电磁辐射对Raji细胞损伤效应及其Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

目的 比对性研究电磁脉冲(electromagnetic pulse,EMP)、S波段高功率微波(S-band high power microwave,S-HPM)和X波段高功率微波(X-band high power microwave,X-HPM)三种不同波段电磁辐射,对Raji细胞的损伤效应和对其Pax和Bcl...     

三种波段电磁辐射致大鼠睾丸损伤的比较

目的 对比性探讨电磁脉冲(EMP)、S带高功率微波(S-HPM)和X带高功率微波(X-HPM)三种波段电磁辐射致睾丸组织受损的近期和远期效应及其相关敏感指标.方法 雄性Wistar大鼠192只,随机分为EMP组、S-HPM组、X-HPM组和对照组,于照后不同时间点采集睾丸组织称重,光镜观察睾丸损伤,并用图像分析技术对曲细精管病变进行定量分析.结果 三种波段电磁波辐照后睾丸结构和生精细胞形态损伤基本相似:早期睾丸重及睾丸重/体重比值呈下降趋势;曲细精管生精上皮变薄,生精细胞排列紊乱,精原细胞变性坏死并由管壁脱落,精母细胞和精子数量减少并团聚于管腔中央,支持细胞和间质细胞不同程度变性;曲细精管受损百分率显示EMP组最重,S-HPM最轻,生精细胞受损数量与程度显著增加(P<0.05).结论 三种波段电磁辐射对睾丸生精细胞的损伤,具有速发性、时相性、分布不均一性特点;损伤程度呈EMP>X-HPM>S-HPM;睾丸曲细精管受损百分率可定量反映其损伤程度,可望成为评估电磁辐射致睾丸损伤的敏感指标之一.     

Bax、Bcl-2在大鼠微波辐射模型脾脏组织中的表达及意义

目的探讨Bax、Bcl-2在大鼠微波辐射模型脾脏组织中的表达及意义,为揭示微波辐射致免疫损伤的相关机制提供实验依据。方法以电磁脉冲（electromagnetic pulse,EMP）、S波段高功率微波（S-band high power microwave,S-HPM）和X波段高功率微波（X-band high power microwave,X-HPM）三种不同波段的微波为辐射源,建立大鼠微波辐射损伤模型,采用免疫组织化学（immunohistochemistry,IHC）技术结合半定量技术,检测Bax、Bcl-2蛋白在模型脾脏组织内表达的变化。所得数据采用SPSS 13.0软件进行一元方差分析。结果 3个实验组脾脏Bax蛋白表达在各时间点均轻微上调,Bcl-2蛋白表达于照后6 h、3 d和7 d均轻微上调,于照后14 d和28 d均轻微下调,经统计学分析,实验组与对照组比较差异均无统计学意义。结论微波辐射大鼠,虽未导致其脾脏内Bax、Bcl-2蛋白表达发生显著改变,但不能完全否认二者在微波辐射致大鼠脾脏损伤中的作用。     

苦参碱对Raji细胞凋亡及凋亡相关蛋白Fas/FasL表达的影响

目的：探讨中药苦参碱对人Burkitts淋巴瘤Raji细胞凋亡的作用及其可能机制.方法：应用MTT法测定苦参碱对Raji细胞生长的抑制作用;AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;WesternBlot检测Fas,FasL,Caspase-3蛋白的表达量.结果：苦参碱0.2～1.6g/L作用Raji细胞24,48,72h后,对Raji细胞生长具有增殖抑制作用,且呈明显的量效和时效关系,48h半数抑制浓度（IC50）为1.34g/L.苦参碱0.4,0.8,1.6g/L组作用48h后,Raji细胞总凋亡率分别为15.10%,27.88%,48.08%,与对照组8.78%相比较差异具有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）.Western Blot检测结果显示Fas,FasL,Caspase-3蛋白表达水平随苦参碱浓度的提高而增加.结论：一定浓度苦参碱可诱导Raji细胞发生凋亡,其凋亡机制可能与上调Fas,FasL蛋白的表达以及激活Caspase-3有关.     

