非霍奇金淋巴瘤患者外周血CD4~＋CD25~＋Foxp3~＋调节性T细胞的检测及临床意义

目的分析CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞（regulatory T cells,Tregs）在非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin＇s lymphoma,NHL）患者外周血中的水平,初步探讨Tregs与NHL预后的关系。方法选取我院2013年4月至2013年12月初诊NHL患者38例为观察组,20例健康志愿者设为对照组,对观察组化疗前后及对照组外周血中CD4＋CD25＋Foxp3＋Tregs比例进行检测和对比。结果初诊NHL患者外周血CD4＋CD25＋Foxp3＋Tregs比例显著高于对照组（P〈0.05）,化疗后达到完全缓解及部分缓解的患者外周血CD4＋CD25＋Foxp3＋Tregs比例较化疗前组均显著减低（P〈0.05）,完全缓解组与部分缓解组相比无统计学意义（P〉0.05）。结论初诊的NHL患者外周血中CD4＋CD25＋Foxp3＋Tregs水平明显升高,经有效化疗后其水平显著降低,监测外周血CD4＋CD25＋Foxp3＋Tregs水平对于判断NHL预后具有的临床应用价值。     

17β-雌二醇对小鼠淋巴结、脾脏和胸腺调节性T细胞及其Foxp3表达的影响

目的：研究小鼠去卵巢及体内注射17β-雌二醇（E2）后，淋巴结、脾脏和胸腺CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（regulatory Tcell，Treg细胞）及相关调节性因子Foxp3表达的变化与E2的相关性。方法：采用流式细胞仪检测CD4^＋CD25^＋Treg细胞功能相关因子Foxp3的表达，CD4^＋CD25^＋T和CD4^＋CD25^＋high T细胞数量的变化。结果：E2抑制淋巴结中Treg细胞Foxp3的表达．上调其在脾脏和胸腺中的表达；E2下调淋巴结中CD4^＋CD25^＋T细胞和CD4^＋CD25^＋high T细胞的比例，上调它们在脾脏尤其是胸腺中的比例。结论：E2对淋巴结、脾脏和胸腺3种免疫器官中的Treg细胞有不同的调节作用。     

CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞在炎性疾病中的研究

1调节性T细胞抑制炎症反应维持免疫耐受的理论基础CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(CD4+CD25+Foxp3+regulatory T cells,简称Tregs)是Sak-aguchi等于1995年首次报道存在于正常人和鼠类外周血及脾脏组织中,具有维持自身免疫耐受功能的一种T细胞亚群[1]。     

食道癌患者CD4^＋、CD25^＋、Foxp3^＋调节性T细胞的变化及意义

[目的]初步探讨CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞在食道癌患者外周血中的变化及临床意义。[方法]59例食道癌患者,分为鳞癌组47例,腺癌组12例,另外30例健康志愿者为对照组,用流式细胞术分别检测外周血中CD4^＋、CD25^＋、Foxp3^＋T细胞占CD4^＋T细胞的比例。[结果]食道癌初诊患者组CD4^＋、CD25^＋、Foxp3^＋T细胞比例为（10．33±5．72）％,明显高于健康志愿者组（4．56±1．06）％（P〈0．01）,而食道鳞癌组和食道腺癌组CD4^＋、CD25^＋、Foxp3^＋T细胞比例没有明显差异。[结论]CD4^＋、CD25^＋、Foxp3^＋调节性T细胞在食道癌初诊患者外周血中比例增加,可能是食道癌免疫抑制的一个重要原因。     

溃疡性结肠炎患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的临床意义

目的研究溃疡性结肠炎（UC）患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞数量、相关细胞因子的水平以及Foxp3的表达,分析它们在UC发病中的作用。方法收集UC患者及健康对照组外周抗凝静脉血,分离纯化T淋巴细胞。分析UC患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞百分率,RT-PCR检测T细胞Foxp3mRNA的表达。结果与正常对照组相比,UC患者外周血CD4^＋T、CD25^＋T、CD4^＋CD25^＋T／CD4^＋T细胞百分率均显著下降（P〈0．05）,血清中细胞因子IL-10、TGF-β1的水平也明显低于对照组,T细胞Foxp3mRNA的表达也明显降低（P〈0．05）,并且CD4^＋CD25^＋T／CD4^＋T细胞百分率和Foxp3mRNA水平与UC患者疾病的活动指数呈负相关。结论UC患者外周血存在细胞免疫功能失调,CD4^＋CD25^＋调节性T细胞数量与功能状态发生改变,T淋巴细胞耐受机制的破坏可能与UC的疾病活动状态和发病机制有关。     

