IL-17与IL-23/IL-17免疫通路在溃疡性结肠炎发病中的作用研究

目的 观察溃疡性结肠炎(UC)组、感染性腹泻(ID)组及健康对照(HC)组外周血单个核细胞(PBMCs)分泌IL-23的水平,以及在IL-23刺激下IL-17、IFN-γ的表达.方法 分离并培养UC组(29例)、ID组(20例)、HC组(26例)的PBMCs;ELISA方法 检测细菌脂多糖(LPS)刺激前后各组培养的PBMCs上清中IL-23水平以及IL-23诱导PBMCs分泌IL-17和IFN-γ的水平.结果 UC及ID组PBMCs上清中IL-23水平分别为(9.984±5.567)pg/ml、(9.843±4.970)pg/ml,明显高于HC组(4.295±5.181)pg/ml(P＜0.05);LPS促进各组PBMCs分泌IL-23,UC组(146.627±86.199)pg/ml及ID组(149.852±51.418)pg/ml,明显高于HC组(72.222±51.863)pg/ml(P＜0.05),而UC与ID组间比较无统计学意义;IL-23促进各组PBMCs分泌IL-17,UC组(63.631±11.793)pg/ml明显高于ID组(27.868±8.314)pg/ml及HC组(26.533±6.422)ps/ml,(P＜0.05);IL-23促进各组PBMCs分泌IFN-γ,UC组(74.573±28.270)pg/ml及ID组(73.064±36.465)pg/ml显著高于HC组(5.167±3.701)pg/ml(P<.05),而UC与ID组间比较差别无统计学意义(P＞0.05).结论 IL-23刺激是UC及ID发病的共同启动因素;IL-17分泌增多在UC的发病过程中发挥关键作用;IL-23/IL-17免疫通路调控异常是导致UC发病的重要机制.     

IL-23对溃疡性结肠炎患者外周血单个核细胞分泌IL-17、IFN-γ的影响及意义

目的观察IL-23在溃疡性结肠炎（UC）患者外周血中的表达及其对外周血单个核细胞（PBMCs）分泌IL-17、IFN7的影响及意义。方法60例活动期UC患者为UC组,健康体检者40例为对照组。两组患者取肘静脉血3mL,送实验室进行PBMCs分离与培养。ELISA法检测上清液（经或未经LPS刺激）中IL-23含量;ELISA法检测上清液（经或未经IL-23刺激）中IL-17、IFN-γ含量。结果UC组上清液中IL-23水平均明显高于对照组（P〈0．01）;经LPS刺激后,两组上清液中IL-23表达水平均明显高于LPS刺激前（P〈0．01）。未经IL-23刺激的两组间IL-17、IFN-γ表达水平差异有统计学意义（P〈0．01）,UC组明显高于对照组;IL-23刺激后两组间IL-17、IFN-γ表达水平差异有统计学意义（P〈0．01）,UC组明显高于对照组。各组经IL-23刺激后,IL-17、IFN-γ表达水平均显著高于IL-23刺激前（P〈0．05或P〈0．01）。结论IL-23是UC发病的重要启动因素,IL-17（IL-23诱导）在UC发病过程中发挥重要作用。     

IL-18对炎症性肠病患者外周血和肠黏膜固有层淋巴细胞增殖和炎症介质分泌的影响

目的:分析IL-18对炎症性肠病患者外周血和肠黏膜固有层T淋巴细胞增殖和促炎症细胞因子分泌的影响。方法:收集12例克罗恩病(CD)、25例溃疡性结肠炎(UC)患者和15例结肠镜检查正常者(对照)的肠黏膜组织,分离外周血单个核细胞(PBMC)和肠黏膜固有层单个核细胞(LPMC),体外培养并用IL-18刺激,48h后,利用ELISA检测上清液中干扰素(IFN)-γ、IL-2、IL-4、IL-5和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,采用3H-胸腺嘧啶掺入法检测LPMC的增殖情况。结果:IL-18刺激后,CD患者PBMC和LPMCIFN-γ、IL-2和TNF-α分泌水平高于UC和对照(P<0.05);CD患者的LPMC增殖率亦高于UC和健康对照。结论:IL-18可激活CD患者淋巴细胞的增殖,PBMC和LPMC分泌大量促炎症细胞因子,可能参与了CD的发病过程,体内阻断IL-18可能对CD患者免疫治疗有帮助。     

