化浊解毒活血通络方通过调控核因子E2相关因子2/Kelch 样环氧氯丙烷相关蛋白-1通路发挥对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织抗氧化作用的机制研究

目的 观察化浊解毒活血通络方通过调控核因子E2相关因子2(Nrf2)/Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)通路对脑缺血再灌注损伤大鼠的抗氧化作用,探讨其可能的神经保护机制。方法 将80只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组及化浊解毒活血通络方高、低剂量组,每组16只。除假手术组外,其余组采用Longa法制备大脑中动脉闭塞模型大鼠。造模成功后,化浊解毒活血通络方高、低剂量组给分别予化浊解毒活血通络方25、6.25 g/(kg·d)灌胃,尼莫地平组予尼莫地平混悬液9.375 mg/(kg·d)灌胃,模型组及假手术组均予等容积0.9%氯化钠注射液灌胃。灌胃3 d后比较各组大鼠改良神经功能缺损评分(mNSS),评分后处死取脑,2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色比较各组大鼠脑梗死体积;制作苏木精-伊红(HE)染色切片观察脑组织病理变化;干湿法测量脑组织含水量;检测脑组织丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性;蛋白免疫印迹法检测脑组织Nrf2、Keap1蛋白表达量;逆转录聚合酶链式反应检测脑组织Nrf2、Keap1基因表达。结果 与...     

益气活血化浊解毒方对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织VEGF、Notch1、Dll4表达的影响

目的 观察益气活血化浊解毒方对脑缺血再灌注损伤大鼠的治疗作用,初步探讨其保护神经血管单元的机制。方法 将SPF级大鼠随机分为假手术组、模型组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组和尼莫地平组。采用线栓法制备大脑中动脉闭塞模型,各组予相应干预,3天后计算各组大鼠神经功能评分,TTC染色测定脑梗死面积,免疫组化检测大鼠脑组织血管内皮生长因子(vascular endothelial growth inhibitor, VEGF)蛋白表达,q-PCR检测大鼠脑组织Notch1、Dll4 mRNA表达,Western blot检测大鼠脑组织VEGF、Notch1、Dll4蛋白表达。结果 (1)神经功能评分结果显示：中药低、中、高剂量组及尼莫地平组较模型组大鼠神经功能缺失评分均有所降低(P<0.05);(2)脑梗死面积结果显示：中药低、中、高剂量组及尼莫地平组较模型组大鼠脑梗死面积显著缩小(P<0.05);(3)免疫组化结果显示：中药低、中、高剂量组及尼莫地平组较模型组大鼠脑组织VEGF蛋白表达显著增大(P<0.05);(4)q-PCR结果显示：中药低、中、高剂量组及尼莫地...     

基于Nrf2/HO-1信号通路探讨益气活血方对脑缺血损伤大鼠氧化应激反应的影响

目的:以氧化应激损伤为切入点探讨益气活血方对脑缺血损伤大鼠的保护作用。方法:将SD大鼠随机分为模型组,假手术组,尼莫地平组(20 mg·kg~(-1)),益气活血方高、中、低剂量组(2. 916,1. 458,0. 729 g·kg~(-1)),连续灌胃14 d后,采用结扎双侧颈总动脉法建立急性脑缺血损伤模型,透射电镜观察突触超微结构,生化法检测脑匀浆中总超氧化物歧化酶(T-SOD),丙二醛(MDA),乳酸脱氢酶(LDH),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)酶的水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)测定大鼠缺血区脑皮层血红素氧化酶-1(HO-1),核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白和m RNA表达。结果:透射电镜观察结果显示益气活血方对脑缺血损伤程度有明显改善作用。与假手术组比较,模型组大鼠脑匀浆MDA水平显著上升,T-SOD,GSH-Px水平显著降低(P 0. 01),LDH,Na+-K~+-ATP酶,Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶及ATP酶的活性均明显降低(P 0. 05,P 0. 01),脑组织中HO-1,Nrf2蛋白含量以及HO-1,Nrf2 m RNA表达显著降低(P 0. 01)。与模型组比较,益气活血方中、高剂量组可明显降低脑组织中MDA含量,升高T-SOD,GSH-Px的水平(P 0. 05,P 0. 01);益气活血方高剂量组可显著增加LDH,Na+-K+-ATP酶,Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶和总ATP酶活性(P 0. 05,P 0. 01),益气活血方中、高剂量组大鼠脑组织中HO-1,Nrf2蛋白含量明显升高(P 0. 05,P 0. 01),益气活血方高剂量组HO-1,Nrf2 m RNA表达明显升高(P 0. 05,P 0. 01)。结论:益气活血方可能通过Nrf2/HO-1信号通路抑制氧化应激水平实现对脑缺血损伤的保护作用。     

