510.6nm激光诱导兔在体血管平滑肌细胞凋亡的研究

目的　观察510-6 nm 波长激光对兔在体血管平滑肌细胞(SMC) 凋亡的诱导作用。方法　日本大耳白兔36 只,由股动脉导入柱状光纤至腹主动脉,对腹主动脉血管壁进行分段激光照射,功率密度分别为50 、100 、200 或300 m W/cm2 ,照射500 或1 000 s 。于照射后4 、8 、12 、24 或72 h 处死动物,取照射段腹主动脉,光镜观察SMC 形态改变,DNA 末端标记法确定细胞凋亡率。结果　兔腹主动脉经100 m W/cm2 及以上功率密度的激光照射后24 h,SMC 可出现变性、凋亡和坏死三种损伤性改变,而血管内皮细胞无明显变化。激光诱导下SMC 呈现典型的细胞凋亡形态特征:细胞明显固缩,细胞质着色加深,染色质固缩深染,并沿核膜着边排列。DNA 末端标记显示,SMC 凋亡与激光照射剂量有关。在100 m W/cm2 照射1000 s 和200 m W/cm2 照射500 s组( 能量密度均为100 J/cm2) ,细胞凋亡的发生率最高。结论　510 .6 nm 激光以能量密度100 J/cm2 照射,能使兔在体腹主动脉SMC 发生细胞凋亡,且发生率较高。     

510.6nm激光照射对兔在体血管平滑肌细胞超微结构的影响

目的 观察510.6 am激光照射兔在体腹主动脉壁24h后,血管平滑肌细胞超微结构的变化及其与激光剂量的关系.方法 新西兰白兔12只,由股动脉导入柱状光纤至腹主动脉,在血管腔内进行分段激光照射,根据光照剂量分为6组.1～5组的光剂量分别为100mW/cm2×500 s、100mW/cm2×1000 s、150mW/cm2×l 000 s、200mW/cm2×500 s、200 mW/cm2×1000s;第6组为对照组,不照射激光.照光后24 h处死动物,取照射段血管组织,观察血管平滑肌细胞的超微结构的改变.结果 兔腹主动脉经功率密度为100 mW/cm2或150 mW/cm2的激光照射后,血管平滑肌细胞出现以细胞凋亡为主要特征的形态结构改变,其损伤部位以线粒体为主.功率密度为200 mW/cm2的激光照射后,血管平滑肌细胞以坏死为主.激光照射后兔血管平滑肌细胞的上述形态变化主要与激光功率密度和照射时间有关.结论 功率密度为100 mW/cm2或150 mW/cm2的510.6 nm激光照射后24 h在体兔血管平滑肌细胞出现凋亡.     

竹红菌乙素-光动力学疗法治疗脉络膜新生血管方案的初步探讨

目的 观察不同参数的竹红菌乙素．光动力学疗法(HB-PDT)对青紫蓝兔脉络膜毛细血管层的生物学效应以及对视网膜的非选择性损伤，为临床应用HB-PDT疗法治疗脉络膜新生血管(CNV)提供依据。方法 青紫蓝兔18只，随机分为6组，每组3只。其中药物对照组耳缘静脉注射HBl．5mg／kg，不照激光。激光对照组耳缘静脉注入生理盐水2．0mg／kg，PDTI-Ⅳ组耳缘静脉注射HB各10mg／kg，分别以能量密度为240、14．4、30．0、48．0和56．OJ／cm^2，波长为532nm的倍频YAG激光照射兔眼底。观察兔眼底变化、荧光素渗漏情况及视网膜、RPE、视细胞、脉络膜的组织病理学变化。结果 在PDT后第1天，单纯照光组和单纯药物对照组眼底和组织学无改变；HB剂量为10mg／kg，功率密度120-700mW／cm^2、能量密度14．4—56．0J／cm^2的532nm激光照射，可以导致脉络膜毛细血管层的闭塞，视网膜外层损伤，内层无明显改变。HB剂量10mg／kg，功率密度300—600mW／cm^2，照光时间80—100s，能量密度30—50J／cm^2是适宜的治疗参数。结论 HB对视网膜和脉络膜的生物学效应与光敏剂的剂量和激光照光时间、功率密度、能量密度密切相关。生物学效应与能量密度呈量效依赖性关系。     

