龟鹿二仙胶汤治疗膝骨性关节炎的临床研究

观察龟鹿二仙胶汤对膝骨性关节炎的临床疗效.选择符合中西医诊断标准的临床患者120例,按就诊顺序随机分为2组,以龟鹿二仙胶汤和壮骨关节丸对照治疗.结果治疗组总有效率为98.3%,对照组为88.3%,治疗组的疼痛缓解、活动范围、步行能力、日常动作等指标明显优于对照组,2组比较有显著性差异（P＜0.01）.说明龟鹿二仙胶汤能有效的改善膝骨性关节炎的临床症状.     

龟鹿二仙汤治疗绝经后骨质疏松症临床观察

目的:观察龟鹿二仙汤治疗绝经后骨质疏松症患者的临床疗效及作用机制。方法:选择绝经后骨质疏松症患者60例,所有患者均以碳酸钙D3(600 mg/d)作为基础药,将其分为治疗组和对照组,治疗组应用龟鹿二仙汤;对照组应用阿仑膦酸钠,每组各30例,评价治疗前后疼痛和骨密度、性激素的变化。结果:龟鹿二仙汤组腰椎、股骨颈的骨密度明显增加,疼痛明显减轻,龟鹿二仙汤组在疼痛控制、骨密度的增加方面明显优于阿仑膦酸钠组,在性激素检测中发现龟鹿二仙汤组的雌二醇(E2)、睾酮(TESTO)较治疗前有明显提高,与治疗前比较有明显差异,具有统计学意义。阿仑磷酸钠组雌二醇(E2)、睾酮(TESTO)相对治疗前无明显差异,无统计学意义。结论:龟鹿二仙汤能够提高绝经后骨质疏松症的腰椎、股骨颈的骨密度,能缓解其疼痛,其作用机制考虑与雌二醇、睾酮的提升有关。龟鹿二仙汤治疗绝经后骨质疏松安全、有效。     

龟鹿二仙膏助阳药理作用研究

目的 :观察龟鹿二仙膏助阳的药理作用。方法 :测定去势大鼠性腺器官指数及皮质激素阳虚模型小鼠的自主活动增加及常压耐寒冷环境中的存活时间。结果 :龟鹿二仙膏能显著增加去势大鼠前列腺及精囊腺指数 ,使腺细胞增生、扩大、萎缩明显改善 ;龟鹿二仙膏还能明显提高肾阳虚小鼠自主活动 ,显著延长在寒冷状态下存活时间。结论 :龟鹿二仙膏有较好助阳作用     

龟鹿二仙胶汤含药血清对兔骨髓基质干细胞增殖的影响

目的：观察龟鹿二仙胶汤对骨髓基质干细胞（BMSCs）增殖的影响,确定影响BMSCs增殖的最佳中药血清浓度。方法：经前期体外分离、纯化、培养获得兔BMSCs,运用不同浓度的龟鹿二仙胶汤中药含药血清对获得的兔BMSCs进行药物干预24、48、72h后,采用MTT、免疫组化、流式细胞仪等方法,研究龟鹿二仙胶汤对BMSCs增殖的影响。结果：MTT比色实验显示,龟鹿二仙胶各浓度组均能不同程度地促进BMSCs的能量代谢,促进BMSCs增殖,与空白对照组相比有显著差异（P〈0．01）,而且以15倍药物浓度组为最佳。免疫组化结果证实,龟鹿二仙胶汤含药血清可通过促进PCNA表达来控制DNA复制,以15倍龟鹿二仙胶汤药物浓度血清培养时BMSCs表达致密的棕褐色颗粒最多,其他浓度组及TGF—β3组较多,空白对照组则最少。FCM结果显示,二仙胶汤药物血清能显著提高BMSCs增殖指数,且以15倍药物浓度龟鹿血清培养时最明显。结论：龟鹿二仙胶汤刺激BMSCs增值与药物浓度有关,低浓度龟鹿二仙胶汤就能显著刺激BMSCs增殖,无论是48h、72h测验均为15倍药物浓度时具有显著的增值作用,而更高浓度龟鹿二仙胶汤则表现为促进BMSCs增殖作用减弱。     

