钩藤提取物对MPTP致帕金森病小鼠的保护作用及机制的研究

目的评价钩藤提取物的抗帕金森病活性及其可能的作用机制。方法经腹腔注射MPTP(1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶),建立小鼠帕金森病(PD)模型。观测小鼠的自主活动、爬杆能力、滚轴能力及悬挂能力等行为学表现,同时检测小鼠脑黑质中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)水平的变化。结果经MPTP诱导的小鼠,其自主活动次数显著减少、爬杆时间差值显著增加、附着能力评分显著降低,钩藤提取物预处理后能显著增加小鼠在测试时间内的自发站立次数(P0.01),显著缩短爬杆时间差值,提高附着能力分值(P0.05),提高小鼠脑内SOD、GSH-Px水平(P0.05),显著降低MDA水平明显下降(P0.01)。结论钩藤提取物能提高PD小鼠肢体运动协调能力,可能通过抑制氧化损伤起到对PD模型小鼠起保护作用。     

迷迭香酸甲酯对帕金森病小鼠多巴胺能神经元损伤的保护作用

目的探讨迷迭香酸甲酯对帕金森病小鼠多巴胺能神经元的保护作用。方法 C57/BL6雄性小鼠腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)以建立帕金森病模型后,行为学实验检测运动功能、爬杆时间、平衡协调能力、悬挂能力,生化方法检测中脑黑质区超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽-过氧化物酶(GSHPx)水平,免疫组织化学染色法检测纹状体区酪氨酸羟化酶(TH)阳性纤维、激活星形胶质细胞的量,Western Blot法检测纹状体区TH、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)水平。结果注射迷迭香酸甲酯后,小鼠在10 min内的运行距离增加,滚筒实验的停留期增加,爬杆时间降低,悬挂能力提高,黑质区多巴胺(DA)及其代谢产物高香草酸(HVA)和3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)的水平升高,脑组织SOD、GSH-Px酶活性升高,而MDA水平降低,小鼠纹状体区TH阳性纤维量显著升高,i NOS水平下降。结论迷迭香酸甲酯可有效抑制帕金森病小鼠黑质纹状体通路的损伤,其机制可能是通过抑制脑内氧化应激和炎性反应来调节MPTP诱导的多巴胺能神经元损伤。     

芍药甘草汤加减对MPTP诱导的帕金森病模型小鼠的影响

目的:研究芍药甘草汤加减对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病模型小鼠的作用。方法:将60只C57/BL6小鼠随机分为正常组,模型组,美多巴组(50 mg·kg~(-1))和芍药甘草汤加减低、中、高剂量组(1,2,4 g·kg~(-1))。将C57/BL6小鼠腹腔注射MPTP(40 mg·kg~(-1)),每天1次,连续7 d。除正常组和模型组每天灌胃生理盐水外,给药组每天灌胃1次相应的药物,灌药第3天后按上述方法造模(除正常组外),给药15 d后,检测各组小鼠的行为学(爬杆实验、游泳实验和悬尾实验)。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测各组小鼠血清中胱抑素-C(Cys-C)和神经元特异烯醇化酶(NSE)的含量,采用分光光度法检测各组小鼠纹状体中超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的水平,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠纹状体中α-突触核蛋白(α-syn),酪氨酸羟化酶(TH),B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠的行为学实验中游泳实验得分和悬挂实验得分显著降低(P 0. 01),爬杆时间显著增加(P 0. 01),血清中Cys-C含量显著减少(P 0. 01),NSE含量明显增加(P 0. 05),纹状体中SOD水平和GSH-Px水平显著减少(P 0. 01),MDA水平明显增加(P 0. 05),TH表达和Bcl-2表达显著减少(P 0. 01),α-syn和Bax表达明显增加(P 0. 05);与模型组比较,芍药甘草汤加减各剂量组与美多巴组的行为学实验中游泳实验得分和悬挂实验得分均明显增加(P 0. 05),爬杆时间明显减少(P 0. 05),血清中Cys-C含量显著增加(P 0. 05),NSE含量显著减少(P 0. 05);纹状体中SOD水平和GSH-Px水平显著增加(P 0. 05),MDA水平明显减少(P 0. 05),纹状体中TH表达和Bcl-2表达明显增加(P 0. 05),α-syn和Bax表达明显减少(P 0. 05);与美多巴组比较,芍药甘草汤加减高剂量组的行为学实验中游泳实验得分和悬挂实验得分明显增加(P 0. 05),爬杆时间明显减少(P 0. 05),血清中Cys-C含量明显增加(P 0. 05),而NSE含量明显减少(P 0. 05);纹状体中SOD水平和GSH-Px水平明显增加(P 0. 05),MDA水平明显减少(P 0. 05),纹状体中TH和Bcl-2表达显著增加(P 0. 05),α-syn和Bax表达明显减少(P 0. 05)。结论:芍药甘草汤加减对MPTP诱导的帕金森病模型小鼠神经保护作用可能是通过抑制氧化损伤和细胞凋亡来实现的。     

