复方活血汤对免疫诱导再生障碍性贫血小鼠骨髓微环境的 …

目的：探讨临床上治疗再生障碍性贫血加用活血化瘀药物提高疗效的机制。方法：建立免疫介导的再障小鼠模型，胃饲１００％复方活血汤注身线次０．２ｍｌ，每天２次，每１０天观察骨髓组织学、体外成纤维细胞集落形成单位（ＣＦＵ－Ｆ）、培养基质细胞层的附能力、骨髓氧分压（ＰＯ２）。结果：昨方活血汤组小鼠白细胞计数，骨髓有核细胞计数，骨髓造血组织容量、ＣＦＵ－Ｆ计数，均较再障组有明显升高；且基质细胞粘附功能、骨髓ＰＯ     

补肾活血法对免疫介导型再障小鼠的影响

建立免疫介导型再障小鼠模型 ,胃饲补肾活血中药 ,观察红系和粒系造血祖细胞的变化。结果 :再障模型组小鼠红系造血祖细胞CFU E、BFU E和粒 单系祖细胞CFU GM集落数均较正常对照组显著减少 (P <0 0 1) ,补肾活血中药组CFU E、BFU E和CFU GM集落数均较再障模型组显著升高 (P <0 0 1)。说明补肾活血中药能使再障小鼠受损的骨髓红系和粒单系造血干细胞继续增殖与分化 ,促进造血功能的恢复。     

补肾化痰活血法促进再生障碍性贫血小鼠骨髓基质细胞黏附分子表达的影响

目的:观察和比较补肾化痰活血中药对再生障碍性贫血小鼠骨髓基质细胞黏附分子VCAM-1(CD106)、HCAM(CD44)、PECAM-1(CD31)表达的影响.方法:建立再障小鼠模型,各组小鼠分别胃饲生理盐水、补肾化痰活血中药、康力龙和再障生血片,连续喂养14d后,采集骨髓进行骨髓基质细胞培养,应用流式细胞仪检测骨髓基质细胞黏附分子表达水平.结果:模型组小鼠骨髓基质细胞黏附分子CD106、CD44、CD31表达水平均低于正常对照组,治疗后各组小鼠骨髓基质细胞黏附分子CD106、CD44、CD31表达水平均明显提高,差异均有显著性,补肾化痰活血疗效最优.结论:补肾化痰活血中药可能通过提高再障小鼠骨髓基质细胞黏附分子CD106、CD31、CD44表达水平,从而增强造血细胞黏附定位于发育的骨髓微环境,改善骨髓造血功能.     

补肾活血法对再障小鼠骨髓基质黏附分子的影响

目的:观察补肾活血法对再障小鼠骨髓基质黏附能力及黏附分子CD106/CD49d的影响。方法:用免疫介导法复制小鼠再障模型,并给予补肾活血方药(参芪益肾饮),体外培养再障小鼠骨髓基质细胞,碘化丙啶染色检测其细胞周期,用流式细胞仪测定骨髓基质黏附分子表达水平。结果:再障小鼠骨髓基质细胞绝大部分处于G0/G1期,处于S期及G2+M期的细胞比例明显降低,中药组小鼠骨髓基质细胞处于S期及G2+M期的比例较模型组小鼠明显增加;模型组骨髓基质细胞黏附能力下降,中药组基质细胞黏附能力回升,与正常组无区别;模型组骨髓基质细胞CD106、CD49d表达均降低,中药组CD106、CD49d水平有所升高。结论:补肾活血法提高再障小鼠骨髓基质黏附分子表达水平,可能是其治疗再障的机制之一。     

当归补血汤对再障小鼠骨髓造血及线粒体自噬的实验研究

目的:探讨当归补血汤对再生障碍性贫血小鼠骨髓造血及骨髓单个核细胞线粒体自噬的影响。方法:化学方法制备再障小鼠模型,观察2.7g/kg、5.4g/kg、10.8g/kg当归补血汤对再障小鼠一般症状、外周血白细胞(WBC)、血红蛋白(HCG)、血小板(PLT)和单侧股骨骨髓单个核细胞(BMMNC)数量的影响,光学显微镜下观察其对再障小鼠骨髓病理的影响,估算造血组织增生度,透射电镜下观察其对小鼠骨髓单个核细胞线粒体自噬的影响。结果:当归补血汤可有效改善再障小鼠的骨髓病理形态,提高造血组织增生度,抑制再障造成的线粒体过度自噬。结论:当归补血汤可以促进再障小鼠骨髓造血功能恢复,线粒体自噬的改变可能是机制之一。     