基于Nrf2/HO-1信号通路探讨脑清通颗粒对脑缺血再灌注大鼠的保护作用及机制

目的:探讨脑清通颗粒对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法:90只大鼠随机分为假手术对照组、模型对照组、尼莫地平6.25 mg/kg组、脑清通颗粒1.3、2.6、5.2 g/kg组,每组15只。除假手术对照组外,其余各组采用高脂饲料喂养、复合应激刺激和线栓法制备脑缺血再灌注大鼠模型。从第6 w起,假手术对照组和模型对照组用等体积生理盐水灌胃,其余各给药组用相应药物灌胃,1次/d,连续给药7 d。观察大鼠体征表现;采用神经功能评分、TTC染色及脑梗死体积测定评价脑缺血再灌注模型;尼氏染色观察神经细胞变化;ELISA法检测SOD活力和MDA含量;免疫组化法和Western blot法检测Keap1、Nrf2和HO-1的蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠体征表现符合临床肝热痰瘀证基本特征,神经功能评分、脑梗死体积显著增加,大鼠血清SOD活力显著降低,MDA含量明显升高,脑组织Keap1、Nrf2、HO-1的蛋白表达明显上调(P<0.05或P<0.01);与模型对照组比较,脑清通颗粒1.3、2.6、5.2 g/kg组可改善大鼠体征表现,明显降低神经功能评分和脑梗...     

天麻钩藤饮对脑缺血模型大鼠皮层组织中Nrf2/HO-1信号通路的影响

目的研究天麻钩藤饮对脑缺血再灌注损伤大鼠大脑皮层组织中氧化应激损伤的影响及作用机制。方法将40只大鼠随机分为假手术组、模型组、天麻钩藤饮组和阻断剂组,每组10只。除假手术组大鼠行假手术外,其余各组大鼠均采用线栓法复制大鼠中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)模型。造模成功后3 h内开始予相应药液灌胃给药,每日灌胃1次,连续给药3 d。末次给药2 h后获取脑组织样本;苏木精-伊红(HE)染色后观察脑组织病理学变化;RT-PCR及Western blot法检测大脑皮层组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶1(HO-1)mRNA及蛋白表达水平。结果与假手术组比较,模型组Nrf2、HO-1 mRNA表达、HO-1蛋白表达及神经功能评分均明显提高(P<0.05);与模型组比较,天麻钩藤饮组Nrf2、HO-1 mRNA和蛋白表达均明显提高(P<0.05),神经功能评分均明显降低(P<0.05);与天麻钩藤饮组比较,阻断剂组Nrf2、HO-1 mRNA和蛋白表达均明显降低(P<0.05),神经功能评分均明显提高(P<0.05)。结论天麻钩藤饮对脑缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与Nrf2/HO-1信号通路被激活有关。     

鹅不食草介导Nrf2/HO-1信号通路在脑缺血再灌注中抗氧化抗炎作用机制研究

目的:探讨鹅不食草对脑缺血再灌注大鼠Nrf2/HO-1信号通路介导的氧化应激反应和神经炎症影响。方法:SD大鼠分为假手术组、脑缺血组、依达拉奉组、鹅不食草100 mg/kg剂量组、鹅不食草200 mg/kg剂量组、鹅不食草400 mg/kg剂量组。采用中动脉栓塞介导大鼠缺血损伤,连续给药后评价大鼠神经功能,脑组织脑梗死面积、氧化因子、炎症因子含量,Nrf2、HO-1 mRNA与蛋白含量。结果:与假手术组相比,脑缺血组大鼠神经功能显著损伤(P<0.05),脑梗死体积增加(P<0.05),氧化因子、炎症因子含量增加(P<0.05)。与脑缺血组相比,鹅不食草组与依达拉奉组改善了大鼠神经功能(P<0.05),减少脑梗死面积(P<0.05),抑制氧化应激与炎症反应(P<0.05),而Nrf2、HO-1 mRNA与蛋白表达增加(P<0.05)。结论:鹅不食草可以介导Nrf2/HO-1信号通路减少大鼠脑中氧化应激反应与炎症因子含量,改善大鼠神经功能。     

