Sirtuin-1的生物学功能的研究进展

正哺乳动物细胞Sirtuin1是一种依赖于烟酰胺腺苷二核苷酸(NAD+)的去乙酰化酶,与酵母细胞中沉默信息调节因子SIR2同源,都可以参与生物体物质代谢和衰老的调节,Sirtuin-1在哺乳动物体内通过其去乙酰化活性,进而参与生物体内DNA的损伤修复、基因的转录调控、细胞凋亡、代谢及衰老等生物过程。本文主要阐述Sirtuin-1作用的生物学机制及其研究进展。1 Sirtuins家族概述Sirtuins广泛表达于哺乳动物体内,且含有高度保     

DNA甲基化

DNA甲基化是指甲基基团与DNA的CpG二核苷酸的胞嘧啶核苷共价结合,它对哺乳动物基因及胚胎的正常发育具有重要意义,但也给基因带来额外负担。肿瘤细胞在整体低甲基化同时伴某些特殊部位的超甲基化使原来正常的甲基化成份频繁破坏,甲基化发生在肿瘤抑制基因的启动子区时将抑制该基因从而使细胞正常生长失控或导致突变。DNA甲基化在DNA修复和基因稳定性方面都有作用,DNA甲基转移酶家族的发现在甲基化研究领域开辟了一个新时期。     

影响外源DNA导入哺乳动物细胞的相关因素研究

目的：建立适合本实验室的标准化转染方法。方法：采用磷酸钙－DNA共沉淀转化法将多组重组质粒导入HeLa细胞，观察其转化效率的相关影响因素。结果：待转化的细胞应为单层略稀疏的对数生长期细胞，重组质粒DNA的浓度为8μg/100mL-10μg/100mL培养瓶，转化时间为10h,G418是在转化后24h加入，浓度为200μg/mL，结论：重组质粒DNA导入哺乳动物细胞方法的标准经为外源基因在哺乳动物细胞中的高效表达创造有利条件。     

DNA甲基化

DNA甲基化是指甲基基团与DNA的CpG二核苷酸的胞嘧啶核苷共价结合，它对哺乳动物基因及胚胎的正常发育具有重要意义，但也给基因带来额外负担。肿瘤细胞在整体低甲基化同时伴某些特殊部位的起甲基化使原来正常的甲基化成份频繁破坏，甲基化发生在肿瘤抑制基因的启动子区时将抑制剂基因从而使细胞正常生长失控或导致突变。DNA甲基化在DNA修复和基因稳定性方面都有作用，DNA甲基转移酶家族的发现在甲基化研究领域开辟了一个新时期。     

甲基化CpG结合蛋白2在肿瘤发生中的作用研究

表观遗传学主要从基因组修饰的角度来研究基因表达的调控机制,其中最具代表性的就是DNA甲基化,这也是目前胚胎学、肿瘤生物学关注热点。在哺乳动物中,DNA甲基化主要发生在二核苷酸胞嘧啶（CpG）第五位碳原子上,即5-甲基胞嘧啶（5-mC）。甲基化的CpG岛可产生阳性信号导致相关基因沉默。在不同组织或细胞不同发育阶段,基因组DNA上各CpG位点甲基化状态差异构成了基因组DNA甲基化谱,异常DNA甲基化会导致肿瘤发生。     

甲基化CpG结合蛋白(MeCPs)在肿瘤表遗传学研究中的进展

肿瘤是严重威胁人类健康的疾病之一，近年来大量的研究表明：肿瘤的发生不但存在遗传学上的改变，而且存在表遗传学的改变。表遗传学的改变主要包括DNA甲基化和组蛋白修饰。在哺乳动物中，DNA甲基化是指在DNA甲基化转移酶催化下，以孓腺苷甲硫氨酸（SAM）为甲基化供体，将甲基转移到特定碱基的过程。在人类，DNA甲基化主要发生在CpG二核苷酸上，形成5-甲基胞嘧啶（5mC），以甲基CpG（mCpG）形式出现。研究表明：DNA甲基化与基因表达沉默密切相关。     

切除修复交叉互补基因1的研究进展

核苷酸切除修复（NER）是哺乳动物细胞DNA修复的主要途径,切除修复交叉互补基因1（ERCCl）在核苷酸切除修复过程中起着关键作用。最近,很多研究表明它的表达与肺癌、卵巢癌对铂类药物的敏感性有密切关系。其表达对铂类药物的应用起到一定的指导作用。     

