健脾药对免疫介导再生障碍性贫血小鼠IL-3、IFN-γ影响的实验研究

目的：检测免疫介导再生障碍性贫血(简称再障)小鼠骨髓造血细胞在含健脾药血清的液体培养体系中IL-3、IFN-γ的浓度，探讨健脾药治疗再障的作用机理。方法：用健脾药灌喂SD大鼠，抽取、制备含中药血清；Balb／C小鼠经^60Co5．5Gyγ射线照射后由尾静脉输入取自DBA／2小鼠胸腺淋巴结混合细胞悬液形成免疫介导再障模型。在含健脾药血清的液体培养体系中培养再障小鼠骨髓造血细胞，检测培养体系中IL-3、IFN-γ的浓度。结果：健脾药对再障小鼠IL-3、IFN-γ的总量无明显影响。结论：健脾药可能通过使局部IFN-γ浓度降低进而影响造血干／祖细胞增殖、分化。     

补肾活血法对再障小鼠骨髓基质黏附分子的影响

目的:观察补肾活血法对再障小鼠骨髓基质黏附能力及黏附分子CD106/CD49d的影响。方法:用免疫介导法复制小鼠再障模型,并给予补肾活血方药(参芪益肾饮),体外培养再障小鼠骨髓基质细胞,碘化丙啶染色检测其细胞周期,用流式细胞仪测定骨髓基质黏附分子表达水平。结果:再障小鼠骨髓基质细胞绝大部分处于G0/G1期,处于S期及G2+M期的细胞比例明显降低,中药组小鼠骨髓基质细胞处于S期及G2+M期的比例较模型组小鼠明显增加;模型组骨髓基质细胞黏附能力下降,中药组基质细胞黏附能力回升,与正常组无区别;模型组骨髓基质细胞CD106、CD49d表达均降低,中药组CD106、CD49d水平有所升高。结论:补肾活血法提高再障小鼠骨髓基质黏附分子表达水平,可能是其治疗再障的机制之一。     

复方活血汤对免疫诱导再生障碍性贫血小鼠骨髓微环境的作用研究

目的 :探讨临床上治疗再生障碍性贫血 (再障 )加用活血化瘀药物提高疗效的机制。方法 :建立免疫介导的再障小鼠模型 ,胃饲 1 0 0 %复方活血汤注射液每次 0 2ml,每天 2次 ,第 1 0天观察骨髓组织学、体外成纤维细胞集落形成单位 (CFU -F)、培养基质细胞层的粘附能力 ,骨髓氧分压 (PO2 )。结果 :复方活血汤组小鼠白细胞计数 ,骨髓有核细胞计数 ,骨髓造血组织容量、CFU -F计数 ,均较再障组有明显升高 (P <0 0 1 ) ;且基质细胞粘附功能、骨髓PO2 已恢复至正常。结论 :复方活血汤可促进再障小鼠骨髓微环境的修复及供氧 ,从而促进骨髓造血。     

生血丸1号对免疫介导的再生障碍性贫血小鼠骨髓增殖及细胞周期蛋白D_3表达的影响

目的:探讨生血丸1号(简称生血丸)对免疫介导的再生障碍性贫血(简称再障)小鼠骨髓增殖及细胞周期蛋白 D_3(Cyclin D_3)表达的影响。方法:建立免疫介导的再障模型,胃饲生血丸1号水提液,每次0.1ml/10g 体重,每天2次,连续9天,并以康力隆为对照。第10天处死动物,采用流式细胞仪检测小鼠骨髓有核细胞(BMNC)G_0/G_1期百分率,免疫组织化学超敏 S-AP 法检测股骨中段骨髓 Cyclin D_3表达水平。结果:生血丸组 G_0/G_1期细胞百分率较再障模型组显著降低(P<0.05),而 Cyclin D_3表达水平明显高于再障模型组(P<0.01),两项指标之间呈显著负相关(r=-0.8219,P<0.05)。结论:生血丸1号能提高免疫介导的再障小鼠骨髓 Cyclin D_3的表达水平,从而促进造血细胞由 G_0/G_1期进入增殖期。     

