CD44s在乳腺癌中的表达及临床意义

目的 :探讨 CD44s在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法 :应用免疫组织化学 S-P法检测 CD44s在 5例正常乳腺组织和 64例乳腺癌组织中的表达 ,分析其表达与乳腺癌临床病理因素的关系。结果 :1正常乳腺导管上皮细胞和腺泡上皮细胞 CD44s呈阴性表达 ,而在肌上皮细胞呈强阳性表达 ;2 CD44s表达与肿瘤大小、TNM分期有关 (P<0 .0 5 ) ,随着乳腺癌的发展 ,CD44s表达呈下降趋势 ,而与病人年龄、月经状态、有无淋巴结转移、组织学类型、组织学分级、雌激素受体 (ER)、孕激素受体 (PR)及预后无关。结论 :CD44s可能在乳腺癌的早期发展过程中起作用 ,但它的表达不能作为预后指标     

透明质酸酶及透明质酸与Tca8113细胞增殖和黏附的相关性

目的 探讨透明质酸酶(HAase)及透明质酸(HA)与Tca8113细胞增殖、黏附的相关性.方法 采用间接免疫荧光法测定Tca8113 细胞CD44s、CD44v6与HAase蛋白表达.单独或联合应用HAase 单抗、CD44s单抗和 CD44v6单抗处理体外培养的Tca8113细胞;用CCK-8新型试剂盒分别测定其黏附和增殖能力,同时观察细胞形态.结果 Tca8113细胞表达CD44s、CD44v6与HAase蛋白.与对照组比较,HAase 单抗、CD44s单抗和 CD44v6单抗均能抑制Tca8113细胞的黏附与增殖(P<0.05),HAase单抗与CD44单抗存在协同作用(P<0.05).结论 HAase/HA与跨膜受体CD44的激活是促进肿瘤细胞黏附、增殖的重要途径.     

乳腺癌组织中基质金属蛋白酶MMP-9和CD44v6表达及其意义

目的探讨基质金属蛋白酶MMP-9和CD44v6在乳腺癌中的表达及其与乳腺癌侵袭、转移的关系.方法采用免疫组化方法对46例乳腺癌(10例导管内癌,36例乳腺浸润癌),10例乳腺增生组织MMP-9、CD44v6进行标记和分析.结果MMP-9和CD44v6在乳腺增生组织中几乎不表达,导管内癌、乳腺浸润癌表达率显著增高,各组间差异有显著性(P＜0.05),而且MMP-9与CD44v6过表达与淋巴结转移有关.结论MMP-9和CD44v6的过表达在乳腺癌侵袭和转移中发挥重要作用,可作为乳腺癌侵袭和转移的重要分子学标志.     

CD44、VEGF和EGFR在乳腺癌中的表达及临床意义分析

目的探讨白细胞分化抗原44(CD44)、血管内皮生长因子(VEGF)和表皮生长因子受体(EGFR)在乳腺癌中的表达情况及临床意义。方法收集进行了根治性切除的乳腺癌患者187例,并收集相应手术切除标本。使用免疫组织法检测CD44、VEGF和EGFR在癌组织、癌旁组织中的表达情况。结果 CD44、VEGF和EGFR在癌组织中的表达均高于癌旁组织(P<0.001);且在有腋窝淋巴结转移者中的阳性表达率均高于无淋巴结转移者(P<0.05);且在组织学分级Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级乳腺癌的阳性表达差异均有统计学意义(P<0.05)。VEGF和EGFR(r=0.218,P<0.05)、VEGF和CD44(r=0.219,P<0.05)、EGFR和CD44(r=0.147,P<0.05)在乳腺癌中的表达呈正相关。结论 CD44、VEGF和EGFR与乳腺癌的浸润转移有关;联合检测乳腺癌中的CD44、VEGF和EGFR的表达可为判断乳腺癌的恶性程度、寻找新的治疗靶点提供理论依据。     