慢性湿疹患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的检测

目的 研究外周血CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞（Treg细胞）数量改变所致的细胞免疫抑制效应在慢性湿疹发病机制中的作用.方法 采用免疫荧光标染技术,经流式细胞仪检测30例慢性湿疹患者和33例正常人外周血CD4^＋CD25^＋T细胞数量及胞内转录因子Foxp3（forkhead box p3）表达水平.结果 慢性湿疹患者外周血CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg细胞数量比正常人对照组明显下降（P＜0.001）.结论 慢性湿疹患者外周血CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞数量下降导致参与IV型变态反应的效应性T细胞功能活性增强,这可能是湿疹发病机制之一.     

类风湿关节炎RF阳性与阴性患者Foxp3表达的差异

目的 研究类风湿关节（rheumatoid arthritis,RA）患者类风湿因子（rheumatoid factor,RF）阳性及阴性之间是否存在CD4＋CD25＋调节性T细胞Foxp3表达的差异。方法RA患者43例．根据RF测定分为RF阳性组和RF阴性组,健康体检者18例为健康对照组。采用流式细胞仪检测RA患者及健康对照组外周血CD4℃D25＋T细胞及CD4＋CD25＋Foxp3＋T细胞的表达。结果RF阴性组CD4＋CD25＋Foxp3＋／CD4＋T细胞为（2．58±1．68）,与对照组（4．23±2．19）相比,差异有统计学意义（P〈0．05）;RF阳性组CD4＋CD25＋Foxp3＋／CD4＋T细胞为（1．25±1．1）,与对照组（4．23±2．19）相比,差异有统计学意义（P〈0．01）;RF阴性组与RF阳性组之间CD4＋CD25＋Foxp3＋／CD4＋T细胞存在明显差异（P〈0．05）。结论RF阳性与阴性RA患者之间存在调节性T细胞Foxp3表达差异,RF阳性与阴性患者之间存在免疫应答的不同,可能与CD4＋CD25＋调节性T细胞的功能有关。     

宫颈癌组织中IDO表达与外周血中T细胞亚群的相关性研究

【目的】探讨宫颈癌组织中IDD基因表达量与患者外周血中T淋巴细胞亚群数量的相关性。【方法】选择2010年1月-2012年1月期间我院符合纳入及排除标准的CINIII患者20例;宫颈癌患者20例;健康妇女20例。半定量RT-PCR、Western blotting检测宫颈组织中IDO mRNA及蛋白表达;流式细胞仪检测外周血中CD4＋T细胞、CD8＋T细胞、CD4＋CD25＋Foxp3＋Tregs数量。【结果】宫颈浸润癌、宫颈原位癌组织中IDO mRNA及蛋白表达高于正常宫颈组织（P〈0.001）。宫颈浸润癌患者外周血中CD3＋T细胞、CD4＋T细胞、CD8＋T细胞数量及CD4＋/CD8＋显著降低,CD4＋CD25＋Foxp3＋Tregs数量显著增高（P〈0.05）。宫颈癌组IDO mRNA表达及蛋白表达与CD3＋T细胞,CD4＋T细胞/CD8＋T细胞呈负相关;与CD4＋CD25＋Foxp3＋Tregs呈正相关【结论】宫颈癌组织中IDO表达增高,机体免疫功能降低,IDO表达与肿瘤免疫抑制有关。     

咳嗽变异性哮喘患者外周血调节性T细胞和辅助性T细胞表达水平分析

目的 分析咳嗽变异性哮喘（CVA）患者外周血调节性T细胞和辅助性T细胞表达水平.方法 连续选择2011年1月至2012年12月在中国医科大学附属第四医院门诊就诊的CVA患者（CVA组）35例和慢性持续期哮喘患者（哮喘组）21例,另有18例同期参加体检结论健康者为对照组.3组对象同期接受了外周血调节性T细胞（CD4＋CD25＋ Treg和CD4＋ CD25＋ Foxp3＋Treg）和辅助性T细胞（CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋）检测.结果 CVA患者外周血CD4＋表达水平及CD4＋/CD8＋比值均明显低于对照组,但都明显高于哮喘组（P＜0.05,P＜0.01）.CVA患者外周血CD4＋CD25＋ Treg和CD4＋ CD25＋ Foxp3＋Treg均明显低于对照组,但都明显高于哮喘组（P＜0.05,P＜0.01）.CVA咳嗽程度重组外周血CD4＋、CD4＋CD25＋ Treg、CD4＋ CD25＋ Foxp3＋Treg表达水平及CD4＋/CD8＋比值都明显低于咳嗽程度轻组（P＜0.05,P＜0.01）.结论 CVA患者存在明确的外周血调节性T细胞和辅助性T细胞异常表达,且随着症状加重这些异常表达趋于显著.     

