Ⅱ.新生牛肝细胞生长因子对大鼠急性肝损伤的保护作用

研究了新生牛肝细胞生长因子对ＣＣｌ４引起的大鼠急性肝损伤的保护作用。结果表明，ｃＨＧＦ可降低ＣＣｌ４引起的急性肝衰竭大鼠的死亡率，抑制血清谷丙转氨酶和胆红素的升高。从肝组织切片观察到ＣＨＧＦ可明显减轻ＣＣｌ４引起的肝细胞结构的损伤，证实ＨＧＦ是一种有效的保肝活性因子。     

新生牛肝细胞生长因子的活性研究──Ⅰ．新生牛肝细胞生长因子对原代细胞DNA合成的作用

以原代培养的人胎肝细胞、大鼠肝细胞等为靶细胞，研究了不同纯化阶段的新生牛肝细胞生长因子（ｃＨＧＦ）对靶细胞ＤＮＡ合成活性的影响。结果表明，ｃＨＧＦ对体外培养的人胎肝细胞、大鼠肝细胞的ＤＮＡ合成有明显的促进作用，对大鼠肾细胞、人肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１的ＤＮＡ合成亦有一定的促进作用，对Ｓ_（１８０）小鼠腹水癌细胞的ＤＮＡ合成无促进作用。纯品ｃＨＧＦ对人胎肝细胞的最小作用剂量为５ｎｇ／ｍｌ。提示ＨＧＦ是一种较强的肝细胞有丝分裂原。     

新生牛肝细胞生长因子的活性研究：Ⅰ.新生牛肝细胞生长因…

以原代培养的人胎肝细胞、大鼠肝细胞等靶细胞，研究了不同纯化阶段的新生牛肝细胞生长因子对靶细胞ＤＮＡ合成活性的影响。结果表明ｃＨＧＦ对体外培养的人胎肝细胞、大鼠肝细胞的ＤＮＡ合成有明显的促进作用，对大鼠肾细胞、人肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１的ＤＮＡ合成亦有一定的促进作用，对Ｓ１８０小鼠腹水癌细胞的ＤＮＡ合成无促进作用。     

人肝细胞生长因子在CHO细胞的表达和生物学活性

将人肝细胞生长因子（ＨＧＦ）ｃＤＮＡ（２．２ｋｂ）经ＤＮＡ连接酶插入到ｐＥＥ１４质粒的多克隆位点上，构建了ｐＥＥ１４／人ＨＧＦ（１１．４５ｋｂ）真核细胞表达质粒。用Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ将ｐＥＥ１４／ＨＧＦ质粒转导至ＣＨＯ细胞表达，表达ｐＥＥ１４／人ＨＧＦ的ＣＨＯ细胞的培养上清液能促进原代培养大鼠细胞的ＤＮＡ合成，ＣＨＯ细胞表达和合成的人ＨＧＦ的水平高于２９３和ＮＳＯ细胞。     

人肝细胞生长因子在CHO细胞的表达和生物学活性

将人肝细胞生长因子（ＨＧＦ）ｃＤＮＡ（２．２ｋｂ）经ＤＮＡ连接酶插入到ｐＥＥ１４质粒的多克隆位点上，构建了ＰＥＥ１４／人ＨＧＦ（１１．４５ｋｂ）真核细胞表达质粒。用Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ将ｐＥＥ１４／ＨＧＦ质粒转导至ＣＨＯ细胞表达，表达ＰＥＥ１４人／人ＨＧＦ的ＣＨＯ细胞的培养液能促进原代培养大鼠细胞的ＤＮＡ合成。ＣＨＯ细胞表达和合成的人ＨＧＦ的水平高于２９３和ＮＳＯ细胞。     

