谷胱甘肽及其构成氨基酸在犬经口、静注给药的药代动力学

目的　主要研究谷胱甘肽（ＧＳＨ）口服后的吸收情况。方法　Ｂｅａｇｌｅ犬５只，先后分别经口、静注给予ＧＳＨ及其构成氨基酸后，用ＨＰＬＣ法测定血中浓度。结果　在清醒犬，单剂量（３．８９、１．６２ｍｍｏｌ／ｋｇ）一次或单剂量（０．４９ｍｍｏｌ／ｋｇ）连续５、１０ｄ经口给ＧＳＨ后，犬前肢静脉血浆中ＧＳＨ、甘氨酸明显升高（Ｐ＜０．０５～０．０１）；如上单次给予１．６２ｍｍｏｌ／ｋｇ（等于ＧＳＨ分子中含有的摩尔数）构成氨基酸后，血浆中的ＧＳＨ水平未见变化，但构成氨基酸均显著增加（Ｐ＜０．０１）；在麻醉犬，经口给ＧＳＨ１．６２ｍｍｏｌ／ｋｇ后，１～６ｈ内肠系膜静脉血浆ＧＳＨ水平高于前肢静脉（Ｐ＜０．０５～０．０１）；清醒犬ｉｖＧＳＨ０．０６５ｍｍｏｌ／ｋｇ后静脉血浆中ＧＳＨ的Ｋｅｌ１和Ｔ１／２α分别为８．０４ｈ－１和０．０９ｈ，且在降至基值后又出现一个再分布的小峰。结论　ＧＳＨ经口给药后部分可以整分子吸收，经肝脏后血浆中ＧＳＨ浓度明显下降，可能是由于肝脏的摄取所致。     

外源性谷胱甘肽在大鼠的药代动力学和器官组织分布

研究外源给予ＧＳＨ的药动学特性及其是否被器官组织利用。采用反相Ｃ１８－ＯＤＳ柱，荧光检测器，经丹磺酰氯衍化反应后分离和测定大鼠血浆及器官组织ＧＳＨ水平。结果：静注２００ｍｇ／ｋｇ，腹腔注射６００ｍｇ／ｋｇ和１２００ｍｇ／ｋｇＧＳＨ给大鼠后，血药浓度－时间曲线均反映ＧＳＨ大鼠体内过程符合二室模型，其Ｔ１／２α分别为０．０６ｈ（ＩＶ），０．７５ｈ（ＩＰ）和０．２２ｈ（ＩＰ），Ｔ１／２β依次为０．５４、     

谷胱甘肽对高糖时人内皮细胞分泌前列环素和内皮素-1的影响

了解谷胱甘肽（ＧＳＨ）对高糖时人内皮细胞分泌前列环素（ＰＧＩ２）和内皮素－１（ＥＴ－１）的影响。方法： 原代培养人脐静脉内皮细胞,分别加入正常对照组,高糖组,正常＋ＧＳＨ组,高糖＋ＧＳＨ组培养基,放免法测定培养 ２４ｈ,４８ｈ,７２ｈ时培养基中的ＰＧＩ２和ＥＴ－１含量。结果：①高糖组较正常对照组ＰＧＩ２显著下降（Ｐ＜０．０１）,ＥＴ－１显 著升高（Ｐ＜０．０１）;②高糖＋ＧＳＨ组较高糖组ＰＧＩ２升高（Ｐ＜０．０１）,ＥＴ－１显著下降（Ｐ＜０．０１）。结论：ＧＳＨ在调节高 糖时人血管内皮细胞分泌 ＰＧＩ２／ＥＴ－１的平衡方面起一定作用。     

