血卟啉单甲醚-光动力学疗法对兔移植静脉再狭窄的抑制作用

目的探讨局部灌注血卟啉单甲醚(HMME)结合血管外激光照射的方法对移植静脉吻合口处内膜增生的抑制作用。方法采用兔颈外静脉颈总动脉移植模型，将实验动物随机分为光动力学治疗组、单纯激光照射组、单纯光敏剂灌注组、空白对照组，每组4只兔。光动力学治疗组局部应用血卟啉单甲醚HMME(15／μg／ml)溶液充盈在移植静脉段，再以532nm波长半导体激光器在吻合口(每只兔2处吻合口)附近进行血管外照射5min，功率密度100mW／cm^2，能量密度30J／cm^2；单纯激光照射组以生理盐水充盈移植静脉段，再用激光照射；单纯光敏剂灌注组仅用HMME(15μg／ml)溶液充盈移植静脉段5min；空白对照组应用生理盐水充盈移植静脉段5min.术后第4周于各实验组移植静脉的动静脉连接都及其两侧0.5cm处的动脉端、静脉端取材，常规石蜡包埋切片HE染色，组织病理观察，采用IMAGE-Pro Plus生物医学图像分析系统，观察不同处理组内膜增生程度的差异。     

竹红菌乙素-光动力学疗法治疗脉络膜新生血管方案的初步探讨

目的 观察不同参数的竹红菌乙素．光动力学疗法(HB-PDT)对青紫蓝兔脉络膜毛细血管层的生物学效应以及对视网膜的非选择性损伤，为临床应用HB-PDT疗法治疗脉络膜新生血管(CNV)提供依据。方法 青紫蓝兔18只，随机分为6组，每组3只。其中药物对照组耳缘静脉注射HBl．5mg／kg，不照激光。激光对照组耳缘静脉注入生理盐水2．0mg／kg，PDTI-Ⅳ组耳缘静脉注射HB各10mg／kg，分别以能量密度为240、14．4、30．0、48．0和56．OJ／cm^2，波长为532nm的倍频YAG激光照射兔眼底。观察兔眼底变化、荧光素渗漏情况及视网膜、RPE、视细胞、脉络膜的组织病理学变化。结果 在PDT后第1天，单纯照光组和单纯药物对照组眼底和组织学无改变；HB剂量为10mg／kg，功率密度120-700mW／cm^2、能量密度14．4—56．0J／cm^2的532nm激光照射，可以导致脉络膜毛细血管层的闭塞，视网膜外层损伤，内层无明显改变。HB剂量10mg／kg，功率密度300—600mW／cm^2，照光时间80—100s，能量密度30—50J／cm^2是适宜的治疗参数。结论 HB对视网膜和脉络膜的生物学效应与光敏剂的剂量和激光照光时间、功率密度、能量密度密切相关。生物学效应与能量密度呈量效依赖性关系。     

照射时机和能量对HMME-PDT的视网膜脉络膜生物学效应的影响

目的观察不同照射时机,不同激光剂量血卟啉单甲醚(HMME)光动力学疗法(PDT)对家兔正常视网膜和脉络膜生物学效应。方法以新西兰兔为实验动物,耳缘静脉注射血卟啉单甲醚,波长532nm激光为激发光源,眼底光斑直径1500~2000μm,功率密度200、300和400mW/cm2,能量密度16、30和40J/cm2,分别在注射光敏剂结束后10s,5、10和15min行PDT操作,每组PDT方案10个光斑。在实验后第6、12h,1、3和5d进行荧光眼底造影观察,并在出现脉络膜毛细血管闭塞或视网膜损伤时于照射部位取标本行组织学检查。结果注射光敏剂距照光时间10s、5、10和15min,能量密度16、30和40J/cm2的情况下,脉络膜毛细血管出现选择性闭塞的发生率分别为100%(10/10),100%(10/10),0%(0/10),0%(0/10);100%(10/10),100%(10/10),20%(2/10),0%(0/10);100%(10/10),100%(10/10),40%(4/10),0%(0/10)。在用药至照光时间间隔10s,能量密度16J/cm2,在PDT后第3天开始出现脉络膜毛细血管闭塞。能量密度提高到30J/cm2,照射后第1天开始出现脉络膜毛细血管闭塞。能量密度提高到40J/cm2,照射后第6h出现视网膜非选择性损伤,照射后第5天视网膜结构恢复,清晰可见脉络膜毛细血管闭塞。结论HMME-PDT可引起脉络膜毛细血管的闭塞,光动力效应出现时间和照射时机及照射光剂量有关。在HMME耳缘静脉内注射结束后5min之内开始照光是最佳照射时机,并随着照射光剂量的增加,光动力效应出现时间提前。     

