基于物质组分分配研究钼对甘草酸积累的影响

目的 基于物质分配研究钼对药材中甘草酸积累的影响并探讨其机制。方法 采用盆栽蛭石的试验方法,以一年生的甘草移栽苗为实验材料,共设置4个钼质量浓度水平,分别为0、0.52、5.2、10.4 mg/L,其中0.52 mg/L为正常Hoagland营养液中钼的质量浓度。每周向盆内浇灌营养液,以达到处理的目的。分别在处理35、70、105 d取样,测定甘草中甘草酸的相对量和绝对量以及总糖、粗蛋白、粗纤维、粗脂肪、灰分等物质组分量。结果 钼对甘草酸的相对量影响不显著,但是对其绝对量的影响显著,施钼可以提高甘草中总糖、粗蛋白和灰分的量以及5种主要物质组分量总和,降低粗脂肪的量,对粗纤维的影响不显著。甘草酸相对量与粗蛋白为显著正相关。甘草酸绝对量与粗纤维为极显著负相关,与灰分、粗脂肪和物质总和为极显著正相关,与总糖为显著正相关。结论 甘草酸的积累与粗纤维、粗脂肪、灰分、总糖的分配密切相关,适当质量浓度的钼可以刺激甘草内的总糖、粗脂肪等物质的合成,进而促进甘草的次生代谢,导致甘草酸的形成和积累。     

外源5-氨基乙酰丙酸对盐胁迫下紫苏种子萌发及幼苗抗氧化酶活性的影响

目的 通过对紫苏种子萌发及幼苗生理特性的研究,寻找提高紫苏种子及幼苗在盐胁迫下抗性能力的途径。方法 测定盐胁迫下紫苏种子在不同浓度的外源5-氨基乙酰丙酸（ALA）处理后,发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数的变化,并对紫苏幼苗叶片的相对含水量、幼苗总生物量、可溶性糖量、叶片丙二醛（MDA）量以及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活性进行测定。结果 100 mmol/L NaCl胁迫下的紫苏种子萌发受到显著抑制,但是经过不同质量浓度的ALA处理后,各项萌发指标均有所升高,其中经过50 mg/L ALA处理后效果最为显著,各项指标均达到最大值,发芽势为71.3%,发芽率为90.5%,发芽指数为15.9,活力指数为0.129 6。各处理均提高了幼苗总生物量和可溶性糖的量,减缓了盐胁迫下紫苏叶片相对含水量下降的趋势,降低了叶片MDA的量,显著地提高了SOD、POD和CAT 3种酶的活性,且经过50 mg/L ALA处理后3种酶的活性分别达到最大值（0.79、7.69、5.84 U/mg）。结论 50 mg/L ALA能够有效地减缓盐胁迫对紫苏种子及幼苗产生的伤害,提高种子及幼苗的抗盐能力。     

NAA和2，4-D对甘草愈伤组织细胞染色体倍性及次生代谢物的影响

目的 建立甘草愈伤组织细胞高频染色体加倍体系,为获得高产量药效成分的甘草品系奠定基础。方法 采用组织培养法对甘草子叶、下胚轴和胚根进行愈伤组织诱导和染色体加倍;利用紫外分光光度法检测愈伤组织甘草酸、甘草总黄酮的量。结果 NAA、2, 4-D不同质量浓度及配比对不同外植体愈伤组织染色体倍性变异具有显著的影响,其中下胚轴2n＞14和2n＝28的细胞频率明显高于子叶和胚根,平均为42.38%和25.19%;且子叶、下胚轴及胚根分别在2.0 mg/L NAA、2.0 mg/L 2, 4-D以及1.0 mg/L 2, 4-D下,2n＞14和2n＝28的细胞频率最高,分别为61.50%、39.20%,63.00%、36.23%,63.50%、37.50%。此外,NAA、2, 4-D对愈伤组织中甘草酸、甘草总黄酮具有明显的促进效应,在1.0 mg/L NAA＋1.0 mg/L 2, 4-D组合下,子叶愈伤组织的甘草酸和甘草总黄酮量均达到最高,分别为52.13 mg/g和8.36 mg/g;在2 mg/L NAA下,下胚轴愈伤组织甘草酸及甘草总黄酮量最高,分别为49.01 mg/g 和8.54 mg/g。相关分析表明,愈伤组织中甘草酸、甘草总黄酮量与2n＝28的细胞频率呈正相关。结论 NAA、2, 4-D对愈伤组织细胞染色体加倍及甘草酸、甘草总黄酮量提高具有显著的促进作用,通过染色体加倍有可能获得高产量药效成分的甘草品系。     