谷胱甘肽对高糖时人内皮细胞分泌前列环素和内皮素—1的 …

目的：了解谷胱甘肽（ＧＳＨ）对高糖时人内皮细胞分泌前列环素（ＰＧＩ２）和内皮素－１（ＥＴ－１）的影响。方法：原代培养人脐静脉内皮细胞，分别加入正常对照组，高糖组，正常＋ＧＳＨ组，高糖＋ＧＳＨ组培养基，放免法测定培养２４，４８ｈ，７２ｈ时培养基中的ＰＧＩ２和ＥＴ－１含量。结果：（１）高糖组较正常对照组ＰＧＩ２显著下降（Ｐ〈０．０１），ＥＴ－１显著升高（Ｐ〈０．０１）；（２）高糖＋ＧＳＨ组较高糖组ＰＧ     

慢性乙醇摄入大鼠肝脏醇脱氢酶和谷胱甘肽硫转移酶活性影响

为探讨长期摄入乙醇大鼠肝脏ＡＤＨ和ＧＳＴ活性的动态变化，旨在为酒精中毒的发病机理提供实验依据，进行了下述实验研究。选用体重１００～１２０ｇＳＤ雄性大鼠４８只，随机分成两组：（１）对照组：２４只喂普通饲料，饮用自来水，（２）乙醇组：２４只白天饮用１０％蔗糖水，夜间饮用１０５乙醇水溶液，平均每只实验动物的乙醇摄入量为８．０ｇ／ｋｇ体重／ｄ，饲料同对照组。实验开始后的３０ｄ、６０ｄ时分批处死动物，第９０天时处死全部动物，除肉眼观察肝脏形态学改变外，同时留取病理标本和进行组织中ＡＤＨ和ＧＳＴ活性测定，结果显示：（１）大鼠肝细胞胞浆中ＡＤＨ活性，在服用乙醇３０ｄ时即可看到明显减低，较对照组有显著差别（Ｐ＜０．０５），至实验９０ｄ结束时，其减低的更明显（Ｐ＜０．０１）．（２）大鼠肝细胞胞浆中ＧＳＴ活性　在６０ｄ和９０ｄ时乙醇组较对照组均明显减低，经统计学处理均有显著差别（Ｐ＜０．０１）。上述结果提示肝脏ＡＤＨ和ＧＳＴ活性表达在酒精性肝病发病机制中起着重要作用。     

安替可胶囊抗肿瘤作用的机理

目的：探讨安替可（Ａｎｔｉｋｅ）胶囊抗肿瘤的作用机理．方法：采用移植瘤模型、常规体液和细胞免疫测定、细胞毒结晶紫染色、比色及同位素参入等方法，观察Ａｎｔｉｋｅ及其组分蟾皮（ＳＴ）和当归（ＡＳＤ）的抗肿瘤作用、诱导ＴＮＦ、ＮＫＣ、ＩＬ－２活性、血中过氧化氢酶（ＣＡＴ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）和组织中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）含量及脾和瘤细胞中３Ｈ－ＵＲ参入ｃｐｍ等指标．结果：①Ａｎｔｉｋｅ，ＳＴ和ＡＳＤ及５－Ｆｕ对Ｈ２２移植瘤的瘤重抑制率分别为４５．０５％，４３．９５％，２７．７９％，５５．７９％（Ｐ＜０．０１）；②Ａｎｔｉｋｅ和ＡＳＤ诱导ＭΦ释放ＴＮＦ分别为２５９．０±４０．８和２１４．８±４３．５Ｕ·μｌ－１（Ｐ＜０．０１），ＮＫＣ杀伤率为７３．３９％，６７．４７％（Ｐ＜０．０１），显著增强ＩＬ－２活性（Ｐ＜０．０１），提高ＣＡＴ，ＧＳＨ－Ｐｘ和移植瘤中ＳＯＤ含量（Ｐ＜０．０１），显著降低瘤细胞ｃｐｍ（Ｐ＜０．０１）；③ＳＴ诱导ＭΦ释放ＴＮＦ为１７７．１±４２．９Ｕ·μｌ－１（Ｐ＜０．０１），ＮＫＣ杀伤率６７．７４％（Ｐ＜０．０１），增强ＩＬ－２活性；但对荷瘤小鼠血中ＣＡＴ，ＧＳＨ－Ｐｘ，ＳＯＤ     

