应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱筛选大肠癌血清特异标志物

目的 采用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测大肠癌患者与健康对照者血清中蛋白的差异,为大肠癌的早期诊断提供理论依据.方法 应用SELDI-TOF-MS技术及弱阳离子蛋白质芯片(WCX2)检测36例健康成人(对照组)和36例大肠癌患者(大肠组)血清中蛋白含量.结果 在质荷比为2 000Da～30 000Da的范围内,两组样本检测到了对照组82个蛋白峰.其中3 604.240 Da蛋白峰大肠癌组明显高于对照组(P＜0.05),而12 861.368 Da的蛋白峰对照组明显高于大肠癌组(P＜0.05).利用这两个蛋白筛查大肠癌的特异度为86.11%(31/36),敏感度为77.78%(28,36),阳性预测值为87.5%.结论 质荷比为3 604.240 Da与12 861.368 Da的两个蛋白峰可以作为大肠癌早期诊断的备选标志物.     

宫颈癌患者与宫颈息肉蛋白质谱的差异分析

目的 探索宫颈癌患者与宫颈息肉的血清蛋白质谱差异,初步探讨其用于宫颈癌诊断的临床价值.方法 收集73例宫颈癌患者和39例宫颈息肉的血清标本,随机分为训练组(56例宫颈癌和20例健康人)与测试组(17例宫颈癌和19例健康对照).采用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF MS)技术检测所有血清标本的蛋白质谱.用Biomarker Wizard统计软件比较训练组宫颈癌与宫颈息肉对照间的蛋白质谱差异,再用Biomarker Pattern软件筛选出一组差异蛋白构建决策分类树模型以鉴别宫颈癌病例和宫颈息肉病例,最后用测试组对分类模型进行验证.结果 宫颈癌患者和对照组血清蛋白指纹图谱共有148个明显表达差异的蛋白峰,筛选质荷比(m/z)为2957、2974、2982、3016、3282、5928、5948、6647、6661的9个蛋白质峰作为标志蛋白(P<0.01)建立人工神经网络诊断模型,利用该模型对宫颈癌癌进行盲法预测,结果表明该诊断模型检测宫颈癌的灵敏度为94.2%,特异度为91.3%.结论 宫颈癌与宫颈息肉人群的血清蛋白质谱存在差异,SELDI-TOF -MS技术筛选出的血清差异蛋白有助于宫颈癌的早期鉴别诊断.     

血清蛋白指纹图谱检测对儿童支原体肺炎早期诊断的研究

目的 用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术和蛋白质芯片技术检测儿童支原体肺炎(MPP)和非MPP患者血清蛋白指纹图谱,探讨基于人工神经网络的的蛋白指纹图谱诊断模型对儿童MPP早期诊断的价值.方法 用SELDI-TOF-MS技术和蛋白质芯片技术测定2014年11月—2016年6月该院儿科住院的130例血清标本的蛋白指纹图谱,其中MPP 68例,非MPP 62例.将测定的血清蛋白指纹图谱建立人工神经网络预测模型,用随机抽取的75例标本(MPP 40例,非MPP 35例)作为训练组,进行训练与交叉验证,另外55例标本(MPP 28例,非MPP 27例)作为测试组,进行盲法验证该模型.结果 利用从75例训练组得出的基于人工神经网络的由M∕Z为4094.91、4650.51、5825.38、6031.77、7862.79、10122.04组成的MPP血清蛋白指纹图谱决策树诊断模型,对MPP诊断的敏感性95.00%(38∕40),特异性为88.57%(31∕35),阳性率为92.00%(69∕75),ROC曲线下面积为0.975,利用测试组的55例标本对模型进行验证,结果显示,对MPP诊断的敏感性89.29%(25∕28),特异性为96.30%(26∕27),阳性率为92.27%(51∕55).结论 该研究建立的支原体肺炎蛋白指纹图谱诊断模型对支原体肺炎的检测时间短,诊断准确率高,有助于诊断支原体肺炎.     

