制剂中的活性组分。作者研究了茶树油是否至少部分地通过抑制AChE而产生除虱作用的。以GC一MS分析所试4种茶树油样     

茶树油微囊乳液对水蛭的驱避效果研究

  目的  将茶树油制备成微囊乳液, 评价其对水蛭的驱避效果并阐明驱避机理。  方法  以吐温20作为增溶剂制备茶树油水溶液。司盘80作为乳化剂制备得茶树油乳液,以明胶、海藻酸钠作为囊材,采用复凝聚法制备茶树油微囊,对微囊的粒径、形貌及结合方式等进行表征。将微囊分散到茶树油乳液中即得茶树油微囊乳液。采用滤纸圈法、水中驱避试验考察比较茶树油微囊乳液、茶树油水溶液、空白微囊及阳性药物驱蚊酯对日本医蛭在不同环境中的驱避作用及茶树油微囊乳液的驱避时长。以体内乙酰胆碱酯酶(AchE)、谷胱甘肽S转移酶(GST)和羧酸酯酶(CarE)活性变化为指标,阐明茶树油微囊乳液对水蛭的驱避机理。  结果  优化得到复凝聚产率较高的明胶与海藻酸钠最佳配比处方,成功制备粒径分布不均一、包封率较高的微囊。根据正交设计筛选出最优处方,制备得分散均匀、稳定均一茶树油微囊乳液。药效学实验表明其驱避时间长、驱避效率高。茶树油微囊乳液通过提高水蛭体内AchE活性、抑制GST及CarE活性发挥驱避作用。  结论  茶树油微囊乳液可避免茶树油挥发, 延长驱避水蛭的有效作用时间, 为天然精油作为驱避剂研发提供新思路, 具有广阔的市场前景。      

小鼠大脑乙酰胆碱酯酶提取、测定优化及异喹啉类生物碱乙酰胆碱酯酶抑制活性研究

目的优化小鼠大脑乙酰胆碱酯酶(AChE)提取、测定方法,评价异喹啉类生物碱的AChE抑制活性。方法采用蔗糖密度梯度离心及Ellman法评价不同提取方法对小鼠大脑AChE亚型表达及提取影响,优化测定方法,并在此基础上对异喹啉类生物碱的AChE抑制活性及构效关系进行考察。结果匀浆+超声、匀浆提取法对大脑AChE亚型表达一致,但前者AChE提取效果较优。随着反应温度、显色时间增加,药物AChE抑制活性增强,但显色时间超过30 min时,药物AChE抑制活性趋于平缓。随着大脑裂解液稀释倍数增加,药物AChE抑制活性未明显变化,且稀释10～20倍时,空白组AChE吸光度值为0.6～1.5。异喹啉类生物碱具有较好AChE抑制活性,而叔胺型生物碱AChE抑制活性降低。结论匀浆联合超声对小鼠大脑AChE有较好提取效果;反应温度37℃,显色时间30 min,大脑裂解液稀释10～20倍时,药物AChE抑制活性灵敏度、准确性好。异喹啉类生物碱的AChE抑制活性与其季胺型结构密切相关。     

从噬菌体随机十二肽库中筛选乙酰胆碱酯酶的抑制肽

目的从随机肽库中筛选乙酰胆碱酯酶（ACHE）的抑制性多肽。方法以人AChE作为靶标，应用噬菌体随机12肽库进行筛选，经过3轮筛选，对阳性克隆进行测序并进行序列分析及抑酶活性测定。结果筛选得到6个能与人AChE较强结合的噬菌体克隆，其中有4个克隆可以抑制AChE的酶活性，其保守序列为W（S／P）HY。结论通过噬菌体肽库技术能够筛选到抑制人AChE活性的多肽，为进一步研究AChE的多肽抑制剂奠定了基础。     

茶树油杀菌效果分析

目的 验证茶树油对致病微生物的杀灭作用,寻找有效、方便实用的新一代消毒剂.方法 用军科院提供的金黄色葡萄球菌ATCC6538(第4代)、白色链珠菌ATCC10231(第9代)、大肠埃希菌8099(第4代)用重庆产茶树油作三次重复定量杀菌试验.结果 茶树油对以上三种微生物10分钟杀灭作用达分别为92.46%、76.49%、99.99%.结论 茶树油可作为制造有效、方便、实用的消毒剂之原料.     