谷胱甘肽-S转移酶的测定及其应用

谷胱甘肽－Ｓ转移酶（ＧＳＴ）是一组多功能的同工酶蛋白，对异生物质的生物转化和解毒有重要作用。在肝损伤时，血清ＧＳＴ活性显著升高，可作为肝病患者的诊断指标之一。作者在参考文献［１～３］的基础上建立了ＧＳＴ活性测定方法，并初步探讨了其临床应用价值。１材料与方法１．１材料７５１Ｇ型分光光度计（上海分析仪器厂），电热恒温水浴箱（上海医用设备厂），１ｍｍｏｌ／ＬＧＳＨ溶液：称取ＧＳＨ（上海酵母厂）３０．７０ｍｇ溶于双蒸水中，稀释至１００ｍｌ，用前临时配制。１ｍｍｏｌ／ＬＣＤＮＢ溶液：称取ＣＤＮＢ（美国Ｓｉ…     

谷胱甘肽过氧化物酶在人膀胱癌组织中的表达及其意义

目的：通过测定人膀胱癌组织及癌旁组织中的谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ）活性,探讨其在各组织中的分布差异,与膀胱分期、分级的关系及临床意义。方法：谷胱甘肽过氧化物酶活力测定采用ＵＩＮＢ直接法。其中Ｔ１期７例、Ｔ２期 １２例、Ｔ３期 ７例,细胞分级Ⅱ级 １９例、 Ⅲ级 ７例,并取 １２例非癌病人做正常对照。结果：①对照组、癌旁组、癌组组织中ＧＳＨ－ＰＸ活力（Ｕ／ｍｇ·ｐｒ）分别为３０．７８±１１．３９、３７．８５ ± ８．７８、６８．４８±１１．６８。对照组与癌组、癌旁组与癌组间均有非常显著性差异（Ｐ＜０．０１）。而对照组与癌旁组间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。②ＣＳＨ－ＰＸ活力与肿病分期（Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３分别为 ６１．ｌ１± １６．０４、７０．７５±９．４１、７１．９４±７．８７）及分级（ Ⅱ级、Ⅲ级分别为 ６６．８６± １２．４４、７２．８７±８．５７）无关。结论：ＧＳＨ－ＰＸ在正常膀胱粘膜组织中发挥一种抗癌作用,而在癌组织中重新表达则呈现高活性,升高的的ＧＳＨ－ＰＸ活性在肿瘤细胞中能减少氧毒素和死活抗癌药及其产生的代谢产物。与膀胱癌的内在抗药性有关。高活性的ＧＳＨ－ＰＸ亦可能是膀胱癌的一种标志酶。     

乙型肝炎病毒x蛋白对细胞周期的影响

目的　研究乙型肝炎病毒ｘ（ Ｈ Ｂｘ） 蛋白对细胞周期影响,探讨 Ｈ Ｂｘ 蛋白致细胞周期紊乱的分子机理。方法　构建 Ｈ Ｂｘ 基因真核表达载体ｐ Ｃ Ｅ Ｐ４ Ｘ,电转染入 Ｈｅｐ Ｇ２ 细胞（ Ｘ 细胞） ,以ｐ Ｃ Ｅ Ｐ４空载体为对照（ Ｘ０ 细胞） ,潮霉素选择培养,克隆扩增转染细胞,经无血清培养同步化后,流式细胞仪检测细胞周期变化;细胞组化和 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 检测增殖细胞核抗原（ Ｐ Ｃ Ｎ Ａ） 和ｐ２１ Ｃ Ｉ Ｐ１／ Ｗ Ａ Ｆ１ 表达变化。结果　流式细胞仪检测示对照 Ｘ０ 细胞７０ ％ 进入 Ｇ０ Ｇ１ 期,而转 Ｘ 细胞仅５６ ％ 进入 Ｇ０ Ｇ１ 期,与含血清培养的亲本细胞 Ｈｅｐ Ｇ２ 几乎相同。ｐ２１ Ｃ Ｉ Ｐ１／ Ｗ Ａ Ｆ１ Ｄ 表达在 Ｘ０ 细胞阳性率为（８６ ±８） ％ , Ｘ 细胞为（１６ ±６） ％ 。 Ｐ Ｃ Ｎ Ａ 表达在 Ｘ０ 细胞阳性率为（９ ±５） ％ , Ｘ 细胞为（８６ ±３） ％ 。结论　 Ｈ Ｂｘ 有推进细胞周期作用,并使细胞生长对血清依赖减少。 Ｈ Ｂｘ 可抑制细胞周期抑制蛋白ｐ２１ Ｃ Ｉ Ｐ１／ Ｗ Ａ Ｆ１ 表达,同时增强细胞 Ｄ Ｎ Ａ 合成。     

