细胞凋亡与Alzheimer病的关系

目的建立Alzheimer病(AD)大鼠动物模型,探讨细胞凋亡与AD发生发展的关系.方法大鼠以氯化铝溶液灌胃制备AD动物模型,通过Y形迷宫实验,判断AD动物模型是否建立成功.TUNEL法原位检测动物模型脑细胞凋亡情况.结果迷宫实验发现灌铝大鼠短期学习记忆能力和灌铝前及对照组相比明显下降(P＜0.001).TUNEL法检测显示AD动物模型脑细胞凋亡明显增多,但海马各区之间未见显著差别.结论通过氯化铝灌胃可建立较为简便可行的AD动物模型;细胞凋亡在AD神经退行性变方面可能起重要作用.     

DNA末端标记法检测番荔枝内酯诱导人乳癌细胞凋亡

目的：用ＤＮＡ末端标记法（ＴＵＮＥＬ法）研究番荔枝内酯凋亡诱导作用，以及ＴＵＮＥＬ法用于凋亡检测和抗癌药所致凋亡的探讨。方法：用台盼蓝拒染法，ＴＵＮＥＬ法，ＤＮＡ凝胶电泳，电镜等技术，研究番荔枝内酯对具有多药抗药性的耐阿霉素的人乳癌ＭＣＦ７／ＡＤＲ细胞的生长抑制作用及凋亡诱导。结果：电镜下观察到细胞染色质浓缩，聚集核膜下，核碎裂等典型的凋亡细胞形态学改变。凝胶电泳可见明显的ＤＮＡ梯形条带。ＴＵＮＥＬ法检测的凋亡细胞明显多于形态学改变的凋亡细胞。结论：番荔枝内酯对人乳癌ＭＣＦ７／ＡＤＲ细胞具有明显生长抑制作用，半数抑制浓度（ＩＣ５０）为１０．５ｍｇ／Ｌ，并诱导其凋亡。ＴＵＮＥＬ法可配合其他方法用于检测抗癌药诱导的人癌细胞凋亡及抗癌药的评价。     

大鼠癫癎持续状态后海马神经元凋亡的研究

目的：通过美解眠诱导鼠癫癎持续状态后观察海马神经元的细胞凋亡现象。　材料和方法：给ＳＤ大鼠腹腔注射美解眠（２０ ｍ ｇ／ｋｇ）,２４ ｈ 后在光镜和电镜下观察大鼠海马神经元的形态学改变,并以ＤＮＡ 末端标记法（ＴＵＮＥＬ）检测海马神经元的凋亡。　结果：ＳＤ大鼠注射美解眠后出现典型的癫癎发作,光镜和电镜下可观察到海马神经元有典型的细胞凋亡现象,包括细胞体皱缩、胞质浓缩、染色质凝聚成块状、有边集现象, 同时有少量凋亡小体形成。ＴＵＮＥＬ检测发现海马结构内可见ＴＵＮＥＬ染色阳性细胞,其分布不均匀,有区域性差异,以ＣＡ３ 区最为多见。致癎组海马ＣＡ３ 区ＴＵＮＥＬ阳性细胞数的平均百分率（７５．１４％ ）与对照组（９．４％ ）相比有极显著性差异（Ｐ＜ ０．０１）。　结论：癫癎发作可诱导大鼠海马神经元发生凋亡。     