中药复方对免疫介导小鼠再生障碍性贫血红系造血祖细胞的影响

目的研究中药复方地甘口服液、红霖四物口服液对免疫介导再障小鼠模型骨髓红系造血祖细胞体外增殖影响。方法选用Ｂａｌｂ／ｃ小鼠为实验对象,在注射ＤＢＡ／２小鼠胸腺、淋巴结混合细胞后,立即接受亚致死剂量射线照射,形成免疫介导再障小鼠模型,然后分组处理。结果地甘口服液、红霖四物口服液在有ＥＰＯ存在的条件下,能促进小鼠骨髓细胞体外培养ＣＦＵ－Ｅ、ＢＦＵ－Ｅ集落的形成,其中１００％浓度的地甘口服液效果明显优于２００％地甘口服液及红霖四物口服液。结论中药复方地甘口服液、红霖四物口服液能促进免疫介导再障小鼠模型骨髓红系祖细胞的体外细胞培殖。     

生血丸1号对免疫介导的再生障碍性贫血小鼠骨髓增殖的影响

目的 :探讨生血丸 1号对免疫介导的再生障碍性贫血 (再障 )小鼠骨髓增殖的影响。方法 :建立免疫介导的再障小鼠模型 ,胃饲生血丸 1号水提液 ,0 1ml 10g体重 次 ,2次 d ,连续 9d ,并以康力隆为对照。实验第 10天处死动物 ,检测外周血白细胞数及股骨骨髓有核细胞数 (BMNC) ,股骨中段骨髓切片HE染色行病理形态学观察。结果 :生血丸 1号组白细胞数 ,股骨BMNC及骨髓造血组织容量均显著高于模型对照组 (P <0 .0 1) ,生血丸大剂量组与康力隆组比较无显著差异 (P>0 .0 5 )。结论 :生血丸 1号能促进再障小鼠骨髓增殖 ,其作用与康力隆相似     

生血胶囊对免疫介导的再生障碍性贫血小鼠骨髓增殖的影响

目的：探讨生血胶囊对免疫介导的再生障碍性贫血（再障）小鼠骨髓增殖的影响。方法：建立免疫介导的再障小鼠模型,胃饲生血胶囊水提液,0.1ml/10g体重／次,2次／日,连续9天,并以生血丸1号为对照。实验第10天处死动物,检测外周血白细胞数及股骨骨髓有核细胞数（BMNC）,股骨中段骨髓切片HE染色行病理形态学观察。结果：生血胶囊组白细胞数、股骨BMNC及骨髓造血组织容量均显高于模型对照组（P＜0.05-0.01),生血胶囊大剂量组与生血丸1号组比较无显差异（P＞0.05)。结论：生血胶囊能促进再障小鼠骨髓增殖,其作用与生血丸1号相似。     

活髓片对免疫介导再障小鼠骨髓超微结构影响的研究

再生障碍性贫血是多种原因导致的骨髓造血功能衰竭的一种疾病，必然伴有骨髓造血细胞及基质细胞形态学的改变。实验的目的是观察活髓片对免疫介导再障小鼠骨髓细胞形态学的影响。用常规超薄切片技术进行切片，透射电镜观察并摄片分析，观察活髓片治疗再障小鼠前后骨髓超微结构的变化，以探究活髓片治疗再障的机理。     

补肾泻肝方对免疫介导再障模型小鼠的影响

为研究补肾泻肝方(主药：熟地黄、制首乌、补骨脂、菟丝子、淫羊藿、牡丹皮、黄连、水牛角等)治疗免疫介导再障的机理。Balb／C小鼠经^60Co5．5Gy γ射线照射后由尾静脉输入取自DBA／2小鼠胸腺淋巴结混合细胞悬液形成免疫介导再障模型。用补肾泻肝方灌喂模型小鼠后检测外周血象、T细胞亚群，应用RT-PCR技术检测IFN-γ基因表达。结果：与模型组相比，治疗组小鼠的周围血象及CD8明显升高、IFN-γ基因高表达则明显减弱。提示：调节免疫紊乱状态、减弱再障时的IFN-γ基因高表达，进而影响造血干／祖细胞增殖、分化可能是该方治疗再障的机理之一。     

