血管铸型方法检测组织工程骨修复羊胫骨缺损的远期血管化

目的采用血管铸型方法对组织工程技术修复中国青山羊胫骨大段骨缺损的远期血管化情况进行检测。方法中国青山羊3只，制备单侧胫骨20mm的骨与骨膜缺损，缺损部位内植入组织工程骨-珊瑚羟基磷灰石／骨髓基质干细胞（coral hydroxyapatite／bone marrow stem cells，CHAP／BMSCs）。术后3年分别行双侧后肢股动脉甲基丙烯酸甲酯血管铸型灌注，灌注后采用大体解剖、未脱钙骨片、扫描电镜等方法检测组织工程骨的远期血管化，并与健侧相同部位正常骨对照，观察其血管化效果。结果血管灌注后大体解剖观察示组织工程骨血管来源于周围软组织、髓腔血管及两端正常骨皮质。灌注后未脱钙骨磨片显示组织工程骨内微血管沿哈弗管和伏克曼管分布交织形成网状。采用图像分析仪比较组织工程骨与正常骨横切面磨片上血管相对面积，分别为（763．89±47．38）U／10万U与（788．00±65．83）U／10万U，差异无统计学意义（t=0．390，P〉0．05）。结论采用CHAP／BMSCs修复山羊胫骨大段骨缺损远期观察结果表明，新生骨远期血管化效果与正常骨无异，为组织工程骨下一步的临床应用提供可靠的依据。     

体外构建与体内构建组织工程骨的血管化研究

目的比较骨髓基质干细胞(BMSCs)与生物衍生骨体内、体外复合所构建的组织工程骨修复山羊胫骨大段骨-骨膜缺损的血管化进程以及血管化与成骨的关系,以探讨修复大段负重骨缺损的最佳途径。方法22只山羊制备成胫骨中段20mm的骨-骨膜缺损,随机分为2组,分别植入BMSCs与生物衍生骨体外构建和体内构建的组织工程骨,常规钢板螺钉内固定,在2、4、6、12周时间点分别用墨汁灌注透明标本、血管面积图像分析和X线片观察血管化过程及成骨情况。结果体外构建组与体内构建组血管化进程无明显区别,各时间点血管面积差异无显著性意义(P>0.05),12周均能达到完全血管化,但X线片见体外构建组新骨形成较快,缺损区密度高,体内构建组以上各变化较前者慢大约2～4周。结论BMSCs与生物衍生骨体外构建和体内构建的组织工程骨均能快速血管化并成骨,但是体内构建方式成骨较体外构建慢。     

影像学技术在组织工程骨修复山羊大段骨缺损长时间观察中的应用

目的 探讨放射性核素骨显像(ECT)、X线、CT等影像学技术在组织工程骨修复山羊大段负重骨骨缺损远近期实验观察中的应用价值。方法 中国青山羊15只，制备单侧胫骨2cm的骨膜与骨缺损，缺损内植入组织工程骨[CAP珊瑚羟基磷灰石 经诱导分化的骨髓基质干细胞（bone marrow stroma cells，BMSCs)]，术后ECT、X线、CT等影像学手段检查，评价骨缺损修复情况及各种手段的应用价值。其中在早期术后2、4、8周行ECT检查，4、8、12周行X线检查。远期在术后2、3、6个月行CT检查，术后6、12、18个月行X线。结果 术后影像学手段检测表明，组织工程骨组可以修复2cm的骨缺损，ECT显示在术后2个月内骨再生和再血管化进展顺利，X线和XT显示术后组织工程骨成骨呈渐进性和偏心性，12个月以后组织工程骨与山羊胫骨牢固愈合，并开始塑形。结论 组织工程骨具有良好的修复山羊大段骨缺损的能力，在这一过程中影像学技术提供了理想的直观依据。     

血管化组织工程骨修复猕猴胫骨缺损模型的建立及初步观察

目的通过对猕猴的解剖和实验,初步建立一种可行的利用血管化组织工程骨修复猕猴胫骨段性缺损的动物模型。方法对一只自然死亡的猕猴进行新鲜解剖,观察其胫骨的形态及周围知名血管束的解剖路径;将10只猕猴双侧胫骨(共20处)制成中段20mm骨-骨膜缺损模型,随机平均分成2组,实验组在缺损处填塞由骨髓基质干细胞(BMSCs)和具有特殊外型(侧槽和中空管)的β-磷酸三钙(β-TCP)支架体外构建的复合物,在中空管内移入隐动、静脉的一段,组织工程骨外被带蒂深筋膜;对照组只填塞组织工程骨。另取2只猕猴的无填充物胫骨缺损作对照。钢板螺钉固定。在4、8、12周时间点分别行放射线检测,墨汁灌注标本,组织学检测及标本大体观察。结果各时间点上,实验组在成骨、血管化程度及材料吸收方面明显优于对照组。未填充任何材料的缺损无愈合。各组猕猴术后一般表现无差异;术前、术后表现无明显变化。结论本组实验所建立的猕猴胫骨段性缺损修复模型及组织工程骨血管化方法是有效的、可行的,为组织工程骨的临床应用提供参考。     