二至丸对MPTP所致帕金森病小鼠的防治作用研究

该研究旨在探讨二至丸对MPTP所致帕金森病小鼠的防治作用及可能的作用机制。模型组腹腔注射MPTP(30 mg·kg-1),1次/d,连续8 d;给药组灌胃给予二至丸(2. 5 g·kg-1),1次/d,连续30 d;正常组给予等体积生理盐水。行为学方面通过爬杆、悬挂、游泳实验检测小鼠肢体运动协调能力,Morris水迷宫检测小鼠空间学习记忆能力;血清学指标检测小鼠血清中SOD,GSH-PX活性及MDA含量; Western blot法检测脑组织中TH,MAOB及凋亡相关因子CHOP,caspase-12的蛋白表达水平;免疫组化法检测小鼠脑组织切片TH的表达情况。结果显示,行为学方面,与模型组相比,给药组小鼠肢体运动得分、空间学习记忆得分均显著升高(P0. 05);血清学指标方面,与模型组相比,给药组小鼠血清中SOD,GSH-PX活性均显著升高,MDA含量显著降低(P0. 05); Western blot法结果显示,与模型组相比,给药组小鼠脑组织TH的蛋白水平显著上调,MAOB及凋亡相关因子CHOP,caspase-12的蛋白水平均显著下调(P0. 05);免疫组化结果表明,与模型组相比,给药组小鼠脑组织TH阳性细胞数目显著增加(P0. 05)。综上,二至丸对MPTP诱导的PD小鼠有一定的防治作用,可显著改善PD小鼠肢体运动协调能力、空间学习记忆能力,这可能与其下调凋亡相关因子CHOP,caspase-12的表达,减轻多巴胺能神经元的损伤,抑制多巴胺能神经凋亡有关。     

钩藤提取物对MPTP诱导帕金森病模型小鼠神经元的影响

目的探讨钩藤提取物对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导帕金森病(PD)模型小鼠神经元保护的作用机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、钩藤组及美多芭组,腹腔注射MPTP法制备PD小鼠模型。行为学测试小鼠抓握和肢体运动协调能力;生化法测定小鼠中脑黑质超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-Px)水平,酶联免疫法测定白细胞介素(IL)-1β、IL-6的活性。结果与对照组比较,模型组小鼠自主活动次数减少、爬杆时间延长(P0.05),脑组织SOD、GSH-Px酶活性明显下降,MDA、IL-1β、IL-6含量明显上升(P0.05,P0.01);与模型组比较,钩藤组和美多芭组小鼠自主活动次数增多、爬杆时间缩短(P0.05),脑组织SOD、GSH-Px酶活性明显上升,MDA、IL-1β及IL-6含量明显下降(P0.05,P0.01)。结论钩藤提取物对PD模型小鼠的治疗作用可能是通过清除氧自由基、提高机体抗氧化能力和抑制炎症反应,从而减少神经元的凋亡实现的。     

参附注射液联合左旋多巴对帕金森病小鼠黑质组织形态及酪氨酸羟化酶水平的影响

目的研究参附注射液联合左旋多巴对帕金森病小鼠黑质组织形态及酪氨酸羟化酶水平的影响。方法 1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)腹腔注射制备帕金森病小鼠模型,分别给予左旋多巴、参附注射液、参附注射液+左旋多巴14 d后,检测小鼠神经行为学,ELISA法检测血液及脑组织中酪氨酸羟化酶(TH)水平,HE染色观察脑组织黑质区神经元,免疫组化染色、Western blot法检测脑组织黑质区TH蛋白表达。结果参附注射液可显著缩短爬杆时间,增加悬挂能力评分,提高TH水平及蛋白表达(P0.05,P0.01),联合左旋多巴应用时上述指标改善更明显(P0.05,P0.01)。结论参附注射液对帕金森病小鼠有神经保护作用,联合左旋多巴时效果更强。     

