少突胶质前体细胞与髓鞘形成及再生的研究进展

脱髓鞘病变可阻碍神经系统电传导,导致功能障碍。髓鞘再生由广泛分布于成体的少突胶质前体细胞(OPC)介导。理解少突胶质细胞生理学,了解髓鞘形成与维稳机制,了解在某些主要神经系统病变(如多发性硬化)CNS髓鞘再生失败与内源性OPC数量、迁移以及形成髓鞘能力的关系,对于改善髓鞘修复策略具有重要意义。     

微RNA调控少突胶质细胞分化及其在脱髓鞘疾病中的研究进展

少突胶质前体细胞(OPC)分化为成熟少突胶质细胞(OL)是中枢神经系统(CNS)神经元轴突髓鞘形成的关键环节。诸多转录因子,如性别决定区Y基因相关高可变区基因10(SOX10)、ZFP191等促进因子和Hes5、SOX6、PDGFRα及     

载脂蛋白D在两型星形胶质细胞和少突胶质细胞中的表达

目的: 通过对载脂蛋白D(ApoD)在分化成熟的两型星形胶质细胞和少突胶质细胞中表达的检测,探讨ApoD等脂代谢相关基因对神经髓鞘生成的调控机制.方法: 用激光共聚焦免疫荧光标记技术检测ApoD在分化成熟的两型星形胶质细胞和少突胶质细胞中的表达情况.结果: 激光共聚焦显微镜检测显示在O-2A谱系来源的成熟2型星形胶质细胞和少突胶质细胞中ApoD标记为阳性,而在T1A谱系来源的成熟1型星形胶质细胞中则未检测到ApoD的表达,从而在蛋白质水平验证本室研究两型星形胶质细胞基因表达谱差异基因芯片结果中ApoD mRNA在T2A中高表达,而在T1A中低表达的现象.结论: ApoD等脂代谢相关基因可能在O-2A谱系发生和分化过程中起重要作用,O-2A谱系与脑内脂质代谢以及神经髓鞘发生内在机制密切相关.     

甲状腺激素促进神经再生的研究进展

甲状腺激素(thyroid hormones，TH)是中枢神经系统正常发育的重要调节因素，少突胶质细胞是中枢神经系统髓鞘形成细胞，神经纤维髓鞘的形成标志着中枢神经系统发育成熟。TH通过不同甲状腺激素受体来影响少突胶质细胞的分化与成熟，减慢少突胶质细胞前体细胞的增殖，促进其分化为成熟的少突胶质细胞，从而控制中枢神经细胞的正常发育。周围神经损伤后，其支配靶器官功能的重建依赖于神经营养因子、细胞外基质和激素。     

复髓鞘机制及其在多发性硬化症脱髓鞘模型中的研究进展

在多发性硬化症患者的中枢神经系统中,脱髓鞘的轴突难以有效复髓鞘是治疗疾病的主要障碍,而髓鞘再生失败的瓶颈问题是少突胶质细胞前体细胞（OPC）不能分化为成熟的少突胶质细胞。复髓鞘是继脱髓鞘后自然发生的再生反应,包括OPC的激活、迁移和分化;具有保护神经轴突、进而避免神经元变性坏死的作用。近年来在体脱髓鞘模型研究发现,二甲双胍、氯马斯汀能有效加强复髓鞘,鉴定了髓鞘转录因子1样蛋白（Myt1L）、N-甲基-D-天门冬氨酸（NMDA）受体、星形细胞连接蛋白43（Cx43）、G蛋白偶联受体17（GPR17）、κ阿片受体（KOR）、甾醇14α-脱甲基化酶（CYP51）、脱氢胆固醇还原酶14（TM7SF2）和3-β-羟基类固醇-8,7-异构酶（EBP）等促进OPC分化的潜在药物靶点。本文基于对复髓鞘机制的理解,讨论了促进OPC分化和增强复髓鞘的研究进展,这些进展为进一步研发治疗多发性硬化症的新方法提供了思路。     

脑卒中后少突胶质细胞再生的细胞间相互作用机制

白质损伤是包括脑卒中在内的很多中枢神经系统疾病的重要临床表现。脑白质由成熟少突胶质细胞形成的髓鞘包绕轴突构成,且作为连接各灰质部位的发挥信号传递作用。在脑卒中的急性阶段,少突胶质细胞死亡.脱髓鞘导致了白质功能失调。而在慢性阶段,白质环境对于神经元修复.血管重塑以及髓鞘再生都起到积极促进作用。少突胶质细胞前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)能增殖分化为成熟少突胶质细胞完成髓鞘再生,重新包绕轴突进行修复。在这过程中,尤其引人注目的是其他种类的细胞在缺血情况下对OPCs的支持作用。本文聚焦白质损伤或者生理情况下,对OPCs如何获得其周围其他细胞支持,完成少突胶质细胞再生以及髓鞘再生的过程进行综述,为白质损伤后修复的进一步研究提供参考。     