慢性移植肾病外周血Th17细胞及其因子变化的意义

目的:探讨外周血CD_4~+Th_(17)/CD_4~+T比率及IL-17、IL-6与IL-23在慢性移植肾肾病患者中的变化及意义。方法:使用流式细胞术检测慢性移植肾肾病、移植肾功能正常以及未行肾移植的慢性肾功能不全尿毒症期和健康人四组人群中Th_(17)细胞及其相关因子。结果:CAN患者组CD_4~+Th_(17)/CD_4~+T比率为3.96±0.28%,血清IL-17、IL-6与IL-23分别为:273.12±17.62pg/ml,231.52±45.32pg/ml,548.79±15.25pg/ml;移植肾功正常组:CD_4~+Th_(17)/CD_4~+T比率为2.47±0.25%,血清IL-17、IL-6与IL-23分别为142.32±10.15pg/ml,157.26±8.17pg/ml,251.20±13.28pg/ml;尿毒症组:CD_4~+Th_(17)/CD_4~+T比率为1.48±0.29%,血清IL-17、IL-6与IL-23分别为44.52±6.12pg/ml,67.38±10.38pg/ml,35.43±9.32pg/ml;健康组:CD_4~+Th_(17)/CD_4~+T比率为1.59±0.31,血清IL-17、IL-6与IL-23分别为36.87±8.14pg/ml,60.28±8.72pg/ml,38.15±8.56pg/ml。移植肾病组指标明显高于移植肾功能正常组(P<0.05),接受移植组较未行移植组各指标均明细升高(P<0.05),而未移植尿毒症组与健康组各指标无明显差别(P>0.05)。结论:移植后患者CD_4~+Th_(17)/CD_4~+T比率及细胞因子表达均升高;CAN组较移植肾功能正常组外周血CD_4~+Th_(17)/CD_4~+T比率及细胞因子表达升高更为明显;未接受移植两组间CD_4~+Th_(17)/CD_4~+T比率及细胞因子变化不明显。     

广西骨关节结核患者血清中IL-4和IL-17水平的检测及临床意义

目的通过检测广西骨关节结核患者血清中白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-17(IL-17)的表达水平,以探讨其临床意义。方法选择在2016年2~6月期间住院治疗的43例广西骨关节结核患者作为观察组,同期选择56名健康者作为对照组,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测两组受试者外周血血清IL-4和IL-17的表达情况,并比较两组间的差异,分析观察组血清IL-4和IL-17水平的线性关系。结果观察组血清IL-4和IL-17的表达水平均明显高于对照组[分别为(54.10±6.77)pg/ml vs(19.06±3.29)pg/ml和(58.63±7.88)pg/ml vs(20.57±4.24)pg/ml],差异有统计学意义(P<0.01);观察组血清IL-4与IL-17的表达含量呈明显正相关(P<0.001)。结论广西骨关节结核患者血清IL-4和IL-17的表达水平升高,提示其可能参与骨关节结核的发病机制。     

IL-12对炎症性肠病患者外周血和肠黏膜固有层淋巴细胞激活和炎症介质分泌的影响

目的:探讨IL-12对炎症性肠病患者外周血和肠黏膜固有层淋巴细胞激活和炎症介质分泌的影响。方法:收集并分离15例克罗恩病、21例溃疡性结肠炎和13例结肠镜检正常者(对照)外周血单个核细胞(PBMC)及肠黏膜固有层单个核细胞(LPMC),体外培养并用IL-12刺激,培养12h、24h、48h后,用流式细胞仪测PBMC或LPMCCD69表达情况;培养48h后,收集细胞培养上清液并用ELISA检测干扰素(IFN)-γ、IL-2和肿瘤坏死因子(TNF)-α的水平。结果:IL-12刺激后炎症性肠病患者外周血T细胞表达高水平的CD69。克罗恩病患者的PBMC和LPMCCD69表达水平及IFN-γ、IL-2和TNF-α分泌水平较溃疡性结肠炎和对照者明显增高(P<0.05)。结论:IL-12能直接刺激炎症性肠病患者外周血和肠黏膜固有层淋巴细胞激活,并产生大量促炎症介质。     