大肠癌和腺瘤细胞凋亡的特征和意义

目的　观察大肠癌和腺瘤组织细胞凋亡的特征,探讨细胞凋亡和增殖在大肠癌和腺瘤组织中的意义。方法　采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的ｄＵＴＰ缺口末端标记（ＴＵＮＥＬ）法检测凋亡细胞,以凋亡细胞百分率作为凋亡指数（Ａｐｏｐｔｉｃｉｎｄｅｘ,ＡＩ）对１５例大肠癌、１０例腺瘤、５例正常大肠粘膜进行凋亡细胞原位观察。结果　ＴＵＮＥＬ阳性物质位于细胞核内,常聚集于核膜附近,呈新月状和块状。大肠正常粘膜ＴＵＮＥＬ阳性细胞全部位于表层上皮中,数量很少（ＡＩ＝１．７４±１．０１）,腺瘤组织中ＴＵＮＥＬ阳性细胞相对较多（ＡＩ＝３３．４６±１１．３９）,大肠癌组织ＴＵＮＥＬ阳性细胞散在分布,与腺瘤相比数量明显减少（ＡＩ＝１１．０８±４．２７）（Ｐ＜０．０１）。结合增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）实验结果可见,腺瘤组织中ＡＩ,ＰＩ（ＰＩ＝２７．２４±７．６６）均高,而大肠癌组织中则以细胞增殖（ＰＩ＝５４．１８±１０．４１）占优势。结论　大肠肿瘤癌变过程中不仅存在活跃的细胞增殖,而且有大量的细胞凋亡,因而增加了粘膜上皮的不稳定性,高的增殖能力通过选择而占优势,从而导致癌变的发生。     

缺血性急性肾功能衰竭与细胞凋亡

目的：探讨缺血性急性肾功能衰竭（ＩＡＲＦ）与细胞凋亡的关系以及褪黑素（ＭＥＬ）对ＩＡＲＦ的保护作用。方法：用无损伤动脉夹钳夹大鼠双侧肾蒂４５ｍｉｎ再灌注２４ｈ的手术方法制成ＩＡＲＦ动物模型,观察不同剂量ＭＥＬ预防用药对ＩＡＲＦ大鼠血尿素氮（ＢＵＮ）、肌酐（Ｃｒ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ Ｐｘ）、丙二醛（ＭＤＡ）的影响以及对肾小管细胞凋亡的影响。结果：ＩＡＲＦ大鼠ＢＵＮ,Ｃｒ升高,ＳＯＤ,ＧＳＨ Ｐｘ下降,ＭＤＡ上升。形态学显示肾小管细胞出现细胞凋亡。ＭＥＬ能不同程度地逆转上述改变,防止或减少凋亡发生,效应呈剂量依赖性。结论：氧自由基（ＯＦＲ）是ＩＡＲＦ的主要发生机制之一,ＩＡＲＦ确实存在着细胞凋亡的病理改变。ＭＥＬ预防用药能减轻ＩＡＲＦ,减少细胞凋亡的发生。     

哮喘豚鼠肺组织嗜酸性粒细胞Fas表达及药物的影响

目的：研究哮喘时嗜酸性粒细胞凋亡与Ｆａｓ表达的关系及药物地它们的影响。方法：应用地塞米松（ＤＭ）、雷公藤甲素及氨茶碱（ＡＭ）干预哮喘豚鼠,以ＴＵＮＥＬ法检测细胞凋亡,以ＲＴ－ＰＣＲ及原位杂交检测ＦａｓｍＲＮＡ表达。结果：哮喘组Ｅｏｓ凋亡率较正常对照组显著降低。应用ＤＭ、ＴＰ、ＡＭ后均显著增加。正常豚鼠Ｅｏｓ可检测到ＦａｓｍＲＮＡ表达,不同Ｅｏｓ表达差异不显著。哮喘组ＦａｓｍＲＮＡ明显减少,以低密度     

原位细胞凋亡的荧光,酶免疫化学法检测实验研究

用荧光法和酶免疫化学法末端转移酶介导的ｄＵＴＰ缺口末端标记（ＴＵＮＥＬ）实验分别对小鼠心肌组织、人慢性肝炎肝组织和内膜增生的小型猪血管组织进行了细胞凋亡检测。结果显示：①心肌无凋亡细胞发现，肝组织和血管内膜组织有散在的０～１２个细胞／２５倍物镜视野的细胞标记阳性（凋亡）。②酶免疫化学法ＴＵＮＥＬ实验的检测敏感度较荧光法ＴＵＮＥＬ实验的敏感度高。③过高的末端转移酶可导致假阳性的产生，对荧光法ＴＵＮＥＬ实验，末端转移酶／标记缓冲液比例应为１∶９～１９，而对酶免疫化学法则以１∶５９为好     

