新生大鼠胃肠道组织Ghrelin、PYY mRNA和蛋白及其下丘脑中受体mRNA的表达

目的 观察新生大鼠胃肠道组织Ghrelin、酪酪肽(PYY) mRNA和蛋白以及两者位于下丘脑的受体mRNA的表达变化,并探讨其与胃肠道成熟程度的关系.方法 选取0日龄和7日龄的新生大鼠各10只,分别采用Real-time PCR法和免疫组织化学法测定胃底组织Ghrelin mRNA和蛋白、结肠组织PYY mRNA和蛋白、下丘脑Ghrelin和PYY受体mRNA的表达.结果 0日龄大鼠胃底Ghrelin mRNA表达高于7日龄大鼠(P<0.05),结肠PYY mRNA表达则低于7日龄大鼠(P<0.01).0日龄大鼠胃肠道Ghrelin和PYY 蛋白表达均高于7日龄大鼠(P<0.05).0日龄与7日龄大鼠下丘脑Ghrelin和PYY受体mRNA的表达比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 未成熟胃肠道组织Ghrelin和PYY蛋白合成分泌增加,起到促进胃肠道发育成熟的作用;而PYY mRNA与蛋白质表达的不平行状态提示该基因表达调控可能具有多样性.     

胃肠激素酪酪肽的特性及其与疾病关系的研究进展

酪酪肽（PeptideYY，PYY）是1982年发现的一种胃肠激素，它主要由分布于回肠及结肠粘膜的内分泌细胞即L细胞分泌，是由36个氨基酸组成的肽类物质。通过对PYY的结构及功能特点研究，认为PYY与分布于中枢神经系统及外周神经系统的神经肽Y（Neuropeptide Y，NPY）、胰多肽（Pancreatic Polypeptide，PP）共属于同一PP家族。PYY作为一种调节肽，通过位于靶细胞的PYY受体向组织细胞内传递信息。因PYY与NPY，PP作用的受体相同，所以将其受体称为Y受体。下面就PYY的作用与其受体的分布及与疾病之间的关系作一简要综述。     

Ghrelin及其受体在大鼠心肌梗死后的动态表达

目的 Ghrelin是近年发现的一种新的生长激素释放肽,具有心血管保护效应。本研究旨在观察心肌梗死（MI）后Ghrelin及其受体GHSR-1a的动态表达及其变化。方法 30只SD雄性大鼠,随机分为四组,分别为假手术组（6只）,心肌梗死后3 d组（8只）,梗死7 d组（8只）,梗死28 d组（8只）。采用冠状动脉结扎法制作心肌梗死模型,假手术组只在冠状动脉下穿线,但不结扎。采用实时定量PCR方法检测梗死边缘心肌Ghrelin及GHSR-1a mRNA表达,免疫印迹法检测梗死边缘心肌Ghrelin及GHSR-1a蛋白表达及分布。结果 与假手术组比较,MI后3 d、7 d、28 d梗死周边区域心肌中Ghrelin mRNA表达明显降低（P〈0.05）,且呈逐渐下降趋势;而GHSR-1a mRNA表达显著增加（P〈0.05）;梗死3 d组与梗死7 d组差异无统计学意义（P〉0.05）。免疫印迹显示假手术组大鼠心肌显示出了较强的Ghrelin阳性表达,而心肌梗死后Ghrelin阳性表达明显降低（P〈0.05）;与此相反,GHSR-1a蛋白表达在梗死后明显增加（P〈0.05）。结论 Ghrelin/GHSR-1a系统在梗死后心脏重构中可能起着重要作用,并可作为防止心脏重构的一个新的干预靶点。     