针刺对急性脑出血大鼠Nrf2/ARE信号通路关键因子表达的影响

目的:探讨"百会"透"曲鬓"针刺法对急性脑出血大鼠Nrf2/ARE信号通路关键因子表达的影响。方法:将健康雄性Wistar大鼠54只随机分为针刺组、模型组和假手术组;再将各组分成3个时间亚组分别为1 d、3 d和7 d,每个亚组6只大鼠。采用自体血注入法建立脑出血大鼠模型。针刺组于造模成功后给予大鼠患侧"百会"透"曲鬓"针刺治疗。采用Longa评分法综合评价各组大鼠的神经功能缺损情况。Western-blot方法检测大鼠脑组织血肿周围转录调节因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)和醌氧化还原酶1(NQO1)蛋白表达情况。结果:神经行为学评分结果:模型组大鼠出现不同程度的神经功能缺损症状,术后3 d神经功能缺损最重,术后7 d减轻。针刺组大鼠在各个时间点的评分均低于同时间点模型组,与模型组比较,差异具有统计学意义(P0.05)。Western blot方法检测结果:模型组大鼠Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达量于术后1 d已有较明显增多,术后3 d表达最多,术后7 d较高峰期有所回落,但表达仍高于假手术组,差异具有统计学意义(P0.01)。针刺组大鼠各个时间点Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达量与同期模型组比较,均明显高于模型组,差异具有统计学意义(P0.01)。各组大鼠脑组织中Nrf2与HO-1、Nrf2与NQO1表达呈正相关。结论:"百会"透"曲鬓"头针疗法可以改善大鼠神经缺损症状,促进Nrf2/ARE信号通路关键因子Nrf2、HO-1和NQO1的表达,对抗氧化应激损伤,从而保护脑细胞。     

基于Nrf2/ARE信号通路探讨清热化瘀方对大鼠脑缺血再灌注损伤氧化应激反应的影响

目的:从核转录因子E2相关因子2/抗氧化反应元件(Nrf2/ARE)信号通路探讨清热化瘀方对脑缺血再灌注损伤大鼠氧化应激的影响及可能的作用机制。方法:采用Longa线栓法制备局灶性脑缺血再灌注大鼠(MCAO)模型,将160只SD大鼠随机分为4组,分别为假手术组(SO),模型组(MCAO),清开灵组(QKL),清热化瘀方组(QRHY)。每组大鼠40只,根据取材时间点12 h,1 d,2 d,3 d可以分为每组分为4个亚组,每个亚组10只大鼠。分别采用氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测量脑梗死体积,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和免疫组化检测Nrf2/ARE信号通路蛋白Nrf2和血红素加氧酶1(HO-1)mRNA及其蛋白表达变化。结果:与SO组比较,大鼠脑缺血再灌注后1 d,MCAO组梗死体积显著升高(P0.01),QKL组较MCAO组梗死体积明显减小(P0.05);QRHY组脑梗死体积较QKL组进一步缩小(P0.05);MCAO组Nrf2和HO-1 mRNA及其蛋白表达均于缺血再灌注后12 h开始明显上升,24 h达高峰(P0.05,P0.01),随再灌注时间延长其表达逐渐下降,但仍保持较高表达水平(P0.05);QKL组较MCAO组Nrf2和HO-1 mRNA及其蛋白表达明显升高(P0.05),QRHY组较QKL组进一步升高Nrf2和HO-1 mRNA及其蛋白表达(P0.05,P0.01)。结论:清热化瘀方治疗脑缺血再灌注损伤可能通过激活Nrf2/ARE信号通路而降低细胞氧化损伤的程度,从而达到保护神经元的作用。     