从丹参中分得具乙酰胆碱酯酶抑制活性的二萜类化合物[英]／Ren Y H…／／Planta Med

作者从丹参Salvia miltiorrhiza Bung丙酮提取物中分离到4个具乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制活性的二萜类化合物，并以改良的Ellman方法为导向，研究了它们对AChE的抑制活性。     

从丹参中分得具乙酰胆碱酯酶抑制活性的二萜类化合物

作者从丹参Salvia miltiorrhiza Bung丙酮提取物中分离到4个具乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制活性的二萜类化合物,并以改良的Ellman方法为导向,研究了它们对AChE的抑制活性。丹参干燥根于55℃用丙酮提取4h,减压回收溶剂至干。提取物经VLC硅胶柱层析,依次用甲苯、甲苯-二氯甲烷(1:1)、二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮和甲醇洗脱,通过TLC检测得到6个部位F1～F6。将显示AChE抑制活性的F1和F2合并,以CC硅胶柱层析得4个部位     

久效磷对硫磷抑制乙酰胆碱酯酶的动力学比较

久效磷、对硫磷与大鼠血影细胞温育,对血影细胞AChE呈竞争性抑制。对硫磷与血影细胞AChE的亲合力大于久效磷。孵育液中存在ATCh时,ATCh的存在可使对硫磷与AChE的亲合力下降,而使久效磷与AchE的亲合力增强。     

大鼠蓝斑衰老变化——Ⅱ.细胞乙酰胆硷酯酶活性定量研究

用二异丙基氟磷酸(DFP)控制的乙酰胆硷酯酶(AChE)活性的药物组织化学方法,研究衰老大鼠蓝斑核(LC)含AChE神经元胞体在被DFP抑制后重新产生AChE量的变化。对5只3个月龄和6只26月龄大鼠LC的AChE细胞,用图像分析仪测量细胞灰度(酶活性浅染或深染后的透光度),细胞数目及细胞大小。三种参数分别列表与图加以比较。结果,老年大鼠LC胞体产生AChE速率减低,AChE活性明显减弱,AChE细胞数显著减少,细胞截面积也变小。     

银杏叶提取物对点燃模型幼鼠学习记忆及海马乙酰胆碱酯酶、胆碱乙酰转移酶活性的影响

目的研究银杏叶提取物（EGb）对点燃模型幼鼠学习记忆等认知功能,对大鼠海马乙酰胆碱酯酶（AChE）、胆碱乙酰转移酶（ChAT）活性的影响。方法21、35日龄SD大鼠各40只,经初筛后随机分为生理盐水对照组、点燃对照组及EGb大、中、小剂量治疗组,采用戊四氮（PTZ）诱导幼鼠点燃模型,以Y型电迷宫及生化检测方法,观察用药前后大鼠学习记忆功能和海马AChE、ChAT活性的变化。结果EGb呈剂量依赖性显著改善实验大鼠的学习记忆能力,并显著抑制海马AChE活性、增强ChAT的活性。结论EGb可以通过抑制功能脑区AChE活性、增加ChAT的活性,增强中枢胆碱能神经系统的功能,改善发育期癫痫大鼠学习记忆功能。     

涕灭威的生理药代动力学/药效学模型在风险评估中的应用

目的:对大鼠和人急性口服涕灭威所致乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制的无明显不良反应剂量(NOAEL)进行估算,并探讨若饮用美国4个不同地区含有涕灭威残量的地下水而带来的健康影响。方法:采用已构建的大鼠和人的生理药代动力学/药效学(PBPK/PD)模型进行模拟运算。结果:大鼠血液和脑内AChE抑制的NOAEL模拟值分别为0.0169和0.0158 mg/kg(文献报道为0.03和0.06 mg/kg)。模型预测人血和脑AChE抑制的NOAEL值为0.0052和0.0055 mg/kg(文献值为0.01和0.025 mg/kg)。如饮用污染的地下水,所致AChE的抑制对人体不构成显著影响。结论:本模型有助于涕灭威的健康风险评估。     