血红素氧合酶-2在糖尿病大鼠结肠组织中的表达及意义

目的：分析血红素氧合酶-2（HO-2）在糖尿病大鼠结肠组织中的表达。探讨一氧化碳（CO）与糖尿病结肠功能紊乱发生发展的关系。方法：应用免疫组化、RT-PCR法检测10例糖尿病大鼠和10例正常大鼠结肠组织中血红紊氧合酶-2的表达。结果：免疫组化结果显示血红素氧合酶．2在糖尿病组和正常组大鼠结肠组织中均有表达．糖尿病大鼠结肠组织中表达较正常大鼠减少（P〈0．05）；RT-PCR结果显示血红素氧合酶-2 mRNA在糖尿病大鼠近端、远端结肠表达均减少（P〈0．05）。结论：血红紊氧合酶-2及其mRNA在糖尿病大鼠结肠中的分布及表达异常．提示胃肠道组织中的一氧化碳可能在糖尿病结肠功能紊乱的发病机制中有一定作用。     

酪酪肽对胰腺癌Miapaca-2细胞凋亡的影响

目的 观察酪酪肽(PYY)对体外培养的胰腺癌Miapaca-2细胞凋亡的影响。方法 不同浓度(0.01、0.005、0.0025、0.00125 mmol/L) PYY分别作用于体外常规培养的Miapaca-2细胞48 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞周期;RT-PCR法检测Survivin mRNA,Western blotting法检测Survivin、Caspase-3蛋白的表达。结果 PYY处理48 h后细胞凋亡率明显升高,并呈浓度依赖性;G₀/G₁期细胞数明显增多,S、G₂/M期细胞数明显减少,G₁期前出现亚二倍体凋亡峰;PYY明显抑制Survivin蛋白和mRNA表达(P<0.01),上调Caspase-3蛋白表达(P<0.01)。结论 PYY能诱导胰腺癌Miapaca-2细胞凋亡,参与细胞周期调控,其机制可能与抑制Survivin蛋白和mRNA表达、上调Caspase-3蛋白表达有关。     

糖皮质激素对普通大鼠和肥胖大鼠下丘脑AGRP、CART基因表达的影响

目的：探讨糖皮质激素对普通大鼠和肥胖大鼠下丘脑Agouti相关蛋白（AGRP）和受可卡因和安非他明调节的转录肽（CART）基因表达的影响。方法：肥胖大鼠和普通大鼠分别随机分为生理盐水组（NSG）、小剂量组（LDG）和大剂量组（HDG）,连续20天腹腔注射生理盐水0.2ml/100g和琥珀酸氢化可的松5mg/kg、15mg/kg。逆转录实时荧光定量PCR测定下丘脑AGRP和CART mRNA的表达水平。结果：大剂量糖皮质激素可使普通大鼠和肥胖大鼠下丘脑组织中促进食欲肽AGRP mRNA和抑制食欲肽CART mRNA的表达水平显著低于盐水组（P〈0.05）。给予小剂量糖皮质激素后,肥胖大鼠下丘脑组织中AGRP和CART mRNA的表达量与生理盐水组相比差异无统计学意义（P〉0.05）,普通大鼠下丘脑组织中AGPR mRNA的表达水平与生理盐水组明显下降（P〈0.05）,而普通大鼠CART的表达与生理盐水组无差异。结论：应用大剂量糖皮质激素使肥胖大鼠和普通大鼠下丘脑促进食欲肽AGRP和抑制食欲肽CART mRNA的表达均下降。小剂量糖皮质激素使普通大鼠下丘脑促食欲神经肽AGRP mRNA的表达下降。     

水通道蛋白4、7、8基因mRNA在新生鼠小肠结肠炎模型中的表达

目的：研究水通道蛋白4、7、8基因mRNA在新生鼠小肠结肠炎模型中的表达变化及其临床意义。方法：选取1日龄新生SD大鼠20只,分为实验组（n=10）和对照组（n=10）。实验组鼠放入低氧舱通入99.99%CO2造成窒息持续5min,再迅速通入99%O2复苏持续5min取出,对照组为空气。所有新生鼠均放回母鼠身边喂养至第4天断头处死,取出十二指肠下端至直肠上端的肠道组织,进行荧光定量PCR检测,获取的数据用2-△△Ct相对定量公式及针对该公式开发的REST-2005软件进行运算,计算出R值（目的基因在样品与对照品间表达差异的倍数）及P值。R〈1（P〈0.05）表示基因相对表达下调,反之则上调,差异有统计学意义。结果：与对照组比较,实验组水通道蛋白4、7、8基因表达的R值分别为（0.117±0.129）、（0.140±0.156）、（0.134±0.140）,R〈1（P〈0.05）,水通道蛋白4、7、8mRNA的表达有显著性差异。结论：水通道蛋白4、7、8mRNA在新生鼠坏死性小肠结肠炎的肠组织中表达下降,可能与水通道蛋白构象改变或分布异位有关。     