二氢青蒿素对膀胱癌T24细胞株的抑制作用及其机制研究

目的探讨二氢青蒿素体外抗膀胱癌T24细胞株活性及相关机制。方法采用体外培养的T24细胞株为研究对象,流式细胞仪检测二氢青蒿素作用后T24细胞凋亡率,Caspase-3活性检测试剂盒检测Caspase-3活性,免疫印迹法检测细胞凋亡关键蛋白p53、Bax、Caspase-3、Bcl-2的表达变化。结果二氢青蒿素能够诱导T24肿瘤细胞凋亡（P〈0.01）,且呈剂量-效应关系;二氢青蒿素还可引发T24肿瘤细胞Caspase-3活性水平升高（P〈0.05或P〈0.01）,促凋亡蛋白Caspase-3、Bax高表达（P〈0.01）,抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低（P〈0.01）,且均呈现时间-效应关系。p53表达水平无显著改变（P〉0.05）。结论二氢青蒿素具有明确的抑制膀胱癌T24细胞株的效应,其机制可能是激活非依赖于p53的Bcl-2家族介导的细胞色素C途径,进而引发T24细胞凋亡。     

Survivin与Caspase-3在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达及意义

目的：研究凋亡相关蛋白Survivin（生存素）和Caspase-3（半胱氨酸蛋白酶-3）在妊娠高血压疾病（HDCP）患者胎盘细胞中的表达情况,探讨其与HDCP发生发展的相关性,为进一步明确HDCP的发病机制提供研究依据。方法：随机选取60例HDCP患者（其中子痫前期轻度28例,子痫前期重度32例,分别为轻度组、重度组）胎盘组织和30例健康孕妇（对照组）胎盘组织,采用免疫组化S—P法检测胎盘组织中Sur-vivin和Caspase-3的表达,并用图像分析系统对染色结果进行分析。结果：①Survivin在重度组表达显著低于轻度组及对照组,差异有显著性（P〈0.01）;轻度组与对照组比较,无显著性差异（P〉0.05）;②Caspase-3表达在轻度组与重度组显著高于对照组,差异均有显著性（P〈0.01）;重度组高于轻度组,差异有显著性（P〈0.01）。③Survivin与Caspase-3在两组胎盘组织中表达呈负相关（R=-0.413,P〈0.01）。结论：在HDCP患者胎盘组织中Survivin表达下调、Caspase-3表达上调,HDCP的发病机制可能与Survivin及Cas-pase-3表达变化有关。     

三七总皂苷诱导U937细胞凋亡及对Caspase-3表达的影响

目的观察三七总皂苷（PNS）对人急性单核细胞白血病细胞系U937细胞的增殖、凋亡及Caspase-3表达的影响。方法用不同浓度PNS作用于U937细胞,采用MTT法检测细胞增殖活性,用流式细胞术检测细胞周期和凋亡,Western-blot法检测Caspase-3蛋白表达。结果 PNS抑制U943细胞生长并呈时间和剂量依赖性;分别予100、200、400、800mg/L处理U937细胞48h,细胞凋亡率分别为（5.93±0.15）%、（7.43±0.70）%、（12.3±0.38）%和（20.4±0.91）%,对照组细胞凋亡率为（1.73±1.50）%（P〈0.01）,并诱导细胞G1期阻滞;Western-blot结果显示,PNS使Caspase-3蛋白表达上调。结论 PNS能抑制U937细胞增殖,并可能通过上调Caspase-3蛋白表达诱导细胞凋亡。     