乳腺癌易感蛋白2的结构和功能

背景乳腺癌易感蛋白2(breast cancer susceptibility protein 2,BRCA2)是由乳腺癌易感基因2编码的一种在维持哺乳动物细胞染色体稳定及DNA损伤生物应答中发挥重要作用的肿瘤抑制因子.许多研究表明BRCA2蛋白与遗传性乳腺癌、卵巢癌及范康尼氏贫血症的发生具有密切关系,猜测其与双链DNA损伤修复有关,但具体作用模型与机制仍不清楚.目的回顾关于BRCA2蛋白结构与DNA损伤修复的研究,明确BRCA2蛋白在双链DNA损伤修复中的作用机制.研究选择选择关于BRCA2蛋白及DNA损伤修复的文献.数据来源进行全面的检索,检索手段包括电子检索、手工检索及个人通信等.数据提取对检索到的BRCA2蛋白及DNA损伤修复的相关研究文章信息进行综述.主要观察指标BRCA2蛋白的结构及其在DNA损伤修复中的作用模型与机制.结果BRCA2蛋白在肿瘤抑制过程中行使重要功能,其C末端DBD中的DNA结合活性与BRC模体中的RAD51蛋白结合活性在双链DNA损伤修复的同源重组过程中起着直接作用.结论BRCA2蛋白在双链DNA损伤修复中发挥重要作用,但其具体过程与整个信号通路仍需进一步研究证实,其有望开发为治疗与DNA损伤相关疾病的新靶点,为其预防康复提供理论依据.     

线粒体DNA与细胞癌变关系的研究

研究表明 ,外源性遗传物质如 DNA病毒或 RNA病毒在细胞基因组中整合能诱导细胞恶性转化。但作为哺乳动物细胞唯一核外基因组的线粒体 DNA( mt DNA) ,是否也具有类似于肿瘤病毒那样的活性呢 ?关于此问题的研究已从理论上进行了大胆的推测 ,认为线粒体这一最容易受损伤的细胞器 ,它所释放的遗传物质有可能具有潜在的致癌性。但此观点尚缺乏充分的实验证据。为了探讨 mt DNA与细胞癌变的关系 ,本实验采用地高辛 ( DIG)标记的人 mt D-NA探针 ,对 6株人癌细胞系和 1例原代培养人皮肤成纤维细胞的染色体或间期细胞核进行了荧光原位杂交( …     

正常核型急性髓系白血病患者BAALC基因的表达和临床意义

BAALC(脑和急性髓系白血病·胞质)基因定位于染色体8q22.3,其DNA序列和表达在哺乳动物中高度保守,主要表达在神经外胚层来源的组织及造血前体细胞中,成熟的骨髓和外周血单个核细胞不表达,编码的蛋白不与任何已知的蛋白或功能域同源,其功能尚不清楚.     

人分化抑制因子3的研究进展

2.南京军区南京总医院解放军临床检分化抑制因子,又称DNA结合抑制因子（Inhibitors of differentiation/DNA binding,Id）属于螺旋-环-螺旋（HLH）转录因子家族成员之一,对碱性HLH（bHLH）转录因子活性起负调节作用。哺乳动物细胞含四种Id分子（Id1-Id4）。Id3,作为血清诱导的立即早期基因1991年第一次在小鼠成纤维细     

Toll受体9对配体的识别及信号传导的研究进展

Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)是一类重要的模式识别受体,在识别病原微生物方面具有重要作用。到目前为止,TLRs在哺乳动物的身上共发现了13种,即TLR1～TLR13[1],其中TLR9识别的配体主要是细菌和病毒的DNA。本文现就近     

乳腺癌易感蛋白2的结构和功能

背景：乳腺癌易感蛋白2(breast cancer susceptibility protein 2，BRCA2)是由乳腺癌易感基因2编码的一种在维持哺乳动物细胞染色体稳定及DNA损伤生物应答中发挥重要作用的肿瘤抑制因子。许多研究表明：BRCA2蛋白与遗传性乳腺癌、卵巢癌及范康尼氏贫血症的发生具有密切关系，猜测其与双链DNA损伤修复有关，但具体作用模型与机制仍不清楚。目的：回顾关于BRCA2蛋白结构与DNA损伤修复的研究，明确BRCA2蛋白在双链DNA损伤修复中的作用机制。研究选择：选择关于BRCA2蛋白及DNA损伤修复的文献。数据来源：进行全面的检索，检索手段包括电子检索、手工检索及个人通信等。数据提取：对检索到的BRCA2蛋白及DNA损伤修复的相关研究文章信息进行综述。主要观察指标：BRCA2蛋白的结构及其在DNA损伤修复中的作用模型与机制。结果：BRCA2蛋白在肿瘤抑制过程中行使重要功能，其C末端DBD中的DNA结合活性与BRC模体中的RAD51蛋白结合活性在双链DNA损伤修复的同源重组过程中起着直接作用。结论：BRCA2蛋白在双链DNA损伤修复中发挥重要作用，但其具体过程与整个信号通路仍需进一步研究证实，其有望开发为治疗与DNA损伤相关疾病的新靶点，为其预防康复提供理论依据。     