龟鹿二仙胶汤含药血清对兔体外BMSCs向软骨细胞分化的干预作用

目的:探讨龟鹿二仙胶汤含药血清对骨髓间充质干细胞(BMSCs)向软骨细胞分化的干预作用。方法:抽取兔骨髓液,经体外分离、纯化、培养获得兔BMSCs,将第2代兔BMSCs分为龟鹿二仙胶汤中药含药血清组、软骨细胞组、单纯诱导剂组及空白对照组,进行培养1、2、3周后,通过细胞染色、透射电子显微镜、免疫组化等实验技术,观察各组对BMSCs诱导成软骨细胞的影响。结果:在转化生长因子-β(3TGF-β3)等诱导下龟鹿二仙胶汤中药血清可以明显促进软骨表型化BMSCs的GAG分泌及Ⅱ型胶原mRNA的表达,与软骨细胞组和单纯诱导剂组有显著性差异(P<0.01)。结论:龟鹿二仙胶汤含药血清可促进BMSCs向软骨细胞转化,优化骨组织工程的种子细胞体系,改善软骨组织的质量,延缓软骨的退化过程。     

龟鹿二仙胶对地塞米松诱导骨髓间充质干细胞损伤的保护作用

目的 研究龟鹿二仙胶对地塞米松诱导骨髓间充质干细胞损伤的保护作用。方法 体外培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,传至第二代后分5组培养:正常组、地塞米松（10-8mol/L）组、骨化三醇含药血清组、龟鹿二仙胶含药血清低剂量组、龟鹿二仙胶含药血清高剂量组。MTT法检测骨髓间充质干细胞活力,检测细胞上清中的超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、炎症因子白介素-6（IL-6）、小鼠白介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）。采用Western blot检测Nrf-2/HO-1/NF-κB信号通路蛋白表达。结果 龟鹿二仙胶能显著提高细胞活力,增加SOD水平、降低MDA水平、降低炎症因子水平,增加蛋白Nrf-2、HO-1蛋白表达水平,降低NF-κB信号蛋白表达。结论 龟鹿二仙胶对地塞米松诱导骨髓间充质干细胞损伤有保护作用,且作用与调控Nrf-2/HO-1/NF-κB信号相关。      

基于网络药理学探讨龟鹿二仙胶治疗骨质疏松症的作用机制

目的:通过网络药理学的方法研究龟鹿二仙胶治疗骨质疏松症的相关作用机制.方法:基于TCMSP数据库、ETCM数据库、化学专业数据库、DrugBank数据库获取龟鹿二仙胶的潜在活性成分及相关靶点,从OMIM、Genecards数据库获取骨质疏松症的已知治疗靶点,运用STRING数据库建立活性成分-疾病靶点的蛋白相互作用网络...     

龟鹿二仙膏提高耐力作用研究

目的：研究龟鹿二仙膏的温肾益精、补气养血作用。方法：采用负荷游泳时间及常压密闭环境存活时间试验方法。结果：龟鹿二仙膏可明显延长小鼠贞荷游泳时间及在密闭环境中的存活时间。结论：龟鹿二仙膏有较好提高耐力作用。     

龟鹿二仙胶联合内热针治疗膝关节骨性关节炎疗效观察(附86例报告)

目的观察中药龟鹿二仙胶联合内热针治疗膝关节骨性关节炎的疗效。方法采用中药龟鹿二仙胶联合内热针治疗膝关节骨性关节炎86例,观察2个月。结果显效36例,有效43例,无效7例,总有效率91.9%。结论龟鹿二仙胶联合内热针治疗膝关节骨性关节炎疗效满意。     

加味龟鹿二仙膏质量标准研究

目的:建立加味龟鹿二仙膏的质量标准。方法:采用薄层色谱法对加味龟鹿二仙膏中的肉苁蓉、枸杞子、党参进行定性鉴别,采用高效液相色谱法对松果菊苷进行含量测定。结果:肉苁蓉、枸杞子、党参的薄层鉴别斑点清晰、专属性强;松果菊苷在4.58~91.6μg/mL之间呈良好的线性关系(r=0.9999,n=5),平均回收率为98.59%,RSD为0.22%(n=9)。结论:该质量标准准确、可靠,能有效控制加味龟鹿二仙膏的质量。     