吻合血管折叠式腓骨皮瓣修复大段胫骨及皮肤软组织缺损

目的报道采用吻合血管的折叠式腓骨皮瓣修复胫骨大段缺损伴骨外露的方法，并观察其临床疗效。方法采用吻合血管的折叠式腓骨皮瓣修复胫骨大段缺损伴骨外露5例。胫骨缺损6～10cm，皮肤软组织缺损范围4cm×5cm-7cm×18cm。保持骨膜的连续性，将腓骨截骨后折叠形成双管状腓骨皮瓣，移植修复胫骨及皮肤缺损。结果术后移植组织全部成活，皮瓣弹性、色泽良好，术后3—4个月患肢开始负重，术后随访8～10个月，复查X线片示腓骨与胫骨骨性愈合良好，恢复行走功能。结论吻合血管的折叠式腓骨皮瓣修复胫骨大段缺损伴骨外露及皮肤软组织缺损是可靠、有效的治疗方法，值得临床推广应用。     

放射性核素骨显像在组织工程骨修复羊胫骨骨缺损实验中的应用价值

目的探讨珊瑚羟基磷灰石(CHAP)体外复合经扩增的骨髓基质细胞(BMSc)在大动物大段骨缺损中的修复能力及放射性核素骨显像技术在此过程中的应用价值.方法中国青山羊6只分为实验组和对照组,每组3只.分别造成左侧胫骨2cm骨缺损,实验组缺损区植入CHAP和BMSc复合体,对照组不植入任何填充物.术后2、4、8周分别通过放射性核素骨显像进行监测.结果放射性核素骨显像中感兴趣区(ROI)计数和摄取比值显示对照组在3个时间点均未见再血管化的表现及明显的成骨活动,而实验组则随着时间的延长再血管化的数量和成骨的质量呈现出上升的趋势.结论CHAP和BMSc复合体具有良好的修复大动物大段骨缺损的能力,放射性核素骨显像在修复过程中有非常准确的预测效果.     

复合血管内皮祖细胞的组织工程骨在修复大段骨缺损实验中的血管化评价

目的 评价复合了血管内皮祖细胞(EPCs)的组织工程骨在修复兔桡骨大段骨缺损实验中的血管化情况.方法 自体骨髓通过不同方法的体外培养,获得EPCs及经成骨诱导的骨髓基质干细胞(BMSCs),与脱钙骨基质(DBM)构建组织工程骨修复兔桡骨大段骨缺损.用墨汁灌注、放射性核素骨显像、血管内皮细胞生长因子和Ⅷ因子相关抗原的免疫组化方法观察术后不同时期实验组(EPCs+BMSCs+DBM)、自身对照组(BMSCs+DBM)、阴性对照组(DBM)的骨组织血管化情况.结果 各组手术后2周骨缺损区新生血管数量增加,血流量开始升高,4周和8周时达到峰值,12周后开始下降.实验绀的新生血管数量和局部血流量在术后2、4、8周明显高于自身对照组和阴性对照组,血管排列更整齐.结论 复合EPCs的组织工程骨在修复大段骨缺损时,能促进早期血管化,从而进一步促进成骨.     