谷红注射液对新生大鼠脑缺氧缺血损伤的保护作用研究

目的探讨谷红注射液对缺氧缺血新生大鼠脑损伤的保护作用及分子机制。方法 126只健康7日龄SD新生大鼠随机分为假手术组,模型组,谷红注射液组低、中、高剂量组、ERK抑制剂LY3214996组(ERK组)、ERK+谷红组。通过结扎左颈总动脉和吸入8%低氧混合气体建立缺氧缺血新生大鼠模型。给药后,对各组大鼠进行神经功能缺损评分,观察脑组织病理学改变,检测脑含水量、脑组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSP-Px)含量及p-ERK、Nrf2和HO-1蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组新生大鼠神经功能缺损评分、脑组织含水量、MDA含量均显著升高(P 0.05),SOD和GSP-Px活力、p-ERK、Nrf2和HO-1蛋白表达均显著降低(P 0.05)。与模型组比,谷红中剂量组、谷红高剂量组和ERK+谷红组新生大鼠神经功能缺损评分、脑组织含水量、MDA含量均显著降低,SOD和GSP-Px活力、p-ERK、Nrf2和HO-1蛋白表达均显著升高(P 0.05)。与ERK组比较,ERK+谷红组新生大鼠神经功能缺损评分、脑组织含水量、MDA含量均显著降低,SOD和GSP-Px活力、p-ERK、Nrf2和HO-1蛋白表达均显著升高(P 0.05)。结论谷红注射液可能通过激活ERK/Nrf2/HO-1信号通路保护新生大鼠脑缺氧缺血损伤。     

调脂通脉解毒方对脑缺血再灌注大鼠炎症因子及脑梗死体积的影响

目的:探讨调脂通脉解毒方对脑缺血损伤大鼠hs-CRP、Lp-PLA2炎症因子表达及脑梗死体积的影响。方法:将雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、调脂通脉解毒方低剂量组[20 mg/(kg·d)]、调脂通脉解毒方中剂量组[40 mg/(kg·d)]、调脂通脉解毒方高剂量组[60 mg/(kg·d)]及尼莫地平组[15mg/(kg·d)];采用线栓法制备大脑中动脉梗死大鼠模型,在缺血2 h后,拔出线栓实施24 h再灌注,再灌注术后14 d造模成功大鼠灌胃给药,每天1次,假手术组及模型组给予等体积溶液。观察各组hs-CRP、Lp-PLA2的含量变化及脑梗死体积的情况。结果:与假手术组比较,模型组、尼莫地平组、调脂通脉解毒方各组大鼠脑组织hs-CRP、Lp-PLA2含量均显著升高(P0.01);与模型组比较,调脂通脉解毒方各组、尼莫地平组hs-CRP、Lp-PLA2含量均显著降低(P0.01)。除假手术组外其余各组均出现脑梗死情况,与模型组比较,调脂通脉方高、中、低剂量组和尼莫地平组均能显著改善脑梗死情况,其中以高剂量组最优。结论:调脂通脉解毒方能显著降低hs-CRP、Lp-PLA2表达,减轻炎症损伤反应,减少脑梗死体积,从而对大鼠缺血再灌注损伤起到保护作用。     

益气活血解毒方药中活性物质组合抗脑缺血性损伤作用的实验研究

 目的 观察益气活血解毒方药中主要活性物质皂苷、黄酮、多糖等组合对脑缺血再灌注损伤的作用及其机制。方法 SD大鼠随机分为假手术组,脑缺血再灌注模型组,皂苷组,黄酮组,多糖组,活性物质组合组,尼莫地平组,每组10只。线栓法制备大脑中动脉局灶性栓塞模型,观察各组对大鼠神经缺损功能的恢复,脑梗死体积,脑指数、脑含水量,缺血侧脑组织超氧化物歧化酶活力、丙二醛含量,白细胞介素-1β、白细胞介素-6和肿瘤坏死因子-α等炎症因子的含量,Bcl-2和Bax蛋白表达,尼氏小体数的影响。结果 益气活血解毒方药主要活性物质皂苷、黄酮、多糖活性物质组合配伍能显著地减轻中动脉局灶性栓塞模型大鼠的神经功能缺损症状,促进神经功能缺损症状恢复;缩小大鼠中动脉局灶性栓塞后脑组织梗死体积,降低脑梗死体积百分率;减轻脑水肿,降低脑指数和脑含水量;提高缺血再灌注后大鼠脑组织中超氧化物歧化酶活性、降低丙二醛含量;降低缺血侧脑组织白细胞介素-1β、白细胞介素-6和肿瘤坏死因子-α等炎症因子的含量;上调Bcl-2蛋白、下调Bax蛋白表达,调节两者比例;抑制尼氏小体数的减少。结论 益气活血解毒方药中主要活性物质组合对大鼠脑缺血再灌注引起的损伤具有明显的保护作用。     