乳腺癌干细胞的检测及Hedgehog信号通路关键分子的表达

目的:探讨乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231中是否存在乳腺癌起始细胞(CD44+/CD24-/low)亚群;并分析Hedgehog信号通路在CD44+/CD24-/low乳腺癌起始细胞亚群中的表达.方法:应用荧光激活细胞分选方法检测与分选MCF-7和MDA-MB-231中的CD44+/CD24-/low细胞亚群和非CD44+/CD24-/low细胞亚群,并在激光共聚焦显微镜下进行观察确认.应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测CD44+/CD24-/low细胞亚群和非CD44+/CD24-/low细胞亚群中Hedgehog信号通路重要基因PTCH(human patched gene)、SHH(sonic Hedgehog)、Gii-1(glioma-associated oncogene homoglog-1)和SMOH(smoothened homolog)的表达情况.结果:乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231中CD44+/CD24-/low亚群,比例分别为(1.70±1.43)%和(94.2±1.2)%.乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231的CD44+/CD24-/low亚群中Hedgehog信号通路处于明显活化状态,其中Hedgehog信号通路中重要下游信号分子Gii-1在MCF-7和MDA-MB-231细胞系CD44+/CD24-/low细胞亚群中的表达要明显高于非CD44+/CD24-/low细胞亚群(P分别为0.007和0.005).结论:乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231中存在CD44+/CD24-/low干细胞标志细胞亚群,其中Hedgehog信号通路处于明显活化状态.     

CD44分子在乳腺癌中的表达

目的:研究粘附分子CD44在乳腺癌中的表达及其与临床病理特征的关系,以求更加深入地探讨乳腺癌侵袭和转移的机制,为乳腺癌临床的诊治提供参考.方法:采用免疫组织化学ABC法,研究CD44S及CD44V6在52例乳腺浸润性导管癌组织中的表达强度.结果:在52例乳腺癌中,CD44S阳性18例(34.6%),阴性34例(65.4%);CD44V6阳性16例(30.8%),阴性36例(69.2%).CD44的表达未发现与病人年龄、肿瘤大小、病理分期、组织学分级、雌孕激素受体有统计学相关,CD44V6的表达,腋淋巴结阳性组的表达率明显高于腋淋巴结阴性组,且组织学分级Ⅲ级CD44V6阳性表达率明显高于Ⅰ Ⅱ级.结论:CD44V6在乳腺癌中的表达与肿瘤的组织学分级及腋淋巴结状态密切相关.     

一种新CD44变异体（CD44v17）在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨一种新CD44变异体(CD44v17)在乳腺癌组织中的表达及其临床意义.方法:根据本实验室在MCF-7/Adr中新发现的一种CD44剪切拼接变异体CD44v17(基因库NO.FJ216964)设计特异性引物,应用SYBR GreenⅠ荧光染料,采用实时PCR法检测了52例乳腺癌组织及相应癌旁组织CD44v17 mRNA的表达情况,根据标准曲线计算出CD44v17 mRNA的表达量,分析CD44v17 mRNA表达与乳腺癌临床生物学特性之间的关系.结果:乳腺癌组织CD44v17 mRNA表达(3.10±1.12)明显高于相应癌旁正常组织(2.31±0.84)(P<0.01);乳腺癌淋巴结转移组(4.07±1.13)显著高于无淋巴结转移组(2.75±0.89)(P<0.01);肿瘤组织＞5 cm组CD44v17 mRNA表达(4.18±0.95)明显高于肿瘤组织≤5 cm组(2.96±1.07)(P<0.05);髓样癌(5.27±0.30)显著高于导管内癌(3.28±1.08)和浸润性导管癌(2.92±1.04)(P<0.05),导管内癌和浸润性导管癌CD44v17 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05);乳腺癌临床Ⅲ期CD44v17 mRNA表达(4.18±0.92)明显高于Ⅰ期(2.73±0.97),Ⅱ期(2.76±0.96)(P<0.05);乳腺癌CD44v17 mRNA表达与雌激素受体、孕激素受体(progesterone receptor,PR)和cerbB-2表达无明显相关性(P>0.05).结论:CD44v17 mRNA在乳腺癌组织中高表达,在乳腺癌的发生发展中起重要作用,可能与乳腺癌的侵袭、转移及预后有关.     