青春期营养性肥胖对大鼠睾丸生殖细胞凋亡的影响

目的探讨营养性肥胖对青春期雄性大鼠睾丸生殖细胞凋亡的影响。方法健康青春期Wistar雄性大鼠20只,按随机化原则分为两组,每组10只,对照组给予普通饲料喂养,高脂组用高脂、高热量饲料喂养建立营养性肥胖大鼠模型,10周末处死大鼠摘取睾丸。全自动生化分析仪（ACA）检测外周血总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）;光镜观察睾丸组织病理学改变;原位缺口末端标记法（TUNEL）检测睾丸组织凋亡细胞;免疫组化法检测Cyt c、Caspase-3蛋白的分布和表达;RT-PCR法检测睾丸组织Cyt c mRNA和Caspase-3 mRNA的表达。结果高脂组TC、TG、LDL-C和HDL-C较对照组明显升高,差异有显著性（P〈0.05）;高脂组生殖细胞凋亡指数明显高于对照组（P〈0.01）,凋亡细胞以精原细胞和精母细胞为主;高脂组Cyt c蛋白和Cyt c mRNA表达明显高于对照组（P〈0.01）;高脂组Caspase-3蛋白和Caspase-3 mRNA表达明显高于对照组（P〈0.01）。结论营养性肥胖诱导大鼠睾丸生殖细胞凋亡增多,其机制可能与Cyt c、Caspase-3蛋白表达升高相关。     

类风湿关节炎患者外周血CD4+T细胞凋亡及其相关信号蛋白表达的检测和临床意义

目的探讨CD4~＋T细胞凋亡在类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）发病机制中的作用及其凋亡机制。方法应用流式细胞术分析类风湿关节炎患者及健康对照组外周血CD4~＋T细胞凋亡指标AnnexinV水平及凋亡相关信号蛋白Caspase-3,Caspase-8,促凋亡基因Fas和抑凋亡基因Bcl-2表达水平;同时对CD4~＋T细胞凋亡相关信号蛋白ESR、RF和DAS 28水平与临床活动相关指标进行相关性分析。结果与健康对照组相比,RA活动期患者CD4~＋T细胞数增加[（40.91±2.73）%vs（31.40±2.71）%,P〈0.05],CD4~＋T cell凋亡指标AnnexinV水平减少[（2.27±1.43）%vs（8.10±2.06）%,P〈0.05];RA患者外周血中CD4~＋T细胞促凋亡基因Fas表达较健康对照组降低差异无统计学意义[（63.12±4.61）%vs（84.13±1.72）%,P〈0.01],抑凋亡基因Bcl-2表达增加[（93.58±2.36）%vs（75.14±5.70）%,P〈0.05],Caspase-8减少[（18.54±15.23）%vs（3.02±1.39）%,P〈0.05],Caspase-3表达无差异无统计学意义[（2.17±1.19）%vs（2.53±1.46）%,P〉0.05];CD4~＋T细胞促凋亡基因Fas表达与DAS28评分呈负相关（r=-0.89,P=0.04,P〈0.05）,Bcl-2与DAS28评分呈正相关（r=-0.97,P=0.00,P〈0.01）。结论RA患者CD4~＋T细胞数量增多与其凋亡减少有关,这可能是导致该病自身免疫反应不能控制的重要原因之一。RA患者外周血CD4~＋T细胞凋亡减少与促凋亡基因Fas表达降低、凋亡相关蛋白Caspase-8表达下降及抑凋亡基因Bcl-2表达增高有关。Fas和Bcl-2的表达可作为评价临床活动性的敏感指标。     

白英提取物诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡及其对凋亡相关蛋白表达的影响

目的：探讨白英提取物（Solanum lyratum Thunb extract，STE）对人胃癌SGC-7901细胞凋亡及凋亡相关蛋白Survivin和Caspase-3表达的影响。方法：体外培养sGC-7901细胞，以2．5、5、10mg／LSTE处理sGC-7901细胞48小时，并以2．5mg／L顺铂（DDP）作为阳性对照。用MTT法检测细胞抑制率，TUNEL法检测凋亡率，二步法免疫组化检测Survivin和Caspase-3表达。结果：与正常对照组相比，STE各浓度组细胞抑制率显著上升（P〈0．001），细胞凋亡率明显升高（P〈0．01），Caspase-3蛋白表达显著上升（P〈0．05或P〈0．01），Survivin蛋白表达明显下降（P〈0．05或P〈0．01）。结论：STE具有诱导SGC-7901细胞凋亡的作用，其分子机制可能与上调Caspase-3及下调Survivin蛋白熹主夭有姜．     