少突胶质细胞前体细胞移植治疗中枢神经系统脱髓鞘疾病的研究进展

脱髓鞘疾病是一类以髓鞘脱失为主要特征的神经系统疾病.脱髓鞘疾病可严重影响患者生活质量,并且目前鲜有令人满意的治疗方法.少突胶质细胞前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)是存在于中枢神经系统(central nervous system,CNS)中,具有迁移、增殖及分化为成熟少突胶质细胞(oligodendrocytes,OLs)能力的前体细胞.OLs是CNS中的成髓鞘细胞,因此OPCs与CNS中髓鞘的发生和损伤后再生都密切相关.近些年对OPCs发育和分化分子基础研究的深入直接推动了利用多能干细胞定向分化以及体细胞谱系重编程等手段获得OPCs的进步,使OPCs移植成为可能治疗CNS脱髓鞘疾病的新方法.本文对近些年的相关研究进行了综述.     

大鼠脊髓源性少突胶质前体细胞的生物学特性

目的 探讨大鼠脊髓源性少突胶质前体细胞在体外条件下的增殖及分化等生物学特性,为进一步研究脊髓脱髓鞘疾病的髓鞘再生奠定基础.方法 采用免疫吸附法原代培养大鼠脊髓源性少突胶质前体细胞,并用免疫荧光染色鉴定其表面标志物A2B5及NG2;采用Alarm blue法检测其在体外的增殖能力,并绘制生长曲线;诱导原代培养的少突胶质前体细胞向成熟少突胶质细胞分化,并用免疫荧光染色鉴定成熟少突胶质细胞表面标志物MBP及GalC的表达情况.结果 免疫吸附法可以对大鼠脊髓组织中的少突胶质前体细胞进行有效的分离纯化,分离获得的少突胶质前体细胞A2B5及NG2表达呈阳性,Alarm blue法检测结果显示少突胶质前体细胞在体外具有良好的增殖能力,诱导分化实验证实少突胶质前体细胞可以分化为成熟少突胶质细胞并且MBP及GalC表达呈阳性.结论 采用免疫吸附法原代培养的大鼠脊髓源性少突胶质前体细胞在体外具有良好的增殖能力以及分化为成熟少突胶质细胞的能力.     

Diosgenin 促进髓鞘再生作用及雌激素受体在其中的介导作用探究

【立论依据】 多发性硬化病人的病灶处存在未成髓鞘的少突胶质细胞和大量的少突胶质前体细胞(OPC),更多证据均表明OPC的分化障碍是导致慢性脱髓鞘病灶处再髓鞘化失败的重要原因。有研究对具有与甾体激素相同或近似母环结构的植物甾醇单体化合物库筛选,发现薯蓣皂苷元(Diosgenin)显著促进OPC的分化。但甾体激素是否对再髓鞘有直接作用及其作用机制有待阐明。 【设计思路】 建立脱髓鞘模型,给予Diosgenin确定其对髓鞘再生是否具有直接作用及剂量关系。进一步给予雌激素受体(ER)阻断剂明确其在介导Diosgenin在髓鞘再生中的作用。 【实验内容】 (1)制备脑片培养模型 体外培养的P10大鼠小脑脑片给予Lysolecithin(溶血卵磷脂)造成急性脱髓鞘模型,免疫组化、免疫印迹等分析比较再髓鞘化程度;(2)Diosgenin在髓鞘再生中的作用 小脑脑片的髓鞘再生阶段给予不同剂量的Diosgenin处理,免疫组化、免疫印迹等比较再髓鞘化程度。进一步给予MPP(ERα阻断剂),PHTPP(ERβ阻断剂)明确ER及其不同亚型在介导Diosgenin在髓鞘再生中的作用。 【材料】 P10大鼠 【可行性】 指导教师肖林在国家自然科学基金的支持下致力于揭示甾体激素受体受体促进OPC分化和再髓鞘化的作用及内在机制。神经生物学教研室具有开展各种分子生物学的设备和能力。本课题组成员已熟练掌握需要的实验技术,并取得理想的预实验结果。 【创新性】 (1)离体小脑脑片培养脱髓鞘模型对给药(Diosgenin)刺激的效应可以消除动物模型诸多干扰因素如机体代谢的影响,也能较好模拟病理急性脱髓鞘模式,弥补分子实验模型的局限性;(2)甾体激素是目前临床治疗慢性脱髓鞘病的主要药物,但甾体激素是否对OPC的分化和再髓鞘有直接作用尚有待阐明。研究调控再髓鞘化的分子机制将为脱髓鞘性疾病的临床治疗提供借鉴;(3)实验设计巧妙,分组严谨,在确定了不同剂量的Diosgenin对髓鞘再生作用后,又能够从受体深入探讨具体的作用机制。     

