核酸疫苗的研究现状

核酸疫苗（nucleicacid vaccine）是指将含有编码某种抗原蛋白的外源基（DNA或RNA）序列质粒载体作为疫苗，直接导入到动物细胞内，通过宿主细胞的表达系统合成抗原蛋白，诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答，以达到预防和治疗疾病的目的。核酸疫苗又称为基因疫苗或裸DNA疫苗，核酸疫苗包括DNA疫苗和RNA疫苗，其中研究最多的是DNA疫苗。这种免疫称为核酸免疫、基因免疫、DNA介导的免疫以及遗传免疫等。许多研究者将不同病原的保护性抗原基因直接导入动物体内，引起特异性免疫应答，并已在一些疾病如流感、狂犬病、乙肝、艾滋病、牛疱疹病毒感染以及结核病和疟疾等取得初步结果。     

日本血吸虫大陆株副肌球蛋白全基因核酸疫苗诱生免疫应答的实验研究

目的初步研究日本血吸虫大陆株副肌球蛋白核酸疫苗在C57BL／6小鼠诱生的免疫应答特征。方法利用TRIzol方法抽提日本血吸虫大陆株成虫总RNA，并通过逆转录聚合酶链反应；扩增编码日本血吸虫大陆株副肌球蛋白（SjC97）的全基因cDNA，将其克隆入质粒表达载体（pcDNA／Amp）构建成日本血吸虫大陆株副肌球蛋白全基因核酸疫苗（pCMV－SjC97）；将其通过后腿胫前肌免疫C57BL／6小鼠，共免疫3次，每次间隔3周；利用酶联免疫吸附试验（ELISA）分析pCMV－SjC97免疫所诱生的特异性抗体IgG及IgG亚类，以及特异性抗体IgM及IgE。并初步分析了pCMV－SjC97免疫C57BL／6小鼠脾淋巴细胞抗原特异性体外增殖能力。结果pCMV－SjC97免疫能够诱生特异性抗体IgG及IgM；pCMV－SjC97诱生的抗体滴度与注射的DNA间存在一定的量-效关系；IgG亚类分析显示，pCMV-SjC97免疫主要诱生IgG2a和IgG2b亚类，未测到IgG1及IgG3亚类。PCMV-SjC97免疫能够诱导小鼠Th细胞激活。结论pCMV-SjC97核酸疫苗能够在C57BL／6小鼠诱生较强的体液免疫应答；pCMV-SjC97免疫主要诱生Th1型细胞免疫应答。     

影响核酸疫苗应用研究的若干问题

核酸疫苗又称基因疫苗或DNA疫苗，这种核酸既是载体又能在真核细胞中表达抗原，刺激机体产生特异而有效的免疫应答，尤其是能诱导产生具细     

核酸疫苗在寄生虫疾病防治中的应用

核酸疫苗(Nucleic acid vaccines)是指将编码某种抗原蛋白的外源基因(DNA或RNA)直接转移到动物体内，通过宿主表达系统合成抗原蛋白，诱导宿主对该抗原蛋白产生免疫应答，以达到预防和治疗疾病的目的。核酸疫苗包括DNA疫苗和RNA疫苗，目前研究较多的是DNA疫苗。由于核酸疫苗具有减毒和灭活疫苗不可比拟的优越性，正备受关注。     

非人灵长类动物模型在核酸疫苗研究中的应用及前景

非人灵长类是人类的近属动物，在核酸疫苗临床前试验中是理想的动物模型。核酸疫苗(Nucleic Acid Vaccines)也称为DNA疫苗或基因疫苗，是近年来快速发展的有很大前景的新一代疫苗，它是把带有编码抗原蛋白基因的真核表达载体直接注入机体，表达蛋白，从而诱发细胞和体液免疫，     