糖尿病大鼠视网膜毛细血管细胞凋亡 --TUNEL法研究

目的 确定早期糖病视网膜病变（糖网病）大鼠视网膜毛细血管细胞凋亡并观察凋亡特征。方法 方法 选成年ｗｉｓｔａｒ大鼠４０只,随机分成正常对照（ＣＯＮ）、糖尿病１月（ＤＭ１）、３月（ＤＭ３）及６月（ＤＭ６）组。采用链脲佐菌素腹腔内注射诱发大鼠糖尿病。取各组大鼠视网膜制备血管铺片,ＴＵＮＥＬ法标记,光镜观察。结果：ＴＵＮＥＬ法标记的阳性周细胞核出现于ＤＭ３和ＤＭ６组,而内皮细胞见于ＤＭ６组。ＣＯＮ和ＤＭ     

大鼠局灶性脑缺血后─氧化氮合酶活性与细胞凋亡关系

目的：了解局灶性脑缺血再灌注过程中一氧化氮合酶（ＮＯＳ　）变化与脑细胞凋亡的关系，探索阻断脑细胞凋亡的时间窗。方法：用线栓　法建立局灶性脑缺血模型，大脑中动脉阻塞（ＭＣＡＯ）的时间分别为１５、３０、６０、９０、１２０　ｍｉｎ　，再灌注２４　ｈ。用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶（ＮＡＤＰＨ－ｄ）组化法，检测局灶性脑　缺血再灌注后缺血中心区（顶叶皮层和尾壳核）ＮＯＳ活性变化。用苏木精－伊红和ＴＵＮＥＬ染色法　检测缺血中心区脑细胞凋亡情况。结果：ＮＯＳ阳性神经元数于３０　ｍｉｎ时增多　最显著，９０～１２０　ｍｉｎ时急剧减少。各组凋亡细胞数随缺血时间延长而增多。结　论：局灶性脑缺血再灌注过程中神经型ＮＯＳ（ｎＮＯＳ）对缺血早期的脑损伤尤其是细胞　凋亡起主要作用。     

DNA末端标记法检测番荔枝内酯诱导人乳癌细胞凋亡

用ＤＮＡ末端法研究番荔枝内酯凋亡诱导作用，以及ＴＵＮＥＬ法用于凋亡检测和抗癌药所致凋亡的探讨。方法：用台盼蓝拒染法，ＴＵＮＥＬ法，ＤＮＡ凝胶电泳，电镜等技术，研究番荔枝内酯对具有多药抗药性的耐阿霉素的人乳癌ＭＣＦ－７／ＡＤＲ细胞的生长抑制作用及凋亡诱导。结果：电镜下观察到细胞染色质浓缩，聚集核膜下，核碎裂等典型的凋亡细胞形态学改变。     

移植静脉平滑肌细胞凋亡及相关基因表达与增殖关系的动态研究

目的 探讨移植静脉狭窄发生机制。方法 建立１００只Ｗｉｓｔａｒ大鼠自体颈静脉移植与肾下腹主动脉模型。采用透射电镜、原位ＤＮＡ片断末端标记（ＴＵＮＥＬ）和免疫组织化学法、检测移植静脉血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣｓ）凋亡及相关基因ｂａｌ－２、ｂａｘ蛋白和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达。结果 术后１￣８周,移植静脉ＴＵＮＥＬ及ＰＣＮＡ阳性ＶＳＭＣｓ多于对照静脉（Ｐ〈０．０１）;术后１￣２周为ＴＵＮＥＬ及Ｐ     

雷公藤对哮喘豚鼠嗜酸性细胞凋亡及IL-5和GM-CSF mRNA表达的研究

目的：探讨雷公藤对哮喘豚鼠酸性细胞（Ｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌ,Ｅｏｓ）凋亡及与白介素－５（ＩＬ－５）,粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）ｍＲＮＡ表达的作用。方法：实验豚鼠分为哮喘组,雷公藤治疗组和下沉对照组,采用原位细胞凋亡（ＴＵＮＥＬ）和原位杂交技术分别检测豚鼠支气管肺泡灌洗涤中的Ｅｏｓ的凋亡率和肺组织ＩＬ－５,ＧＭ－ＣＳＦ ｍＲＮＡ的表达强度均显著高于处理和对照组,哮喘组ＢＡＬＦ中Ｅｏｓ     