电针对功能性消化不良大鼠中枢及外周胃动素相关肽及其受体GHSR-1a的影响

目的观察电针对功能性消化不良大鼠中枢及外周胃动素相关肽胃饥饿素(Ghrelin)及其受体生长激素促分泌素受体-1a(GHSR-1a)的影响。方法将40只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、药物组、电针组,每组10只。除正常组外均采用多因素干预法造模,造模成功后分别给予电针足三里及西药对照治疗4周,测定大鼠胃内残留率及小肠推进率,Western blot法测定大鼠下丘脑与胃窦的Ghrelin及GHSR-1a的表达。结果与正常组相比,模型组大鼠胃窦与下丘脑的Ghrelin、GHSR-1a的表达及小肠推进率均明显降低(P0.01),胃内残留率明显升高(P0.01);与模型组相比,电针组大鼠下丘脑与胃窦的Ghrelin及GHSR-1a的表达及小肠推进率均明显升高(P0.05或P0.01),胃内残留率明显降低(P0.05),且电针组与药物组无显著差异(P0.05)。结论电针可以升高中枢及外周Ghrelin及GHSR-1a的表达水平,调节胃肠道活动,这可能是电针治疗功能性消化不良的作用机制。     

脾气虚和脾阳虚模型大鼠脑肠肽与下丘脑葡萄糖转运体1及葡萄糖转运体3表达水平变化的实验研究

目的 分析脾虚模型大鼠脑肠肽〔β-内啡肽（β-EP）、胆囊收缩素（CCK）、血管活性肽（VIP）〕、下丘脑葡萄糖转运体（GLUT）1、GLUT3表达水平变化。方法 2015年3-9月,采用随机数字表法将24只SPF级雄性SD大鼠分为对照组、脾气虚组、脾阳虚组,每组8只。脾气虚模型的建立采用饮食失节结合劳倦过度的原则,脾阳虚模型则是在脾气虚的基础上施加苦寒泻下法完成。观察3组大鼠一般情况（体征状态、体质量、体温、进食量等）及前肢抓力。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定下丘脑、胃、空肠β-EP、CCK、VIP表达水平,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）法测定下丘脑GLUT1、GLUT3 mRNA表达水平,Western blotting法测定下丘脑GLUT1、GLUT3表达水平。结果 脾气虚组大鼠体质量、进食量、前肢抓力低于对照组（P＜0.05）;脾阳虚组大鼠体质量、体温、进食量、前肢抓力低于对照组（P＜0.05）;脾阳虚组大鼠体温低于脾气虚组（P＜0.05）。脾气虚组大鼠下丘脑β-EP表达水平低于对照组,胃、空肠β-EP表达水平及下丘脑、胃、空肠CCK、VIP表达水平高于对照组（P＜0.05）;脾阳虚组大鼠下丘脑β-EP表达水平低于对照组,胃、空肠β-EP、CCK表达水平及下丘脑、胃、空肠VIP表达水平高于对照组（P＜0.05）;脾阳虚组大鼠下丘脑β-EP表达水平及下丘脑、空肠CCK表达水平低于脾气虚组,胃、空肠β-EP表达水平及下丘脑、胃、空肠VIP表达水平高于脾气虚组（P＜0.05）。脾气虚组、脾阳虚组大鼠下丘脑GLUT1、GLUT3 mRNA及其蛋白表达水平低于对照组（P＜0.05）;脾阳虚组大鼠下丘脑GLUT1、GLUT3 mRNA及其蛋白表达水平低于脾气虚组（P＜0.05）。结论 脾虚状态下,大鼠下丘脑GLUT1、GLUT3 mRNA及其蛋白表达水平下降,导致下丘脑、胃、空肠β-EP、CCK、VIP表达水平异常,这可能是脾虚本质研究的又一新观点。     