肝星形细胞表达转化生长因子α与成纤维细胞生长因子

目的 研究肝星形细胞（ＨＳＣ）转化生长因子α（ＦＧＦα）与成纤维细胞生长因子（ａＦＧＦ）的表达。方法 分别从正常与ＣＣＬ４肝纤维化大鼠肝脏分离ＨＳＣ,提取ＲＮＡ,用ＲＴ－ＰＣＲ测定ＴＧＦα和ａＦＧＦｍＲＮＡ。结果 正常ＨＳＣ表达ＴＧＦα和ａＦＧＦ,肝纤维化时ＴＧＦα与ａＦＧＦｍＲＮＡ水平均显著升高（Ｐ〈０．０５）。结论 ＨＳＣ自分泌ＴＧＦα和ａＦＧＦ,对肝纤维化具有重要促进作用。     

肝细胞生长因子对大鼠急性肝损伤保护作用的实验研究

目的：研究肝细胞生长因子（ＨＧＦ）对大鼠急性肝损伤的保护作用。方法：ＣＣｌ４所致大鼠肝损伤作为观察对象。ＨＧＦ治疗组分别与损伤组、正常对照组作比较。结果：治疗组血清ＡＬＴ、α－肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）、肝组织匀浆ＭＤＡ、肝组织钙含量和血清及肝组织匀浆超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力均有明显改善。结论：肝细胞生长因子对肝脏有保护作用。     

神经生长因子对甲低功大鼠脑胆碱乙酰转移酶活性的影响

实验的目的是为了探讨神经生长因子（ＮＧＦ）对甲低在大鼠胆碱乙酰转移酶（ＣＨＡＴ）活性的影响。用１％ＮａＣｌＯ４诱发大鼠甲状腺功能低下，侧脑室注射ＮＧＦ，观察脑ＣＨＡＴ活性变化。结果表明：甲低功大鼠脑ＣＨＡＴ活性降低，注射ＮＧＦ后，脑ＣＨＡＴ活性升高，与实验组有非常显著判别，但仍比对照组低，说明ＮＧＦ能恢复脑ＣＨＡＴ活性，改善甲低功引起的中枢胆碱能神经元损害。     

牛肝细胞再生刺激因子的制备及其生物学特性

从新生牛肝脏提取肝细胞再生刺激因子（ｃＨＳＳ），并对其理化及生物学特性进行研究。ｃＨＳＳ对原代大鼠肝细胞具有刺激活性，使ＤＮＡ合成明显增加，其活性经９５℃加热１５分钟无明显下降，但对蛋白酶敏感。动物试验结果表明，ｃＨＳＳ能显著降低Ｄ－ＧＡＬ致肝损伤大鼠血清ＡＬＴ水平，对损伤肝细胞具有保护及修复作用，能明显提高ＣＣＬ４致急性肝功能衰竭小鼠的生存率。     

重组人肝细胞生长因子的纯化及鉴定

目的对重组人肝细胞生长因子（Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｈｕｍａｎ ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｏｒ, ｒｈＨＧＦ）进行初步纯化及鉴定。方法 培养上清液经过离心、超滤,在ＦＰＬＣ系统上经肝素亲和层析分离纯化,用ＥＬＩＳＡ法检测、收集ｒｈＨＧＦ。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电 泳鉴定纯度和相对分子质量,大鼠原代肝细胞培养法检测ｒｈＨＧＦ的生物学活性。结果ｒｈＨＧＦ主要在０．９～１．３ ｍｏｌ／Ｌ　ＮａＣｌ 范围内被洗脱,由约６２ ０００和３４ ０００两个亚基组成,明显促进大鼠肝细胞ＤＮＡ合成。结论　经肝素亲和层析分离,从 表达山ＨＧＦ的ＣＨＯ细胞培养上清液中纯化出有活性的ｒｈＨＧＦ。     