荜茇总生物碱对6-羟基多巴胺致帕金森病大鼠多巴胺能神经元损伤的保护作用研究

目的:探讨荜茇总生物碱(PLA)对6-羟基多巴胺(6-OHDA)致帕金森病(PD)大鼠多巴胺能神经元损伤的保护作用及其可能的机制。方法:采用脑立体定位单侧纹状体注射6-OHDA建立大鼠PD模型,将PD大鼠随机分为PLA组(PLA50 mg·kg-1·d-1),美多巴组(美多巴50 mg·kg-1·d-1)及模型组,每组15只,每日灌胃给药1次,连续6周。另随机选取15只大鼠在纹状体仅注射生理盐水作为假手术组。采用阿朴吗啡(APO)诱导的大鼠旋转及转棒实验进行行为学观察,酪氨酸羟化酶(TH)免疫组化检测大鼠黑质中TH阳性细胞数及纹状体中TH阳性纤维密度,用分光光度法检测大鼠黑质及纹状体内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、还原型谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NOS)的含量。结果:帕金森病大鼠在APO诱导后出现明显的旋转行为,且在转棒上的滞留时间缩短,黑质区TH阳性细胞数及纹状体TH阳性纤维密度明显减少,组织内SOD,GSH-Px,CAT的活力降低,NOS的活力升高,MDA,NO含量升高,GSH含量降低,总抗氧化能力明显降低。PLA能明显改善PD大鼠的行为学异常,增加黑质区TH阳性细胞数及纹状体TH阳性纤维密度,提高组织内SOD,GSH-Px,CAT的活力,降低NOS的活力,降低MDA和NO含量,提高GSH含量,总抗氧化能力明显提高。结论:荜茇总生物碱对6-OHDA致PD模型大鼠的黑质细胞具有保护作用,其机制可能与抗氧化活性有关。     

针刺夹脊穴对帕金森小鼠行为学及脑内GSH、GSH-PX含量的影响

目的:探讨采用针刺的方法,对帕金森病(PD)小鼠行为学及黑质内还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)含量的影响。方法:选用纯系C57BL老龄鼠60只,随机分为假手术组、模型组和针刺组。采用腹腔注射MPTP法制备帕金森病动物模型,针刺夹脊穴进行治疗。观察小鼠爬杆实验与悬挂实验评分的变化。检测小鼠黑质内的GSH含量、GSH-PX活性的改变。结果:数据经统计学处理表明,针刺PD小鼠的夹脊穴可以提高小鼠的爬杆实验与悬挂实验的分数(P0.01),并能增加小鼠黑质内GSH含量、增强GSH-PX活性(P0.01)。结论:采用针刺的方法可改善PD小鼠的行为协调能力,修复PD小鼠黑质神经元的损伤。     

电针对帕金森病大鼠中脑黑质多巴胺能神经元氧化应激损伤的影响

目的:观察电针对帕金森病(PD)大鼠的中脑黑质超氧化物歧化酶(SOD)活力和谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)含量及对中脑黑质酪氨酸羟化酶(TH)表达及多巴胺(DA)能神经细胞凋亡的影响,探讨电针治疗PD的可能机制。方法:雄性Wistar大鼠随机分为正常组(n=10)、模型组(n=11)、电针组(n=11)和西药组(n=11)。皮下注射鱼藤酮溶液制备PD大鼠模型。电针组选"百会""三阴交""太冲"穴电针10min,每天1次,7d为1个疗程,治疗2个疗程;西药组给予美多巴混悬液灌胃(1.67mg/kg)。治疗后行酶法测定右脑中脑黑质SOD、GSH-Px活力,比色定量分析法测定GSH、MDA含量;免疫组化(SP法)染色检测左脑中脑黑质TH,TUNEL法检测DA能神经细胞凋亡。结果:模型组SOD、GSH、GSH-Px均低于正常组(P0.05),模型组MDA高于正常组(P0.05);电针组SOD、GSH、GSH-Px均高于模型组(P0.05),电针组、西药组MDA均低于模型组(P0.05);电针组SOD、GSH-Px均高于西药组(P0.05)。电针组、西药组与模型组相比中脑黑质DA能神经元细胞形态较规则,体积较正常,核仁较明显,神经纤维排列较整齐,结构较密集;西药组改善差于电针组,优于模型组。电针组、西药组与模型组相比TH改善明显,阳性神经元数目增多(P0.05),神经元胞体轮廓及突起清晰;西药组改善差于电针组(P0.05)。电针组、西药组与模型组相比,DA能神经细胞凋亡减少(P0.05)。结论:电针可通过提高PD大鼠中脑黑质SOD、GSH-Px活力和GSH含量,降低MDA含量,增加TH免疫反应阳性神经元数目,抑制DA能神经细胞凋亡来治疗PD。     