激光照射防治移植静脉再狭窄的实验研究

目的 观察激光照射对移植静脉血管平滑肌细胞（VSMC）增殖与凋亡的影响。探索激光疗法防治移植静脉远期再狭窄的可行性及作用机制。方法 建立兔颈外静脉颈总动脉移植模型。应用IECu-10铜蒸气激光器，输出波长510.6nm。功率密度500mW/cm^2，于移植静脉血管外照射1000s。术后4周，用免疫组织化学方法检测增殖细胞核抗原（PCNA），应用DNA片段末端标记法（TUNEL）标记凋亡细胞，HE，Masson及维多利亚蓝染色后，应用计算机图像分析系统检测移植静脉内膜，中膜增生情况。结果 术后4周，激光血管外照射的移植静脉与对照组相比，VSMC增殖率降低41.5%。细胞凋亡率增加40.9%。抑制了VSMC细胞增殖，促进细胞凋亡；移植静脉内膜和中膜厚度分别减少58.5%,18.0%，静脉内膜与中膜厚度比值（I/M）减少47.2%。结论 适当能量激光血管外照射可以抑制移植静脉血管平滑肌细胞增殖，促进移植静脉血管平滑肌细胞凋亡。使移植静脉内膜和中膜的增生减轻。有防治移植静脉远期再狭窄的作用。     

光动力疗法封闭兔耳缘静脉的实验研究

目的：探讨光动力疗法封闭小静脉所需光敏剂和激光照射的剂量，为临床应用光动力疗法封闭小静脉提供依据。方法：以兔耳缘静脉为研究对象。实验动物注射血啉甲醚或竹红菌乙互后用铜蒸气激光照射耳缘静脉。选择不同的功率密度、照射时间、光敏剂及其剂量，比较各组兔耳缘静脉血栓形成比率。结果：在血啉甲醚剂量为10mg/kg时，150mW/cm^2激光照射40min(能量密度为360J／cm^2)的血兔耳缘静脉血栓形成比率高于180J/cm^2和240J/cm^2(P=0.040,P=0.167)。180J／cm^2激光照射剂量时，30mg/kg血啉甲醚组血栓形成比率高于10mg/kg和20mg/kg(P=0.014,P=0.214).功率密度同为150mW/cm^2，血啉甲醚剂量为30mg/kg激光照射20min与10mg/kg激光照射40min的血栓形成比率相当（P＝0．556）。功率密度为150mW/cm^2激光照射时，竹红菌乙素剂量为1mg/kg激光照射5min，与血啉甲醚剂量为10mg/kg激光照射40min的血栓形成比率相当（P＝0．714）。结论：在一定范围内局部激光照射能量越高、光敏剂的剂量越大，越容易形成血栓。光动力疗法封闭小静脉形成血栓比较合适的条件是血啉甲醚剂量10mg/kg，功率密度150mW/cm^2，照射时间40min。光动力疗法对小静脉的封闭作用使之有可能成为治疗食管、胃静脉曲张的新方法。     

波长510.6 nm铜蒸气激光诱导兔血管平滑肌细胞凋亡的照射剂量筛选

目的　筛选对离体培养的兔血管平滑肌细胞 (VSMC)能诱导出较高凋亡率的激光照射剂量参数。方法　取离体培养的第 4代兔VSMC ,予波长 5 10 6nm铜蒸气激光照射 ,照射剂量为功率密度 10 0、2 0 0、30 0mW cm2 ,能量密度10 0、15 0、180、2 0 0、2 10、30 0J cm2 。脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法 (TUNEL)标记检测各照射剂量组细胞凋亡率。结果　与对照组比较 ,各照射组VSMC凋亡率明显增高 ,达对照组凋亡率的 2 9～ 14 7倍 (P <0 0 5 )。以功率密度 30 0mW cm2照射 6 6 7s照射组之VSMC凋亡率最高 ,达 30 %。结论　以波长 5 10 6nm、功率密度 30 0mW cm2 铜蒸气激光照射兔VSMC 6 6 7s可诱导发生较高的细胞凋亡率     