龟鹿二仙胶巴布剂治疗结直肠癌化疗后不良反应临床研究

目的:观察龟鹿二仙胶巴布剂治疗78例Ⅲ~Ⅳ期结直癌患者FOLFIRI方案化疗后骨髓抑制的疗效,评价安全性及对中医症状积分的影响。方法:采用随机双盲、安慰剂对照的研究方法,将78例Ⅲ~Ⅳ期结直癌患者分为治疗组及对照组。两组均采用FOLFIRI方案化疗,治疗组随化疗开始同时使用龟鹿二仙胶巴布剂外敷神阙穴治疗,疗程为14 d;对照组使用安慰剂巴布剂,用法用量同治疗组。观察化疗开始后14 d内患者外周血白细胞、中性粒细胞及血小板计数,中医症状积分疗效指标,肝肾功能、皮肤不良反应等药物不良反应指标。结果:以化疗后第14天为观察节点,治疗组白细胞及中性粒细胞计数均显著高于对照组(P0.05);中医症状积分显著低于对照组(P0.05);两组患者肝肾功能指标及皮肤情况均未见明显异常。结论:龟鹿二仙胶巴布剂治疗Ⅲ~Ⅳ期结直肠癌患者FOLFIRI方案化疗后骨髓抑制疗效显著,安全性高。     

龟鹿二仙胶通过调控 PD-1 表达抑制 H22 荷瘤小鼠肿瘤生长的研究

目的初步探讨龟鹿二仙胶通过降低肿瘤周围T淋巴细胞PD-1表达,抑制T细胞凋亡,从而抑制肿瘤生长的分子机制。方法采用皮下接种H22肝癌细胞株方法建立荷瘤小鼠模型,观察药物干预后各组荷瘤小鼠肿瘤的生长速度,Annexin V/PI双染色法测定小鼠脾脏T淋巴细胞凋亡比例,分离肿瘤浸润性T淋巴细胞,流式细胞检测PD-1阳性细胞的比例。结果 (1)龟鹿二仙胶呈剂量依赖抑制皮下瘤的生长,顺铂组及高、中、低剂量组抑瘤率分别为81.36%、79.64%、48.86%、21.96%;(2)顺铂组及高、中、低剂量组小鼠T淋巴细胞凋亡比例分别为早期(24.37±0.32)%、(5.30±0.21)%、(6.90±0.16)%、(11.93±2.01)%;晚期(8.83±1.23)%、(4.73±0.33)%、(6.40±0.34)%、(7.47±0.54)%,说明与顺铂组比较,龟鹿二仙胶能够抑制小鼠T淋巴细胞凋亡;(3)龟鹿二仙胶高剂量组、中剂量组的PD-1表达阳性细胞比分别为(11.73±0.54)%、(20.00±0.66)%,明显低于生理盐水组(32.57±0.65)%和顺铂组(31.83±0.43)%,说明龟鹿二仙胶能够降低肿瘤浸润T淋巴细胞中PD-1阳性的比例。结论龟鹿二仙胶具有抑制肿瘤生长的作用,其机制可能是通过抑制PD-1表达,减少T淋巴细胞凋亡,增强机体免疫力,从而抑制和杀伤肿瘤细胞得以实现的。     