电针对帕金森病小鼠结肠及黑质α-syn表达的影响

目的:观察电针干预对帕金森病(PD)模型小鼠行为学、结肠及中脑黑质中α-突触核蛋白(α-syn)表达的影响,探讨早期电针干预PD的效应及其机制。方法:C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、电针组,每组8只。除空白组外,其余各组均皮下注射鱼藤酮构建PD小鼠模型。电针组于造模当天开始针刺或电针干预"神庭""天枢""曲池""上巨虚",频率2 Hz,电流强度1 mA,10 min/次,1次/d, 7 d为1个疗程,共干预8个疗程。分别在造模前、造模中和造模结束后对各组小鼠进行悬挂、爬杆测试。治疗结束后采用Western blot、免疫组织化学法、免疫荧光法检测各组小鼠结肠和中脑黑质中α-syn表达的变化。结果:造模8周后,模型组小鼠精神萎靡,毛色暗淡,出现怕冷、蜷缩等症状。与空白组比较,造模6周后模型组小鼠悬挂评分明显降低(P0.01),爬杆时间显著延长(P0.01),结肠和黑质中α-syn蛋白表达量显著升高(P0.01)。与模型组比较,电针组小鼠精神状态良好,皮毛光泽,悬挂评分升高(P0.01),爬杆时间缩短(P0.05),结肠和黑质中α-syn的表达明显下降(P0.01)。结论:电针早期干预可延缓鱼藤酮诱导的PD模型小鼠行为障碍发生的时间,其机制可能与降低结肠及中脑黑质中α-syn的表达有关。     

拜颤停复方对帕金森病小鼠模型氧化应激反应的影响

目的:通过研究拜颤停复方(BCT)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)致小鼠帕金森病(PD)模型神经行为学、纹状体多巴胺(DA)含量、氧化应激反应的影响,探讨BCT对PD模型神经保护作用的可能作用机制。方法:雄性C57BL/6小鼠,MPTP-HC1(30 mg·kg-1·d-1,ip,0.9%生理盐水溶解)5 d,造成PD小鼠模型;设立正常组、模型组、多巴丝肼组(62.50 mg·kg-1·d-1)及BCT高、中、低剂量组(363.00,181.50,95.75 mg·kg-1·d-1),各给药组均用0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶解;BCT高、中、低剂量组ig给药治疗20 d后,进行爬杆实验和自主活动实验以观察小鼠行为学的变化;采用UPLC-MS-MS三重四级杆串联质谱技术检测小鼠纹状体多巴胺(DA)的含量;化学比色法检测小鼠黑质(SN)部位超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及单胺氧化酶B(MAO-B)。结果:与正常组比较,模型组小鼠爬杆时间显著延长(P0.05),自主活动次数显著减少(P0.05),纹状体DA含量、SOD及GSH-Px水平显著降低(P0.01),MDA及MAO-B水平显著升高(P0.01)。与模型组比较,经过BCT治疗,PD小鼠的神经行为学得到显著改善(P0.05),纹状体DA含量,SOD及GSH-Px水平显著升高(P0.01,P0.05),MDA及MAO-B水平显著降低(P0.01)。结论:BCT可以通过提高机体的抗氧化和清除自由基能力,明显改善PD小鼠的神经行为学变化及纹状体DA的含量,是其对PD模型神经保护作用的可能机制。     