C-erbB-2、Ki-67和CD44v6在乳腺癌中的表达与其生物学行为的研究

目的检测C-erbB-2、Ki-67及CD44v6，探讨这3个指标与乳腺癌淋巴结转移之间的关系及预后意义。方法应用免疫组织化学EliVision法，检测110例乳腺癌中C-erbB-2、Ki-67和CD44v6表达。并对110例乳腺癌作生存分析。结果在110例乳腺癌组织中，C-erbB-2、Ki-67和CD44v6阳性表达率分别为50．9％(56／110)、75，5％(83／110)和71．8％(79／110)。C-erbB-2阳性过表达与乳腺癌淋巴结转移显著正相关(P＜0．05)，Ki67阳性表达与淋巴结转移无关(P＞0．05)，CD44v6阳性表达与淋巴结转移正相关(P＜0.05)。C-erbB-2与CD44v6正相关(P＜0．05)，与Ki-67无相关性(P＞0．05)。Cox比例风险模型多因素生存分析，显示只有淋巴结转移，联合C-erbB-2、CD44v6检测是预后不良的指标。结论淋巴结转移，联合检测C-erbB-2、CD44v6是乳腺癌判断预后的重要指标。     

CD44^＋/CD24^-表型在乳腺癌分子亚型中的表达和分布

目的：研究CD44＋/CD24-表型在乳腺癌中的表达并探讨其与乳腺癌各分子亚型的相关性.方法：根据免疫学标志物（ER,PR,HER2,CK5/6,P53）把217例乳腺癌划分为5类分子亚型：basal-like型、LuminalA型、LuminalB型、Her2过表达型和Normalbreast-like型.应用双重免疫组织化学检测CD44/CD24双染的情况,分析CD44＋/CD24-表型与乳腺癌5个分子亚型的相关性.结果：217例乳腺癌病例中,luminalA型130例、luminalB型15例、HER2过表达型21例、basal-like型29例、Normalbreast-like型22例.38%的乳腺癌组织表达CD44＋/CD24-表型,CD44＋/CD24-表型在basal-like型、Lu-minalA型、LuminalB型、Her2过表达型、Normalbreast-like型乳腺癌中表达率分别为69.0%,36.2%,26.7%,19.0%,31.8%.CD44＋/CD24-表型在乳腺癌各分子亚型中的表达具有显著差异性（P=0.003）,高表达在basal-like乳腺癌中（69%）.结论：CD44＋/CD24-乳腺癌干细胞与basal-like乳腺癌有相关性; 其他乳腺癌干细胞标志物仍需得到进一步鉴定.     

乳腺癌细胞系中肿瘤干细胞相关亚群初步研究

目的:检测不同乳腺癌细胞系中肿瘤干细胞相关亚群含量,并探讨使乳腺癌细胞系MCF-7中肿瘤干细胞相关亚群富集的方法.方法:利用流式细胞仪检测3种乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435s中SP细胞(side population cells)比例及CD44 CD24-/low细胞比例.用Percoll不连续密度梯度法分离MCF-7细胞亚群,利用流式细胞仪筛选出SP细胞富集的亚群.用添加生长因子的无血清培养液培养MCF-7,检测其中CD44 CD24-/low细胞的比例.结果:MCF-7、MDA-MB-435s中SP细胞比例分别为3.61%和2.72%,MDA-MB-231中未检测到SP细胞.3种细胞系中CD44 CD24-/low细胞比例分别为0.87%、0.59%和94.04%.MCF-7经Percoll分选,D亚群SP细胞富集,比例高达25.23%.MCF-7中CD44 CD24-/low细胞比例随着无血清培养时间的增加而增加,3周时达29.35%.结论:SP检测与CD44 CD24-/low细胞检测是目前乳腺癌干细胞检测的两种常用方法,但两者在同一乳腺癌细胞系中的检测结果并不一致,两种方法均有一定的局限性.另外,Percoll分选或无血清培养均能使MCF-7中肿瘤干细胞相关亚群(SP细胞或CD44 CD24-/low细胞)富集.     