复方活血汤对免疫诱导再生障碍性贫血小鼠骨髓微环境的 …

目的：探讨临床上治疗再生障碍性贫血加用活血化瘀药物提高疗效的机制。方法：建立免疫介导的再障小鼠模型，胃饲１００％复方活血汤注身线次０．２ｍｌ，每天２次，每１０天观察骨髓组织学、体外成纤维细胞集落形成单位（ＣＦＵ－Ｆ）、培养基质细胞层的附能力、骨髓氧分压（ＰＯ２）。结果：昨方活血汤组小鼠白细胞计数，骨髓有核细胞计数，骨髓造血组织容量、ＣＦＵ－Ｆ计数，均较再障组有明显升高；且基质细胞粘附功能、骨髓ＰＯ     

四物汤对放射线致血虚证小鼠骨髓蛋白质表达的影响

目的 :观察四物汤对血虚证小鼠骨髓蛋白质表达的影响 ,为阐明四物汤补血作用的分子机理提供理论和实验依据。方法 :采用 3.5Gy⁶⁰Coγ射线全身 1次性照射 ,制备小鼠血虚证模型。利用双向电泳、图像分析、胶内酶切、质谱鉴定等蛋白质组学技术 ,结合生物信息学 ,分离、分析、鉴定蛋白质。结果 :四物汤可以逆转放射线致血虚证小鼠骨髓 10个上调和 5个下调的蛋白质。其中 8个蛋白质可能分别是淋巴细胞特异性蛋白质 1、蛋白酶体26SATP酶亚组分 4、造血细胞蛋白质酪氨酸磷酸酶、H-ras、3-磷酸甘油醛脱氢酶、生长因子受体结合蛋白 14及Lgals12。结论 :四物汤能调节骨髓蛋白质表达 ,并可能由此促进造血细胞的生长和分化 ,发挥补血作用。     

DS-1226对环磷酰胺所致小鼠骨髓抑制的保护作用

目的：探讨DS-1226胶囊对环磷酰胺所致小鼠骨髓抑制的影响。方法：将小鼠随机分为5组,正常对照组、模型组、DS-1226 3个剂量组（37.5、75、150mg·kg-1·d-1）。模型组、DS-1226组腹腔注射环磷酰胺（200mg·kg-1）造模,同时DS-1226组给予不同剂量的DS-1226灌胃,对照组、模型组给予蒸馏水灌胃,共8d。检测小鼠的一般状况、外周血象、骨髓有核细胞、骨髓结构、胸腺指数及淋巴细胞转化率。结果：DS-1226能改善骨髓抑制小鼠的一般状况,升高外周血象和骨髓有核细胞数量,促进骨髓腔内造血组织的增生,提高胸腺指数及淋巴细胞转化率。结论：DS-1226具有改善环磷酰胺所致小鼠骨髓抑制的作用,其机制可能与增强免疫功能,促进造血功能恢复有关。     

当归补血汤不同剂型及配伍对骨髓抑制小鼠造血调控的实验研究

 目的本实验通过比较当归补血汤煎剂及颗粒剂对骨髓抑制小鼠造血机能调控的影响来比较它们之间的疗效差异。旨在为中药颗粒剂的疗效提供实验室依据。方法本实验用高效液相色谱仪检测了当归补血汤不同制剂中阿魏酸、黄芪甲苷的含量差异;采用造血祖细胞培养术、外周血像计数法、ELISA等方法对造血祖细胞集落数、外周血像的变化及造血微环境中EPO,TPO,G-CSF的变化进行检测。结果当归补血汤煎剂、颗粒剂能通过平衡骨髓微环境中EPO,TPO,GM-CSF的表达;促进骨髓造血细胞从G_{0/G1期进入G2/M期和S期;促进造血祖细胞增殖,从而提高骨髓抑制小鼠外周血像和骨髓像。结论当归补血汤煎剂、颗粒剂均能改善骨髓抑制小鼠的造血机能,其中配方颗粒剂疗效较为突出。}     