盐胁迫对长春花愈伤组织生长及阿玛碱积累的影响

目的 研究盐胁迫对长春花愈伤组织生长及阿玛碱积累的影响。方法 用浓度为0、50、100、150 mmol/L的NaCl处理长春花愈伤组织,测定其鲜质量、干质量、丙二醛（MDA）量、光合速率、呼吸速率等生理指标和阿玛碱的量。结果 盐胁迫显著地降低了长春花愈伤组织的鲜质量和干质量,提高了MDA量、光合速率和呼吸速率;在含有不同浓度NaCl的培养基上生长30 d后,愈伤组织的阿玛碱量随NaCl浓度的增加而逐渐降低;用不同浓度的NaCl溶液喷洒生长27 d的愈伤组织,发现3 d后50 mmol/L处理的愈伤组织中阿玛碱量比对照高出近1倍。结论 长期盐胁迫能够抑制长春花愈伤组织的生长,同时引起阿玛碱积累的减少;低浓度NaCl喷洒处理则对长春花细胞中阿玛碱的积累有较大的促进作用。     

外源性5-氨基乙酰丙酸对盐胁迫下决明子萌发及幼苗生理特性的影响

目的 通过对决明子萌发及幼苗生理特性的研究,寻找提高决明子及幼苗在盐胁迫条件下抗性能力的途径。方法 测定盐胁迫下决明子在经过不同质量浓度的外源性5-氨基乙酰丙酸（ALA）处理后,种子的发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数,并对决明幼苗叶片叶绿素量、叶绿素荧光参数、原生质膜透性、叶片丙二醛（MDA）量、可溶性糖量、可溶性蛋白量及脯氨酸量及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活性进行测定。结果 100 mmol/L盐胁迫下的决明子萌发受到显著抑制,但是经过不同质量浓度的ALA处理后,萌发指标均有升高。结果表明,外源性ALA处理显著提高了决明子发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数,提高了叶片叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素量,显著提高了最大光化学效率（Fv/Fm）,PSII有效光化学效率（Fv′/Fm′）,PSII实际光化学效率（ΦPSII）,光化学淬灭系数（qP）,降低了原生质膜透性、叶片的MDA量及非光化学淬灭系数（NPQ）,提高了盐胁迫下幼苗叶片可溶性糖、可溶性蛋白和脯氨酸量,显著提高了叶片SOD、POD、CAT活性。结论 外源性ALA通过提高决明子的萌发指数,提高幼苗光合效率、渗透调节物质量及抗氧化酶活性,有效地减缓盐胁迫对决明子及幼苗产生的伤害,提高种子及幼苗的抗盐能力。     

近红外透反射光谱法用于复方苦参注射液渗漉过程在线检测

目的 利用近红外透反射光谱技术,对复方苦参注射液渗漉液中多组分的量进行快速测定。方法 采用氧化槐果碱、氧化苦参碱的HPLC测定值,总糖的苯酚-硫酸法测定值及固体总量的烘烤法测定值为对照值,用偏最小二乘法建立近红外光谱与对照值之间的校正模型,并对未知样品进行定量预测。结果 校正模型对氧化槐果碱、氧化苦参碱、总糖和固体总量4种组分的交叉验证均方根误差分别为43.5、135.4、1 255.7 mg/L和150.7 mg/mL,相关系数分别为0.926 6、0.954 6、0.953 9和0.974 1。经外部验证,预测均方根误差分别为32.5、191.7、1 461.9 mg/L和164.0 mg/mL。结论 本方法方便、准确、可靠,可用于中药渗漉过程的快速分析。     