大鼠谷胱甘肽S-转移酶P1基因顺式调控元件的搜寻

目的搜寻大鼠谷胱甘肽Ｓ－转移酶Ｐ１基因（ｒａｔｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅＳ－ｔｒａｎｓ－ｆｅｒａｓｅＰ１，ｒＧＳＴＰ１）上游３．０ｋｂ区域内顺式调控元件。方法采用高灵敏度的荧光素酶报告基因载体，以外切酶Ⅲ（ＥｘｏⅢ）、Ｓ１核酸酶对上述３．０ｋｂ片段进行删切后造成缺失，将所获得的一系列缺失质粒分别转染ＨｅＬａ细胞，测定转染细胞裂解液荧光素酶活性。结果当删切从－２．９ｋｂ进展至－２．３ｋｂ时，荧光素酶活性降低６７％（Ｐ＜０．０５），－２．５ｋｂ～－２．２ｋｂ区域能以不依赖于位置、方向性的方式增强基因表达强度，从－１．８ｋｂ缺失到－１．３ｋｂ时，荧光素酶活性升高４倍（Ｐ＜０．０５）。结论ｒＧＳＴＰ１基因上游在－２．５ｋｂ～－２．２ｋｂ及－１．８ｋｂ～－１．３ｋｂ区域内分别存在增强子元件和负调控序列。     

降低细胞内GSH浓度对乳腺癌细胞阿霉素敏感性的影响

目的 探讨肿瘤细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)浓度对肿瘤细胞药物敏感性及在肿瘤细胞耐药机制中的作用. 方法以马来酸二乙酯(DEM)处理人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADM和敏感细胞株MCF-7/S,以消耗细胞内GSH,MTT法检测DEM处理前后两种细胞存活率的变化,并采用荧光分光光度法同步检测其细胞内GSH的消耗程度,分析细胞内GSH浓度的变化与MCF-7细胞对ADM敏感性变化间的相关关系. 结果 0.1 μmol/L DEM使MCF-7/ADM细胞内GSH浓度减少37.4%(P＜0.01),使MCF-7/S细胞内GSH浓度减少29.7%(P＜0.01);ADM亦使细胞内GSH含量呈ADM浓度依赖性的下降;DEM与ADM合用时,GSH浓度显著下降,其下降程度大于DEM和ADM单独应用之和.随着细胞内GSH数量的减少,无论是MCF-7/ADM细胞,还是MCF-7/S细胞,细胞存活率均下降,即对ADM的敏感性均增强(P＜0.01).结论 DEM耗竭细胞内GSH的作用与ADM有协同效应,耗竭细胞内GSH可增强人乳腺癌MCF-7/S细胞对ADM的敏感性,部分逆转MCF-7/ADM细胞对ADM的耐药性.     