光动力疗法封闭兔耳缘静脉的实验研究

目的：探讨光动力疗法封闭小静脉所需光敏剂和激光照射的剂量，为临床应用光动力疗法封闭小静脉提供依据。方法：以兔耳缘静脉为研究对象。实验动物注射血啉甲醚或竹红菌乙互后用铜蒸气激光照射耳缘静脉。选择不同的功率密度、照射时间、光敏剂及其剂量，比较各组兔耳缘静脉血栓形成比率。结果：在血啉甲醚剂量为10mg/kg时，150mW/cm^2激光照射40min(能量密度为360J／cm^2)的血兔耳缘静脉血栓形成比率高于180J/cm^2和240J/cm^2(P=0.040,P=0.167)。180J／cm^2激光照射剂量时，30mg/kg血啉甲醚组血栓形成比率高于10mg/kg和20mg/kg(P=0.014,P=0.214).功率密度同为150mW/cm^2，血啉甲醚剂量为30mg/kg激光照射20min与10mg/kg激光照射40min的血栓形成比率相当（P＝0．556）。功率密度为150mW/cm^2激光照射时，竹红菌乙素剂量为1mg/kg激光照射5min，与血啉甲醚剂量为10mg/kg激光照射40min的血栓形成比率相当（P＝0．714）。结论：在一定范围内局部激光照射能量越高、光敏剂的剂量越大，越容易形成血栓。光动力疗法封闭小静脉形成血栓比较合适的条件是血啉甲醚剂量10mg/kg，功率密度150mW/cm^2，照射时间40min。光动力疗法对小静脉的封闭作用使之有可能成为治疗食管、胃静脉曲张的新方法。     

瘢痕成纤维细胞对血卟啉单甲醚的吸收特性及其光动力效应

目的探讨增生性瘢痕成纤维细胞（HSF）对光敏剂血卟啉单甲醚（HMME）的吸收特性和光动力疗法（PDT）的杀伤效应。方法取原代培养的HSF,经流式细胞仪（FCM）检测HMME浓度（0～40μg/ml）和孵育时间（0～120 min）对HSF细胞吸收HMME的影响;MTT法检测HMME-PDT对HSF细胞存活率的影响。结果在一定HMME浓度范围内（0～40μg/ml）,HSF细胞对HMME的吸收量随HMME浓度和孵育时间的增加而增大。实验范围内的HMME-PDT对HSF细胞的杀伤效应与HMME浓度和激光能量密度正相关。结论 HSF对HMME的吸收随HMME浓度和孵育时间的增加而增大,HMME-PDT处理HSF时,光敏剂HMME浓度和激光能量密度是影响细胞存活率的重要因素。     

血卟啉单甲醚光动力学疗法对体外培养的人角质形成细胞增生的影响

目的观察人角质形成细胞株Hacat对血卟啉单甲醚(hematoporphyrinmonomethylether,HMME)的吸收特性及HMME-PDT对角质形成细胞增生的影响。方法对数生长期的Hacat细胞分别与浓度为0、10、20和40μg/ml的HMME孵育1h;同时将另一实验组的Hacat细胞与10μg/ml的HMME分别孵育0和30min、1和2h,分别以流式细胞仪检测孵育时间和孵育浓度对Hacat细胞吸收HMME的影响;在此基础上,将Hacat细胞分别与0、2·5、5、10、20和40μg/ml的HMME孵育2h,用532nm的倍频Nd∶YAG激光以20mW/cm2的功率密度分别照射0、2·5、5、10、20min,同时设立完全空白对照组和单纯光敏剂组,24h后以MTT法检测Hacat细胞的存活率。结果Hacat细胞对HMME吸收量随着孵育浓度的增高和孵育时间的增加而增多。单独照光或以高达40μg/ml的HMME孵育对Hacat无明显杀伤(P>0·05)。在激光功率密度相同的情况下,HMME-PDT对Hacat细胞的杀伤呈孵育浓度和激光能量密度相关性。结论Hacat细胞对HMME吸收呈孵育浓度和孵育时间相关性,孵育浓度及激光能量密度是影响HMME-PDT杀伤效应非常重要的影响因素,在实验范围内的HMME-PDT能对Hacat细胞产生明显的杀伤作用。     