活体电穿孔导入法增强恶性疟原虫核酸疫苗免疫反应研究

目的 采用活体电穿孔免疫方法,研究恶性疟原虫DNA核酸疫苗不同免疫剂量对于动物免疫反应的影响,并对载体中CpG寡脱氧核苷酸基序的免疫刺激活性进行了初步探讨。方法 将恶性疟原虫多表位嵌合抗原M.RCAg-1基因克隆于真核表达载体VR1012中,使用电穿孔导入方法免疫小鼠,采用ELISA检测抗体效价、ELISPOT测定细胞因子分泌水平,探索基因疫苗最佳免疫剂量以及考察免疫反应类型。使用计算机分析恶性疟核酸疫苗中特殊CpG基序组成,实验验证基因疫苗中CpG基序的免疫刺激活性。结果 相同DNA免疫剂量下,电穿孔免疫法与单纯肌内注射免疫法相比较,小鼠血清IgG抗体效价提高118倍,且能显著诱导体内特异性Th1和Th2型细胞反应。电穿孔免疫小鼠血清可识别天然虫体抗原,抗体效价可达1：1200。恶性疟原虫核酸疫苗抗原DNA含有24个CpG免疫活性基序,可以有效的刺激人外周血单个核细胞（PBMCs）增殖与IL-6分泌。结论 活体电穿孔方法可以显著提高恶性疟原虫DNA疫苗体液免疫和细胞免疫水平。     

孕妇能接种疫苗吗?

疫苗分活疫苗和死疫苗两种。活疫苗是病毒经过处理后发生了变异的活病毒。这种活病毒接种到人体后,可在人体内生长繁殖,并能引起人体的免疫反应,毒性较低。死疫苗是经过处理的死菌或死病毒,进入人体不会在体内生长繁殖,但可引起人体的免疫反应,故对人体没有妨碍。在一般情况下,妇女是不接种疫苗的。但在长达10个月的妊娠过程中,有时免不了会遇到需要接种疫苗的情况。如被狂犬或可疑狂犬咬伤,就需注射狂犬疫苗;密切接触乙肝病人,或被含有乙肝病毒的血液污染的针头刺伤,便需注射乙肝疫苗。如果孕妇接种了活疫苗,有可能通过胎盘进入胎儿体内。…     

日本血吸虫大陆株副肌球蛋白全基因核酸疫苗诱生免疫应答的？…

目的 初步研究日本血吸虫大陆副肌球蛋白核酸疫苗在Ｃ５７ＢＬ／６小鼠诱生的免疫应答特征。方法 利用ＴＲｌｚｏｌ方法抽提日本血吸虫大陆株成虫总ＲＮＡ〈并通过逆转录聚合酶链反应；扩增编码日本血吸虫大陆株副肌球蛋白的全基因ｃＤＮＡ，将其克隆人质粒表达载体构建成日本血吸虫大陆株副肌球蛋白全基因核酸疫苗；将其通过后腿胫前肌免疫Ｃ５７ＢＬ／６小鼠，共免疫３次，每次间隔３周；利用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）分析     

核酸疫苗的研究进展(综述)

核酸疫苗又称ＤＮＡ疫苗或基因疫苗，是最近几年从基因治疗研究领域发展起来的一种全新疫苗，其组分为编码蛋白质抗原的双链环状重组表达质粒，它的出现被誉为第三次疫苗革命，通过肌肉注射等途径接种动物后，外源基因能在宿主细胞内表达相应抗原，通过抗原提呈细胞的加工、提呈、诱导免疫应答。 ｌ核酸疫苗的发现：Ｗｏｌｆｆ等（１９９０）将分别编码β－半乳糖苷酶、虫荧光素酶、氯霉素乙酰转移酶的 ＲＮＡ和 ＤＮＡ的表达载体注入小鼠骨骼肌后，这些基因都能在肌细胞内表达相应蛋白［１］。Ｗｉｌｌｉａｍｓ（１９９１）报道用基因枪将…     

中药免疫活性多糖作为疫苗佐剂的研究进展

中药活性多糖存在着普遍的免疫调节与促进作用。它作为生物效应调节剂（BRM），主要影响机体的网状内皮系统（RES）、巨噬细胞（MΦ）、淋巴细胞、NK细胞、补体系统以及RNA、DNA、蛋白质的合成和体内的 cAMP、cGMP的含量，增强诱生细胞因子和干扰素，最终可以促进抗体的生成。现结合新型疫苗佐剂的特点对中药活性多糖作为新型疫苗佐剂进行综述。     

乙型肝炎DNA疫苗研究进展

DNA疫苗也有基因疫苗、核酸疫苗、DNA免疫、基因免疫等各种名称和相关概念.有人将DNA疫苗称为第三代疫苗.第一代疫苗以Jenner用牛痘预防天花为代表,人类从此开始摆脱许多疾病的困扰.第二代疫苗是运用基因重组技术,以特定的基因表达产生的抗原作为疫苗,重组乙型肝炎疫苗就是典型例子.DNA疫苗则是将编码目的抗原的基因与载体重组以后,经不同途径将基因直接转入机体细胞内,利用宿主细胞内的表达加工机构合成抗原,从而激发体液免疫和细胞免疫.近年来,DNA疫苗在打破HBV慢性感染的免疫耐受方面取得了一定的进展,对乙型肝炎及HBV无症状携带状态的临床治疗提供了值得探索的新途径.     