半夏总蛋白提取及其动态变化研究

目的 优选出半夏总蛋白提取的最适方法并研究不同生长时期总蛋白量及成分的变化,为半夏药用成分的监控及合理采收提供科学依据。方法 采用丙酮沉淀法、95% (NH₄)₂SO₄盐析法、TCA-丙酮法和Tris-饱和酚法提取半夏总蛋白,筛选半夏总蛋白提取的最佳方法。分别于半夏出芽期、全苗期、珠芽期、佛焰苞期及倒苗期采集样品,分为新鲜组和干燥处理组,提取样品总蛋白,进行SDS-PAGE电泳检测及Bradford浓度测定。结果 丙酮沉淀法、95% (NH₄)₂SO₄盐析法、TCA-丙酮法和Tris-饱和酚法提取的半夏总蛋白量分别为0.369、0.678、1.082、0.493 mg/mL;新鲜半夏5个不同生长时期总蛋白量占块茎的质量分数分别为出芽期4.53 mg/g、全苗期2.28 mg/g、珠芽期2.79 mg/g、佛焰苞期7.61 mg/g、倒苗期10.21 mg/g;干燥半夏5个不同生长时期总蛋白量占块茎的质量分数分别为出芽期31.85 mg/g、全苗期18.52 mg/g、珠芽期42.08 mg/g、佛焰苞期28.56 mg/g、倒苗期56.84 mg/g;新鲜半夏块茎中蛋白含有15条蛋白带,干燥处理半夏块茎中蛋白含有5条蛋白带。结论 TCA-丙酮法是半夏总蛋白提取的最佳方法,不同生长时期的半夏块茎中蛋白成分各异,倒苗期总蛋白量最高。     

亚精胺对盐胁迫下紫苏种子萌发和幼苗生理特性的影响

目的 通过对紫苏种子萌发和幼苗生理特性的研究,寻找提高紫苏种子及幼苗在盐胁迫条件下的抗盐能力的方法。方法 测定不同浓度亚精胺（Spd）处理后的盐胁迫下紫苏种子的发芽势（G_v）、发芽率（G_r）和发芽指数（G_i）,并对紫苏幼苗叶片的相对含水量、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）的活性进行了测定。结果 盐胁迫下的紫苏种子萌发受到显著抑制,但是经过不同浓度的Spd处理后,萌发指标均有所升高,其中经过0.25 mmol/L Spd处理,各项指标均达到最大,G_v为59.7%,G_r为69.4%,G_i为12.8。Spd处理减缓了盐胁迫下紫苏叶片的相对含水量和总黄酮降低的趋势,并且降低了叶片MDA的量。Spd处理后SOD、POD和CAT 3种酶的活性均有所增加,但在Spd为0.25 mmol/L时达到最大值,分别为72.4 U/g、8.7 U/mg、8.8 U/mg。结论 0.25 mmol/L的Spd能够有效地减缓盐胁迫对紫苏种子及幼苗产生的伤害,提高了种子及幼苗的抗盐能力。     

通脉养心丸质量控制研究

摘要：目的 建立通脉养心丸质量控制方法。方法 采用TLC法鉴别制何首乌、甘草;采用HPLC法测定通脉养心丸中甘草酸的量。结果 制何首乌和甘草的TLC鉴别效果良好、专属性强、分离度高,且阴性对照无干扰;甘草酸进样量在0.133 6～3.006 9 μg与峰面积积分值呈良好的线性关系（r＝1.000 0）;平均回收率为97.7%,RSD为0.78%（n＝6）。结论 所建立的质量分析方法稳定可靠,可用于通脉养心丸的质量控制。     