高效液相色谱法检测人血浆中咖啡因及其3种去甲基代谢产物

以８－氯茶碱作为内标，利用高效液相色谱同时测定人血浆中咖啡及其３种去甲基代谢产物－－副黄嘌呤、可可碱和茶碱的方法。这４种物质可以在一个固定相柱子上被同时分离；流动相为甲；０．１ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钠（３０：７０）（Ｖ／Ｖ）；流速：０．８ｍｌ／ｍｉｎ；紫外检测器，波长２７４ｎｍ。实验表明这４种物质的最小检出量均在７５ｎｇ／ｍｌ，并具有较好的线性、重复性及较高回收率。     

孕周与母儿血甲状腺激素含量的关系

目的：观察不同孕周与母儿血甲状腺激素的关系。方法：应用放射免疫分析法对67例中、晚期妊娠要求引产患者，10例早产及78例孕足月自然分娩患者进行了母血及胎儿脐静脉、脐动脉血中TSH、T3、T4的测定。结果：TSH值在母血及胎儿血中随着孕周的增加而增加．T3值在胎儿血中与母血中比较，显示低T3血症，T4值接近正常母体水平。结论：测定母血中的甲状腺激素，可动态观察不同孕周甲状腺激素变化，可及时发现胎儿低甲血症。     

5种生物碱胃癌多药耐药逆转剂的筛选及机制研究

目的 研究骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱、贝母素甲、贝母素乙和氧化苦参碱对肿瘤细胞多药耐药性（MDR）的逆转作用及机制。方法 以胃癌亲本细胞系SGC-7901和MDR细胞系SGC-7901/VCR为细胞模型,采用MTT法检测上述5种生物碱的细胞毒活性及对MDR的逆转效果;用流式细胞仪检测MDR逆转效果最好的贝母素乙对肿瘤细胞内阿霉素（ADR）蓄积的影响;Western blotting法检测P-糖蛋白（P-gp）的表达;Hoechst荧光染色和细胞免疫荧光法检测贝母素乙诱导SGC-7901/VCR细胞凋亡情况。结果 骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱、贝母素甲、贝母素乙和氧化苦参碱均能不同程度地抑制SGC-7901和SGC-7901/VCR细胞的增殖,在非毒剂量下贝母素乙能够显著提高SGC-7901/VCR细胞对ADR的敏感性及细胞内ADR的浓度,降低P-gp表达。贝母素乙联合5-氟尿嘧啶（5-FU）给药可诱导SGC-7901/VCR细胞凋亡,凋亡细胞cleaved caspase-3呈高表达。结论 贝母素乙具有作为胃癌MDR逆转剂的潜力,其逆转耐药的机制可能与下调P-gp表达和诱导细胞凋亡有关。     

褪黑素载药纳米粒的优化设计及研制

目的：探讨采用复合乳液-溶剂挥发法制备褪黑素载药纳米粒的最佳工艺条件。方法：以聚乳酸、壳聚糖可降解生物材料为载体,明胶为分散剂,span-80和tween-80混合液为微乳液,根据微粒的表面形态、粒径大小、分布、包封率、载药量选择最佳工艺条件,制备褪黑素载药纳米粒。结果与结论：原子力显微镜下可见纳米粒表面圆滑,分布均匀。正交设计效应曲线图直观分析和方差分析结果显示,搅拌速度、溶剂挥发温度、聚乳酸与褪黑素投药比、壳聚糖浓度是影响制备工艺的主要因素。在30℃,1000r／min搅拌速度,搅拌时间45min,m(褪黑素)：m(聚乳酸)为1：5,V(Tween-80)：V(Span-80)为5：1,壳聚糖质量浓度为1％条件下,可制备成平均粒径为45．84nm,包封率为38．33％,载药量为8．35％的褪黑素载药纳米粒。     