泛素-结核抗原融合基因DNA疫苗诱导小鼠较强的细胞免疫应答

目的:构建结核杆菌ESAT6抗原DNA疫苗(pE)和泛素基因与ESAT6抗原基因融合的DNA疫苗(pUE).方法:分别将构建的DNA疫苗肌内注射免疫BALB/c雌性小鼠,检测小鼠的血清抗体(IgG、IgG1、IgG2a)、细胞因子(IFN-γ、IL-4)和细胞毒性T淋巴细胞反应(CTL),比较融合基因DNA疫苗和单基因DNA疫苗诱生免疫应答的强度.结果:pE组小鼠血清IgG水平高于pUE组(P＜0.01),但IgG2a/IgG1比值低于pUE组[(2.28±0.40) vs (3.87±0.60),P＜0.05].与pE组相比,pUE组小鼠IFN-γ分泌水平增高(P＜0.01),IL-4分泌水平下降(P＜0.01);pUE增强了CTL活性.提示融合基因DNA疫苗诱生的抗原特异的体液免疫应答不及单基因DNA疫苗,但其能诱导更强的细胞免疫应答.结论:泛素-ESAT6融合基因DNA疫苗对于防治结核病可能比单基因DNA疫苗更为有效.     

我国弓形虫病核酸疫苗研究概况

刚地弓形虫（简称弓形虫）呈世界性分布,哺乳动物及鸟类普遍易感.人类对弓形虫有较强的自然免疫力,感染后绝大多数无明显症状表现,或只出现亚急性弓形虫病.但在孕妇及免疫功能低下（如ADIS病、器官或组织移植后接受免疫抑制剂治疗的病人等）感染弓形虫后引起的危害严重.人体弓形虫感染日益受到关注,弓形虫病疫苗成为当前研究的热点.动物实验发现,弓形虫全虫疫苗,弓形虫特异抗原组分疫苗有预防弓形虫感染或降低感染度作用,但前可能会引起再感染,后的免疫保护效果较差.弓形虫病核酸疫苗克服了上述疫苗存在的不足,具有良好的开发应用前景.我国从上世纪90年代后期开始了弓形虫病核酸疫苗的研制,通过对表达保护性抗原蛋白基因进行重组,先后研制出弓形虫基因单价疫苗、复合疫苗和混合疫苗.动物实验证明部分疫苗具有良好的免疫预防效果.     

幽门螺杆菌UreB核酸疫苗的构建

目的:构建含幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)尿素酶B亚单位(UreB)基因的核酸疫苗.方法:抽提Hp标准菌株CCUG17874基因组DNA,应用PCR技术从基因组DNA扩增UreB基因,克隆入PUCmT载体,检测UreB基因序列.经过一系列酶切、连接反应将其克隆入真核表达载体pIRES,转入感受态大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,通过PCR和酶切反应进行鉴定.通过脂质体法将构建好的重组载体pIRES-UreB转染COS-7细胞,Western印迹分析检测pIRES-UreB表达UreB蛋白的免疫原性.结果:扩增出长约1 700 bp的UreB基因,与基因库Hp UreB序列一致,PCR和酶切鉴定结果证实成功构建了含UreB基因的Hp核酸疫苗pIRES-UreB,并且Western 印迹分析检测到特异性的蛋白条带.结论:构建了具有免疫反应性UreB基因的Hp核酸疫苗,为进一步探索其免疫作用奠定了基础.     

治疗性HBV DNA疫苗的研究及进展

HBV DNA疫苗是通过向体内递送编码HBV抗原的外源性重组质粒，刺激机体产生特异的体液免疫反应和细胞免疫反应，由于其能较好的诱发Th1型细胞介导的细胞毒反应，而且同蛋白质疫苗相比设计相对简单，生产高纯度产品所需成本更低，因此DNA疫苗成为对慢性乙肝进行免疫治疗的一种选择，它不仅可作为预防性疫苗，也可作为治疗性疫苗，在乙型肝炎预防和治疗中具有广阔的应用前景。     