蛋白质指纹图结合支持向量机生物信息学分析在早期胰腺癌检测中的应用

目的建立早期胰腺癌的血清蛋白质质谱模型,探讨蛋白质指纹图结合支持向量机生物信息学分析在早期胰腺癌诊断中的应用价值.方法选取用22例胰腺癌患者及20例健康者,采用表面增强激光解吸/电离时间飞行质谱(SELDI-TOF-MS)结合弱阳离子交换芯片(CM10)检测分析样本.采用支持向量机方法建立早期胰腺癌和健康者辨别模型.结果共筛选出11个蛋白质峰建立了早期胰腺癌和健康者辨别模型,辨别的敏感性为100%,特异性为95%.结论 SELDI-TOF-MS 技术结合生物信息学方法检测早期胰腺癌具有较高的敏感性和特异性.     

应用SELDI-TOF-MS技术联合CT鉴别肾脏良恶性占位

目的 探讨表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术在肾脏占位的良恶性鉴别诊断中的应用以及联合CT进行鉴别诊断的价值.方法 96例血清标本取自62例肾癌和34例肾脏良性占位患者,患者术前均接受过CT检查.应用SELDI-TOF-MS技术获得所有患者的金属亲和-铜离子(IMAC-Cu2+)蛋白芯片的表达图谱,随机采用42例肾癌和22例肾脏良性占位患者的血清蛋白质谱建立决策树诊断模型,并用其余患者进行双盲验证.结果 利用质荷比分别为4657.56、2955.95和3278.00的3个蛋白峰建立了1个决策树诊断模型,其敏感性为85.7%(36/42),特异性为90.9%(20/22),双盲法验证后的敏感性为75.0%(15/20),特异性为83.3%(10/12).而联合CT的诊断结果,建模组和验证组的诊断特异性和阳性预测值均可达100%.结论 利用质荷比分别为4657.56、2955.95和3278.00的3个蛋白峰所建立的诊断决策模型有助于鉴别肾脏占位的良恶性,联合临床CT诊断可明显提高诊断的效率.     

SELDI-TOF-MS technique in diagnosis of gastric cardia adenocarcinoma

目的 寻找贲门癌肿瘤标记物并建立诊断模型.筛选提示发生淋巴转移的差异蛋白,为临床早期诊断贲门癌及判断预后提供新方法.方法 CM10蛋白芯片结合表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)检测101例贲门癌患者及118例正常对照者血清蛋白,Biomarker Wizard 软件和Biomarker Patterns System(BPS)分析得差异蛋白并建立贲门癌诊断分类树,双盲法验证其准确性.进一步分析对比有、无淋巴转移的贲门癌患者血清蛋白指纹图谱,得到差异蛋白.结果 对照分析贲门癌患者和正常对照组的血清蛋白指纹图谱得56个差异蛋白(P<0.05),经BPS软件筛选,以质荷比为5 480.49(P<10-8)的蛋白为主根结点建立贲门癌诊断模型,其灵敏度为95.05%,特异度为95.76%.得到可提示淋巴转移的差异蛋白3 820.87(P<0.05),其灵敏度为84.4%,特异度为82.1%.结论 SELDI-TOF-MS技术可建立有较高灵敏度和特异度的贲门癌诊断模型,筛选出能够提示发生淋巴转移的差异蛋白,有助于贲门癌的早期筛查、诊断和预后判断.     

应用液体蛋白芯片飞行时间质谱系统研究胃癌、肝癌血清差异蛋白表达

目的：研究胃癌、肝癌和正常人的血清差异蛋白表达,寻找具有潜在诊断意义的血清标志物,以利于胃癌、肝癌的早期诊断.方法：收集胃癌患者20例和肝癌患者10例以及正常人20例血清样本,经ClinProt磁珠纯化、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）分析及ClinPro-Tools生物信息学方法研究其血清蛋白表达谱.结果：质荷比（m/z）为2863u和4965u的蛋白峰能较好地鉴别胃癌和非癌组.m/z为1618u和4965u的蛋白峰能较好地鉴别肝癌和非癌组.m/z为4965u的蛋白峰在胃癌、肝癌中较正常人均异常高表达.结论：液体蛋白芯片飞行时间质谱系统作为研究蛋白表达谱的工具,具有较好的重复性与精度,筛选得到的m/z为2863,1618,4965u的蛋白可能为潜在的胃癌、肝癌肿瘤标志物.     