少突胶质前体细胞在髓鞘再生中作用的研究进展

髓鞘再生是脱髓鞘疾病发生后的重要修复方式.在中枢神经系统(Central Nervous System,CNS)主要由少突胶质细胞及其前体细胞(Oligodendrocyte Precursor Cells,OPCs)介导,OPCs分化形成具有功能性的少突胶质细胞.近年来,研究发现OPCs广泛存在于哺乳动物的CNS,这使髓鞘再生过程成为可能.     

Inhibition of TROY promotes OPC differentiation and increases therapeutic efficacy of OPC graft for spinal cord injury

Objective:To observe the regulatory effects of TROY on neural myelination in central nervous system(CNS)and remyelination in response to spinal cord injury(SCI)by oligodendrocyte precursor cell(OPC).Results:TROY expression was detected by RT-PCR and Western blotting in OPCs as well as in differentiated premature and mature oligodendrocytes of postnatal mice.Pharmacological inhibition or RNAi-induced knockdown of TROY promotes OPC differentiation,whereas overexpression of TROY dampens oligodendrocyte maturation.Furthermore,treatment of co-cultures of DRG neurons and OPCs with TROY inhibitors promotes myelination and myelin sheath-like structures.Mechanically,protein kinase C(PKC)signaling is involved in the regulation of the inhibitory effects of TROY.Moreover,in situ transplantation of OPCs with TROY knockdown leads to notably enhanced remyelination as well as augmented recovery of motor function and nervous conduction in rats with SCI.Conclusions:Our results indicate that TROY negatively modulates remyelination in the CNS,and thus may be a suitable target for improving the therapeutic efficacy of cell transplantation for CNS injury.     

肿瘤坏死因子-α对少突胶质前体细胞的影响及其机制的研究

目的：探讨肿瘤坏死因子‐α（T N F‐α）对少突胶质前体细胞（O PC ）的作用及机制,为脑室周围白质软化（PV L ）的治疗提供策略。方法将分离纯化的OPC分为空白对照组、TNF‐α组、肿瘤坏死因子受体1（TNFR1）抗体组,将50 ng／mL TNF‐α作用于TNF‐α组、TNFR1抗体组,免疫荧光化学检测OPC的分化情况,四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测3组细胞的相对活力, RT‐PCR检测细胞TNFR1的mRNA水平的表达情况。结果与空白对照组和TNFR1抗体组相比,TNF‐α组OPC的细胞活力明显下降（P＜0．05）,并且不能沿着少突胶质谱系细胞进行分化,即分化为原少突胶质细胞。TNF‐α组TNFR1的mRNA表达明显的上调,空白对照组和TNFR1抗体组的mRNA表达无明显的变化。结论 TNF‐α主要通过 TNFR1引起OPC的凋亡,抑制O PC分化。     

Nogo-A及其受体NgR对中枢神经系统损伤后修复的影响

Nogo-A是近年来在中枢神经系统髓鞘中发现的一种抑制中枢神经轴突生长的蛋白,NgR作为Nogo-A的细胞表面受体而被发现。NgR与Nogo-A结合后通过一系列信号转导过程发挥抑制中枢神经再生的作用,与中枢神经系统损伤后的修复有着密切关系。对于Nogo-A及其受体NgR的深入研究,将有助于推动中枢神经系统损伤的治疗。     

中枢神经系统OMgp的研究进展

中枢神经系统(CNS)损伤后轴突再生相当困难,长期以来,研究人员通过各种途径寻找其原因并试图攻克这一难关。少突胶质细胞髓鞘糖蛋白是最近发现的CNS髓鞘中的一种重要轴突抑制成分,是CNS髓鞘来源的轴突再生抑制因子之一,并因在体外培养时具有很强的轴突生长抑制作用而成为当前研究的热点。     

Research progress on the treatment of spinal cord injury with cellular transplantation

Spinal cord injury(SCI) is a severe trauma to the central nervous system(CNS). This article reviews recent advances in cellular transplantation to treat SCI. Transplanted cells can supply new neurons to replace injured ones, promote regeneration of axons and myelin sheath, modulate the inflammatory response, and thus promote recovery from traumatic injury of the CNS. Cellular transplantation is a promising potential method for the treatment of SCI.     