补肾活血方治疗免疫介导型再生障碍性贫血小鼠的实验研究

目的观察中药补肾活血方治疗免疫介导型再生障碍性贫血小鼠的疗效,并探讨其作用机制。方法建立免疫介导型再生障碍性贫血动物模型,观察中药补肾活血方的疗效,并从造血祖细胞集落培养和骨髓基质细胞黏附功能,造血调控因子等方面探讨其作用机制。结果中药补肾活血方可改善免疫介导型再障小鼠的外周血象,增加骨髓有核细胞计数,延长其生存期,促进红系造血祖细胞 CFU-E、BFU-E 的增殖、分化,调节 T 细胞亚群,抑制 Ts 的活性,促进白细胞介素-10(IL-10)的分泌,抑制造血负调控因子白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的活性。结论中药补肾活血方通过促进 CFU-E、BFU-E的增殖、分化以及调节细胞免疫功能而达到治疗的目的。     

复方活血汤对辐射损伤小鼠骨髓基质细胞粘附功能的影响

目的：研究常用活血化瘀中药对急性放射损伤小鼠骨髓基质细胞粘附功能的影响。方法：小鼠接受８ＧＹ＾６０Ｃｏγ射线照射后立即腹腔注射１００％复方活血汤液０．２ｍｌ，每天２次，连续６天，第７天取股骨骨髓制备有核细胞（ＢＭＣ）悬液，按长期骨髓细胞培养技术，第１２天计数成纤维细胞集落形成单位（ＣＦＵ－Ｆ），第２８天观察培养的基质细胞层对正常小鼠ＢＭＣ的粘附能力。结果：正常小鼠骨髓培养的基质细胞层粘附正常小鼠Ｂ     

补肾活血方对慢性骨髓障碍（CMA）小鼠的实验研究

应用临床治疗慢性再障有效的补肾活血方治疗ＣＭＡ小鼠。通过比较分析中药治疗组与正常对照组，ＣＭＡ对照组小鼠周围血细胞计数，股骨有核细胞计数和股骨骨髓病理形态学等项结果，表明补肾活血方能提高ＣＭＡ小鼠骨髓造血功能，其疗效机理可能与补肾活血方改善ＣＭＡ小鼠造血微环境有关。     

补肾生血法对慢性再障患者表达整合素αLβ2/CD 11a水平影响的研究

目的:探讨补肾生血法对慢性再生障碍性贫血(简称慢性再障,CAA)患者粘附分子αLβ2/CD 11a表达水平的影响.方法:将60例慢性再障患者随机分为实验组和对照组,分别给予补髓生血颗粒和康力龙,采用RT-PCR方法检测αLβ2/CD 11a和的mRNA表达,流式细胞术(FCM)检测骨髓造血干祖细胞αLβ2/CD 11a的表达水平.结果:CAA患者造血细胞αLβ2/CD 11a表达异常,补髓生血颗粒剂对造血细胞αLβ2/CD 11a的表达水平有调节作用,与康力龙组比较无显著差异.结论:CAA可能存在造血干祖细胞与骨髓微环境功能缺陷,骨髓造血干祖细胞粘附分子水平异常导致其与骨髓基质细胞间的粘附功能降低,从而影响造血,所以调节骨髓造血千祖细胞粘附分子的表达,改善骨髓造血干祖细胞与骨髓基质细胞/细胞外基质间的粘附功能从而促进骨髓造血功能恢复可能是补髓生血颗粒治疗CAA的作用机理之一.     

三七总皂甙对免疫介导性再生障碍性贫血小鼠造血祖细胞的增殖作用

目的：探讨三七总皂甙(PNS)对免疫介导性再生障碍性贫血(再障)小鼠模型血细胞生成的作用。方法：采用免疫介导法进行再障造模,Balb／c小鼠经^60Coγ射线亚致死量照射后,自尾静脉输入DBA／2小鼠的淋巴细胞,随机分成4组,即模型组、PNS治疗高、中和低剂量组(每只3．2、1．6、0．8mg／d),并设正常对照组。腹腔注射给药,模型组和正常对照组注射生理盐水。治疗12天后,做血白细胞计数、骨髓病理检查和粒系、红系造血祖细胞(CFU-GM、CFU-E)集落培养。结果：(1)PNS升高白细胞数,与模型组比较,PNS高、中和低剂量组的白细胞数提高率分别为(34．3±2．9)％,(29．2±1．7)％和(14．5±1．6)％(P<0．01或P<0．05)。(2)改善骨髓抑制,骨髓病理检查模型组出现大片空白区,被大量的脂肪组织代替,而PNS治疗组造血组织结构较完整,造血细胞量丰富。(3)促进造血祖细胞增殖,高、中和低剂量PNS对CFU—GM集落提高率分别为(64．4±2．8)％、(67．3±2．4)％和(21．9±1．8)％(均P<0．01);CFU—E集落的提高率分别为(31．9±3．6)％、(20．7±2．4)％和(12．8±2．6)％(P<0．01或P<0．05)。结论：免疫介导性再障小鼠在骨髓抑制、造血功能低下时,PNS通过促进骨髓粒系、红系造血祖细胞的增殖,改善骨髓造血组织增生,从而促进血细胞的生成。     