益血生髓颗粒对苯试剂诱导的再生障碍性贫血小鼠造血功能及T细胞亚群的影响

目的:研究益血生髓颗粒对苯试剂诱导的再生障碍性贫血(AA)模型小鼠造血及免疫功能的影响。方法:72只SPF级BALB/c小鼠随机分为正常对照组、AA模型组、益血生髓颗粒低剂量组(低剂量组)、益血生髓颗粒高剂量组(高剂量组)和司坦唑醇阳性药组(阳性对照组),除正常对照组其他各组小鼠注射苯和玉米油混合液2 ml/kg,每周4次,建立AA模型,正常组注射同体积玉米油,7周后,低剂量组用药1.2 g/(kg·d),高剂量组用药4.8 g/(kg·d),阳性对照药组予司坦唑醇2 mg/(kg·d),连续给药15 d后,检测血细胞(WBC、RBC、HGB、PLT)、骨髓有核细胞数(BMNC)、T淋巴细胞亚群(CD3⁺CD4⁺、CD3⁺CD8⁺、Th₁、Th₂)、血清白介素2(IL-2)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和HE染色骨髓病理学的变化情况。结果:与AA模型组比较,低、高剂量组和阳性对照组小鼠外周血四种血细胞数量、血清M-CSF、CD3⁺CD4⁺T和CD4⁺/CD8⁺比值升高(P<0.05),CD3⁺CD8⁺T、IL-2水平和Th₂细胞百分数降低(P<0.05),骨髓病理学显示骨髓组织增生较模型组活跃,造血细胞增多,非造血细胞减少。结论:益血生髓颗粒可通过对AA小鼠T细胞亚群的免疫调节和促进造血细胞增殖达到一定恢复造血功能的作用。     

补虚化瘀方对化疗荷瘤小鼠骨髓造血微环境的影响

目的观察补虚化瘀方对联合荷瘤小鼠骨髓造血微环境的影响。方法采用P388瘤株制作荷瘤小鼠模型后,再以环磷酰胺、阿糖胞苷腹腔注射获得联合化疗荷瘤小鼠骨髓抑制模型,实验分为正常组、模型组及补虚化瘀方组,进行小鼠骨髓成纤维细胞集落形成单位(CFU-F)、骨髓VCAM-1及NF-κB、骨髓微血管测定。结果联合化疗可致荷瘤小鼠CFU-F计数、骨髓VCAM-1及NF-κB表达、骨髓微血管损伤明显低于正常组(P均<0.01);补虚化瘀方可提高联合化疗荷瘤小鼠CFU-F计数、骨髓VCAM-1及NF-κB表达,改善模型小鼠骨髓微血管损伤。结论补虚化瘀方具有保护联合化疗荷瘤小鼠骨髓抑制模型骨髓造血微环境和促进其化疗损害修复作用。     

红景天与熟地配伍对骨髓抑制小鼠骨髓功能的影响

目的 探讨红景天与熟地配伍对环磷酰胺所致小鼠外周血白细胞下降及骨髓造血功能抑制的     

生血增白汤对骨髓移植后小鼠造血重建中黏附分子表达水平的影响

目的探讨生血增白汤对骨髓移植后小鼠骨髓中细胞间黏附分子-1（ICAM-1）表达水平的影响及其促进骨髓造血重建的机制。方法将实验动物随机分为5组：正常组、对照组、G-CSF组、生血增白汤组、G-CSF＋生血增白汤组,建立小鼠骨髓移植模型,生血增白汤组及G-CSF＋生血增白汤组胃饲生血增白汤浓缩煎剂。骨髓移植后第9天、第14天、第24天,采用免疫组化方法检测ICAM-1表达水平,进行外周血细胞和骨髓单核细胞计数,并做骨髓组织学观察。结果骨髓移植后第9天、第14天、第24天,生血增白汤组ICAM-1的表达水平、外周血细胞、血红蛋白、骨髓有核细胞计数及骨髓细胞增生程度均高于其他各组（P〈0.05或P〈0.01）。结论生血增白汤能促进骨髓移植后骨髓中ICAM-1的表达,可能是生血增白汤重建造血的机制之一。     