血管内皮生长因子与乙型肝炎的关系

目的：研究血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）与乙型肝炎（乙肝）的关系。方法：对２１０例乙肝患者肝活检组织及４０例ＣＣｌ４实验大鼠不同时期肝组织,用 ＶＥＧＦ ｍＡｂ进行免疫组织化学（免疫组化）染色;同时,对其中 ７５例乙肝患者用ＥＩＡ法定量检测其血清 ＶＥＧＦ含量。结果：在 ＣＣｌ４大鼠实验早、中期（２～５周）,肝组织炎症反应显著,变性肝细胞 ＶＥＧＦ阳性表达;晚期（８～１２周）ＶＥＧＦ阳性肝细胞较少。在急性乙肝,ＶＥＧＦ呈弥散性强阳性表达,血清ＶＥＧＦ含量极显著升高（Ｐ＜０．００１）;在慢性乙肝及肝硬变（ＬＣ）,ＶＥＧＦ散在表达,以扩张肝窦的内皮细胞及周围肝细胞较显著,其血清ＶＥＧＦ含量并无升高,至ＬＣ反而下降（Ｐ＜０．０１）。结论：ＶＥＧＦ与乙肝的发病阶段、肝细胞再生、肝组织病变程度等密切相关,其在肝内血管改建中担当一重要角色。     

Fhss对Ccl_4诱发大白鼠急性肝衰竭血清ALTSODLPO和肝组织学动态变化

以新生牛肝脏提取分子量小于２００００Ｄａｌｔｏｎ的生物活性物质—胎牛肝细胞刺激因子（Ｆｈｓｓ）可用于治疗Ｃｃｌ４诱发大鼠急性肝功能衰竭（ＡＨＦ）具有促进大鼠肝细胞生长和肝细胞合成ＤＮＡ，有降低血清ＡＬＴ、ＳＯＤ及ＬＰＯ的能力。此种制剂中含有多种人体所需的氨基酸和微量元素对受损的肝细胞修复起一定作用，对临床治疗重症肝炎及各种原因引起肝损伤开辟一条新途径。     

新生小牛肝的肝细胞生长因子的提取和纯化

新生小牛肝经组织匀浆、加热和离心制得粗制的肝细胞生长因子（ＨＧＦ），然后经过超滤、ＤＥＡＥ－ＤＥ５２纤维层析、Ｓｕｐｅｒｏｓｅ１２凝胶过滤，ＭｏｎｏＱ离子交换层析和高效液相色谱进行分离提纯，用＾３Ｈ－标记的胸腺嘧啶核苷的掺入法在人肝瘤ＳＭＭＣ－７２２１细胞株上检测提纯的新生小牛肝细胞生长因子的生物学活性，得到一分子量为（１２－１４）×１０＾３的有促进肝细胞有丝分裂的有效成分。显面易见此ＨＧＦ的分子     

人肝细胞生长因子在CHO细胞中的表达

以ｐＲＣ／ＣＭＶ作为真核细胞表达性载体，用限制性内切酶ＢａｍＨＩ／ＸｂａⅠ将ＨＧＦｃＤＮＡ全序列定向重组到ｐＲＣ／ＣＭＶ的多克隆位点上。筛选得到的重组质粒以磷酸钙ＤＮＡ共沉淀的方法转染ＣＨＯ细胞，经８００ｍｇ／Ｌ的Ｇ４１８筛选，获得阳性细胞克隆。用ＨＣＣ－７９０２细胞及原代培养的成年大鼠肝细胞对转染阳性细胞培养基收集上清进行活性测定。３Ｈ－ＴｄＲ掺入等分析证明，它能有效地抑制体外培养的人肝癌细胞的生长，并可明显刺激鼠肝细胞ＤＮＡ的合成。结果表明，重组人ＨＧＦ基因在ＣＨＯ细胞中成功地获得表达，为基因工程大量制备和纯化ＨＧＦ奠定了基础     

糖尿病末梢神经病变的感觉神经传导速度与空腹血糖、糖基化血红蛋白的关系

对５３例糖尿病末梢神经病变患者感觉神经传导速度（ＳＣＶ）、空腹血糖（ＦＢＧ）、糖基化血红蛋白（ＨｂＡｌｃ）的资料进行分析，结果发现在直线相关分析中，ＦＢＧ与ＨｂＡｌｃ呈正相关，ＦＢＧ及ＨｂＡｌｃ与ＳＣＶ呈负相关，提示长期高血糖是引起糖尿病末梢神经病变的重要因素。     