复方活血汤对再生障碍性贫血小鼠骨髓造血细胞粘附分子及细胞周期蛋白表达作用

目的：探讨复方活血汤（简称中药）对免疫诱导的再生障碍性贫血（再障）小鼠骨髓造血细胞粘附分子及细胞周期蛋白表达的作用。方法：建立免疫诱导的再障小鼠模型，喂饲１００％复方活血汤每次０２ｍｌ，每日２次，第１３日用流式细胞仪检测小鼠骨髓单个核细胞β１整合素家族（ＣＤ４９ｄ／ＣＤ２９，α４β１；又称ＶｅｒｙＬａｔｅＡｎｔｉｇｅｎｓ，ＶＬＡ家族）及细胞周期蛋白Ｄ２的表达水平。结果：中药组ＣＤ４９ｄ表达明显高于再障组（Ｐ＜００５），且与正常组无明显差异；中药组细胞周期蛋白Ｄ２表达明显高于再障组（Ｐ＜００１）；而其Ｇ０＋Ｇ１期细胞数显著低于再障组（Ｐ＜００１）。结论：复方活血汤能增强免疫再障小鼠骨髓造血细胞粘附分子ＣＤ４９ｄ和细胞周期蛋白Ｄ２的表达，促进造血细胞的增生。     

复方活血汤对再生障碍性贫血小鼠骨髓造血细胞粘附分子 …

目的：探讨复方活血汤对免疫诱导的再生障碍性贫血小鼠骨髓造血细胞粘附分子及细胞周期蛋白表达的作用。方法;建立免疫诱导的再障小鼠模型,喂饲１００％复方活血汤每次０．２ｍｌ,每日２次,第１３日用流式细胞仪检测小鼠骨髓单个核细胞β１整合素家族及细胞周期蛋白Ｄ２的表达水平。结果：中药组ＣＤ４９ｄ表达明显高于再障组,且与正常组无明显差异;中药组细胞周期蛋白Ｄ２表达明显高于再障组;而其Ｇ０＋Ｇ１期细胞数显著低于     

凉血解毒汤对再障小鼠骨髓免疫紊乱的调控

目的:观察再障小鼠骨髓免疫功能及造血负调控因子的变化,及凉血解毒汤的影响。方法:用物理化学复合法复制再障小鼠模型,并给予凉血解毒汤,测小鼠外周血象,骨髓造血干细胞和T细胞凋亡的情况,及骨髓造血负调控因子IFN-γ、TNF-α、IL-2水平。结果:再障小鼠外周血三系减少,网织红细胞下降,骨髓T细胞比例增加,凋亡减少,而造血干细胞比例减少,凋亡增加。凉血解毒汤能在一定程度上促进骨髓T细胞的凋亡,从而减少骨髓造血负调控因子的分泌,抑制造血干细胞的凋亡,促进外周血象及网织红细胞的恢复。结论:凉血解毒汤能有效地改善再障小鼠骨髓T细胞与造血干细胞凋亡失衡的状况,降低造血负调控因子的水平,从实验角度直接说明了热毒与细胞免疫亢进相关。     

川芎嗪对免疫介导再生障碍性贫血小鼠骨髓细胞CD34抗原表达的影响

目的：探讨川芎嗪对免疫再生障碍性贫血（再障）小鼠骨髓细胞ＣＤ３４抗原分子表达的影响。方法：建立免疫介导的再障小鼠模型，６．０Ｇｙ＾６０Ｃｏγ－射线照射和尾静脉输注淋巴细胞造成小鼠再障。分为正常组、再障组（对照组）、川芎嗪组，除正常组外均胃饲川芎嗪注射液４ｍｇ／次，１天２次，第１０天用流式细胞仪检测各组小鼠骨髓细胞膜上ＣＤ３４抗原表达量。结果：川芎嗪ＣＤ３４抗原表达量的荧光强度（７７．６±．６．５）     