水木和宁方对帕金森病模型小鼠泛素-蛋白酶体系统的影响

目的:基于泛素-蛋白酶体系统(UPS)研究水木和宁方对帕金森病(PD)小鼠的影响。方法:C57BL/6小鼠颈背部皮下注射鱼藤酮建立慢性PD小鼠模型。造模成功PD小鼠随机分为模型对照组、美多芭0. 15 g/kg组、水木和宁方15、30、60 g/kg组。治疗组每天灌胃给药2次,溶剂对照组和模型组给予等体积生理盐水,连续4 w。观察小鼠行为学改变;免疫组化检测中脑黑质α-突触核蛋白(α-syn)、酪氨酸羟化酶(TH)表达; WB和RT-PCR方法检测中脑黑质α-syn、TH及UPS相关的蛋白及mRNA表达。结果:与溶剂对照组比较,PD模型对照组小鼠前肢、后肢步长显著降低,游泳评分显著降低,中脑黑质TH阳性细胞数显著降低,α-syn阳性表达显著上调,α-syn蛋白及mRNA表达明显上调,TH、u BE1、Parkin、UCH-L1、Ubiquitin蛋白及mRNA表达明显下调(P <0. 05或P <0. 01)。与模型对照组比较,水木和宁方15 g/kg、30 g/kg、60 g/kg组小鼠行为学改变明显改善;中脑黑质TH阳性细胞数显著增加,α-syn阳性表达显著下调; TH、UPS相关蛋白及mRNA表达明显上调,α-syn蛋白及mRNA表达显著下调(P <0. 05或P <0. 01)。结论:水木和宁方可能通过调节UPS功能,促进α-syn的降解,从而改善PD小鼠的运动功能。     

补髓健脑方对帕金森小鼠行为学及脑内谷胱甘肽含量与其过氧化物酶活性的影响

目的 探讨补髓健脑方对帕金森病小鼠行为学及黑质内还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的影响.方法 选用纯系C57BL老龄小鼠45只,随机分为假手术组、模型组和中药组.采用腹腔注射MPTP法制备帕金森病动物模型.给予中药补髓健脑方灌胃治疗.观察小鼠爬杆实验、悬挂实验评分的变化.检测小鼠黑质内GSH含量、GSH-PX活性的改变.结果 补髓健脑方可提高小鼠的爬杆实验与悬挂实验分数(P<0.01),并可增加小鼠黑质内GSH含量、增强GSH-PX活性(P<0.01).结论 补髓健脑方可改善PD小鼠的行为协调能力,修复PD小鼠黑质神经元的损伤.     

佛手散对MPTP诱导帕金森模型小鼠的神经保护作用研究

目的:探讨佛手散对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)模型小鼠的治疗作用,并研究其神经保护作用相关机制。方法:将50只雄性C_(57)BL/6C小鼠随机分为5组,即正常对照组、模型对照组、佛手散100、300 mg/kg组和沙芬酰胺50 mg/kg组,除正常对照组注射等体积生理盐水外,其余各组均每天腹腔注射30 mg/kg的MPTP,连续注射5 d。造模完成后连续给药3 w,于末次给药后1 h,进行行为学检测。并采用高效液相色谱电化学法(HPLC-ECD)检测小鼠纹状体中多巴胺(DA)含量;采用免疫组织化学法检测黑质中酪氨酸羟化酶(TH)免疫阳性细胞情况;采用酶联免疫吸附法(Elisa)检测黑质中前列腺素E2(PGE2)含量;采用Western blot技术测定小鼠纹状体中α-突触核蛋白(α-Syn)和环氧化酶-2(COX-2)蛋白表达情况。结果:与正常对照组相比,模型对照组小鼠在行为学中爬杆和横木行走时间显著延长、自主活动的纵向探索次数明显减少,纹状体中DA含量显著降低,小鼠多巴胺神经元明显损伤,黑质中TH免疫阳性细胞急剧下降,同时纹状体中α-Syn蛋白、COX-2蛋白表达明显上调,黑质中代谢产物PGE2显著增加(P<0.05或P<0.01)。与模型对照组相比,佛手散100、300 mg/kg组能显著减少PD模型小鼠爬杆和横木行走时间、增加纵向探索次数,增加TH免疫阳性细胞,显著下调小鼠纹状体中α-Syn、COX-2蛋白表达,降低黑质中PGE2含量。结论:佛手散对PD的潜在治疗作用可能与其能够减少α-Syn生成,抑制MAO-B活性有关。其详细的分子机制还有待进一步深入研究。     