组织工程骨膜同种异体体内修复兔肩胛骨大段骨缺损的实验研究

[目的]对比观察组织工程骨膜(tissue-engineered periosteum,TEP)及脱蛋白骨对兔肩胛骨大段骨缺损的修复效果,探讨组织工程骨膜通过膜内化骨修复大段不规则骨缺损的可行性。[方法]将体外分离培养的兔骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)传代扩增及成骨诱导后,与自制的猪小肠黏膜下基质(small intestinal submucosa,SIS)复合培养构建组织工程化骨膜。选取2个月龄新西兰大白兔60只,行肩胛骨次全切除术,制作大段不规则骨缺损模型。随机分为5组,每组12只:A组在骨缺损区置入TEP;B组在骨缺损区置入脱蛋白骨(deproteinization bone,DPB);C组在骨缺损区置入TEP+DPB复合体;D组、E组则分别为造模后不处理空白组和切除骨保留自身骨膜组。术后4、8、12周时,各组每次分别处死4只动物收集标本,进行X线片及组织学检测,对比分析各组肩胛骨大段骨缺损的修复效果。[结果]X线表现:不同时间段,A、C组均有相当数量的新生骨形成,密度接近正常骨。其中C组外观形态与正常肩胛骨相似,塑形好,与E组密度较接近。B组DPB逐渐被吸收,无骨缺损修复征象。D组缺损区始终无高密度影出现。组织学表现:A、C、E组4周时以多点方式形成新骨,8周时出现岛状生长的骨组织,12周时新生骨趋成熟,呈编织状排列,可见血管腔。B、D组仅为胶原瘢痕组织,无新骨生成。[结论]组织工程骨膜可修复兔肩胛骨大段骨缺损,其通过膜内化骨修复大段不规则骨缺损是可行的。     

异种脱蛋白骨管复合不同移植材料修复大段骨缺损的实验研究

目的 应用异种脱蛋白骨管复合骨基质明胶(BMG)、骨形态发生蛋白(BMP)、骨膜细胞与复合脱钙骨基质(DBM)、自体红骨髓(RBM)作比较,观察修复猪大段骨缺损的成骨差异.方法 建立猪双侧胫骨大段骨缺损模型.24只成年猪,随机分成2组,实验组A:异种骨管+BMG、BMP、骨膜细胞;实验组B:异种骨管+DBMLRBM;两组均采用锁定钢板及异种皮质骨板固定.分别于术后4、8、12、24周时通过大体标本观察.放射学及组织学观察评估其修复猪大段骨缺损的成骨情况.结果 植入后24周,异种骨管复合BMG、BMP、骨膜细胞完全修复.成骨活跃程度,骨再生量和重建髓腔结构等方面均显著;复合脱钙骨基质、自体红骨髓成骨能力较弱.结论 异种脱蛋白皮质骨管复合骨基质明胶、骨形态发生蛋白及骨膜细胞能够有效修复大段骨缺损.     

组织工程骨膜及脱蛋白骨修复兔桡骨大段骨缺损的早期观察

[目的]比较组织工程骨膜及脱蛋白骨对兔桡骨大段骨缺损的早期修复效果,研究组织工程骨膜移植修复大段骨缺损的可行性。[方法]分离兔骨髓间充质干细胞体外诱导增殖,制成细胞悬液接种于猪小肠黏膜下层表面,构建组织工程骨膜。3个月龄新西兰大白兔24只,随机分为3组各8只,手术制备单侧桡骨干30 mm骨膜-骨缺损模型,A组缺损区植入组织工程骨膜骨修复,B、C组则分别以猪小肠黏膜下层和脱蛋白骨作为对比。术后4周,行X线检查并杀取标本予以组织学染色及评分。[结果]经放射学和组织学观察,在A组中缺损区可见大量新骨形成并桥连两缺损端;而在B组和C组中无明显新骨产生。[结论]使用组织工程骨膜修复同种异体兔桡骨大段骨缺损是可行的,且明显优于脱蛋白骨。     

在下肢大段骨缺损治疗中Ilizarov技术的选择

[目的]总结应用Ilizarov技术治疗下肢大段骨缺损的临床体会，探讨不同病例的术式选择。[方法]14例下肢大段骨缺损，平均8．5cm，其中股骨2例；胫骨12例；创伤11例，均伴有不同程度的骨感染和（或）软组织缺损，骨肿瘤切除3例？分别采用肢体短缩加骨段截骨延长，或加骨段输送延长，或单纯骨段截骨输送治疗。[结果]全部病例均获得1a以上随访，骨缺损治愈，骨感染消失，皮肤创面消灭，肿瘤无复发，无附加神经血管损伤症状：[结论]Ilizarov技术是治疗骨大段缺损的简单而有效方法，根据不同病例，选择不同术式可简化治疗过程．缩短治愈时间。     