HMME-PDT对兔耳增生性瘢痕块成纤维细胞增殖能力及其超微结构的影响

目的 观察血卟啉单甲醚(hematoporphyrin monomethyl ether,HMME)-光动力学疗法(photodynamie therapy,PDT)对兔耳增生性瘢痕块中成纤维细胞增殖能力及细胞超微结构的影响.方法 建立兔耳增生性瘢痕模型后,将24个瘢痕块随机分为HMME-PDT治疗组和对照组(n=12).造模后28 d取材行银染色,计算瘢痕成纤维细胞核内AgNORs颗粒数,并在透射电镜下观察细胞超微结构改变,分析HMME-PDT对瘢痕的影响.结果 HMME-PDT治疗后,银染成纤维细胞核内AgNORs颗粒数显著下降,细胞内粗面内质网萎缩且数量减少;核糖体脱颗粒、解聚;线粒体肿胀,嵴溶解;并出现部分细胞凋亡现象.结论 在瘢痕形成早期,HMME-PDT能够抑制兔耳瘢痕成纤维细胞的增殖能力,破坏前胶原蛋白合成的场所,减少胶原蛋白的合成与分泌,并能诱导部分成纤维细胞进入凋亡途径,HMME-PDT有可能成为瘢痕防治的有效方法.     

角膜新生血管光动力学疗法的实验研究

目的研究角膜新生血管的治疗方法,观察不同浓度的光敏剂血卟啉单甲醚(hematoporphyrinmonomethylether,HMME)所介导的光动力作用对兔角膜新生血管的影响,为探讨光动力学疗法治疗角膜新生血管的可行性和有效性提供初步的实验依据。方法采用角膜缝线的方法,诱导18只荷兰大耳白兔36只眼角膜新生血管形成。缝线后的第7天,将18只兔随机分成9组,将不同浓度的HMME分别注射于兔眼球结膜下,30min后用波长为632.8min的He-Ne激光照射不同的时间(即能量密度不同),观察每眼角膜新生血管损伤情况及角膜组织病理学改变。结果在HMME浓度为7.5mg/ml时,激光功率密度为30mW/cm2,能量密度为108,(?)m2,照射时间60min,兔角膜新生血管密度减低率(67.97±2.20)%,不但高于激光照射时间分别为15、30和45min,能量密度分别为27.54和81J/cm2时的新生血管密度减低率,其统计学差异有显著意义(P=0.001,P=0.002,P=0.031),而且高于HMME浓度为2.5mg/ml和5mg/ml2时的角膜新生血管的减低率,其统计学差异有显著意义(P<0.01,P<0.01);而HMME浓度为10m/ml时,睑球结膜损伤较大,不宜用于治疗眼部。PDT后组织病理学检查,电镜下见新生血管内皮细胞变性;HE染色角膜标本光镜下见新牛血管退缩。结论采用结膜下注射HMME,并用波长为632.8nm的He-Ne激光照射,     

光动力疗法对大鼠类风湿性关节炎治疗作用的观察

目的　观察以血啉甲醚 (HMME)为光敏剂的光动力效应对类风湿性关节炎动物模型的治疗作用。方法　LEW大鼠 30只 ,随机分为正常对照组 5只、关节炎组 10只、治疗组 15只。关节炎组和治疗组用Ⅱ型胶原蛋白诱发关节炎 (CIA)。治疗组在大鼠出现踝关节红肿后 1周 ,炎症达到高峰时进行光动力治疗 (PDT)。随机治疗大鼠一侧的踝关节 ,对侧作为单纯HMME对照。治疗方法是大鼠麻醉后尾静脉注入HMME 10mg kg ,2 0min后踝关节照光 ,激光波长 6 2 7 8nm ,功率密度 10 0mW cm2 ,照射时间 10 0 0s,能量密度 10 0J cm2 。治疗后 2周取关节进行病理评分。结果　关节炎组滑膜细胞增生 ,血管翳形成 ,并侵蚀和破坏软骨和骨 ;治疗组滑膜细胞增生不明显 ,软骨和骨完整。病理评分治疗组滑膜增生、血管翳形成及软骨破坏、骨破坏和总分较关节炎组和HMME组低 ,统计学检验差异有显著意义 (P <0 0 1)。结论　在HMME 10mg kg,激光功率密度 10 0mW cm2 、能量密度 10 0J cm2 的条件下 ,光动力疗法能够有效地减轻CIA的滑膜细胞增生 ,减轻血管翳的形成及对软骨和骨的破坏 ,起到保护软骨和骨的作用。     