人外周血单个核细胞在尼古丁作用下白细胞介素-1β的分泌

目的吸烟是增加慢性牙周炎发病率的危险因素,本试验研究体外培养正常人和重度牙周炎患者外周血单个核细胞(PBMC)在尼古丁作用下的白细胞介素-1β(IL-1β)分泌情况。方法采集20例重度牙周炎患者和20例健康志愿者的PBMC,体外培养并与尼古丁(浓度分别为5,25,50,100和200 ng/ml)作用,分别在培养1,2,3,4,5 d后收集上清液,用ELISA法检测上清液中IL-1β的水平。结果5 ng/ml尼古丁对PBMC分泌IL-1β几乎没有影响,与对照组比较差异无显著性(P>0.05),随着尼古丁浓度增加,IL-1β分泌明显增加(P<0.001),并呈浓度时间依赖关系,但当尼古丁浓度超过100 ng/ml,PBMC分泌IL-1β的水平随浓度的增加而下降,与50 ng/ml时比较,差异有显著性(P<0.01)。牙周炎患者PBMC培养3 d后,IL-1β含量为(31.2±7.8)pg/ml,与对照组(23.6±8.1)pg/ml比较差异有显著性(P<0.01);50 ng/ml尼古丁时,牙周炎患者IL-1β为(197.9±26.5)pg/ml,明显高于对照组(117.4±16.8)pg/ml,差异有显著性(P<0.001)。结论尼古丁可致PBMC分泌IL-1β增加,在一定浓度范围内呈时间剂量依赖关系,但高浓度却抑制其分泌;重度牙周炎对尼古丁的刺激更加敏感,提示IL-1β的变化可能是吸烟影响牙周病的机制之一。     

雷公藤甲素对外周血单个核细胞白细胞介素17A分泌的影响

目的:探讨外周血单个核细胞(PBMCs)经CD3、CD28双信号通路活化后白细胞介素17A(IL-17A)的分泌以及免疫调节剂雷公藤甲素对该细胞因子分泌的影响。方法:抗CD3单克隆抗体(浓度10μg/ml)和抗CD28单克隆抗体(浓度5μg/ml)共刺激PBMCs,模拟T细胞在体内受双信号免疫活化的过程,应用酶联免疫吸附方法(ELISA)检测细胞培养液上清IL-17A水平。结果:外周血单个核细胞经CD3/CD28双信号通路刺激后,其分泌的IL-17A在6h内即出现明显增加,并在24h内呈继续增高的趋势;100nmol/L和500nmol/L浓度的雷公藤甲素均能够显著抑制该细胞分泌IL-17A。结论:PBMCs经双信号免疫活化后,其分泌的IL-17A明显增加,可能是哮喘气道变应性炎症的形成和发展机制之一;雷公藤甲素能够通过抑制PBMCs对IL-17A分泌,从而有可能减轻哮喘气道炎症。     

感染性腹泻病和溃疡性结肠炎患儿血清IL-17的水平变化及意义

目的探讨IL-17在感染性腹泻病和溃疡性结肠炎发病中的意义。方法采用流式细胞仪检测35例感染性腹泻病患儿(其中急性感染性腹泻组10例,迁延性感染性腹泻组15例,慢性感染性腹泻组10例)、7例溃疡性结肠炎患儿(溃疡性结肠炎组)和8例健康体检者(对照组)血清IL-17水平。结果(1)感染性腹泻组和溃疡性结肠炎组血清IL-17水平均明显高于对照组(P0.05),溃疡性结肠炎组高于感染性腹泻组(P0.05);(2)迁延性感染性腹泻组和慢性感染性腹泻组血清IL-17水平均明显高于对照组(P0.01),慢性感染性腹泻组高于急性感染性腹泻组(P0.01)。结论IL-17参与了感染性腹泻病及溃疡性结肠炎的发病机制,且与病程、炎症程度密切相关,在慢性感染性腹泻及溃疡性结肠炎中表达更高,但确切关系及具体机制仍有待进一步研究。     