宫颈癌人乳头瘤病毒感染与CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞的相关性研究

目的探讨宫颈癌人乳头瘤病毒（HPV）感染与T细胞亚群、CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞（Treg）的相关性。方法采用HPV核酸扩增分型检测试剂盒及流式细胞术检测宫颈癌组（40例）、正常对照组（20例）的HPV分型和外周血中T细胞亚群及CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg的百分率。结果HPV阳性的患者外周血T细胞亚群与HPV阴性的患者比较,差异无统计学意义（P〉O．05）,但调节性T细胞（Treg）在HPV阳性与阴性组之间比较,差异有统计学意义（P〈O．05）。宫颈癌组外周血中CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg的百分率与正常对照组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。HPV与CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg细胞呈显著正相关（r=0．613,P〈O．05）。结论宫颈癌患者免疫功能与正常人无明显差异,Treg细胞与宫颈癌患者HPV持续感染、肿瘤免疫逃避密切相关。     

川崎病患儿外周血中FOXP3 mRNA表达与CD4~＋CD25~＋调节性T细胞的变化

目的探讨CD4＋CD25＋调节性T细胞在川崎病（KD）发病机制中作用。方法 32例KD患儿为研究对象,以年龄匹配的30名儿童作为对照组（其中15例急性呼吸道感染的发热患儿为非KD发热组,15名健康体检儿童为健康组）,KD患儿分别于静注丙种球蛋白（IVIG）治疗前和静注IVIG治疗后热退2～3 d取外周血用流式细胞仪测CD4＋CD25＋调节性T细胞,并用RT-PCR测定外周血单个核细胞（PBMC）叉头/翼状螺旋转录因子（FOXP3）mRNA的表达水平。结果急性期KD患儿外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞比例与对照组相比均显著降低（P〈0.01）,而IVIG治疗后热退2～3 d,其比例显著升高,接近于正常水平,而外周血PBMC FOXP3 mRNA表达水平也出现同样的改变。结论 CD4＋CD25＋调节性T细胞可能参与了KD的发病机制。     

哮喘患儿外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的测定及临床意义

目的：探讨CD4＋CD25＋调节性T细胞在哮喘儿童外周血中的比例改变,并探讨其临床意义。方法150例哮喘患儿按临床表现分为急性发作组（50例）、临床缓解期组（50例）和咳嗽变异性哮喘组（50例）,另选择50名健康儿童为正常对照组。应用流式细胞仪检测上述各组外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞占CD4＋T细胞的百分比。结果急性发作期组患儿外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞水平较缓解组、咳嗽变异性哮喘组及健康对照组明显下降（P〈0.05）,而缓解期组及咳嗽变异性哮喘组与健康对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论CD4＋CD25＋调节性T细胞可能参与了哮喘的发生与发展,哮喘的严重程度可能与CD4＋CD25＋调节性T细胞的水平相关。     

类风湿关节炎患者外周血CD4＋CD25^high曲调节性T细胞测定及意义

目的探讨CD4＋CD25^high岫调节性T细胞（CD4＋CD25^high Treg）在类风湿性关节炎（RA）发病机制中的作用。方法采用流式细胞仪（FCM）检测42例RA患者及23例健康对照组外周血CD4＋CD25^highTreg的数量。结果RA患者组及对照组外周血CD4＋CD25^highTreg的表达为（2．69±1．85）％和（3．83±0．89）％,RA患者组CD4＋CD25^highTreg的表达低于对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论RA组患者CD4＋CD25^highTreg表达下降。     