《中国激光医学杂志》2002年(第11卷)文题索引

基础研究光动力疗法对大鼠类风湿性关节炎治疗作用的观察　 (论著 )　黄乃艳　顾瑛　刘凡光等　 11( 1) :3低强度激光引起线粒体功能及细胞内游离Ｃａ2 的变化　 (论著 )　姜胜利　高长青　顾瑛等　 11( 1) :2 6长脉冲翠绿宝石激光脱毛的组织学研究　 (论著 )　陈向东　刘健航汪蓓青等　 11( 2 ) :73波长 510 6ｎｍ铜蒸气激光诱导兔血管平滑肌细胞凋亡的照射剂量筛选　 (论著 )　陆亚彬　刘凡光　顾瑛等　 11( 2 ) :84铜蒸气激光照射下 11种光敏剂杀伤强度的比较　 (论著 )　刘慧龙顾瑛　刘凡光等　 11( 2 ) :88Ｈｅ Ｎｅ激光照射对大鼠心…     

不同参数HMME-PDT对兔耳增生性瘢痕的生物效应

目的观察不同参数的血卟啉单甲醚-光动力学疗法（HMME-PDT）对兔耳增生性瘢痕的生物学效应，为临床应用HMME-PDT防治增生性瘢痕提供实验依据。方法建立兔耳增生性瘢痕模型后，将150个增生性瘢痕块随机分为HMME-PDT治疗组和对照组。PDT治疗组给予HMME10mg／kg，分别在给药后即刻、30min、1和3h行半导体激光照射，波长630nm，能量密度分别为5、10和20J／cm^2。观察瘢痕生长情况，术后28d取材行常规HE染色，计算各组瘢痕增生指数，分析HMME-PDT对瘢痕的影响。结果静脉注射HMME10mg／kg后，以功率密度为20mW／cm^2，能量密度为5J／cm^2的半导体激光在给药后即刻和30min照光时能对瘢痕增生块产生抑制效应，其中以时间间隔为30min时的作用更加显著，而能量密度为20J／cm^2的激光照射瘢痕增生指数仍然较高，甚至超过空白对照组。结论HMME-PDT对兔耳增生性瘢痕的生物学效应与光敏剂的剂量和激光照光时间、给药后至照光的时间间隔和能量密度密切相关。     

1.319 μm近红外激光致兔角膜损伤后修复的长期观察

目的 建立1.319μm近红外激光致兔角膜全层损伤动物模型，观察角膜损伤后长期修复的过程及结果。方法 实验对象新西兰白兔10只,采用波长1.319μm近红外激光损伤兔左眼角膜(右眼作为正常对照组)，每只兔眼1个照射光斑，光斑直径3 mm，照射时间0.7 s，能量密度140 J/cm²。利用裂隙灯显微镜、光学相干断层成像(optical coherent tomography,OCT)、组织病理学检测等技术手段，于损伤前、损伤后即刻至6个月内多个时间点进行角膜损伤修复观察。结果 波长1.319μm激光在本实验照射条件下的兔角膜损伤为全层性损伤。裂隙灯显微镜观察可见激光损伤形成的白色损伤斑先增大后缩小，损伤后6个月基本消失，同时角膜先肿胀增厚后迅速消退；OCT观察及定量测量可见损伤斑中心角膜全层厚度最大可达正常角膜厚度的2倍，增厚区域直径最大可达照射光斑直径的2.6倍；组织病理学观察可见激光损伤后坏死上皮和内皮细胞快速脱落，新生上皮和内皮细胞随后覆盖损伤区，基质细胞损伤后数小时核染色质脱失，后期修复过程出现大量浸润细胞。结论 波长1.319μm激光在能量密度140 J...     

激光热消蚀兔颈动脉增生修复的形态学观察

本实验用Ｎｄ：ＹＡＧ激光经金属帽光纤传输，在１８只健康兔颈总动脉造成急性热损伤，于消蚀后即刻至８周动态观察血管壁组织增生修复变化，结果表明，激光消蚀后出现炎症反应和血小板粘附聚集，２周时内皮层恢复正常，但中膜平滑肌细胞呈过度增殖，管腔狭窄和闭塞。此可能是激光血管成形术后再狭窄的机制之一。     

510nm激光诱导血管平滑肌细胞凋亡的初步研究

为了探讨用激光防治血管成形术后再狭窄的可能性，以５１０ｎｍ激光照射体外培养的血管平滑肌细胞，以ＤＮＡ片断末端标记法观察细胞凋亡现象。结果显示，５０和７５Ｊ／ｃｍ２照射后４小时ＳＭＣ出现凋亡现象，２４小时凋亡最为显著，凋亡率分别为９．４％和６．１％。表明激光直接照射能引起平滑肌细胞凋亡。这可能有益于减轻血管内膜的增厚程度     