四种检测细胞凋亡方法的比较

目的：比较４种细胞凋恨检测方法的优缺点。方法：以ｂｕｆａｌｉｎ诱导ＨＬ６０细胞凋亡为例,选择４例方法即电镜（ＥＭ）、ＤＮＡ电泳、原位缺口标记法（ＴＵＮＥＬ）和流式细胞术（ＦＣＭ）检测细胞凋亡,并对凋亡率进行了比较。结果：ＥＭ和ＤＮＡ电泳技术是定性说明凋亡的可靠方法,而ＴＵＮＥＬ和ＦＣＭ擅长于定量检测凋亡细胞,ＥＭ、ＴＵＮＥＬ和ＦＣＭ检测的凋亡率具有显相关性。结论：研究细胞凋亡时宜选用既特异、灵敏     

实验性变态反应性神经炎周围神经浸润CD4（＋）T细胞的凋亡

为探讨实验性变态反应性神经炎（ＥＡＮ）中周围神经浸润ＣＤ４（＋）Ｔ细胞的凋亡,应用免疫组织化学和原位末端标记法动态检测不同发病阶段ＥＡＮ大鼠坐骨神经浸润ＣＤ４（＋）Ｔ细胞于免疫后第１８ｄ出现,在第２２ｄ达高峰后下降,第３０ｄ基本消失。原位末端标记法证实凋亡ＣＤ４（＋）Ｔ细胞中存在断裂的ＤＮＡ片段。提示ＣＤ４（＋）Ｔ细胞亡是ＥＡＮ浸润ＣＤ（＋）Ｔ细胞的重要清除机制。     

NAC对大鼠I/R心肌细胞凋亡及bad、bak、bax的影响

采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的带荧光的ｄＵＴＰ缺口末端标记（ＴＵＥＮＬ）法和免疫组化方法对Ｎ－Ｌ酰基－Ｌ－半胱氨酸（ＮＡＣ）对大鼠心肌缺血４５ｍｉｎ再灌注２４ｈ心肌细胞凋亡的影响及其对凋亡促进基因ｂａｄ、ｂａｋ和ｂａｘ蛋白表达的调节进行研究。结果：（１）ＮＡＣ加ＩＲ组ＴＵＮＥＬ法阳性心肌细胞核数量及阳性心肌细胞核占总心肌细胞的百分比均明显少于ＩＲ组（Ｐ〈０．０５）；（２）ＮＡＣ加ＩＲ组表达ｂａｄ、     

恶性淋巴瘤中细胞凋亡与增殖的特征及意义

观察恶性淋巴瘤中细胞凋亡与细胞殖的特征，探讨其发生机制。用ＴＵＮＥＬ法检测凋亡细胞，观察其特征，以每平方毫米面积中的凋亡细胞数作为凋亡指数（ａｐｏｐｔｏｔｉｃ ｉｎｄｅｘ，ＡＩ）；用枸橼酸－微波－ＡＢＣ法检测ＰＣＮＡ表达并以ＰＣＮＡ阳性细胞百分率作为增殖指数（ＰＣＮＡ ｉｎｄｅｘ，ＰＩ）。结果：与反应性增生相比，在大多数淋巴瘤类型中ＡＩ显著减小，ＰＩ显著增大，而ＡＩ／ＰＩ在所有淋巴瘤类型中均显著减     