苯乙烯作业工人血GSH含量和GSH-Px活力的研究

目的：研究苯乙烯接触工人血中谷胱甘肽（GSH）含量和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的变化。方法：选择接触苯乙烯工人54人为接触组,选择年龄、性别构成与接触组相似的不接触遗传毒物的工人25人为对照组。血中GSH含量和GSH-PX活力测定,采用二硫代二硝基苯甲酸（DNTB）比色法。结果：苯乙烯接触组工人GSH-Px活力明显升高,与对照组比较差异有显著性。结论：接触苯乙烯使工人GSH-Px活力增加,导致脂质过氧化改变。     

益气清热活血方对小鼠骨髓多染红细胞微核形成的抑制作用

目的:观察益气清热活血方对环磷酰胺诱发小鼠骨髓多染红细胞(PCEs)微核形成的抑制作用及其机制探讨。方法:微核实验和测定小鼠肝组织中谷胱甘肽-S-转移酶(GST)活性、还原性谷胱甘肽(GSH)含量。结果:益气清热活血方对环磷酰胺(CPA)诱发PCEs微核细胞率有较强抑制作用,并能提高肝脏GST活性,升高GSH含量。结论:益气清热活血方对化学诱变剂引起的染色体断裂有一定保护作用,其作用机制可能与提高肝脏的解毒功能有关。     

蓖麻毒素及其SPDP修饰物对小鼠肝脏GSH含量的影响

目的：观察麻毒素（ＲＴ）修饰前后对小鼠肝脏毒性的影响。方法：ＲＴ用３－（２－吡啶二巯基）丙酸Ｎ－羟基琥珀酰亚胺酯中（ＳＰＤＰ）－－一种异型双功能交联剂,进行化学修饰,自下而上的ＳＰＤＰ衍生物（ＰＤＰ－Ｒ）,测定两者在不同剂量和时间对小鼠肝脏还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量的影响,以比较两者的毒性差别,结果：随着中毒剂量的增加和时间的延长,两者与可使小鼠肝脏ＧＳＨ含量下降,但ＲＴ组下降程度较ＰＤＰ－Ｒ     

GSH脑保护作用及其吸收机制的研究

目的：研究口服GSH的脑保护作用并探讨其在肠道的吸收机制。方法：观察口服GSH对小鼠耐缺氧能力和对大鼠皮层、下丘脑、纹状体、脑干及海马的GSH、SOD及LPO的影响,以及Acivicin预处理大鼠后口服GSH,以上五个脑区GSH的变化。结果：口服GSH可明显提高小鼠耐缺氧能力;大鼠皮层、下丘脑、纹状体、脑干及海马GSH上升、LPO下降,在皮层、下丘脑、纹状体及脑干SOD活性升高;Acivicin预处理大鼠后,口服GSH仍能使大鼠下丘脑、纹状体及脑干GSH提高。结论：口服外源性GSH对脑组织有保护作用,其保护作用同脑内GSH含量提高、SOD活性升高和LPO下降有关;外源性GSH在肠道的吸收有整分子GSH吸收参与。     

Schedule-dependent reversion of cisplatin resistance by 5-fluorouracil in a cisplatin-resistant human lung adenocarcinoma cell line A549DDP

ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｓｔｕｄｙｔｈｅｓｃｈｅｄｕｌｅｄｅｐｅｎｄｅｎｔｒｅｖｅｒｓｉｏｎｏｆｃｉｓｄｉａｍｍｉｎｅｄｉｃｈｌｏｒｏｐｌａｔｉｎｕｍ（ＣＤＤＰ）ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｂｙ５ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ（５Ｆｕ）ｉｎａＣＤＤＰｒｅｓｉ...     