糖尿病末梢神经病变的感觉神经传导速度与空腹血糖,糖基化血红蛋白的…

对５３例糖尿病末梢神经病变患者感觉神经传导速度（ＳＣＶ）、空腹血糖（ＦＢＧ）、糖基化血红蛋白（ＨｂＡｌｃ）的资料进行分析，结果发现在直线相关分析中，ＦＢＧ与ＨｂＡｌｃ呈正相关，ＦＢＧ及ＨｂＡｌｃ与ＳＣＶ呈负相关，提示长期高血糖是引起糖尿病末梢神经病变的重要因素。     

硝苯啶对大鼠肝纤维化肝透明质酸、羟脯氨酸及氨基葡萄糖苷酶的影响

用四氯化碳（ＣＣｌ_４）造成大鼠肝纤维化，发现钙拮抗剂硝苯啶（Ｎｉｆ）明显降低早期治疗组大鼠肝纤维化肝透明质酸（ＨＡ）、羟脯氨酸（Ｈｙｐ）含量及大剂量组肝Ｎ－乙酰－β－氨基葡萄糖苷酶（β－ＮＡＧ）活性。晚期治疗组中，ＨＡ含量及大剂量组β－ＮＡＧ，活性仍明显降低。Ｎｉｆ对大鼠肝纤维化肝ＨＡ、Ｈｙｐ和β－ＮＡＧ的影响与其剂量有一定依赖关系。实验提示Ｎｉｆ对ＣＣｌ_４诱导的大鼠肝纤维化有抑制，甚至可能有一定逆转作用。     

转化生长因子β1基因修饰的小鼠树突状细胞在移植体内的迁移？…

目的 观察β型转化生长因子（ＴＧＦβ１）基因修饰的Ｂ１０小鼠骨髓树突关细胞（ＤＣ）在Ｃ３Ｈ小鼠体内的迁移和存活,以探讨ＤＣ生物学特性与移植耐受性的关系。方法 从Ｂ１０小鼠骨髓分离ＤＣ前体细胞,在粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子＋β型转化生长因子（ＧＭ－ＣＳＦ＋ＴＧＦβ）条件下培养增殖（ＧＣ１）并转导Ａｄ－ＬａｃＺ（Ｄｃ２）或Ａｄ－ＴＧＦβ１（ＤＣ３）,每组５×１０＾５个细胞注入Ｇ３Ｈ小鼠后掌皮下,分别     

重组人肝细胞生长因子保护四氯化碳染毒小鼠肝的效应

为检测重组人肝细胞生长因子（ｒ－ｈＨＧＦ）的保肝作用，本工作观察到ｒ－ｈＨＧＦ降低ＣＣｌ４染毒小鼠血清ＡＬＴ和ＡＳＴ升高的幅度，减轻肝组织受损的程度和防止肝细胞器的破坏。而且，ｒ－ｈＨＧＦ的这种保肝效应所需剂量极小，为１５ｎｇ／ｇ体重。根据上述资料推测，ｒ－ｈＨＧＦ具有保护小鼠肝以抗ＣＣｌ４损伤作用。     

硝苯啶对大鼠肝纤维化肝透明质酸,羟脯氨酸及氨基葡萄糖…

用四氯化碳（ＣＣｌ４）造成大鼠肝纤维化，发现钙拮抗剂硝苯啶（Ｎｉｆ）明显降低早期治疗组大鼠肝纤维化肝透明质酸（ＨＡ）、羟脯氨酸（Ｈｙｐ）含量及大剂量组肝Ｎ－乙酰－β－氨基葡萄糖苷酶（β－ＮＡＧ）活性。晚期治疗组中，ＨＡ含量及大剂量组β－ＮＡＧ活性仍明显降低。Ｎｉｆ对大鼠肝纤维化肝ＨＡ、Ｈｙｐ和β－ＮＡＧ的影响与其剂量有一定依赖关系。实验提示Ｎｉｆ对ＣＣｌ４诱导的大鼠肝纤维化有抑制，甚至可能有一定逆