活骨移植治疗四肢骨肿瘤切除后长段骨与关节缺损

目的:探讨四肢骨肿瘤的广泛或边缘切除后,长段骨关节缺损的修复方法及其疗效。方法:四肢骨肿瘤切除术后骨缺损14例,男10例,女4例;年龄4~37岁。骨巨细胞瘤4例,骨化性纤维瘤1例,非骨化性纤维瘤2例,韧带样纤维瘤1例,骨纤维结构不良3例,侵袭性骨母细胞瘤1例,软骨母细胞瘤1例,瘤样病损致骨溶解1例。14例四肢侵袭性良性骨肿瘤行肿瘤广泛或边缘切除,应用吻合血管的腓骨、带腓骨头腓骨近端和带旋髂深血管的髂骨瓣移植修复骨缺损、重建桡腕关节和重建肩关节。移植体行简单内固定加外固定。术后定期复查X线片、多普勒血管超声,其中3例行ECT核素骨扫描,并作关节功能评定。结果:随访3个月~5年,13例均于手术后3个月后达Ⅰ期愈合,其中1例因内固定松动再次手术而愈合。1例肿瘤局部复发,再次行肿瘤切刮与植骨术后愈合;2例畸形愈合行截骨矫形后愈合。关节功能评定:优9例,良3例,差2例。结论:骨肿瘤切除后行骨移植修复骨缺损、重建关节,手术切除彻底,复发率低,植骨愈合可靠,重建后的关节功能良好。     

Are Bone Turnover Markers Capable of Predicting Callus Consolidation During Bone Healing?

The aim of this study was to determine the ability of the following bone turnover markers to monitor the course of callus consolidation during bone healing: Carboxy-terminal propeptide of procollagen type I (PICP), skeletal alkaline phosphatase (sALP), and amino-terminal propeptide of type III procollagen (PIlINP). Since interfragmentary movements have been proven to possess the ability to document the progression of bone healing in experimental studies, correlations between bone turnover markers and interfragmentary movements in vivo were investigated. Therefore, two different types of osteosyntheses representing different mechanical situations at the fracture site were compared in an ovine osteotomy model. Blood samples were taken preoperatively and postoperatively in weekly intervals over a nine-week healing period. At the same intervals, interfragmentary movements were measured in all sheep. After nine weeks, animals were sacrificed and the tibiae were evaluated both mechanically and histologically. Wide interindividual ranges were observed for all bone turnover markers. The systemic PICP level did not increase with callus consolidation. The bone-healing model seemed to influence the systemic level of PIIINP and sALP but no general correlation between bone turnover markers and interfragmentary movements could be detected. No differences between the different types of osteosyntheses and thus the different mechanical situations were observed. All analyzed markers failed as general predictors for the course of callus consolidation during bone healing.     

骨重建中的骨代谢指标

骨重建是破骨细胞和成骨细胞共同完成的旧骨退化,等量新骨取代的骨组织更新过程,在骨重建过程中,许多激素和细胞、体液因子以及细胞代谢产物影响骨的重建.目前国内外通过生物化学检测技术获得的骨代谢指标分为骨代谢调节激素、细胞与体液因子、骨吸收、骨形成标志物.笔者将影响骨重建生物化学指标的生理作用、临床意义进行综述.骨代谢指标虽不能作为骨质疏松诊断的金标准,但已广泛应用于临床,评价骨代谢状态、骨质疏松诊断分型、预测骨折风险、观察药物治疗的疗效,以及代谢性骨病的鉴别诊断.并且在抗骨质疏松药物的研究及流行病学研究方面具有重要应用价值.     

异体松质骨移植治疗骨肿瘤切除后骨缺损

目的：探讨应用异体松质骨移植治疗肿瘤切除后骨缺损的生物材料填充方法。方法：总结应用深低温冷冻保存异体松质骨移植治疗骨肿瘤切除后骨缺损57例。年龄6－56岁,平均年龄17．4岁。结果：除1例因感染异体骨取出外,其余56例均取得满意的骨愈合,愈合时间平均为4．5个月。依骨腔大小或植骨量的不同愈合时间 亦有所不同。单纯异体松质骨移植与异体松质骨加自体松质骨混合移植相比,愈合时间没有明显不同。植骨量越大,骨愈合时间越长。此组患者中未见明显排异反应及并发感染者。肿瘤复发率为7％。结论：同其他骨缺损填充方法和大块异体骨的使用相比,此种方法可行性较好,安全性较高。在骨愈合率,骨愈合时间上及复发以外并发症的发生上同自体松质骨植骨无明显差异。     