通络方剂对实验性糖尿病大鼠胸腺CD4+CD25+调节性T细胞的影响

目的探讨通络方剂对实验性糖尿病大鼠胸腺CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的影响。方法 112只SD大鼠随机分为3组:正常对照组、糖尿病模型组、通络方剂干预组。后两组一次性腹腔注射链脲佐菌素60mg/kg制备1型糖尿病大鼠模型。通络方剂干预组再分为2组:分别于糖尿病造模成功后当天及普通饲养12周后0.4g.kg-1.d-1)灌胃给药,即预防性给药组(TL-1)和治疗性给药组(TL-2)。灌胃时间均为12周。实验周期6个月,不同时间点(对照组和模型组:4、8、12、16、20、24周;通络方剂组:12和24周)处死大鼠,流式细胞仪检测胸腺CD4+CD25+Treg数量及其占CD4+T细胞比例,H-E染色观察胸腺形态,免疫组化检测Foxp3蛋白表达。结果随糖尿病病程发展,与正常对照组相比,糖尿病大鼠胸腺逐渐萎缩,Treg占CD4+T细胞比例逐渐减少,Foxp3表达减少。两组通络方剂组较糖尿病组Treg比例升高(P<0.01),胸腺指数升高(P<0.05),Foxp3有表达。结论通络方剂可显著提高Treg比例,提高胸腺指数,提高Foxp3表达,可能对实验性糖尿病大鼠的胸腺Treg有保护作用。     

阿司匹林对糖尿病大鼠免疫系统影响的研究

目的探讨阿司匹林对糖尿病大鼠外周血T淋巴细胞及相关细胞因子和免疫器官系数的影响。方法链脲佐菌素腹腔内注射雄性SD大鼠诱导糖尿病,分为糖尿病组(DM组n=12)和糖尿病阿司匹林干预组(AD组n=12),另有鼠龄和体重相似的雄性SD大鼠作为对照组(NC组n=12)。AD组用阿司匹林30mg﹒kg-1﹒d-1灌胃,DM组和NC组用等量的蒸馏水灌胃;流式细胞术检测CD3+T细胞、CD4+T细胞以及CD8+T细胞比例,酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组大鼠血浆中TNF-α及IL-6,无菌取胸腺和脾脏计算免疫器官系数。结果实验12周时,DM组CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞和胸腺指数,显著低于NC组(P0.01),血浆中IL-6和TNF-α显著高于NC组(P0.01)。与DM组相比,AD组CD8+T细胞无显著改变(P0.05),但AD组CD3+T细胞、CD4+T细胞和胸腺指数显著高于DM组(P0.01),血浆中TNF-α和和IL-6显著低于DM组(P0.01)。结论阿司匹林对糖尿病大鼠免疫系统有保护作用。     

儿童过敏性鼻炎特异性免疫治疗过程中外周血CD4＋调节性T细胞的变化及意义

目的：探讨儿童过敏性鼻炎（allergic rhinitis, AR）的发病及特异性免疫治疗（specific immunotherapy, SIT）的治疗机制。方法采用流式细胞术检测56例 AR 患者 SIT 治疗前、治疗1年后外周血中 CD4＋CD25＋CD127lo/-Treg表达水平：采用ELISA 法检测血清中IL-10、TGF-β1,并与30例健康儿童进行对比。结果56例AR患儿 SIT 治疗前外周血中 CD4＋CD25＋CD127lo/-Treg 占 CD4＋ T 细胞的百分比为（5.36＆#177;1.31）%,显著低于对照组（10.23＆#177;2.26）%,P＆lt;0.05,但SIT治疗1年后其数值为（9.37＆#177;2.15）%,与对照组无明显差异。 AR患儿治疗前血清中IL-10值为（3.68＆#177;1.21）pg/ml,显著低于对照组的（12.37＆#177;2.18）pg/ml,P＆lt;0.05;TGF-β1表达水平与对照组比较差异无统计学意义。 SIT 治疗1年后血清中IL-10水平亦与对照组差异不明显（P＆lt;0.05）;而TGF-β1表达水平分别为（20.16＆#177;4.45）pg/ml及（9.27＆#177;2.38）pg/ml,其差异有统计学意义（P＆lt;0.05）。结论儿童AR患者外周血中CD4＋Treg表达水平低,且存在功能缺陷,导致体内诱导免疫耐受机能不足,SIT治疗可以明显调节免疫免疫细胞的功能。     

特异性免疫治疗对哮喘大鼠转化生长因子-β1和CD4＋CD25＋调节性T细胞的影响

目的 探讨特异性免疫治疗（specific immunotherapy,SIT）对哮喘大鼠转化生长因子-β1（TGF-β1）和CD4＋CD25＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋Tr）的影响.方法 40只健康雄性清洁级Wistar大鼠随机分为哮喘组、正常对照组、SIT对照组和SIT治疗组4组,每组10只.通过卵蛋白（OVA）雾吸减敏的方法对致敏大鼠进行SIT,观察各组支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞分类及计数结果、血清和BALF中TGF-β1水平及外周血CD4＋CD25＋Tr百分率变化.结果 哮喘组血清和BALF中TGF-β1水平分别高于正常对照组（均P＜0.01）和SIT治疗组（P＜0.05或0.01）;正常对照组外周血CD4＋CD25＋Tr百分率显著高于哮喘组（P＜0.01）和SIT治疗组（P＜0.01）,而SIT治疗组CD4＋CD25＋Tr百分率高于哮喘组（P＜0.05）.结论 特异性免疫治疗可下调哮喘大鼠体内TGF-β1水平和纠正调节性T细胞的缺失状态.     