溴氰菊酯对德国小蠊AChE及GSTs作用研究

目的通过研究溴氰菊酯对德国小蠊若虫和成虫的AChE和GSTs的影响,探讨溴氰菊酯在化学防治德国小蠊中的作用。方法用药膜法测定东营市野外品系的德国小蠊的KT50;每隔一段时间选取与药膜接触的活体德国小蠊若虫,冰浴匀浆后用试剂盒测定AChE和GSTs的活力。结果溴氰菊酯对德国小蠊的成虫和若虫的KT50相差不大,分别为19.9min和18.7min,差异无统计学意义。德国小蠊的若虫与成虫对GSTs有较大差异,成虫的GSTs活力是若虫的2倍多。经溴氰菊酯诱导后,若虫在35min相对活性最高,达175%。对成虫的GSTs诱导作用在30min时诱导率达最高,为109.93%。结论生测结果显示,溴氰菊酯对AChE有抑制作用,对GSTs有诱导作用,对酶的活性抑制及诱导效应与时间成正相关。     

生物酶制剂JA对人乳腺癌细胞MDA-MB-435s的抑制作用

目的:本研究采用生物酶制剂JA,对人乳腺癌细胞MDA-MB-435s进行药物干预,探讨此制剂对乳腺癌消融的可能机制,为临床应用提供合理的科学依据。方法:通过MTT法,倒置相差显微镜观察及扫描电镜观察细胞超微结构,流式细胞仪检测细胞周期。从不同的角度来观察JA制剂对乳腺癌细胞的作用。结果:JA制剂明显抑制乳腺癌细胞增长,使细胞坏死,促进凋亡。结论:JA对人乳腺癌细胞MDA-MB-435s有很强的生长抑制作用,随着浓度的增加和时间的延长,作用越明显;JA制剂抑制乳腺癌MDA-MB-435s的可能机制是通过抑制细胞生长周期和促进细胞凋亡和坏死途径实现的。     

生姜水提物对血管性痴呆模型大鼠的影响

目的 探讨生姜水提物对血管性痴呆(VD)的治疗作用与机制.方法 SD雄性大鼠随机分为假手术组,模型对照组,尼莫地平组,生姜水提物高、中、低剂量组.采用反复结扎与开放双侧颈总动脉的方法复制VD模型,Morris水迷宫定位航行实验和空间探索实验测定大鼠空间学习记忆能力,光化学比色法测定大脑皮质和纹状体乙酰胆碱酯酶(AChE)、SOD活性和MDA含量.结果 与假手术组比较,VD对照组大鼠morris空间学习记忆能力和纹状体AChE活性明显降低,皮质AChE活性无明显变化;脑组织SOD活性和MDA含量分别有降低和升高的趋势,但无统计学意义.生姜水提物能明显提高VD大鼠morris定位航行能力和空间搜索能力;显著提高纹状体AChE活性,与模型对照组及石杉碱甲组比较均有显著性差异.对皮质AChE活性无明显影响;生姜高剂量能明显降低MDA含量,升高SOD/MDA比值.结论 生姜具有提高血管性痴呆大鼠学习记忆能力的作用,作用机制与提高胆碱能神经功能和抑制胆碱酯酶活性有关.     

茶树油皮肤消毒液的毒理学安全性评价

目的研究茶树油皮肤消毒液反复使用对哺乳动物的毒性,为茶树油消毒剂的进一步开发利用提供理论依据。方法按照《消毒技术规范〉）（2002年版）,采用大、小鼠急性经口毒性试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、家兔皮肤刺激性毒性试验和大鼠亚急性毒性试验,观察茶树油皮肤消毒液对实验动物的毒性作用。结果大、小鼠的急性经口毒性试验结果显示,茶树油皮肤消毒液的LD50均大于5000mg／kgBW,属实际无毒级;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果为阴性,未发现该受试样品对体细胞有诱变作用;新西兰家兔的多次完整皮肤束B激实验结果,每只动物的平均积分小于0．5,属无刺激性;亚急性毒性试验,给药量在1000mg／kgBW以下,各剂量组与阴性对照组比较,大鼠的体重、脏体系数、血清生化指标及血常规无显著影响,脏器组织病理学检查未发现异常。结论在本实验条件下,茶树油皮肤消毒液毒性较低,刺激性小,将其开发成消毒剂具有广阔的前景。     