Bone substitutes

Summary Biocompatible calcium phosphate ceramics has been used for several years in orthopeadic surgery. We have been using two new synthetic biphasic calcium phosphate ceramics (BCP) since September 1996 for bone defect filling in any orthopaedic or trauma operation where autograft use was not possible or even wanted. The first, Eurocer 400® has 300 to 500 micron wide macropores with a totally interconnected porosity. This salt seed like product can be used in bone defect filling, when solidity is not a major concern. The second, Eurocer 200® has not totally interconnected 200 micron large pores. Its main characteristic is a mechanical resistance up to 30 Mpa. We use it in any case of weight-bearing surgery. Different sizes and presentation forms are available and will be chosen according to the recipient site shape. We report one hundred and fifty cases with a six to thirty month follow-up. In one third of the patients hip revision surgery was addressed. Another third concerned recent trauma or sequelae cases,.whereas the last third involved cold orthopaedic procedures. General principles are the need of a living and non-infected site after thorough debridement if necessary. Osteocompatibility of calcium phosphate ceramic is confirmed by our results. We report no mechanical failure. In all cases X-rays show a progressive integration, with new bone formation. Our substitutes have been histologically studied in nine cases, four to fifteen months after implantation. New bone formation around and in the substitute is impressive. Indeed, their good mechanical properties without loss of biological quality is the most relevant feature of these BCPs, leading to a wider indication field; therefore we have now abandoned the use of any bony auto, allo or xenograft.Paper presented at the 1998 meeting of GECO (Arc 1800, Bourg-Saint-Maurice, France)     

表面脱钙骨基质明胶修复长骨骨缺损9例报告

采用表面脱钙骨基质明胶（ＳＤＢＭＧ）移植治疗长骨大块骨缺损９例，结果，除１例因适应证选择不当而失败外，其它８例均得到治愈，患健肢等长。说明ＳＤＢＭＧ具有良好的成骨作用和可靠的生物力学性能，是修复长骨大块骨缺损的理想移植材料，可作为自体骨合适的替代材料推广使用，但对急性感染性骨缺损应慎用     

深度冷冻大段同种骨的制备及应用

目的：建立现代骨组织库，观察深度冷冻大段同种骨移植的临床效果。方法：采用深度冷冻、物理脱脂、真空包装和辐照灭菌等现代技术处理人类大段骨组织，临床应用24例，包括创伤性肢体骨重建、半侧骨盆重建、半侧骶骨移植、四肢大段骨或骨关节移植等，观察近期临床结果。结果：骨移植材料的无菌检测合格，生物力学强度无明显下降，可远程运输和短期保存．全部病例无明显的免疫排斥反应，成功率为100％.结论：深度冷冻大段同种骨临床使用安全可靠，保存和运输方便.     

骨基质明胶复合自体红骨髓及同种异体骨修复骨缺损

目的:评价骨基质明胶复合自体红骨髓及同种异体骨联合移植修复骨缺损的疗效。方法:76例良性骨肿瘤和瘤样病损患者,彻底刮除病灶或作肿瘤骨段切除,并对瘤壁作灭活处理,以同种异体骨作支架,周围填充骨基质明胶和自体红骨髓复合物,术后观察机体反应及骨缺损修复情况。结果:术后机体无明显免疫排斥反应,无1例发生感染,所有病例随访时间为5～16个月,X线显示新骨形成时间为术后1.5～4月,完全骨化的时间为术后5～9月,骨缺损骨性愈合74例,并获得较好的关节功能,肿瘤复发2例。结论:骨基质明胶、自体红骨髓、同种异体骨复合物能有效修复骨缺损,有广泛的临床应用前景。     

The comparative effects of dichloromethylene diphosphonate (Cl2MDP) and ethane-1-hydroxy-1,1-diphosphonate (EHDP) on growth and modeling of the rat tibia

Summary Male rats weighing 100 g were assigned to groups and injected daily for 10 days with vehicle (control), 0.4, 2.0, 4.0, 10.0, or 20.0 mg/kg/day of ethane-1-hydroxy-1,1-diphosphonate (EHDP) or dichloromethylene diphosphonate (Cl₂MDP). The proximal tibial metaphysis and epiphysis were assayed for changes in percentage of hard tissue and bone formation parameters. From the data, information about hard tissue resorption was deduced.All doses of Cl₂MDP and doses of 2.0 mg EHDP/kg/day and greater caused significant increases in percentage of hard tissues with Cl₂MDP being more effective than similar doses of EHDP in decreasing bone resorption.Osteoclast population parameters were increased with all doses of both Cl₂MDP and EHDP with Cl₂MDP having a greater effect than similar doses of EHDP. Decreases in the proliferation of the osteoprogenitor pool parallel the decreases in osteoblasts and bone formation parameters. These decreases in osteoprogenitor pool proliferation do not account for the increases with diphosphonates in osteoclast population parameters.