大鼠电点燃岛叶致痫模型建立后神经肽Ghrelin的表达

目的电点燃大鼠岛叶建立致痫模型,检测致痫大鼠神经肽Ghrelin变化特征,并探讨其意义。方法将雄性SD大鼠用数字表法随机分为空白对照组、假手术组和点燃组,又将点燃组分为点燃后1、3、7 d和10 d4个亚组。立体定向下将电极植入大鼠岛叶,建立致痫模型,观察大鼠行为学,监测大鼠脑电情况;Nissl染色观察海马区神经元变化情况,用放射免疫法（RIA）和免疫荧光法分别检测血清和下丘脑中Ghrelin的表达水平。结果点燃后各亚组血清Ghrelin表达水平均降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;下丘脑Ghrelin表达也明显减少,差异有统计学意义（P〈0.05）;各时间亚组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论电刺激岛叶可建立稳定的点燃模型,癫痫发作后Ghrelin水平明显降低,血清Ghrelin水平可以反映下丘脑中相应神经肽的变化趋势。     

加味四逆散对身心应激模型大鼠胃肠功能及胃组织中GASR和空肠组织中VIPR2 mRNA表达的影响

目的:建立大鼠慢性身心应激模型,探讨加味四逆散(JWSNS)对模型大鼠胃排空率及小肠推进比、大鼠下丘脑环核苷酸系统(cAMP、cGMP)、胃组织中胃泌素受体（GASR）与空肠组织中血管活性肠肽Ⅱ型受体（VIPR2）mRNA表达的影响,阐明JWSNS干预应激性胃肠功能障碍的机制。方法：60只大鼠随机分为正常组,模型组,小、中、大剂量JWSNS组和西沙比利组,每组10只。采用慢性心理性应激方法建立大鼠应激模型,经JWSNS等干预后检测胃肠动力,放射免疫法检测大鼠下丘脑中cAMP和cGMP含量,RT-PCR法检测胃组织中GASR及空肠组织中VIPR2 mRNA表达变化。结果：与模型组比较,各治疗组大鼠下丘脑中cAMP和cGMP 含量显降低(P<0.05或P<0.01);与西沙比利组比较,大剂量JWSNS组大鼠下丘脑cAMP和cGMP 含量显著降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,各治疗组胃排空率及小肠推进比均明显升高(P<0.05或P<0.01);与西沙比利组比较,大剂量JWSNS组胃排空率升高不明显(P>0.05),而小肠推进比明显升高 (P<0.05)。各治疗组大鼠胃组织中GASR mRNA表达水平均高于模型组,空肠组织中VIPR2 mRNA表达水平则降低(P<0.05或P<0.01);中和大剂量JWSNS组大鼠胃组织中GASR mRNA表达水平均高于西沙比利组 (P<0.05或P<0.01);大剂量JWSNS组大鼠空肠组织中VIPR2 mRNA表达水平低于西沙比利组 (P<0.01)。结论:环核苷酸系统（cAMP、cGMP）异常可影响胃肠功能,JWSNS可通过影响环核苷酸系统对慢性心理应激反应进行调控,进而改善胃肠功能,并可改善胃组织中GASR和空肠组织中VIPR2 mRNA的表达。     