人发角蛋白对脊髓损伤大鼠少突胶质细胞增殖分化效应的影响

目的探讨体内可降解生物材料人发角蛋白(HHK)植入急性冲击性损伤脊髓后,对神经再生过程中少突胶质细胞增殖分化效应的影响。方法采用改制Ⅱ型NYU装置,在建立大鼠急性冲击性脊髓损伤模型基础上,将经过特殊处理后能在体内降解的HHK植入大鼠脊髓损伤部位,对植入后1、4、12、26周损伤脊髓组织进行光学和电镜结构观察。结果第1周时,损伤部位可见少突胶质细胞散在分布于大量浸润的炎症细胞中;第4周时,通过Mallory's磷乌酸苏木素染色,显示HHK周边呈层包绕的增生少突胶质细胞;第12和26周主要为神经再生和髓鞘重建过程,重建中的少突胶质细胞髓鞘内出现较大的空腔,髓鞘层状分离,并形成大小不一的髓鞘小体,重建髓鞘周边可见新生的少突胶质细胞。结论在急性冲击性脊髓损伤后神经再生过程中,HHK对少突胶质细胞的增殖分化及髓鞘再生修复有积极作用,为进一步综合研究HHK对脊髓损伤修复的作用提供了实验依据。     

人发角蛋白对脊髓损伤大鼠少突胶质细胞增殖分化效应的影响

目的 探讨体内可降解生物材料人发角蛋白(HHK)植入急性冲击性损伤脊髓后，对神经再生过程中少突胶质细胞增殖分化效应的影响。方法 采用改制Ⅱ型NYU装置，在建立大鼠急性冲击性脊髓损伤模型基础上，将经过特殊处理后能在体内降解的HHK植入大鼠脊髓损伤部位，对植入后1、4、12、26周损伤脊髓组织进行光学和电镜结构观察。结果 第1周时，损伤部位可见少突胶质细胞散在分布于大量浸润的炎症细胞中；第4周时，通过Mallory's磷乌酸苏木素染色，显示HHK周边呈层包绕的增生少突胶质细胞；第12和26周主要为神经再生和髓鞘重建过程。重建中的少突胶质细胞髓鞘内出现较大的空腔，髓鞘层状分离，并形成大小不一的髓鞘小体。重建髓鞘周边可见新生的少突胶质细胞。结论 在急性冲击性脊髓损伤后神经再生过程中，HHK对少突胶质细胞的增殖分化及髓鞘再生修复有积极作用。为进一步综合研究HHK对脊髓损伤修复的作用提供了实验依据。     

肿瘤坏死因子α在脊柱韧带细胞体外培养中的作用

目的检测肿瘤坏死因子 α(TNF α)在后纵韧带骨化中的表达及对体外培养后纵韧带细胞生物学性状的影响。方法切取手术后纵韧带骨化患者和非后纵韧带骨化患者非骨化部位的脊柱韧带,进行体外培养建立8个后纵韧带骨化细胞系(OL1～OL8)和7个非后纵韧带骨化细胞系(NL1～NL7)。检测体外培养条件下各细胞系的形态学特征及成骨特性。采用免疫组织化学法检测TNF α在正常及退变后纵韧带组织中的表达;分析不同浓度的重组人TNF α（rhTNF α）对两类细胞系分化方向的作用。结果①只有4个OL细胞系表达成骨细胞表型,其余细胞系均表达成纤维细胞表型;②免疫组织化学染色显示,TNF α在退变及成熟的骨化区均有表达,在正常及软骨化后纵韧带组织中无表达;③rhTNF α对各细胞系的作用不同,它可增强各细胞系的碱性磷酸酶（ALP）活性、DNA及胶原合成,能诱导所有OL细胞系分泌骨钙素（OC）,只有2个NL细胞系分泌较低水平OC。结论后纵韧带骨化患者脊柱韧带细胞体外培养可表达成骨细胞表型,TNF α在后纵韧带骨化发生中起着重要作用。