低强度激光照射对大鼠血管平滑肌细胞一氧化氮生成通路的上调作用

目的 观察低强度激光照射(low power laser irradiation,LPLI)对大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)左旋精氨酸(L-Arg)转运、一氧化氮(NO)生成以及NO合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性的作用,以探讨LPLI血管保护作用的细胞分子机制.方法 取Wistar大鼠主动脉,贴块法培养VSMCs,分别以能量密度0、0.9.2.7和4.5 J/cm2的He-Ne激光(波长632nm)照射,无照射组为对照组.重氮化学反应法测定培养液中NO含量,细胞孵育液中加入3H-L-Arg测定细胞L-Arg的摄入,测定3H-胍氨酸的生成反映NOS活性.结果 能量密度分别为0.9,2.7和4.5 J/cm2的LPLI照射VSMCs,促进细胞NO生成分别较对照组增加-1.3%(P＞0.05)、60.4%(P＜0.01)和78.6%(P＜0.01);细胞NOS活性分别较对照组增加16.9%(P＞0.05)、44.6%(P＜0.01)和53.0%(P＜0.01);而且细胞摄入L-Arg(Vmax值)分别较对照组增加11.0%(P＜0.05),66.7%(P＜0.01)和38.7%(P＜0.01);激光照射对L-Arg跨细胞膜转运的米氏常数(Km值)无明显影响(均P＞0.05).结论 低强度He-Ne激光照射激活大鼠VSMCs的L-Arg/NOS/NO通路,可能为低强度激光扩张血管、改善器官血流等生物学效应的机制之一.     

Irradiated versus nonirradiated endothelial cells: effect on proliferation of vascular smooth muscle cells.

PURPOSE: Endovascular radiation therapy is a promising strategy for the prevention of restenosis. Radiation prevents proliferation of vascular smooth muscle cells, thereby reducing the incidence of restenosis, but may also affect the remaining endothelial cells. For this reason, a comparison was made between irradiated and nonirradiated endothelial cells and their effects on the proliferation of vascular smooth muscle cells in a coculture system was evaluated. MATERIALS AND METHODS: A coculture system was used, in which both endothelial cells and vascular smooth muscle cells were grown on opposite sides of a semipermeable membrane. After a period of growth arrest, the proliferation of vascular smooth muscle cells was measured during four subsequent days. RESULTS: The presence of endothelial cells stimulated the proliferation of vascular smooth muscle cells during the first days of analysis but had an inhibitory effect during the subsequent days (P <.5). gamma-irradiation of endothelial cells resulted in a complete blockage of the proliferation of these cells. However, irradiated endothelial cells affected the proliferation of vascular smooth muscle cells in coculture in a fashion comparable to nonirradiated endothelial cells (P >.5). CONCLUSION: The results suggest that, in endovascular radiation therapy, irradiation of endothelial cells does not change their effects on the proliferative behavior of vascular smooth muscle cells.     

In vitro response of human and porcine vascular cells exposed to high dose-rate γ-irradiation

Aim : The objective of this study was to compare the in vitro response of human and pig endothelial cells, smooth muscle cells and fibroblasts exposed to conventional high dose-rate γ-irradiation. Materials and methods : Clonogenic cell survival and growth responses were obtained after irradiation of plateau-phase cells with a 60 Co source at a dose-rate of 1.5 Gy/min. DNA single-strand breaks were also evaluated using an alkaline filter elution technique. Results : Overall, both the pig and human cell lines showed a similar response to conventional high dose-rate irradiation. Using clonogenic assays, the human aortic smooth muscle cell line was more sensitive than the fibroblast and endothelial cell lines, whereas the pig endothelial cell line was more sensitive than smooth muscle cells and fibroblasts. Shortly after irradiation (10 days) there was a temporary growth arrest, which was similar for endothelial, smooth muscle cells and fibroblasts with doses above 6 Gy. There was also a non-linear, dose-dependent growth delay up to 4 weeks after irradiation. This effect was also consistent between the different cell lines. Using alkaline filter elution, there was no significant difference in relative elution between endothelial cells, smooth muscle cells and fibroblasts, indicating similar DNA damage among the different cell lines. Conclusion : The in vitro response of human and pig endothelial cells, smooth muscle cells and fibroblasts exposed to high doserate irradiation appeared similar. The pig model seems well suited to evaluate the short- and long-term effects of ionizing radiation in the prevention of restenosis after vessel injury.     