微波辐射诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的可能机制

目的:观察微波辐射对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的影响,并探讨其机制.方法:采用10、30和50 mW·cm-2辐射强度的微波辐射SH-SY5Y细胞5 min,以假辐射组(0 mW·cm-2)为对照,光镜下观察细胞形态变化;荧光显微镜下观察DAPI染色细胞核的形态;CTAB法提取细胞基因组DNA,电泳观察DNA...     

FHIT,Caspase -3及Survivin蛋白在结肠癌组织中的表达及其意义

[目的]探讨结肠癌组织FHIT,Caspase-3及Survivin蛋白表达状况及其意义.[方法]免疫组化方法检测60例结肠癌组织和癌旁组织标本FHIT,Caspase-3及Survivin蛋白表达,并分析结肠癌3种蛋白表达间的相关性.[结果]结肠癌与癌旁组织,FHIT蛋白表达阳性率分别为31.9％和93.3％ (P ...     

马鞭草总黄酮诱导肝癌HepG-2细胞凋亡及可能机制

目的 探讨马鞭草总黄酮对肝癌HepG-2细胞凋亡的作用及可能机制.方法 采用浓度为50、100和200 mg/L的马鞭草总黄酮处理体外培养的肝癌HepG-2细胞,流式细胞仪和琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡;流式细胞仪检测活性氧簇(ROS)和膜电位变化;Western印迹法分析Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9和P53蛋白表达水平.结果 与未给药对照组比较,马鞭草总黄酮50、100和200 mg/L给药组均能促进肝癌HepG-2细胞凋亡(P<0.01),增加ROS水平(P<0.01),降低线粒体膜电位(P<0.05,P<0.01);马鞭草总黄酮50、100和200 mg/L可增加Caspase-3、Caspase-9和P53蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01).结论 马鞭草总黄酮可体外诱导肝癌HepG-2细胞凋亡,其诱导凋亡的机制可能与其增加ROS水平、降低线粒体膜电位,并同时上调Caspase-3、Caspase-9、P53蛋白水平有关.     

脑内注射凝血酶对大脑细胞凋亡的影响

目的 探讨脑内注射凝血酶（thrombin，TM）对周围组织Caspase-3蛋白表达和细胞凋亡机制的影响。方法 24只SD大鼠随机分为A，B，C3组，A组在大鼠右倒基底节区注入凝血酶（TM），B组注入TM＋组织蛋白酶G（catbepsia G，CATG），分别于注射后6，24，48，72，96h时间点处死，C组注入生理盐水。取脑组织应用Westernblot技术检测Caspase-3蛋白表达。结果 TM脑内注射后6h Caspase-3蛋白开始增加（P〈0．01），24h达高峰（P〈0．01），然后逐渐下降。TM＋CATG脑内注射后Caspase-3蛋白表达与对照组比较差异均无显著性（P〉0．05）。结论 TN脑内注射后Caspase-3蛋白表达明显增加，TM通过蛋白酶激活受体-1激活（PAR-1）激活Caspase-3，诱导细胞凋亡。     