珍龙醒脑胶囊对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究珍龙醒脑胶囊对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 120只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,尼莫地平(37 mg/kg)组,珍龙醒脑胶囊低、高剂量(125、250 mg/kg)组。利用大鼠可逆性右侧脑中动脉闭塞线栓法制作局灶性脑缺血再灌注模型,用Longa's法、TTC染色法评价大鼠的神经功能评分和脑梗死体积;检测左右半脑组织中谷胱甘肽(GSH)、总抗氧化能力(T-AOC)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)的量;Western blotting法检测脑组织中P38、NF-κB、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠神经功能症状评分、脑梗死体积显著增高,T-AOC、T-SOD水平降低,同时促进P38和Caspase-3蛋白表达。与模型组比较,珍龙醒脑胶囊低、高剂量组及尼莫地平组可显著降低脑缺血再灌注大鼠的神经功能评分,减少脑梗死体积,提高T-AOC、T-SOD水平,珍龙醒脑胶囊高剂量组可抑制P38和Caspase-3的蛋白表达。结论珍龙醒脑胶囊对大鼠脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用,其机制可能与改善神经功能、减少自由基损伤和抑制炎症因子表达和细胞凋亡有关。     

基于调控核因子E2相关因子2探讨蟾酥对脑缺血再灌注损伤小鼠星形胶质细胞的影响

目的 研究蟾酥预处理通过调控星形胶质细胞核因子E2相关因子2(Nrf2)表达对脑缺血再灌注损伤小鼠的保护作用。方法 将60只C57小鼠随机分为假手术组、模型组和蟾酥注射液低、中、高剂量组,每组12只。模型组采用线栓法制备脑缺血再灌注模型;假手术组血管分离后不插入线栓,结扎消毒后缝合皮下组织及皮肤即可,其余操作同模型组;蟾酥注射液低、中、高剂量组分别于缺血前30 min经腹腔注射蟾酥注射液1.6、3.2、6.4 mL/kg,其余操作同模型组。再灌注后24 h,采用Longa’s评分法评定各组小鼠神经功能。再灌注后72 h以2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测小鼠脑梗死体积百分比,蛋白免疫印迹法检测小鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和Nrf2蛋白表达水平,免疫荧光法检测小鼠脑组织GFAP和Nrf2阳性表达数。结果 与假手术组比较,模型组小鼠Longa’s评分、脑梗死体积百分比、GFAP蛋白表达和阳性细胞数均显著提高(P<0.05),Nrf2蛋白表达和阳性细胞数均降低(P<0.05);与模型组比较,蟾酥注射液低、中、高剂量组小鼠Longa’s评分、脑梗死体积百分比...     

三白草木脂素对创伤性脑损伤大鼠神经保护作用及Nrf2-ARE信号通路的影响

目的:探讨三白草木脂素对创伤性脑损伤(TBI)模型大鼠的神经保护作用及脑组织核因子E2相关因子2(Nrf2)-抗氧化反应原件(ARE)信号通路参与的机制。方法:将60只大鼠随机分为假手术组、模型组、木脂素组3组,每组20只。除假手术组外,其余大鼠构建TBI模型。采用改良的神经功能缺损评分(mNSS)评价神经功能,脑组织干湿重称量法评价脑水肿,TUNEL染色评价神经元的凋亡,酶活性检测试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及丙二醛(MDA)的水平,并比较各组大鼠脑组织中Nrf2蛋白、亚铁血红素加氧酶1(HO-1)和奎宁氧化还原酶1(NQO1)mRNA的表达水平。结果:与假手术组比较,模型组2 h和24 h m NSS、脑组织含水量、神经细胞凋亡率、氧化应激产物MDA的水平、细胞核Nrf2蛋白相对表达水平显著升高,氧化酶SOD、GSH-Px的活性、细胞质Nrf2蛋白相对表达水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,木脂素组24 h m NSS、脑组织含水量、神经细胞凋亡率、氧化应激产物MDA的水平、细胞质Nrf2蛋白相对表达明显降低,SOD、GSH-Px的活性、细胞核Nrf2蛋白相对表达、HO-1和NQO1 mRNA的表达水平明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:三白草木脂素通过减弱氧化应激来保护脑组织免受TBI的影响,同时Nrf2-ARE信号通路激活可能是三白草木脂素发挥其神经保护作用的机制之一。     