乙酰胆碱酯酶在家兔小脑内的分布

研究了11只家兔小脑内AChE活性的分布。采用改良的经典组织化学技术来显示AChE活性。小脑皮质颗粒层一般有很强的AChE活性,而浦肯野细胞层的分子层的浅部则呈AChE反应阴性。分子层的深部和小脑白质的AChE活性较弱。而且有很多阳性神经元出现在后叶的分子层中,以X小叶最为密集。在小脑白质中,发现5条与正中面相平行的AChE活性较强的纵带。其中蚓状正中面上的正中带出现在除Ⅵ、Ⅶ小叶以外的各小叶中;对称分布的内侧带出现在前叶的Ⅱ到Ⅴ小叶和后叶的Ⅷ、Ⅸ小叶;外侧带只出现在Ⅸc和Ⅸd分叶。小脑中央核显示很强的AChE活性。在颗粒层的胶质细胞和白质中发现有丁酰胆碱酯酶(BuChE)的活性,而且在近颗粒层的白质活性更强。     

柴胡皂苷对抑郁模型大鼠海马乙酰胆碱代谢及组织形态学影响的实验研究

目的观察慢性应激抑郁模型大鼠脑组织中海马区Ach的表达情况,以及柴胡皂苷对该因子表达水平的影响,为临床抗抑郁中药研发提供实验基础。方法 100只SD大鼠随机分为正常对照组、慢性应激模型组、氟西汀组、柴胡皂苷中药治疗组共4组。采用慢性不可预见性应激法制作大鼠抑郁模型,通过免疫组织化学染色法观察大鼠大脑组织海马区AChE与ChAT的表达变化,同时利用TUNEL检测该区的细胞凋亡。结果免疫组化实验：与空白对照组比较,模型组大鼠海马区AChE、ChAT的蛋白表达均明显升高（P〈0.05）,与模型组相比较,西药组及中药治疗组海马区AChE、ChAT表达均明显降低;TUNEL检测结果：与正常对照组比较,模型组大鼠海马CA3区凋亡细胞数目明显增加;与模型组相比较,西药组、中药组海马CA3区凋亡细胞数目减少。结论柴胡皂苷抗抑郁作用与其抑制大脑组织海马区ChAT蛋白的表达、降低大脑海马区AChE活性,减少大脑海马区神经细胞凋亡有关。     

免疫抑制剂的应用

免疫抑制剂足通过影响机体的免疫应答反应和免疫病理反应抑制机体的免疫功能的制剂。多数免疫抑制剂对机体免疫系统的作用缺乏特异性和选择性，既可抑制免疫病理反应，又干扰正常应答反应，既抑制体液免疫，又抑制细胞免疫。     

硒锌制剂拮抗氟毒性作用的实验研究

为研究硒锌制剂对氟毒性的影响，大鼠在饮高氟水的同时给予硒锌制剂，结果发现硒锌制剂可通过促进尿氟排泄，增加GSH－Px和SOD活性及GSH含量而抑制氟引起的脂质过氧化，从而降低尿γ－GT活性和LPO水平。提示硒锌制剂对氟毒性具有明显的拮抗作用，其机理与促进尿毒排泄和抗脂质过氧化作用有关。     

脱氧鬼臼毒素对３龄菜青虫头部ＡＣｈＥ、ＡＴＰａｓｅ活性的影响

目的:研究脱氧鬼臼毒素(DOP)对3龄菜青虫的毒杀作用及中枢神经系统AChE、ATPase活性的影响,探讨其杀虫机制.方法:采用小叶碟添加法,测定DOP对3龄菜青虫的毒杀活性,建立染毒模型,用试剂盒测定AChE和ATPase活性.结果:①DOP对3龄菜青虫的毒杀活性表现出浓度、时间依赖性,48 h LC50=151.87 mg/L＞72 h LC50=39.99 mg/L＞96 h LC50=10.60mg/L.②DOP对AChE活性没有明显影响.③高浓度(125 mg/L)组对ATPase活性持续抑制,中浓度(5、25 mg/L)组在24 h时激活,48 h时恢复正常,72 h时保持正常(5 mg/L)或抑制作用(25 mg/L).结论:DOP对3龄菜青虫具有毒杀作用;3龄菜青虫中枢神经系统AChE不是DOP靶标.ATPase可能是DOP的重要靶标之一.