化湿补肾法对膝骨关节炎大鼠软骨修复机制的研究

目的 探讨化湿补肾法治疗膝骨关节炎(KOA)的机制.方法 将48只SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、化湿定痛汤组、龟鹿二仙胶组、化湿补肾法组,采用木瓜蛋白酶关节腔注射建立膝骨关节炎模型,造模成功后各组大鼠灌胃相应药物,化湿定痛汤组灌胃化湿定痛汤4.68 g/(kg·d),龟鹿二仙胶组灌胃龟鹿二仙胶汤2.7 g/(kg·d),化湿补肾法组灌胃化湿补肾法中药7.38 g/(kg·d),连续灌胃28 d,于第28天对大鼠进行取材,取右侧股骨行HE染色观察软骨形态,取右侧胫骨平台滑膜、关节液用ELISA检测前列腺素-2(PGE-2)、环氧化和酶-2(COX-2)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达,取右胫骨平台软骨用qPCR检测p38、p53、Ⅱ型胶原的表达.结果 HE染色形态结果表明化湿补肾法组、龟鹿二仙胶组、化湿定痛汤组均优于模型组.与龟鹿二仙胶组相比,化湿补肾法组PGE-2、COX-2、IL-1β、TNF-α表达量下降(P<0.05),软骨的p38、p53表达降低(P<0.05),Ⅱ型胶原表达升高(P<0.05).结论 化湿补肾法可有效减轻滑膜和关节液中炎症因子表达,增加软骨细胞合成代谢,抑制软骨细胞凋亡,从而促进关节软骨的修复,延缓KOA的进程.     

龟鹿二仙汤联合激素治疗肾虚血瘀型卵巢早衰临床研究*

目的 探究龟鹿二仙汤联合西药常规激素治疗对肾虚血瘀型卵巢早衰（premature ovarian failure，POF）患者中医证候积分及性激素水平的影响。方法 选取2020年1月—2022年12月本院收治的肾虚血瘀型POF患者61例作为研究对象，根据随机数字表法分为治疗组和对照组。32例治疗组患者予以龟鹿二仙汤加减联合西药常规激素治疗，29例对照组患者予以西药常规激素治疗。比较2组患者治疗前后中医证候积分及血清卵泡刺激素（follicle stimulating hormone，FSH）、黄体生成素（luteinizing hormone，LH）、雌二醇（estradiol，E2）水平。结果 治疗后，治疗组各项中医证候积分明显低于对照组（P<005）。治疗组FSH、LH水平明显低于对照组（P<005），治疗组E2水平明显高于对照组（P<005）。结论 龟鹿二仙汤联合西药常规激素治疗能够缓解肾虚血瘀型POF患者临床症状，有效调节患者性激素水平。     

龟鹿二仙胶加味方联合泼尼松片治疗Duchenne型肌营养不良的疗效观察

目的 观察龟鹿二仙胶加味方联合泼尼松片治疗Duchenne型肌营养不良（Duchenne muscular dystrophy，DMD）的疗效。方法 将49例DMD患者随机分为观察组（19例）、对照组（30例）。观察组采用龟鹿二仙胶加味方联合泼尼松片的中西医结合治疗方案，对照组仅用泼尼松片治疗。治疗前及连续治疗3个月后，分别观察自汗盗汗、步行异常等临床症状的改善情况，并检测血清肌酸激酶（creatine kinase, CK）、乳酸脱氢酶（lactic dehydrogenase,LDH）、肌酸激酶同工酶（creatine kinase-MB, CK-MB）水平。结果 连续治疗3个月后，观察组自汗盗汗、步行异常评分显著升高（P<0.05），两组治疗前后自汗盗汗、步行异常、睡眠质量异常、乏力懒言评分差值的差异具有统计学意义（P<0.05）。观察组治疗后CK、CK-MB水平均显著下降（P<0.05），两组治疗前后LDH、CK-MB差值的差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 龟鹿二仙胶加味方联合泼尼松片不仅改善DMD患者的临床症状，而且修复其血清CK、CK-MB的异常。     

龟鹿二仙膏结合硫酸亚铁、叶酸治疗老年营养不良性贫血临床研究

目的观察龟鹿二仙膏结合硫酸亚铁、叶酸治疗老年营养不良性贫血的临床疗效。方法选取我院80例老年营养不良性贫血患者,随机分为对照组和治疗组,每组40例,对照组口服硫酸亚铁片、叶酸片治疗,治疗组口服龟鹿二仙膏及硫酸亚铁片、叶酸片,治疗3个月后,比较两组患者的临床疗效及血常规,评价治疗效果。结果治疗组总有效率优于对照组(P0.05)。治疗后两组的红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)较治疗前改善,差异具有统计学意义(P0.05);治疗组的RBC、HGB、HCT较对照组明显改善,差异具有统计学意义(P0.05)。结论龟鹿二仙膏结合硫酸亚铁、叶酸治疗老年营养不良性贫血效果良好,值得临床推广。     