甘草次酸及其衍生物TY501对小鼠巨噬细胞RAW264.7增殖的影响

目的 探究甘草次酸及其衍生物TY501对小鼠巨噬细胞RAW264.7增殖的影响。方法 以小鼠巨噬细胞RAW264.7为靶细胞,设置空白组,脂多糖（LPS）1 μg/mL处理组（模型组）,LPS 1 μg/mL加80、40、20、10 μg/mL药物处理组（受试药物TY501,对照药物泼尼松龙、甘草次酸、吡罗昔康）,每组设置4个复孔在给药刺激24 h后按照CCK-8试剂盒说明测定各药物对细胞增殖抑制率。结果 TY501半数抑制浓度（IC₅₀）为233 μg/mL,泼尼松龙IC₅₀为1 571 μg/mL,甘草次酸IC₅₀为31 μg/mL,吡罗昔康IC₅₀为14 187 μg/mL。结论 甘草次酸对RAW264.7巨噬细胞的增殖具有明显的抑制作用,甘草次酸衍生物TY501也可抑制小鼠巨噬细胞RAW264.7的增殖,在同等质量浓度条件下其对小鼠巨噬细胞增殖的抑制程度强于泼尼松龙,弱于甘草次酸,表明甘草次酸及其衍生物TY501对于小鼠巨噬细胞RAW264.7增殖的抑制作用可能是其发挥抗炎作用的机制之一。     

甘草酸对非酒精性脂肪性肝炎大鼠治疗效果研究

目的 研究甘草酸对非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠的治疗效果及其作用机制。方法 雄性SD大鼠40只随机分为5组：正常组,模型组,低、中、高剂量甘草酸治疗组（60、120、180mg/kg）,以高脂饮食喂养16周构建大鼠NASH模型,于造模第7周起进行不同剂量甘草酸治疗10周,HE染色观察肝组织病理学变化,并对总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）及还原型谷胱甘肽（GSH）进行检测。结果 高脂饮食诱导的NASH大鼠模型中,肝组织可见肝细胞脂肪病变,血清中TC、TG、LDL-C、AST、ALT及MDA明显升高,HDL-C、SOD及GSH显著降低;而经过中、高剂量甘草酸治疗后发现,肝细胞脂肪病变程度降低,血清中TC、TG、LDL-C、AST、ALT及MDA明显降低,HDL-C、SOD及GSH明显升高,与模型组相比差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论 甘草酸能够经过抑制氧化应激损伤、改变血脂水平来改善NASH大鼠肝功能及抑制肝脏病变程度,对NASH治疗具有潜在的临床意义。     

近红外光谱法快速测定甘草饮片中甘草酸和甘草苷的含量

目的 利用近红外光谱法建立快速测定甘草饮片中甘草酸和甘草苷含量的模型。方法 采用HPLC测定不同产地的甘草饮片中甘草酸和甘草苷的含量作为参考值,分别选取2200~2049、1750~1450、1151~1001nm和1795~1475、1395~1293、1125~1030nm波长范围的近红外光谱,利用偏最小二乘（PLS）回归分析结合交叉验证法,建立快速测定甘草饮片中甘草酸和甘草苷含量的模型。结果 所建立的甘草酸和甘草苷含量校正模型的相关系数分别为0.980和0.919,交互验证均方差分别为0.184和0.144。结论 近红外光谱法结合PLS法操作简便、快速、无损,适合大批甘草饮片中甘草酸和甘草苷的含量测定,为快速评价甘草饮片质量提供了一种新方法。     

冰片和熊去氧胆酸对黄芩苷角膜透过性的影响

目的 研究冰片、熊去氧胆酸对黄芩苷离体角膜透过率的影响,探讨其在眼用制剂中的应用。方法 采用离体角膜渗透技术考察不同质量浓度的冰片、熊去氧胆酸对黄芩苷角膜透过率的影响。结果 0.2 mg/mL的冰片使黄芩苷表观渗透系数（P_app）增加了1.36倍,与对照组相比具有显著性差异（P＜0.05）;0.3、0.4、0.5、0.7 mg/mL的冰片使黄芩苷P_app分别增加了1.35、1.43、1.51、3.47倍,0.2、0.3、0.4、0.5、0.7 mg/mL的熊去氧胆酸使黄芩苷P_app分别增加了1.19、2.25、1.24、0.35、0.68倍,与对照组相比均具有非常显著性差异（P＜0.01）。结论 0.2、0.3、0.4、0.5、0.7 mg/mL的冰片、熊去氧胆酸能够显著增大黄芩苷的P_app,且对角膜无刺激性。     