生血丸1号对免疫介导的再生障碍性贫血小鼠骨髓增殖及细胞周期蛋白D_3表达的影响

目的:探讨生血丸1号(简称生血丸)对免疫介导的再生障碍性贫血(简称再障)小鼠骨髓增殖及细胞周期蛋白 D_3(Cyclin D_3)表达的影响。方法:建立免疫介导的再障模型,胃饲生血丸1号水提液,每次0.1ml/10g 体重,每天2次,连续9天,并以康力隆为对照。第10天处死动物,采用流式细胞仪检测小鼠骨髓有核细胞(BMNC)G_0/G_1期百分率,免疫组织化学超敏 S-AP 法检测股骨中段骨髓 Cyclin D_3表达水平。结果:生血丸组 G_0/G_1期细胞百分率较再障模型组显著降低(P<0.05),而 Cyclin D_3表达水平明显高于再障模型组(P<0.01),两项指标之间呈显著负相关(r=-0.8219,P<0.05)。结论:生血丸1号能提高免疫介导的再障小鼠骨髓 Cyclin D_3的表达水平,从而促进造血细胞由 G_0/G_1期进入增殖期。     

黄鼬干粉胶囊对再生障碍性贫血模型小鼠造血功能的影响

目的:观察黄鼬干粉胶囊对再生障碍性贫血(AA)模型小鼠造血功能的影响及作用机制。方法:采用X射线+环磷酰胺+氯霉素复合方法复制小鼠AA模型,观察黄鼬干粉胶囊对小鼠外周血象、骨髓有核细胞数(BMNC)、骨髓粒细胞-巨噬细胞集落生成单位(CFU-GM)、血清中可溶性细胞间黏附因子1(s ICAM-1)和骨髓组织病理学的影响。结果:黄鼬干粉胶囊能明显增加模型小鼠外周血中HGB、RBC、WBC和PLT数量,能增加骨髓BMNC数量,还能升高骨髓CFU-GM和降低血清s ICAM-1。与模型对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。骨髓组织病理学结果表明,黄鼬干粉能明显改善模型小鼠骨髓增生低下和造血灶减少,促进骨髓造血。结论:黄鼬干粉胶囊能改善AA模型小鼠造血功能,其作用机制可能与调节骨髓CFU-GM和血清s ICAM-1的平衡有关。     

调营饮对化疗所致骨髓抑制小鼠外周血象及骨髓有核细胞的影响

目的观察调营饮对化疗所致骨髓抑制小鼠外周血象及骨髓有核细胞计数（BMC）的影响。方法昆明清洁级小鼠168只,随机分为正常组、模型组、调营饮组、调营饮拆方组、六味地黄汤组、八珍汤组、当归补血汤组,每组24只。正常组实验小鼠腹腔注射0.9%氯化钠注射液0.2 mL,其余各组实验小鼠腹腔注射注射用环磷酰胺（CTX）100 mg/kg,连续3 d。注射CTX后4 h,调营饮组、调营饮拆方组、六味地黄汤组、八珍汤组、当归补血汤组分别给予相应药液0.2 mL灌胃,每日1次,连续10 d。正常组、模型组给予等容积蒸馏水灌胃。分别于实验第4、7、10 d取小鼠静脉血,测外周血白细胞计数（WBC）、红细胞计数（RBC）、血红蛋白（Hgb）、血小板计数（PLT）,第10 d取小鼠股骨腔骨髓细胞测BMC。结果调营饮组、八珍汤组WBC均明显高于其它各药物组（P〈0.01）;调营饮组RBC、Hgb明显高于其他各药物组（P〈0.05）;调营饮组、八珍汤组PLT与模型组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）;调营饮组BMC明显高于其他各药物组（P〈0.05,P〈0.01）。结论调营饮具有升高化疗所致骨髓抑制小鼠外周血象及BMC的作用。     

补髓生血颗粒对慢性再障患者骨髓单个核细胞MEK表达的影响

目的：探讨补髓生血颗粒对慢性再障患者（CAA）骨髓单个核细胞中丝裂原活化蛋白激酶（MEK）表达的影响及其作用机制。方法：采用蛋白质印迹（Western-blot）方法检测CAA患者、正常人骨髓基质细胞MEK表达水平。结果：CAA患者骨髓单个核细胞的MEK表达水平均低于正常组（P〈0.05）,经补髓生血颗粒治疗后,MEK表达水平有所上升,与治疗前相比具有显著性差异（P〈0.05）。结论：CAA患者骨髓基质细胞MEK呈低水平表达,它有可能参与了CAA的发病机制过程;中药补髓生血颗粒可能是通过调节MEK的表达水平而促进MEK抗凋亡作用,从而影响骨髓造血信号转导调控,促进骨髓造血功能。