谷胱甘肽GSH/GSSG氧化还原态各指标的测定

目的通过对不同样品中GSH/GSSG各指标的测定比较,确定最适合的血液样品以反映体液的氧化还原态。方法分别测定血浆、血清及红细胞液中GSH和GSSG浓度,并计算出GSH/GSSG比值以及相应的氧化还原电位,进行比较。结果血清和血浆都可以作为氧化-还原态的检测样本,但GSH/GSSG氧化还原对测定以血浆为佳。结论GSH/GSSG氧化还原对测定以血浆为最佳检测样品。     

毛细管电泳电化学法（CE-ECD）检测人全血中的同型半胱氨酸（Hcy）、半胱氨酸（Cys）和还原型谷胱甘肽（GSH）

 目的 建立毛细管电泳电化学技术(capillary electrophoresis with electrochemical detection,CE-ECD)检测人全血中同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)、半胱氨酸(cysteine,Cys)和还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)的方法。考察缓冲液的浓度、酸碱度、分离电压、进样时间和检测电压等参数对分离和检测的影响,确定最佳的实验条件。方法 以直径为500 μm的铂圆盘电极作为检测电极,用长度为50 cm的熔融石英毛细管对一系列待检物标准溶液和人全血样本进行毛细管电泳电化学检测。结果 在最优条件下,当电极电位为+1.05 V(相对饱和甘汞电极)、分离电压为18 kV时,Hcy、Cys和GSH于100 mmol/L的磷酸盐缓冲液(pH 7.8)中在10 min内获得理想分离。检测下限(S/N=3)在0.29～0.80 μmol/L范围内,且在3倍数量级浓度范围内,3种组分的浓度与峰电流呈良好线性关系。对0.5 mmol/L的混合标准溶液连续检测7次,Hcy、Cys和GSH峰高的相对标准偏差（relative standard deviation,RSD)分别为3.7%、3.1%和2.9%。结论 CE-ECD方法可对Hcy、Cys和GSH等3种生物活性巯基化合物进行高效分离及检测,具有分析速度快、成本低、灵敏度高、试剂及样品用量小等优点,因此在生物医药领域具有广泛的应用前景。本实验采用的铂圆盘电极具有污染少、重复性好的特点。     

外源性GSH镇静催眠作用及其作用机制初探

目的 观察外源性GSH灌胃给药的镇静催眠作用及对不同脑区NA、5-HIAA和HVA的影响。方法 观察外源性GSH灌胃给药对阈下剂量（25mg/kg,iv)戊巴比妥钠小鼠行为的影响，同时用高效液相色谱电化学法测定了外源性GSH灌胃给药后大鼠不同脑区NA、5-HIAA和HVA的含量。结果 外源性CSH灌胃给药可提高阈下剂量戊巴比妥钠所致的小鼠“睡眠”发生率，并使大鼠下丘脑干NA下降，皮层及脑干5-HIAA上升。结论 GSH可协同戊巴比妥钠的镇静催眠作用，其作用可能与下丘脑NA下降，皮层及脑干5-HIAA上升有关。     

大蒜素及葛花露对扑热息痛所致小鼠肝损伤的保护作用

目的：观察大蒜素（allitridi,Alt)及葛花露（Puerariae fols essenec,PFE)对扑热息痛（Paracetamol,Par)所致小鼠肝损伤的保护作用。方法：建立小鼠Par肝损伤模型,分别测定生理盐水对照组、Par 模型组、Par Alt10mg/kg组、Par Alt组（10、20和30mg/kg)、Par PEE组小鼠血清天冬氨酸转氨酶（AST）、谷胱甘肽S-转移酶（GST）活性及肝组织中谷胱甘肽（GSH）和MDA含量。结果：Alt可阻抑Par小鼠血清AST、GST和肝组织MDA升高及GSH耗竭（均P＜0.01）,其中抑制血清GST升高和肝内GSH耗竭的作用皆呈现量效关系;PFE亦可显著阻止P ar小鼠血清AST、GST和肝组织MDA升高,对肝脏GSH耗竭则无保护作用（P＜0.05)。结论：Alt小剂量即可有效防治Par肝损害,适当增加剂量更有利于Par鼠肝功能全面恢复;PFE对Par肝损害亦有显著保护作用,但不及Alt。