细胞凋亡在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤中的作用

目的：研究细胞凋亡在新生儿缺氧缺血性脑损伤（ＨＩＢＤ）中的作用。方法：结扎新生７ｄ龄大鼠左颈总动脉后吸８％浓度氧２ｈ制成ＨＩＢＤ模型,应用苏木素－伊红（ＨＥ）染色、原位缺口末端标记（ＴＵＮＥＬ）、ＤＮＡ电泳分析综合研究新生大鼠ＨＩＢＤ后脑细胞的死亡形式。结果：缺氧缺血（ＨＩ）后０ｈＨＥ染色即发现左侧纹状体有一些神经元呈凋亡早期的改变;ＨＩ后１８ｈＴＵＮＥＬ染色在左脑皮质及纹状体见到阳性凋亡细胞;ＨＩ后２ｄＤＮＡ电泳见到ＤＮＡ梯形带;ＨＩ后２～３ｄ凋亡达高峰;持续至少２１ｄ。结论：３种方法均表明细胞凋亡为ＨＩＢＤ后神经元的主要死亡形式,也是加重脑损伤的一个因素。     

幽门螺杆菌对胃上皮细胞的凋亡作用

目的 研究幽门螺杆菌（Ｈｐ）对胃黏膜上皮细胞的凋亡作用。方法 １０例Ｈｐ阴性的非溃疡性消化不良（ＮＵＤ）患者,２５例Ｈｐ相关性胃炎患者,以ＴＵＮＥＬ法进行细胞凋亡的检测,免疫组织化学法检测凋亡调控蛋白Ｂｃｌ－２,Ｂａｘ,Ｂａｋ等的表达。结果与Ｈｐ阴性的ＮＵＤ患者相比,Ｈｐ相关性胃炎患者胃黏膜上皮细胞的凋亡指数（ＡＩ）明显增加（１９．６６％υｓ３．０３％,Ｐ〈０．０１）,其促凋亡蛋白Ｂａｋ,Ｂａｘ蛋     

一氧化氮诱导VSMC凋亡观察

目的研究动脉粥样硬化和冠脉气囊成形术后再狭窄中血管平滑肌细胞数量异常增多的机制,并初步探讨ＮＯ诱导血管平滑肌细胞凋亡的作用。材料和方法　以ＳＮＡＰ作为ＮＯ供体,采用ＨＥ,ＴＵＮＥＬ,荧光双染后光镜观察以及电镜、流式细胞术、细胞ＤＮＡ的琼脂糖凝胶电泳对ＳＮＡＰ作用下的细胞凋亡进行鉴定和检测。结果　观察发现, ０．４ｍｍｏｌ／Ｌ　 ＳＮＡＰ作用 ８－１０ ｈ即能明显地诱导培养的血管平滑肌细胞凋亡。结论 ＳＮＡＰ以浓度依赖方式诱导血管平滑肌细胞凋亡;细胞爬片的ＨＥ染色结合ＴＵＮＥＬ标记是检测凋亡的较为准确且简单的方法。     

不均称型胎儿宫内生长迟缓动物模型的建立及其母鼠胎盘一氧化氮等含量的变化

为探索不均称型胎儿宫内生长迟缓动物模型的建立及探讨一氧化氮（ＮＯ）、内皮素（ＥＴ）在大鼠ＩＵ－ＧＲ发病中的作用,将ＳＤ系雌性大鼠分为３ 组。Ａ组：孕７ ｄ 起被动吸烟,饮酒;Ｂ组：孕７ ｄ 起被动吸烟,孕１５ ｄ起饮酒;Ｃ组（对照组）：并于孕２０ ｄ 检测３ 组孕鼠胎盘ＮＯ 及ＥＴ含量。结果：Ａ、Ｂ两组ＩＵＧＲ发生率较对照组明显增加（Ｐ＜ ０．０１）。Ｂ组胎死率低于Ａ 组（Ｐ＜ ０．０５）。且胎仔体重减轻以肝脏为主,同时Ａ、Ｂ两组ＮＯ含量明显低于正常对照组,而ＥＴ－１ 水平则远高于对照组（Ｐ＜ ０．０１）。ＥＴ与ＮＯ比值显著增大（Ｐ＜ ０．０１）。结论：孕早期被动吸烟、饮酒可产生混合型ＩＵＧＲ动物模型。孕晚期饮酒则产生不均称型ＩＵＧＲ动物模型。且ＩＵＧＲ的发病可能与ＮＯ合成、释放减少及ＥＴ－１ 合成、释放增加有关。