IL-17和IL-23在肥胖哮喘小鼠气道炎症中的作用及其与氧化应激的关系

目的探讨Th-17相关因子——IL-17和IL-23在肥胖哮喘小鼠气道炎症中的作用及其与氧化应激反应的关系.方法??45只雌性C57/6J小鼠随机分为哮喘组、肥胖哮喘组(肥哮组)和对照组各15只.卵白蛋白激发致敏和高脂饮食制作肥胖哮喘模型,计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数并分类,酶联免疫吸附法法测定肺组织匀浆中白细胞介素(IL)-17、 IL-23和8-异前列腺素2α(8-iso-PGF2α)水平.结果??哮喘组小鼠BALF中白细胞总数和嗜酸粒细胞比例均较对照组明显升高(P<0.05).肥哮组肺组织匀浆的IL-17、 IL-23和8-iso-PGF2α水平分别为(65.83±5.69)pg/ml、(141.52±14.62)pg/ml和(61.33±7.75)pg/ml均高于哮喘组和对照组(P<0.05). Pearson相关分析表明,IL-17与8-iso-PGF2α水平存在相关性(r=0.758, P<0.01).结论?肥胖哮喘小鼠体内IL-17和IL-23水平升高,参与了哮喘气道炎症和氧化应激过程,抑制Th17偏移可望成为肥胖哮喘治疗的有效措施     

过敏性哮喘患者外周血IL-2、IL-4、IL-6和IL-8水平的变化

为了观察白细胞介素在哮喘发病中的作用。该文分别对哮喘发作期２０例。缓解期１２例患者及正常对照组１０例进行了血清ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－６和ＩＬ－８的测定。结果发现,发作期患者血清ＩＬ－２水平下降,而ＩＬ－４、ＩＬ－６和ＩＬ－８水平均增高,缓解期均增高,缓解期均恢复至正常水平。提示这些细胞因子在哮喘哪病过程中起着重要作用。     

IL-17、IL-5、IL-4、 IL-33等细胞因子在哮喘发病机制中的作用

目的 探讨白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-33(IL-33)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)等细胞因子在哮喘发病机制中的作用.方法 选择浙江省乐清市人民医院2011年2月～2014年8月收治的82例哮喘患者作为研究对象,根据患者的临床表现分为急性发作组(45例)、缓解期组(37例),并选取同期健康人群40例作为对照组,比较三组患者相关指标的差异及其相关性.结果 缓解期组呼气流量峰值(PEF)、第1秒用力呼气量(FEV1)、第1秒用力呼气量/用力肺活量(FEV1/FVC)、哮喘控制测试评分(ACT)均显著高于急性发作组(P＜0.01).急性发作组IL-17、IL-5、IL-4、IL-6、IL-8、IFN-γ、IgE值均显著高于缓解期组、对照组,IL-2显著低于缓解期组、对照组(P＜ 0.05);缓解期组IL-17、IL-5、IL-4、IL-8、IFN-γ、IgE值显著高于对照组,IL-2显著低于对照组(P＜0.05).三组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+测定值比较差异有高度统计学意义(P＜0.01),急性发作组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+值显著高于缓解期组、对照组(P＜0.05);缓解期组患者的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+值显著高于对照组(P＜0.05).结论 哮喘患者的T细胞亚群、细胞因子与健康人群存在显著差异,急性发作期患者与缓解期患者的T细胞亚群、细胞因子、肺功能指标差异显著,提示免疫功能紊乱、炎症介质分泌增加与哮喘发作关系密切.     