龟鹿二仙胶的现代运用

<正>龟鹿二仙胶为中医传统名方,明代(1569年)王三才所著的《医便》就有详细记载,该方由鹿角胶、龟板、人参、枸杞子组成。方中龟板、鹿角胶"二仙"为主药,均归肾经。《古今名医方论·龟鹿二仙膏》云"龟得天地之阴气最厚,善通任脉",其腹甲为胶,能滋阴潜阳、补血。"鹿得天地之阳气最全,善通督脉",其角为胶,能补肾阳、生精血。人参大补元气而生津。枸杞子益精生血。《医方考·虚损劳瘵门》云人参"善于固气"     

龟鹿二仙胶加味治疗绝经后妇女不稳定型心绞痛的临床研究

目的:采用龟鹿二仙胶加味治疗绝经后妇女不稳定型心绞痛的临床研究.方法:观察患者用药前后心绞痛每天发作次数,心电图24h缺血总负荷、E2、NO、LDL-C等指标有无改善.结果:两组患者用药前后心绞痛每天发作次数、心电图24h缺血总负荷、E2、NO、LDL-C等指标改善有显著意义(P<0.05或P<0.01),中药组在停用或减服抗心绞痛药物的情况下与西药组比较,降低心绞痛发作次数及改善心肌缺血仍无显著差异(P>0.05),提高患者E2、降低LDL-C方面与尼尔雌醇相类似(P>0.05),提高NO水平优于西药组(P<0.05).结论:龟鹿二仙胶加味治疗绝经后妇女不稳定型心绞痛有延缓患者衰老及抗心绞痛作用.     

龟鹿二仙胶方义与应用述要

龟鹿二仙胶,又名龟鹿二仙膏,由瘫角胶、龟板、枸杞子、人参组成。其方见于《医方考·虚损劳瘵门》,方后论：“精极,梦泄遗精,瘦削少气,目视不明,此方主之。”然据其方义,既可作为治疗各科虚证的基本方,也可作为保健的常用方。     

龟鹿二仙胶对创伤后应激障碍模型大鼠行为学及海马GR、5-HT受体表达的影响

目的:观察龟鹿二仙胶对创伤后应激障碍(posttraumatic stress disorder,PTSD)模型大鼠行为学,海马糖皮质激素受体(glucocorticoid receptors,GR)及5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)受体1A亚型(5-HT1A)、2A亚型(5-HT2A)表达的影响。方法:采用单一延长刺激方法制作大鼠PTSD模型,通过旷场实验、拒俘反应实验以及Morris水迷宫实验观察大鼠的情感行为和学习记忆能力的改变。采用RT-PCR法检测海马GR、5-HT1A和5-HT2A受体表达。结果:PTSD大鼠表现出多种情感行为障碍,学习能力显著降低(P0.01)。海马GR表达增强(P0.01),5-HT1A受体表达下降(P0.05),5-HT2A受体表达则升高(P0.05)。龟鹿二仙胶(2.025 g·kg~(-1))和淫羊藿总黄酮(0.06 g·kg~(-1))能显著改善PTSD大鼠的情感行为障碍,提高学习记忆能力(P0.05或P0.01)。龟鹿二仙胶(2.025 g·kg~(-1))和淫羊藿总黄酮(0.06 g·kg~(-1))可以明显降低PTSD大鼠海马GR的表达水平,升高5-HT1A受体表达水平和降低5-HT2A受体表达水平(P0.05或P0.01)。结论:龟鹿二仙胶对PTSD具有良好的干预治疗作用,其作用机理与改善情感行为和认知功能以及调节海马GR、5-HT1A和5-HT2A受体表达有关。