Ghrelin对大鼠急性胃粘膜损伤的保护作用

目的:研究Ghrelin对乙醇诱导的大鼠急性胃粘膜损伤的保护作用和可能机制。方法:大鼠随机分为4组:空白对照组、生理盐水组(NS组),0.5μg Ghrelin组(0.5μg GH组)和5μg Ghrelin组(5μg GH组)。75%乙醇灌胃建立急性胃粘膜损伤大鼠模型,NS组、0.5μg GH组和5μg GH组大鼠乙醇灌胃前1h分别给予NS、0.5μg Ghrelin和5μg Ghrelin腹腔注射。乙醇灌胃1h后处死大鼠,HE染色观察胃粘膜损伤程度并计算胃粘膜损伤指数,RT-PCR法检测胃粘膜环氧化酶-1(COX-1)和COX-2 mRNA的表达。结果:两个Ghrelin组大鼠胃粘膜损伤及炎症反应明显轻于NS组,各组大鼠胃粘膜COX-1 mRNA表达比较无统计学差异,两个Ghrelin组大鼠胃粘膜COX-2 mRNA的表达明显低于NS组,且呈量效关系(P<0.01,P<0.05)。结论:Ghrelin对乙醇诱导的大鼠急性胃粘膜损伤有明显的保护作用,其机制可能是抑制COX-2的过度表达。     

PTEN基因mRNA和蛋白表达与胃癌病理生物学行为的关系

目的 :观察PTEN基因在胃癌发展不同阶段中的表达 ,探讨其作用机制。方法 :采用RT PCR方法和SABC免疫组化方法 ,对 4 9例胃癌及其相应的癌旁非癌胃粘膜中PTENmRNA和PTEN蛋白表达进行检测。结果 :PTENmRNA在非癌粘膜、早期胃癌、进展期胃癌的阳性表达率分别为 76 .3% ,4 5 .5 % ,34.2 % ;PTEN蛋白的阳性表达率为 10 0 % ,6 3.6 % ,4 7.4 %。进展期胃癌与非癌粘膜比较差别均十分显著 (P <0 .0 1)。两种检测方法具有相关性 (P <0 .0 5 )。PTEN表达下调与胃癌淋巴结转移和临床分期相关 (P <0 .0 5 )。胃癌组织学恶性行为与PTEN表达相关 (P <0 .0 5 )。结论 :PTEN基因可能参与胃癌的侵袭和转移过程。     

CEA蛋白、CEAmRNA的检测在大肠癌、胃癌早期诊断中的应用价值

目的研究CEA蛋白、CEAmRNA在大肠癌、胃癌患者血清、癌组织中的表达,为大肠癌、胃癌的早期诊断提供理论依据。方法选取21例大肠腺癌、20例胃腺癌住院患者和40例胃肠道良性疾病患者,检测其术前血清CEA蛋白表达;用免疫组织化学法和实时荧光定量RT-PCR法检测癌组织、癌旁组织及良性胃肠道疾病组织中CEA蛋白和CEAmRNA表达。结果大肠癌、胃癌癌组织CEA蛋白及CEAmRNA的表达均高于癌旁组织及良性胃肠道疾病组织（P〈0.01,P〈0.05）,胃癌组织CEAmRNA表达与血清及组织中CEA表达比较有统计学显著差异（P〈0.05）;大肠癌组织CEAmRNA表达与血清CEA表达比较有统计学差异（P〈0.05）。CEA和CEAmRNA在癌旁组织和良性胃肠道组织中表达率低。结论应用实时荧光定量RT-PCR法检测组织CEAmRNA在大肠癌和胃癌早期诊断中有重要价值。     

孕期补充DHA对脂多糖所致宫内感染仔鼠脑组织TLR4表达的影响

目的探讨宫内感染的孕鼠经二十二碳六烯酸(DHA)干预后,对围产期炎症暴露的仔鼠脑组织炎症状态的影响。方法将孕鼠随机分为3组,①实验组(LPS+DHA组):孕期第1天开始给予DHA 130 mg/kg灌胃至分娩。于孕第17、18天连续2次腹腔注射LPS,剂量为350μg/kg;②模型组(LPS组):无菌生理盐水灌胃,同期连续2次腹腔注射LPS,剂量同上;③对照组(NS组):无菌生理盐水灌胃,同期腹腔注射无菌生理盐水0.6 mL。取各组孕21天,生后第1、7、14天(G21,P1,P7,P14)的胎鼠及幼鼠脑组织,用苏木精-伊红染色法观察不同时间点脑组织的病理改变。Realtime-PCR法检测脑组织Toll样受体4(TLR4)、IL-1βmRNA转录水平,Western blot法检测脑组织TLR4、IL-1β蛋白表达水平。结果模型组新生鼠平均出生体重较实验组及对照组减低(均P<0.05)。模型组脑组织苏木精-伊红染色见细胞水肿,组织疏松,细胞数减少。实验组脑细胞水肿较模型组减轻,细胞数减少不明显,而对照组脑组织炎性改变不明显。模型组及实验组IL-1βmRNA、IL-1β蛋白表达较对照组高(均P<0.05),但实验组表达较模型组减低(均P<0.05)。模型组及实验组TLR4mRNA、TLR4蛋白表达较对照组升高(均P<0.05),实验组表达较模型组减少(均P<0.05)。结论孕期LPS腹腔注射可引起孕鼠胎盘和胎儿的炎症反应,导致子代的脑损伤。孕期补充DHA能减少仔鼠脑内致炎细胞因子的表达,因此可能会降低宫内炎症暴露仔鼠脑损伤的发生率。     