紫外线联合中药疗法治疗寻常性银屑病的疗效观察

目的探讨利用窄谱中波紫外线联合中药治疗寻常型银屑病的临床疗效。方法选取我科2006年3月至2009年2月收治的120寻常型银屑病患者的临床资料,随机分为两组,治疗组(60例)和对照组60(例),对照组静脉点滴复方甘草酸苷60 mg,每日1次;治疗组患者静脉点滴复方甘草酸60 mg,每日1次;另外应用中药熏蒸治疗,每天1次;窄谱中波紫外线照射,隔日1次。结果治疗组患者有效人数49例,总有效率81.67%,治愈时间为(10.28±5.6)d;观察组患者有效人数36例,总有效率为60%,治愈时间为(27.65±7.35)d。两组患者治愈率相比差异有统计学意义(P<0.05),治愈时间相比较差异有统计学意义(P<0.05)。且两组患者在治疗过程中未出现不良反应。结论应用窄谱中波紫外线和中药熏蒸联合复方甘草酸苷静脉点滴治疗银屑病疗效满意,无不良反应,值得在临床推广。     

川泽泻质量与其根际土壤理化性质的相关性分析

目的 研究川泽泻质量及其土壤理化性质,分析二者的相关性,为提高川泽泻质量提供依据。方法 采用RP-HPLC测定川泽泻中23-乙酰泽泻醇B的量;参照《中国药典》2010年版的测定方法测定川泽泻水分、醇溶性浸出物、总灰分和酸不溶性灰分量;采用常规方法测定泽泻种植区土壤理化性质。结果 除醇溶性浸出物外,川泽泻含水量、23-乙酰泽泻醇B、总灰分和酸不溶性灰分均符合《中国药典》2010年版的规定;总灰分与醇溶性浸出物显著负相关,相关系数为?0.407,与酸不溶性灰分显著正相关,相关系数为0.466;各产地泽泻速效钾量缺乏严重;土壤有机质与碱解氮,全磷与速效磷存在极显著正相关,相关系数分别达到0.555、0.806,全钾与速效钾显著正相关,相关系数为0.433;土壤各理化指标内某一因素对泽泻相应指标的影响受其他土壤因子的影响较大;土壤全钾量对川泽泻各成分量的影响最大,其次为全氮量。结论 各地之间川泽泻质量较优且稳定,可作为制定川泽泻质量标准的依据;川泽泻种植时应选择土壤全钾量、速效钾量较高的地块,以保证川泽泻质量。     

飞龙掌血提取物对高脂血症心肌缺血小鼠氧化损伤的影响

目的观察飞龙掌血提取物(Toddalia asiatica extract,TAE)对高脂血症心肌缺血小鼠氧化损伤的影响,初步探讨TAE对心血管保护作用的机制。方法选用雄性KM小鼠,随机分成对照组、模型组、辛伐他汀组、TAE高、低剂量组,除对照组外,其余各组均用牛奶代替水自由饮用,诱导高脂血症。同时灌胃给予相应的药物,每天一次,连续28 d。于试验结束72 h前分3次皮下注射盐酸异丙肾上腺素(isoprenaline hydrochloride,Iso),造成心肌缺血模型。检测小鼠体重、心电图、心脏和肝脏指数、心肌含水量、血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化酶(glutathione peroxidase,GPx)活性。结果 TAE可改善模型小鼠心肌缺血心电图变化,降低体重,抑制心脏、肝脏指数,降低心肌含水量;降低血清TC、TG、LDL-C含量,升高血清HDL-C含量;降低血清MDA含量,升高血清SOD、GPx活性。结论 TAE可能通过调节氧自由基代谢,改善氧化损伤,发挥其保护心血管的作用。