慢性乙型肝炎患者外周血IL-7与细胞免疫的关系

目的研究慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血IL-7含量与T淋巴细胞亚群、调节性T细胞百分比的关系,探究IL-7对慢性乙型肝炎细胞免疫作用的影响。方法慢性乙型肝炎患者组、慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带组、健康对照组,采用ELISA法检测受试者外周血IL-7含量,流式细胞仪技术检测外周血T淋巴细胞亚群和CD4+CD25+调节性T细胞百分比。结果 CHB组、HBV携带组、健康对照组外周血IL-7含量分别为(1.68±0.58)ng/mL、(3.83±0.62)ng/mL和(6.25±0.32)ng/mL,3组间存在显著性差异(P0.05);CHB组、HBV携带组、健康对照组外周血T细胞亚群CD4+T淋巴细胞分别为(31.3±3.3)%、(38.1±6.8)%、(43.2±9.4)%,CD8+T淋巴细胞分别为(24.8±5.2)%、(28.1±3.4)%、(30.5±8.6)%;CD4+CD25+调节性T细胞分别为(10.9±1.3)%、(7.4±1.0)%、(4.2±1.1)%。CHB组外周血IL-7明显低于HBV携带组及健康对照组,且与CD4+T细胞百分比呈负相关(r1=-0.58,P0.05),与CD8+T细胞百分比呈正相关(r2=0.63,P0.05),与CD4+CD25+调节性T细胞百分比呈负相关(r3=-0.43,P0.05)。结论 CHB患者外周血IL-7负调控调节性T细胞,对CD8+T细胞的细胞免疫有促进作用。     

慢性支气管哮喘患者外周血CD8~(+) T细胞平衡及其与细胞因子的关系

目的探索CD8+CD28+杀伤性T细胞和CD8+CD28-抑制性T细胞及其所构成的平衡在慢性支气管哮喘发病机制中的作用。方法选取稳定期慢性支气管哮喘患者25例为实验组,同时选取慢性支气管炎及健康志愿者各25例作为对照组。采集外周血并采用多色流式细胞仪检测CD8+CD28+及CD8+CD28-T细胞的含量,并检测细胞因子γ干扰素(IFN-γ)及白介素4(IL-4)含量。结果与慢性支气管炎及健康志愿者比较,慢性支气管哮喘患者的CD8+CD28-抑制性T细胞含量明显降低(P0.05),而CD8+CD28+杀伤性T细胞以及CD8+CD28+/CD8+CD28-T细胞平衡含量明显升高(P0.05)。慢性支气管哮喘患者CD8+CD28+杀伤性T细胞内IFN-γ明显降低,而CD8+CD28-抑制性T细胞内IL-4含量明显升高(P0.05)。结论 CD8+CD28-T细胞含量降低导致免疫抑制不足可能是慢性支气管哮喘的重要机制,CD8+CD28+T细胞过度分泌IL-4诱导Tc2类免疫反应可能是慢性哮喘发作的关键环节。     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在糖尿病发病中作用的研究

目的：探讨CD4＋CD25＋调节性T细胞在糖尿病发病中的作用及机制。方法：选取BALB/c小鼠,每日腹腔注射链脲佐菌素（STZ）40mg/kg,连续5天,建立1型糖尿病模型;从小鼠内眦静脉采血,检测血糖;取小鼠尿液,检测尿糖;流式细胞术检测两种小鼠感染不同时间脾细胞悬液中CD4＋T细胞和CD4＋CD25＋T细胞百分含量;ELISA法检测脾细胞培养上清IFN-γ和IL-10水平。结果：BALB/c小鼠的IFN-γ水平在注射STZ第2周和4周明显增高（P〈0.05）;IL-10水平在注射STZ第2周和4周明显降低（P〈0.05）;CD4＋T细胞数量在注射STZ第2周未见明显升高,第4周水平明显升高（P〈0.05）;CD4＋CD25＋T细胞数量在注射STZ第2周和4周明显降低（P〈0.05）。结论：CD4＋CD25＋调节性T细胞通过抑制Th1型细胞因子分泌,分泌IL-10等细胞因子,防止糖尿病的发生,维持自身耐受。