血管活性肠肽对便秘大鼠排便及结肠组织中#br# VIP-cAMP-PKA-AQP3信号通路的影响

目的：观察血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)对便秘大鼠肠道水液代谢、环磷酸腺苷-蛋白激酶A信号通路(cyclic AMP protein kinase A signaling pathway,cAMP-PKA)和水通道蛋白3(water channel protein 3,AQP3)的影响,探讨VIP治疗便秘的作用及机制。方法：45只健康成年Sprague-Dawley大鼠随机分为空白对照组、模型组、模型+ VIP组。给药4周后,墨汁灌胃法检测大鼠首粒黑便排出时间;根据大鼠粪便干湿重计算粪便含水率;HE染色观察各组大鼠结肠组织形态学变化;Western 印迹检测各组大鼠结肠组织中 VIP和AQP3蛋白表达水平;定量即时聚合酶链锁反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qPCR)检测各组大鼠结肠组织中cAMP,PKA和AQP3 mRNA的表达水平。结果：与空白对照组比较,模型组大鼠首粒黑便出现时间延长,粪便含水率明显减少(均P<0.01);结肠黏膜上皮部分破坏,杯状细胞体积减小,数量明显减少;结肠组织中VIP和AQP3蛋白含量明显减少,AQP3,cAMP和PKA mRNA相对表达水平均有所降低(均P<0.05)。与模型组比较,模型+VIP组大鼠首粒黑便出现时间缩短,粪便含水率明显增加(均P<0.05);结肠黏膜上皮完整性明显改善,杯状细胞体积增大,数量增多;结肠组织中VIP和 AQP3蛋白含量增多,CAMP,PKA和AQP3 mRNA相对表达水平升高(均P<0.05)。结论：VIP静脉注射能够调节肠道水液代谢,改善大鼠便秘症状,其机制可能与调节VIP-cAMP-PKA-AQP3信号通路有关。     

胃肠道恶性肿瘤及其周边组织中c-myc基因mRNA表达与临床意义

目的　探讨胃肠道恶性肿瘤及其周围边组织中c -mycmRNA表达与手术切缘的安全性关系。方法　用RT -PCR方法检测了 12例胃癌和 16例肠癌标本肿瘤中心及周边组织中c-mycmRNA的表达。结果　肿瘤的各种分型与各个分期c -mycmRNA的表达无显著性差异。肿瘤周边组织中 ,距肿瘤边缘 4cm处c -mycmRNA表达率显著下降 (P <0 .0 5 ) ,距肿瘤边缘 5cm以远表达率为 0。结论　根据c -mycmRNA表达 ,距肿瘤边缘 5cm处可定为肿瘤较安全的切缘     

Interaction of Dietary Composition and PYY Gene Expression in Diet-induced Obesity in Rats

Dietary obesity ,induced by exposure to highfat food,is the rodent model that most closely re-sembles human obesity . Comparing rats that areresistant or prone to diet-induced obesity serves thedual purpose of illustrating the molecular adapta-tions that prevent obesity and identifying genesthat become dysregulated by high fat diets .Neuropeptide Y ( NPY) and peptide YY(PYY) are closely related polypeptides which arecomposed of 36 amino acides and share considera-ble homology . While NPYa…