Effect of TGF-β1 on the Expression of IL-12, IL-15, IL-18, IL-4 and IL-10 in Heart Transplantation Rejection in Rats

To investigate the effect of TGF-β1 on the expressions of IL-12, IL-15, IL-18, IL-4 and IL-10 in heart transplantation rejection in rats, a model of rat cervical heterotopic heart transplantation was set up and the model rats were randomly divided into three groups： control group, transplant group and TGF-β1 group. The mRNA expression levels of IL-12, IL-15, IL-18, IL-4 and IL-10 were determined by RT-PCR at the 5th day after the transplantation. The mRNA expression levels of IL- 12, IL-15, IL-18 were increased obviously and those of IL-4, IL-10 were significantly decreased in the transplant group as compared with the control group （P〈0.01）. In the TGF-β1 group, the mRNA ex- pression levels of IL- 12, IL- 15, IL- 18 were significantly decreased and those of IL-4, IL- 10 were significantly increased as compared with the transplant group （P〈0.01）. The immunosuppressive effect of TGF-β1 on heart transplantation rejection was related to its inhibition of the expressions of Th1-type cytokines （IL-12, IL-15, IL-18 etc） and its promotion of the expressions of Th2-tpye cyto- kines （IL-4, IL-10）.     

Effect of TGF-β1 on the expression of IL-12, IL-15, IL-18, IL-4 and IL-10 in heart transplantation rejection in rats

Summary To investigate the effect of TGF-β1 on the expressions of IL-12, IL-15, IL-18, IL-4 and IL-10 in heart transplantation rejection in rats, a model of rat cervical heterotopic heart transplantation was set up and the model rats were randomly divided into three groups: control group, transplant group and TGF-β1 group. The mRNA expression levels of IL-12, IL-15, IL-18, IL-4 and IL-10 were determined by RT-PCR at the 5th day after the transplantation. The mRNA expression levels of IL-12, IL-15, IL-18 were increased obviously and those of IL-4, IL-10 were significantly decreased in the transplant group as compared with the control group (P<0.01). In the TGF-β1 group, the mRNA expression levels of IL-12, IL-15, IL-18 were significantly decreased and those of IL-4, IL-10 were significantly increased as compared with the transplant group (P<0.01). The immunosuppressive effect of TGF-β1 on heart transplantation rejection was related to its inhibition of the expressions of Th1-type cytokines (IL-12, IL-15, IL-18 etc) and its promotion of the expressions of Th2-tpye cytokines (IL-4, IL-10).     

IL-2,IL-7,IL-15和IL-21在艾滋病免疫疗法中的应用前景

高效抗反转录病毒疗法可以有效地减少HIV的复制,但却不能完全恢复CD4+T细胞的数量.即使病毒血清学指标得到良好控制的病人,CD4+T细胞数也很难达到正常水平.目前研究表明:γ链细胞因子在始动、维持及调节免疫稳态和炎症反应中发挥重要作用.γ链细胞因子具有多重功能,如在健康及疾病中作为调节和效应分子发挥作用,因此,该家族...     

反义IL-6寡核苷酸对实验性系膜增生性肾炎IL-6、IL-6mRNA表达的影响

[目的]观察反义IL-6寡核苷酸经左肾动脉注入系膜增殖性肾小球肾炎SD大鼠后对肾小球系膜区IL-6 mRNA及蛋白水平的影响。[方法]30只SD大鼠接受葡萄球菌内毒素静脉注射、牛血清白蛋白隔日口服、完全弗氏佐剂及不完全弗氏佐剂皮下注射,并加做肝左叶切除术,制作系膜增生性肾小球肾炎动物模型。经FAM标记的反义寡核苷酸肾小球定位后,将IL-6反义、正义、及错义寡核苷酸由左肾动脉注入肾脏,并用右肾作对照,分别作常规组织病理,免疫组织化学及原位杂交检测。[结果]FAM标记的IL-6反义寡核苷酸经左肾动脉注入后1h,系膜区可检测到少量表达,6 h后肾系膜区表达明显增加。反义寡核苷酸治疗组的SD大鼠IL-6。IL-6 mRNA表达被显著抑制(P<0.01),但IL-6正义及错义寡核苷酸对IL-6、IL-6 mRNA表达无明显影响(P>0.05)。3组蛋白尿及病理改变均无显著差异(P>0.05)。[结论]脂质体介导的反义寡核苷酸(IL-6)能在肾小球表达。IL-6反义寡核苷酸治疗显著抑制系膜增生性肾炎SD大鼠IL-6、IL-6 mRNA表达,但IL-6正义、及错义寡核苷酸无此作用。