510.6nm激光对兔血管平滑肌细胞、内皮细胞选择性损伤作用的研究

目的 观察激光照射后兔血管平滑肌细胞、内皮细胞形态结构变化特点，观察激光对血管壁的损伤是否有选择性，为防止再狭窄提供实验依据。方法 用能量密度为50、100、150和200J／cm^2的铜蒸气激光照射兔腹主动脉，分别用光镜、电镜、图像分析方法，观察激光照射后第24小时，血管平滑肌细胞、内皮细胞形态、结构变化。结果 100J／cm^2能量密度的激光照射后，血管平滑肌细胞出现细胞核固缩，细胞质凝集贴边，细胞核面积均值缩小等损伤性改变。经同等剂量激光照射，而内皮细胞无明显变化。结论 经100J／cm^2的铜蒸气激光照射可损伤在体血管平滑肌细胞，而对内皮细胞无明显作用。激光对血管壁的损伤具有一定的选择性。     

HMME-PDT对原代培养瘢痕成纤维细胞中Cyc表达的影响

目的观察血卟啉单甲醚(hematoporphyrin monomethyl ether,HMME)-光动力学疗法(photodynamic therapy,PDT)对增生性瘢痕成纤维细胞(hypertrophic scar fibroblast,HSF)中细胞色素C(cytochrome C,Cyc)表达的影响。方法采用组织块法原代培养瘢痕组织来源的成纤维细胞,建立HSF的传代细胞系,实验用第4～6代细胞。取对数生长期的HSF细胞,分为对照组和HMME-PDT组,其中HMME-PDT组的处理方法为培养的HSF与4μg/ml的HMME避光孵育3h,PDT治疗采用波长为630nm的激光,功率密度10mW/cm2,能量密度2.5J/cm2,两组细胞爬片细胞经固定、打孔后加入Cyc(1∶50)抗体以及FITC标记的二抗(1∶100),荧光显微镜下观察Cyc的荧光强度。用PI单染后经FCM检测细胞凋亡率。每标本计数105个细胞,实验重复5次。结果对照组HSF的细胞浆中Cyc-FITC荧光微弱,PDT组荧光显著增强;PI染色分析表明对照组凋亡率低(2.45±0.22%),PDT组的凋亡率显著升高(30.54±3.78%),二者相比差异有显著意义(P0.05)。结论光动力治疗后导致的线粒体功能障碍可能在瘢痕成纤维细胞凋亡中发挥了重要作用。     

湿性医疗技术与常规方法处置慢性肥厚性鼻炎激光术后创面效果比较

目的 比较湿性医疗技术(MEBT/MEBO)和常规疗法处置慢性肥厚性鼻炎Nd∶YAG激光术后创面的效果.方法 将200例患者分为2组,于激光治疗术后分别应用湿润烧伤膏(MEBO处置,MEBO组)治疗101例和常规方法治疗(常规组)99例,对各组创面愈合过程与愈合情况进行临床比较.结果 水肿反应消退时间:MEBO组为3 ...     

可调脉宽倍频Nd:YAG532nm激光联合皮肤再生技术治疗红色增生性瘢痕的疗效评价

目的:探讨可调脉宽倍频Nd:YAG532nm激光联合皮肤再生技术治疗红色增生性瘢痕的疗效.方法:总结我科采用可调脉宽倍频Nd:YAG532nm波长激光联合皮肤再生技术治疗红色增生性瘢痕的病例,激光治疗参数:脉宽为20ms～40ms,能量密度为24～40J/cm2,光斑直径为3mm,分别对手术切口条形瘢痕和挫伤及烧烫伤后片状瘢痕的治疗效果进行评价.结果:红色瘢痕每次经激光加皮肤再生技术治疗后症状和体征都减轻,4次治疗后手术切口条形瘢痕的总有效率为100%,显效率为96%,挫伤及烧烫伤后片状瘢痕的总有效率为90%,显效率为70%.结论:可调脉宽倍频Nd:YAG532nm激光联合皮肤再生技术治疗红色增生性瘢痕的疗效良好.     