葛根素对6-羟多巴胺致帕金森病模型大鼠黑质组织神经细胞的保护作用

目的:研究葛根素对6-羟多巴胺(6-OHDA)致帕金森病(PD)模型大鼠黑质组织神经细胞的保护作用。方法:建立帕金森病大鼠模型,随机分成5组:模型组、左旋多巴阳性组及葛根素低、中、高剂量组。ig给予葛根素20,40,80 mg.kg-1,阳性组给予左旋多巴40 mg.kg-1,连续灌胃30 d。检测黑质组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)含量,进行黑质神经细胞常规染色观察,Western blot法检测黑质组织内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、环-磷酸腺苷(cAMP)反应元件结合蛋白(CREB)蛋白表达。结果:葛根素能缓解帕金森模型大鼠病情。与模型组比较,葛根素有效增加帕金森病大鼠黑质组织中GSH-Px,SOD活性,同时降低MDA含量(P<0.01)。下调黑质组织中iNOS蛋白水平,并上调CREB蛋白表达(P<0.01)。结论:葛根素对6-羟基多巴胺所致PD大鼠黑质组织神经细胞具有保护作用,机制可能与其抑制过氧化应激作用以及调节内源性iNOS、CREB蛋白的表达有关。     

电针对帕金森病大鼠中脑黑质Sirt3/NLRP3/GSDMD信号通路的影响

目的：观察电针“风府”“太冲”“足三里”对帕金森病（PD）模型大鼠中脑黑质酪氨酸羟化酶（TH）、α-突触核蛋白（α-syn）及沉默信息调节因子同源蛋白3(Sirt3)、NOD样受体3(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)的影响,探讨电针治疗PD的机制。方法：SD大鼠随机分为对照组、模型组、电针组,每组10只。采用颈背部皮下注射鱼藤酮复制PD大鼠模型。电针组给予电针“风府”“太冲”“足三里”,30 min/次,1次/d,连续治疗28 d。采用旷场实验检测大鼠自主运动总路程;爬杆实验检测大鼠肢体协调能力;免疫组织化学法检测大鼠中脑黑质组织中TH的阳性表达;实时荧光定量PCR法检测大鼠黑质组织中α-syn、Sirt3、NLRP3、GSDMD mRNA表达水平;Western blot法检测大鼠黑质组织中NLRP3、接头蛋白-凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)蛋白表达水平。结果：与对照组比较,模型组大鼠旷场实验自主运动总路程缩短（P<0.01）;爬杆实验评分升高（P<0.01）;中脑黑质TH阳性表达减少（P<0.01）;Sirt3 mRNA...     

加味五虎追风散对帕金森病模型大鼠多巴胺能神经元氧化应激水平的影响

目的:研究加味五虎追风散对鱼藤酮诱导的帕金森病(PD)模型大鼠多巴胺(DA)能神经元氧化应激的影响,探讨加味五虎追风散治疗PD的机制。方法:大鼠随机分为正常组、模型组、加味五虎追风散组,模型组及加味五虎追风散组采用颈背部皮下注射鱼藤酮法建立PD大鼠模型,正常组同法注射予相同体积的葵花油乳液,造模结束后给予药物干预,加味五虎追风散组每日灌胃给予10 ml/kg加味五虎追风散溶液,正常组、模型组每日给予等量的蒸馏水灌胃。检测各组大鼠中脑黑质部位超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量,同时观察黑质酪氨酸羟化酶(TH)免疫阳性神经元数目的变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠中脑黑质MDA含量显著增加(P<0.01),GSH含量、GSH-Px和SOD活性显著减少(P<0.01),黑质TH免疫阳性神经元数目明显减少(P<0.01);与模型组比较,加味五虎追风散组可明显增加PD模型大鼠脑组织中GSH-Px、SOD活性,增加GSH含量,减少MDA含量(均P<0.05),黑质TH免疫阳性神经元数目明显增多(P<0.01)。结论:加味五虎追风散对PD模型大鼠DA能神经元具有保护作用,其机制可能与加味五虎追风散减轻鱼藤酮所致的氧化应激损伤有关。     