HepG2 细胞谷胱甘肽含量和谷胱甘肽转移酶活力的诱导

目的：建立一种具有较高ＧＳＨ含量和ＧＳＴ活力的肝细胞系。方法：将ＨｅｐＧ２细胞在０．１,０．３,０．５ｍｇ／Ｌ浓度的ＣＤＤＰ间歇作用下传代１２个月后得到三种稳定的ＣＤＤＰ耐药细胞系ＨｅｐＧ２／ＣＤＤＰ０．１,ＨｅｐＧ２／ＣＤＤＰ０．３,ＨｅｐＧ２／ＣＤＤＰ０．５细胞的ＧＳＨ含量和ＧＳＴ活力,结果用显著性ｔ检验方法作统计学处理。结果：诱导刺激后的子代ＨｅｐＧ２／ＣＤＤＰ０．１,ＨｅｐＧ２／ＣＤＤＰ０     

疾病词“癘”“痱”“脪”“瘘”等考证

对“癘”“”“痱”“”“脪”“瘘”等6个疾病词及其相关词汇进行考证。主要利用佛经音义相关材料,结合历代辞书、文献材料,与《汉语大字典》相关条目进行比对,补充了某些疾病词的书证,增补或订补了某些词的义项,纠正了某些词的注音及释义,明确了某些词之间的字际关系,并据此对《汉语大字典》中这些疾病词及其相关条目中存在的问题和缺漏进行了补正。     

应用重组促红细胞生成素治疗长期血透患者的贫血

作者应用重组促红细胞生成素(rHuEPO)治疗68例依赖输血的透析患者(醋酸盐血透32例,碳酸氢盐血透24例,血液滤过12例)。治疗前 Hb 52.7±8.0g/L,Ht19.4±2.2%,血清铁蛋白>100μg/L。rHuEPO 治疗剂量150～300 u·kg~(-1)/周,静脉推注。当 Hb>100～120g/L,Ht>30%～35%时将 rHuEPO 减至维持量。疗程6.2±4.3个月。所有患者经 rHuEPO 治疗后不再输血,Hb 和 Ht 均有不同程度上升。其中39例 Hb 净增大于60g/L,Ht 增加大于10%,分别占治疗病例的57.4%。结果表明,rHuEPO 剂量为150～300 u·kg~(-1)/周是安全有效的,副作用远较国外报道为低。     

磁分离酶联免疫测定男性生殖激素方法性能评价

目的：对磁分离酶联免疫测定（MAIA）法测定男性生殖激素的方法学性能作临床和实验室评价。方法：将本法与放射免疫测定（RIA）法进行对比研究。结果：MAIA法测定促卵泡生成激素（FSH）、促黄体生成素（LH）、睾酮（T）和催乳素（PRL）的线性分别为0－150IU／L、0－200IU／L、0．5－55ng/L、0－250ng/L；最小检测量分别为0．3mIU/ml、0．25mIU/ml、4μIU/ml、4μIU/ml；批内CV＜4％，批间CV＜8％，平均回收率偏差＜5％，互感率＜3％；与RIA法比较，两法相关系数分别为0．9826、0．8550、0．8512、0．9831。临床质控观察60d，质控稳定；成年健康男性（n=95）血清FSH、LH、T、PRL的参考范围分别为：0．25－10．18IU／L、0．33－8．95IU／L、0．54－11．11ng/L和8．77－33．43ng/L。结论：用MAIA法测定男性生殖激素，方法灵敏，结果可靠，先例临床要求。     

磁场对大白鼠生殖功能的影响

本文采用放射免疫测定技术、通过检测雄性大白鼠体内 FSH、LH 及 T 和雌性大白鼠体内 FSH、LH 及 E_2的水平变化,研究了磁场对大白鼠生殖功能的生物学效应。实验结果表明,在表面静磁场为2000GS 的旋磁作用下,这些促性腺激素及性激素的含量均无明显改变。作者认为这一结果提示,磁场对大白鼠的生殖功能无不良影响,因而对磁疗技术在临床推广使用上的安全性问题提供了一个理论依据。     

PCR技术检测1165例生殖道分泌物的初步分析

ＰＣＲ技术同时做淋病、解脲支原体、沙眼衣原体三种病原体体外基因扩增，对确诊淋菌性尿道炎及与非淋菌性尿道炎的双重感染，可在５ｈ内解决。