四物汤中糖类物质对辐射小鼠造血功能的影响

目的初步探讨四物汤中糖类物质与四物汤补血作用的关系。方法四物汤部位分离采用醇沉法、萃取法和大孔吸附树脂法。用辐射小鼠血虚证模型考察活性。结果将前期发现的具有提高辐射血虚模型小鼠外周血白细胞数和促进骨髓造血祖细胞增殖作用的四物汤部位C 2(正丁醇部位),用吸附树脂法分离为C 2-1(糖部分)和C 2-2(非糖部分)两个部位。活性研究表明部位C 2-1具有提高模型小鼠外周血白细胞数和促进骨髓造血祖细胞增殖的作用,部位C 2-2仅显示促进骨髓造血祖细胞增殖的作用。按照部位C 2中糖类的组成和质量分数,将D-果糖、D-葡萄糖和蔗糖混合,活性研究表明混合糖具有促进模型小鼠骨髓造血祖细胞增殖的作用,但对外周血白细胞的作用不显著。结论单、双糖类物质对四物汤促进辐射小鼠造血功能的作用有一定贡献。     

当归补血汤不同制剂对骨髓抑制小鼠造血调控的实验研究

[目的]通过比较当归补血汤煎剂及颗粒剂对骨髓抑制小鼠造血机能调控的影响来比较它们之间的疗效差异.[方法]本实验采用造血祖细胞培养术、外周血像的计数法、酶联免疫吸附法(ELISA)等方法对造血祖细胞集落数、外周血像的变化及造血微环境中红细胞生成素(EPO)、血小板生成素(TPO)、粒细胞集落刺激因子(GM-CSF)的变化进行了检测.[结果]煎剂、颗粒剂能平衡骨髓微环境中EPO、TPO、GM-CSF.的表达;促进骨髓造血细胞从G0/G1期进入G2/M期和S期;促进造血祖细胞增殖,从而提高骨髓抑制小鼠外周血像和骨髓像.[结论]当归补血汤煎剂、颗粒剂均能改善骨髓抑制小鼠的造血机能,其中配方颗粒疗效较为突出.     

斑蝥天灸对环磷酰胺小鼠造血功能的影响及其机理探讨

目的:观察斑蝥天灸对化疗小鼠造血功能和腹腔巨噬细胞分泌粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor,GM-CSF)能力的影响.方法:将环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)小鼠模型随机分为6组,对照组10只不予任何治疗;天灸I-Ⅳ组分别采用不同浓度的斑蝥酊灸大椎、肾俞、足三里;麦粒灸组10只用精制艾绒制备的小艾炷灸上述穴位;另设正常组10只作对照.检测不同时期小鼠外周血白细胞、骨髓有核细胞数、脾指数及腹腔巨噬细胞诱生GM-CSF的能力.结果:CTX化疗可致小鼠出现明显的骨髓抑制,骨髓有核细胞计数和外周血白细胞(White BloodCell,WBC)数显著减少,脾指数减少,且其腹腔巨噬细胞诱生GM-CSF能力降低.天灸大椎、肾俞、足三里穴,不但可以不同程度地减轻骨髓抑制,促进骨髓增生活跃,提高骨髓有核细胞计数,提前回升外周血-WBC数,缩短化疗所致WBC的持续低值期,还可增强化疗小鼠巨噬细胞诱生GM-CSF的能力.结论:斑蝥天灸对化疗小鼠具有抗化疗骨髓抑制作用,能够增强化疗小鼠腹腔巨噬细胞诱生GM-CSF的能力.