天元冲剂对实验性帕金森病小鼠脑内GSH、GSH-PX影响及行为学变化的研究

目的：建立帕金森病（PD）动物模型,探讨天元冲剂对PD小鼠黑质内还原型谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）及行为学变化的影响。方法：选用纯系C57BL老龄鼠30只,随机分为空白组、模型组和冲剂组,采用腹腔注射MPTP法制备PD小鼠模型,使用天元冲剂灌胃进行治疗。检测小鼠黑质内的GSH含量、GSH-PX活性的改变;观察小鼠爬杆实验与悬挂实验的评分的变化。结果：经统计学处理数据表明,与对照组相比,天元冲剂能增加冲剂组小鼠脑内GSH含量、增强GSH-PX活性（P〈0.01）;可以提高小鼠的爬杆实验与悬挂实验的分数（P〈0.01）,改善小鼠的运动协调能力。结论：天元冲剂能改善PD小鼠的行为协调内力,增加黑质GSH含量,使黑质GSH-PX活性增强。     

天地镇颤方颗粒剂、口腔速溶散抗帕金森病的比较药理学研究

目的比较天地镇颤方颗粒剂、口腔速溶散抗帕金森病的疗效差异。方法采用氢溴酸槟榔碱、氧化震颤素、1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导3种帕金森病动物模型,小鼠随机分为空白对照组、氢溴酸槟榔碱组(氧化震颤素组、MPTP组)、美多巴组(50 mg/kg)、天地镇颤颗粒组(2. 70 g/kg)、天地镇颤口腔速溶散组(2. 70 g/kg)。评价氢溴酸槟榔碱、氧化震颤素致震颤小鼠的震颤行为学,并检测黑质和纹状体SOD、MDA水平。评价MPTP致PD小鼠自主活动、开场运动及爬杆时间,并检测脑组织MDA、SOD水平及黑质TH神经元。结果颗粒剂能改善小鼠震颤行为;2种剂型均能降低震颤小鼠纹状体MDA水平,增加纹状体SOD水平(P<0. 05,P<0. 01),均能提高MPTP致PD帕金森病小鼠自主活动,增强开场运动;仅口腔速溶散能够改善爬杆行为,均对黑质多巴胺神经元具有保护作用(P<0. 05,P<0. 01)。结论天地镇颤方颗粒剂改善帕金森病震颤具有优势,而天地镇颤方口腔速溶散在保护多巴胺神经、改善运动协调方面具有优势,最终选择口腔速溶散作为优选剂型。     

电针对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶诱导的帕金森病模型小鼠线粒体功能的影响

目的:观察电针对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)模型小鼠行为学、酪氨酸羟化酶(TH)、线粒体复合物Ⅰ—Ⅳ活性、线粒体膜电位、线粒体超微结构的影响,探讨电针治疗PD的可能靶点及机制。方法:将雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、美多巴组及电针组,每组11只,采用MPTP 30 mg·kg^-1·d^-1连续5 d腹腔注射诱导亚急性PD小鼠模型,对小鼠头部双侧舞蹈震颤区行电针治疗15 min/次,1次/d,连续14 d。观察各组小鼠行为学改变;用免疫组织化学法检测小鼠中脑黑质致密部TH的表达;测定小鼠线粒体复合物Ⅰ—Ⅳ的活性;JC-1染色法检测小鼠线粒体膜电位变化;透射电镜观察小鼠纹状体线粒体超微结构变化。结果:造模后小鼠出现震颤、竖毛、翘尾等明显行为学异常,模型组小鼠爬杆时间较正常组显著延长(P<0.01);治疗7、14 d后,模型组爬杆时间仍显著长于正常组(P<0.01),电针组、美多巴组爬杆时间较模型组显著缩短(P<0.05,P<0.01)。与正常组比较,模型组小鼠中脑黑质TH阳性表达、线粒体复合物Ⅰ活性、线粒体膜电位水平显著降低(P<0.01);与模型组比较,电针组、美多巴组中脑黑质TH阳性表达、线粒体复合物Ⅰ活性、线粒体膜电位水平显著升高(P<0.01)。模型组小鼠线粒体结构破坏明显,电针组、美多巴组线粒体结构损伤减轻,损伤的线粒体减少。结论:电针治疗对MPTP诱导的PD小鼠模型线粒体结构及功能有保护及促进恢复的作用,可能与改善线粒体功能障碍,平衡细胞稳态,减轻多巴胺能神经元损伤有关。