CLINICOPATHOLOGICAL SIGNIFICANCE OF PTEN AND CASPASE-3 EXPRESSIONS IN BREAST CANCER

Objective To investigate the expressions of PTEN and Caspase-3 proteins in human breast carcinoma, and to evaluate their clinicopathological implications during the tumorigenesis and progression of breast cancer. Methods The expressions of PTEN and Caspase-3 proteins in 95 cases of breast cancer and 15 cases of benign breast diseases were investigated immunohistochemically. Correlations between the expression of PTEN protein, Caspase-3 protein, and clinicopathological features of breast cancers were analyzed. Results The loss expression rate of PTEN protein in tumor tissues was significantly higher than that in benign breast diseases （33.7% vs. 0, P 〈 0.01 ）. Analysis of the clinicopathological features showed that PTEN expression level was negatively correlated with TNM stage, histological grade, axillary lymph node status, recurrence, and metas- tasis （ P 〈 0. 05 ）. The positive expression level of Caspase-3 was negatively correlated with TNM stage （ P 〈 0. 01 ）, but not related with histological grade, axillary lymph node status, recurrence, or metastasis （ P 〉 0.05 ）. In addition, the expression of PTEN protein had significantly positive correlation with the expression of Caspase-3 protein in breast cancer （P 〈 0. 01 ）. Conclusion The combination detection of PTEN and Caspase-3 may serve as an important index to estimate the pathobiological behavior and prognosis of breast cancer.     

大肠肿瘤组织中Caspase-3、Bcl-2的表达及其与细胞凋亡和增殖的关系

目的探讨半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）、B细胞淋巴瘤伯血病基因2（Bcl-2）与大肠肿瘤发生、发展的关系。方法利用链菌素亲生物素-过氧化物酶法和末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记法。检测80例大肠组织（腺癌43例、腺瘤27例、正常组织10例）中Caspase-3、Bel-2和增殖细胞核抗原的表达水平及细胞凋亡情况。结果Caspase-3在大肠腺癌和腺瘤中的表达率分别为41．9％和55．6％，明显低于正常组织的80．0％（P〈0．01）；Caspase-3在大肠腺癌中的表达与肿瘤Dukes分期、分化程度有关（P〈0．05）。Bcl-2在大肠腺癌和腺瘤中的表达率分别为76．7％和70．4％，明显高于正常组织的20．0％（P〈0．01）；Bcl-2在大肠腺癌中的表达与分化程度有关（P〈0．01）。凋亡指数与增殖指数呈正相关（r=0.471，P〈0．01），与Caspase-3的表达呈正相关（r=0．634。P〈0．01）。与Bcl-2的表达呈负相关（r=-0．523，P〈0．01）。结论Caspase-3、Bcl-2与大肠肿瘤的细胞凋亡密切相关，参与细胞凋亡的调节机制，在大肠肿瘤恶变的过程中发挥作用，并与恶性程度关系密切，有可能成为大肠癌预后评估的参考指标。     

内毒素预处理激活大鼠急性脊髓损伤Nrf2蛋白抑制Caspase-3的表达

目的 研究大鼠急性脊髓损伤及经内毒素预处理后损伤脊髓中转录因子Nrf2及凋亡蛋白Caaspase-3的表达.方法SD大鼠132只,随机数字表法分为假手术组、模型组和LPS预处理组.采用改良Allen's打击法制作SD大鼠急性脊髓损伤(acute spinal cord injury,ASCI)模型,在术后1、3、5、7...     

川芎嗪对大鼠脑缺血再灌注Bcl-2、c-fos、Caspase-3的影响

目的:探讨川芎嗪干预脑缺血再灌注损伤后对Bd-2蛋白、C-fos蛋白、Caspase-3蛋白的表达影响及其保护大脑损伤的作用机制.方法:将SD大鼠30只,随机分为3组,即假手术组、模型组和治疗组,每组10只.建立脑缺血再灌注模型.治疗组用川芎嗪干预,采用免疫组化法测定川芎嗪干预大鼠脑缺血24 h后对Bd-2蛋白、C-fos蛋白、Caspase-3蛋白表达的变化.结果:在脑缺血再灌注损伤24 h后,治疗组脑组织Bcl-2蛋白阳性神经元数较模型组明显增多,差异有显著性意义(P＜0.01);治疗组C-fos蛋白和Caspase-3蛋白表达阳性神经元数较模型组明显减少,差异有显著性意义(P＜0.01).结论:川芎嗪能上调Bcl-2蛋白和下调C-fos蛋白和Caspase-3蛋白表达,川芎嗪可能通过抑制脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡机制,从而对脑脑缺血再灌注损伤有保护作用.