DNA疫苗黏膜免疫的研究进展

DNA疫苗是一种控制感染性疾病的新制剂,目前大多数DNA疫苗是通过注射途径进行免疫,这种方法在黏膜上皮中很少产生免疫反应,而黏膜恰恰是病原体进行传播的主要部位。通过黏膜免疫能更有效地抵抗多种病原微生物感染。因此鉴于黏膜免疫的重要性,DNA疫苗黏膜免疫也越来越被人们所重视。本文主要对DNA疫苗黏膜免疫的研究进展作综述。     

抗弓形虫感染ROP2核酸疫苗的研究

目的研究弓形虫核酸疫苗，以用于弓形虫病的防治。方法根据ROP2基因序列，设计合成能表达ROP2完整蛋白基因的扩增引物，扩增ROP2靶基因并克隆于PUCm—T载体，然后再亚克隆于真核表达载体pe—DNA3质粒中，制备弓形虫pe—DNA3—ROP2核酸疫苗；应用裸pc—DNA3—ROP2免疫小鼠，通过免疫学指标的检测，评价小鼠的免疫应答反应，最后应用弓形虫RH株攻击实验，评价出该疫苗的有效保护率、安全性和在人类及畜类的应用价值。结果以ROP2基因为模板，PCR扩增出1.7kb DNA条带，与预想结果一致；将扩增DNA回收并成功的克隆了ROP2（PUCm—T—ROP2），然后亚克隆并构建了pe—DNA—ROP2重组体，通过酶切、PCR扩增和基因测序证明亚克隆的重组子正确，ROP2扩增基因包含了ROP2蛋白基因读码框内的完整序列；在应用疫苗免疫接种小鼠结果显示。疫苗接种能使小鼠产生强烈的细胞、体液免疫反应；攻击实验结果显示，实验组小鼠的存活时间明显延长。并且开始死亡时间明显延迟（P〈0.001），实验组9只小鼠中有1只长期存活；在实验的整个过程中，没有发现小鼠对免疫接种的毒性和异常反应。结论该疫苗免疫原作用强，具有很好的开发应用价值，目前可在动物群体中试验应用。     

乙型肝炎病毒的核酸疫苗研究进展

传统的乙型肝炎 (乙肝 )治疗主要是干扰素和核苷类似物 ,但仍存在许多缺点 ,而新的抗乙型肝炎的基因治疗手段反义RNA、ribozyme和dominantnegativemutants虽为乙肝的治疗提供了希望 ,但是在实际运用中仍存在许多问题。核酸疫苗技术的出现为乙型肝炎的治疗开辟了一条新的途径。核酸疫苗分为DNA疫苗、RNA疫苗。由于RNA疫苗容易降解 ,不易保存 ,所以目前研究的疫苗主要是DNA疫苗。DNA疫苗是指含有编码抗原的基因的真核表达质粒DNA ,经直接接种体内后 ,可被体细胞摄取、并转录翻译表达出相应抗原。它可通过不同途径刺激机体产生针对此…     

单纯疱疹病毒1型糖蛋白D核酸疫苗的构建及初步免疫观察

目的 构建用于防治单纯疱疹的核酸疫苗并观察其免疫效果。方法 用PCR反应，从HSV-F株基因组DNA中扩增出gD蛋白的全部编码序列，将其插入pcDNA3.1（ ）的PCMV下游，构建HSV gD核酸疫苗，并用酶切分析和测序鉴定；通过中和试验、ELISA方法和攻击试验检测是用pLy-D三次肌肉接种小鼠的免疫效果。结果 经鉴定证实了HSV gD核酸疫苗pLy-D的构建，实验小鼠产生了对HSV-1特异性的抗体（抗体滴度：ELISA法1：203，中和试验法1：37）。并经受了HSY-1病毒的攻击（存活率：70%）。结论 成功构建出了HSV gD核酸疫苗pLy-D，用其接种小鼠可以诱导产生特异性免疫反应，并具有良好的保护作用。     

乙肝病毒Core基因区DNA疫苗免疫原性的研究

ＤＮＡ疫苗的突出优点之一是目的基因进入机体后的表达产物属于内源性抗原物质，后者主要通过ＭＨＣ－Ⅰ类途径激发机体的免疫反应，其中特异性细胞毒性Ｔ细胞（ＣＴＬ）反应尤为显著。慢性乙型肝炎患者和乙肝病毒（ＨＢＶ）慢性携带者针对ＨＢＶ的特异性ＣＴＬ反应明显低...