晚期氧化蛋白产物模拟表位的初步研究

目的利用噬菌体展示肽库筛选技术获得模拟人晚期氧化蛋白产物（advanced oxidation protein products,AOPP）表位的序列,探索该表位的分布与表达。方法以抗晚期氧化蛋白产物多克隆抗体为靶,对噬菌体随机12肽库进行免疫亲和筛选,ELISA鉴定阳性噬菌体克隆特异性;对阳性克隆进行DNA测序并推导其氨基酸序列,利用生物信息学技术检索其分布与相似性。结果经3轮亲和筛选获得18株与靶分子特异结合的阳性噬菌体克隆,阳性率为62.07%。竞争ELISA结果表明,AOPP可有效抑制阳性噬菌体克隆与抗体结合,其中对No.6克隆的IC50达到0.2ug/ml,提示其能模拟AOPP表位。经DNA测序并推导氨基酸序列,得到LXDMLXD保守序列（X为任意氨基酸）;发现该序列不存在于正常人与哺乳动物的蛋白分子,但与某些真菌及寄生虫蛋白分子有同源性。结论通过噬菌体肽库筛选技术获得模拟AOPP表位并具良好抗原性的短肽序列;证实该结构不存在于正常人与哺乳动物蛋白分子,正如AOPP并非正常组织蛋白。     

重编程的机制研究进展

<正>旧的观点认为发育是不可逆的过程,而从分化的供者细胞克隆出哺乳动物驳斥了这个观点。现已证明卵母细胞能重编程供者核到胚胎状态,并发育成一个新的生物。未来将研究替代核移植的重编程方法,不使用卵母细胞,在培养皿中重编程。本文综述了重编程的几种方法,包括核移植、细胞融合、细胞提取物、培养诱导和分子介导重编程的方法,对重编程的机制进行了探讨。1在哺乳动物发育中的表观重编程的机制DNA甲基化是基因组主要的表观修饰,是调节基因组功     

叉头转录因子-1在神经系统疾病的相关研究

叉头（FOx）转录因子是2000年命名的一个新的蛋白质家族,其中研究最深入的是。亚家族（FoxO）。FoxO是长寿基因DAF．16（DauerFormation-16）在哺乳动物中最相近的同源基因,而DAF．16最早发现于秀丽隐形线虫。FoxO蛋白因其特色的“又头框”DNA结合结构域而命名。     

高迁移率族蛋白B1与自身免疫性疾病研究进展

高迁移率族蛋白B1（high mobility group box-1protein,HMGB1）是哺乳动物中参与染色质结构和转录调控的DNA结合非组蛋白。最近作为一种引发宿主防御和组织修复的改变固有免疫系统的危险信号被重新认识。本研究将对HMGB1的分子结构及信号调节机制,及其在自身免疫性疾病发生发展中的作用加以综述。     

ATP、PARP、Caspase-3与细胞凋亡和胀亡

ATP、PARP和Caspase-3与凋亡和胀亡的关系密切。ATP是生物体储存能量的主要形式,也是生物体获取能量的主要来源。ATP水平可以决定细胞的死亡方式,若胞内ATP丰富,则走向凋亡;若胞内ATP缺乏,则走向胀亡。原来走向胀亡的细胞在补充ATP后会转向凋亡。多聚ADP核糖聚合酶（poly ADP-ribose polymerase,PARP）是一类存在于多数真核细胞中的蛋白质翻译后修饰酶。PARP具有保持染色体结构完整、参与DNA复制和转录的功能,在维持基因组稳定和细胞死亡过程中发挥重要作用。小量DNA损伤时,PARP对DNA断裂起修复作用;大量DNA断裂时,PARP的过度活化消耗细胞内的NAD＋,降低细胞内ATP水平,最终会导致细胞死亡。Caspase-3又称半胱氨酸蛋白酶3（Cystein-proteaseP-3,CPP-3）。Caspase-3是哺乳动物细胞凋亡中的关键蛋白酶,处于凋亡级联反应通路的核心位置,被称为死亡蛋白酶。该文就这三者与细胞凋亡和胀忘的关系做一综述。     

胰腺神经内分泌肿瘤病因学及基因分型

大量研究发现, 染色体重塑相关基因(ATRX/DAXX、ARID1A)、MEN-1基因、DNA损伤修复基因(MUTYH)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路相关基因的异常改变共同参与了无功能性胰腺神经内分泌肿瘤(pancreatic neuroendocrine neoplasia, pNEN)的发生发展。作为功能性pNEN的代表, 胰岛素瘤常出现拷贝数异常, 伴随转录因子YY1的热点突变。驱动基因突变、DNA损伤修复、DNA甲基化、组蛋白修饰、染色体重塑和端粒替代延长机制激活等表观遗传学的异常改变以及相关信号通路的异常激活协同引起pNEN增殖和侵袭。这些分子机制及基因分型具有十分重要的意义, 可为临床个体化综合治疗和预后判断提供依据, 使更多的pNEN患者从精准医学中获益。     

HMGB1与临床疾病关系的研究进展

高迁移率族蛋白是一种高度保守的DNA 结合蛋白,广泛存在于哺乳动物体内.在核内参与核小体的构建和稳定,调节基因的转录.在核外可介导炎症反应、促进细胞分化及肿瘤生长等.其释放途径主要为主动分泌和被动释放,通过与RAGE、TLR2、TLR4等受体结合,激活相应信号传导途径.近来研究发现,HMGB1与脓毒症、肿瘤、风湿免疫、动脉粥样硬化、缺血再灌注损伤等多种疾病密切相关,本文就此作一综述.