实验性血管成形术后狭窄变化的动态观察

目的 建立球囊成形术后动脉狭窄的简易动物模型，观察成形术后血管壁各部分变化在动脉狭窄发生中的作用。材料与方法 用2F Fogarty球囊导管损伤大鼠左颈动脉，分别在8周内不同时间点获取标本，利用光镜和电镜研究动脉球囊损伤后的形态变化，另选取2周组和1个月组动物于造模前、造模后进行DSA和MRI检查。结果 (1)光镜与电镜表现：损伤后内皮细胞剥脱，血小板及单核细胞附着，中膜平滑肌细胞坏死和增殖，平滑肌细胞由收缩表型转变为合成表型以及随后的内膜平滑肌细胞出现与复制，弹力纤维、胶原和蛋白成分等细胞外基质的堆积导致内膜明显增厚，管腔狭窄。(2)影像学表现：DSA及MRI均清楚反映出造模后的模型动脉狭窄变化。结论 大鼠球囊损伤模型能较好地反映球囊损伤后血管的病理变化过程且经济、简便易行，应是初筛研究的首选模型；DSA、MRI是监测模型血管动态变化的较好方法。     

鸢尾苷元抗血管平滑肌细胞增殖及抗动脉粥样硬化机制的研究

目的观察鸢尾苷元对氧化低密度脂蛋白诱导血管平滑肌细胞增殖及其单核细胞趋化蛋白-1和细胞间黏附因子-1表达的影响,探讨其抗动脉粥样硬化的作用机制。方法采用体外培养大鼠血管平滑肌细胞,加入氧化低密度脂蛋白100μg/ml建立血管平滑肌细胞增殖模型,加入不同剂量的鸢尾苷元,通过噻唑蓝比色法观察血管平滑肌细胞增殖率,并采用逆转录-聚合酶链反应方法检测血管平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白-1和细胞间黏附因子-1mRNA的表达情况。结果鸢尾苷元对氧化低密度脂蛋白所致的血管平滑肌细胞增殖具有明显的抑制作用,并显著抑制氧化低密度脂蛋白诱导血管平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白-1和细胞间黏附因子-1mRNA的过度表达。结论鸢尾苷元抗血管平滑肌细胞增殖和抑制氧化低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白-1和细胞间黏附因子-1的过度表达,可能是其抗动脉粥样硬化的重要作用机制之一。     

血管平滑肌细胞对血啉甲醚吸收特性的研究

目的 探讨血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）对光敏剂血啉甲醚（ＨＭＭＥ）的吸收特点及影响因素,为进一步建立动脉粥样硬化和血管成形术后再狭窄的光动力治疗方法提供实验依据。方法 培养兔主动脉ＳＭＣ并接种至９６孔培养板。首先,培养液中分别加入ＨＭＭＥ和血卟啉衍生物（ＨＰＤ）,浓度分别为２０、４０、６０、８０、１００μｇ／ｍｌ,采用荧光分析法测定细胞内光敏剂含量,绘缺点ＳＭＣ吸收光敏剂的浓度－含量和时间－含量关系曲     

激光光凝后曲张大隐静脉的组织病理学变化

目的探讨激光光凝后曲张大隐静脉的组织病理学变化。方法采用810nm波长激光器,功率为12W,暴光时间1s,血管内光凝治疗曲张大隐静脉9例,光凝后3h取血管行组织病理学检查,观察光凝后血管结构变化。以正常静脉和治疗前曲张静脉作为对照。结果正常静脉分3层,内膜为单层血管内皮细胞,中膜为平滑肌细胞、弹力纤维和胶原纤维等,外膜为一疏松排列的结缔组织。曲张静脉组织学检查见内膜不完整,内皮细胞之间连接疏松,中膜平滑肌细胞增生、肥厚或萎缩,弹力纤维减少,胶原纤维增多。光凝后管腔内可见大量血细胞,血小板扁平,伸出伪足,贴附于胶原表面;血管内皮细胞和靠近管腔部位的平滑肌细胞结构破坏,细胞浆外溢,和细胞外基质融合;靠近血管腔部位的弹力纤维和胶原纤维断裂,部分脱落于管腔;靠近外膜部位的弹力纤维和胶原纤维和外膜结构没有改变。结论激光光凝治疗曲张静脉的内膜和部分中膜结构破坏,大量血细胞聚集于管腔,促进血小板附着于血管壁。