小肝癌微血管侵犯早期诊断指标的探讨

目的检测小肝癌患者血清蛋白及肝癌组织中微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达,探讨其对有微血管侵犯的小肝癌早期辅助诊断的意义。方法对58例小肝癌肝切除术患者的血清样本采用蛋白质飞行质谱技术检测蛋白表达谱;应用免疫组织化学方法检测患者肝癌组织的MVD及VEGF,分析微血管侵犯与蛋白表达谱及MVD、VEGF的相关性。结果 58例中,20例有微血管侵犯。蛋白质飞行质谱分析表明,微血管侵犯组在相对分子质量4 196,5 832的蛋白质峰明显升高,与无微血管侵犯组比较差别有统计学意义(P<0.05);肝癌组织MVD及VEGF检测表明,微血管侵犯组患者MVD计数及VEGF表达较无微血管侵犯组升高(P<0.05)。结论结合血清中蛋白质的差异性表达及肝癌组织MVD、VEGF检测,小肝癌微血管侵犯有望获得早期诊断。     

贲门癌高发区慢性萎缩性贲门炎患者血清蛋白质质谱的变化

目的:检测贲门癌高发区人群慢性萎缩性贲门炎(CAG)患者血清蛋白质质谱变化.方法:采用弱阳离子结合芯片(WCx2)及表面加强激光解吸/电离飞行时间质谱仪(SELDI-TOF-MS)对食管癌高发区普查人群中活检组织诊断为正常的63人和CAG的57人的血清蛋白质质谱进行检测,找出差异蛋白质.结果:2组间有165种质核比在2 010～49 170的蛋白质谱图被标记,其中CAG人群中升高37种,降低31种(P＜0.05).结论:CAG人群存在多种血清蛋白质的变化.     

酶联免疫斑点检测和结核菌素试验在初治肺结核中的辅助诊断价值

目的 比较酶联免疫斑点检测(ELISPOT)和结核菌素试验(TST),探讨ELISPOT在初治肺结核中的辅助诊断价值.方法 选取初治肺结核123例和非结核疾病病例102例作为结核组和对照组,应用6 kD早期分泌靶向抗原/10 kD培养滤过蛋白融合蛋白(ESAT-6/CFP-10)作为抗原对受试者外周血单个核细胞进行ELISPOT(即ESAT-6/CFP-10-ELISPOT),检测斑点形成细胞(SFCs)的数量;同时对受试者行TST.结果 结核组ESAT-6/CFP-10-ELISPOT形成的SFCs数显著高于对照组(P=0.000).结核组中ESAT-6/CFP-10-ELISPOT的敏感度91.1%(111/123)、特异度80.4%(82/102)、阳性似然比4.60、阴性似然比0.12、阳性预测值0.85、阴性预测值0.87,TST的敏感度65.6%(59/90)、特异度45.1%(46/102)、阳性似然比1.31、阴性似然比0.76、阳性预测值0.51、阴性预测值0.60.ESAT-6/CFP-10-ELLS-POT的敏感度和特异度显著高于TST(均P=0.000).菌阳肺结核组和菌阴肺结核组间ESAT-6/CFP-10-ELLSPOT形成SFCs数量差异无显著性(P=0.166),两组ESAT-6/CFP-10-ELISPOT的敏感度分别为91.8%(67/73)和88.0%(44/50),二者比较差异无显著性(P=0.448).结论 ESAT-6/CFP-10-ELISPOT有可能作为辅助诊断初治肺结核的较为准确方法,并为菌阴肺结核提供一定的诊断依据,但诊断的特异度可能受结核潜伏感染影响.TST对初治肺结核的诊断价值较小.