可吸收修复胶原联合银离子敷料治疗供皮区创面的疗效

 目的 观察可吸收修复胶原联合银离子敷料治疗供皮区创面的临床效果。方法 选取2016-07至2018-12医院收治的100例自体皮移植患者,随机分为治疗组和对照组,每组50例,治疗组采用可吸收修复胶原联合银离子敷料治疗供皮区创面,对照组采用传统凡士林纱布治疗。观察供皮区创面换药时疼痛程度、创面感染率、愈合时间,以及创面愈合后瘢痕指标评定。结果 治疗组供皮区创面换药时疼痛分数在术后3、6、9 d分别为6.24±2.23,4.13±2.37,1.49±1.31,显著低于对照组的7.73±2.14,5.24±1.59,2.43±1.66(P<0.05);治疗组供皮区创面感染率为2%,较对照组14%显著降低(P<0.05);治疗组创面愈合时间明显短于对照组(P<0.05);治疗组创面愈合后3、6、9个月温哥华瘢痕量表评分较对照组显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 可吸收修复胶原联合银离子敷料治疗供皮区创面相比于传统凡士林纱布治疗是一种更优越的方式,适合临床推广使用。     

激光光动力学疗法治疗恶性黑色素瘤6例

目的 探讨激光光动力学疗法治疗恶性黑色素瘤的临床疗效.方法 恶性黑色素瘤患者6例,静脉滴注血卟啉衍生物(HpD)5 me/kg后6～72 h内以金蒸气激光或半导体激光照光,功率密度120～150 mW/cm2,能量密度120～200 J/cm2.治疗前后观察病灶情况,1个月后评价疗效.结果 6例患者中,完全效应4例,部分效应2例,总有效率达100%.1例患者随访6年未见复发.所有病例均未出现严重毒副反应.结论 光动力学疗法是治疗恶性黑色素瘤的有效方法,值得进一步深入研究.     

578.2 nm激光对不同黑色素含量兔视网膜损伤的比较

目的比较脉宽20～40 ns、频率6 kHz的578.2 nm脉冲铜蒸气激光照射后不同黑色素含量兔视网膜的损伤阈值。方法以青紫蓝灰兔(16只,32只眼),新西兰大耳白兔(13只,26只眼)为实验对象,应用波长578.2mm,脉宽20～40ns的脉冲铜蒸气激光照射兔眼底视乳头下方的后极部,按照眼底功率密度将两组实验对象各分为五组,灰兔435 mW/cm~2、869 mW/cm~2、1 304 mW/cm~2、1948 mW/cm~2、2 898 mW/cm~2组和白兔869 mW/cm~2、1304 mW/cm~2、1593 mW/cm~2、2 174 mW/cm~2、3 043 mW/cm~2组。照光时间100 s,眼底光斑直径2 mm。照光后24 h检眼镜检查视网膜上的曝光点,眼底照相机检查和记录,组织病理学检查兔视网膜的损伤。结果波长578.2 nm,频率为6 kHz的铜蒸气激光,在眼底光斑直径为2 mm,照光时间为100 s的照光条件下,相同功率密度下灰兔视网膜损伤重于白兔。结论在照光时间相同和光斑大小不变的条件下,眼底色素含量是影响激光生物学效应的重要因素。     

瘢痕移除原位再生皮肤组织器官的研究

目的 探讨一种增生性瘢痕的理想治疗方法,为病理性瘢痕防治研究打下基础.方法 对32 例自体皮源不足、瘢痕面积较大的增生性瘢痕患者,应用瘢痕移除及瘢痕皮回植原位再生皮肤疗法进行治疗,每例选择两处瘢痕相似的部位,进行随机自身对照研究,试验组采用皮肤原位再生复原疗法（MEBT/ MEBO）,对照组采用凡士林纱布覆盖治疗.结果 实验组愈合速度和质量优于对照组; 术后6 个月,应用温哥华瘢痕评估量表评估：瘢痕移除前后有显著性差异,试验组优于对照组（P 〈0.05）; 瘢痕所致的疼痛、瘙痒等症状消失,皮片平整且颜色与周围皮肤接近.结论 对自体皮源不足、瘢痕面积较大的增生性瘢痕患者或恐供皮区术后又出现增生性瘢痕时,应用瘢痕移除及瘢痕皮回植原位再生皮肤的方法治疗,不失为一种理想的方法.     

光动力疗法对犬正常呼吸道粘膜及其周围组织的影响

为了探索PDT在呼吸道应用的安全性,作者等将PDT用于正常犬呼吸道,观察比较常规静脉注射HpD、局部注射HpD、不注射HpD在不同功率密度的630nm波长激光照射下的组织反应。观察分照射后即刻,1天至4周,肉眼和光镜下组织学改变。实验证实正常呼吸道粘膜在全身给药后48小时照光仅有轻微的光敏损伤,照射激光的功率密度高于500mW/cm~2时,则产生明显的非特异性组织热损伤。因而在谋求真正的PDT作用时,激光的功率密度不宜超过500mW/cm~2。本文对光敏损伤与热损伤以及在呼吸道中PDT所使用的照射光功率密度的特点等问题进行了探讨。