益气活血方对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型的干预作用

目的 观察益气活血方对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的作用及其机制.方法 采用随机、对照进行实验研究,SD大鼠48只,随机分为3组,即假手术组、模型组、益气活血组.每组16只.除假手术组不插线外,其余两组制备大鼠大脑中动脉阻断缺血再灌注模型(MACO).前两组于术前7d和术后24h按1 mL/100g,每日2次的剂量灌喂0.9％氯化钠注射液,益气活血组按等剂量灌喂益气活血汤药.参考Zea Longa的5分制评分标准.假手术组,模型组,益气活血组分别在于再灌注1、3、6、24h进行评分,观察比较各组各时间点的神经功能缺损积分;采用光镜对假手术组,模型组,益气活血组进行大鼠脑组织形态学结果进行观察,观察比较脑组织含水量;脑组织中的ATP酶(ATPase)、超氧化物歧化酶(SOD),一氧化氮合酶(NOS)的活性,丙二醛(MDA)、一氧化氮(N0)含量变化.结果 与模型组相比,益气活血方组能明显减轻神经功能缺损及脑含水量,使得缺血区脑组织损伤的形态学结构有明显改善,且能提高缺血侧脑组织中ATPase、SOD活性降低NOS的活性两组之间差异有统计学意义(P＜0.05),并能降低MDA、NO的含量,但两组之间没有显著性差异(P＞0.05).结论 益气活血方有比较好的整体疗效,能够改善神经功能,减轻脑水肿,通过不同的作用环节,阻断脑缺血再灌注后的瀑布性损害反应,具有保护脑缺血再灌注损伤的作用.     

化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤小鼠血清IL-6和TNF-α水平的影响

目的:观察化浊解毒活血通络方对小鼠脑缺血再灌注损伤的局部炎症反应的影响。方法:将50只昆明小鼠随机均分为模型组、中药高剂量组、中药低剂量组、尼莫地平组、假手术组。采用双侧颈总动脉结扎法合并尾端放血制造脑缺血再灌注模型。手术造模成功分别给予高、低剂量组化浊解毒活血通络方中药灌服。在治疗后用放免法检测各组小鼠血清中IL-6、TNF-α的表达水平。结果:化浊解毒活血通络方高剂量组小鼠中IL-6和TNF-α的表达水平明显低于模型组,与假手术组及尼莫地平组比较无统计学意义。结论:化浊解毒活血通络方可以抑制小鼠脑缺血再灌注损伤时炎症细胞因子的表达,减少白细胞的浸润,降低脑缺血再灌注损伤的程度。     

芍药苷对大鼠脑缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响及其作用机制

目的:探讨芍药苷对大鼠脑缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:选择健康雄性SD大鼠80只,随机分为假手术组、模型组、芍药苷组及尼莫地平组各20只,建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型,观察各组大鼠神经行为学评分及脑梗死面积,TUNEL检测大鼠神经细胞凋亡情况,免疫组化法检测大鼠大脑皮层中Bcl-2和Bax蛋白表达情况。结果:假手术组大鼠未表现出神经功能缺失症状,模型组大鼠神经行为学评分及脑梗死面积高于假手术组,芍药苷组及尼莫地平组均低于模型组,差异具有统计学意义(P0.05);假手术组几乎未见神经细胞凋亡,模型组TUNEL阳性细胞明显多于假手术组,芍药苷组及尼莫地平组细胞凋亡个数及阳性率均低于模型组,其差异具有统计学意义(P0.05);假手术组大鼠大脑皮质中Bcl-2及Bax的灰度值均高于模型组,芍药苷组及尼莫地平组大鼠Bcl-2灰度值较模型组降低,而Bax灰度值较模型组明显升高,2组Bcl-2/Bax灰度值较模型组下降,其差异具有统计学意义(P0.05)。结论:芍药苷可通过抑制Bax的表达,上调Bcl-2的表达来抑制神经细胞凋亡,从而保护神经功能,减轻脑梗死。     

解毒通络方对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的:探讨解毒通络方对脑缺血再灌注损伤的防治作用。方法:制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型,随机分为假手术组、模型组、尼莫地平阳性药组、解毒通络方高、中、低剂量组,观察各组大鼠神经功能损伤症状、脑梗死面积、脑组织各指标的变化。结果:解毒通络方高、中剂量组能显著降低神经功能缺失症状评分,各剂量组均能显著减少脑梗死面积,解毒通络方可提高模型大鼠脑组织中SOD含量,降低MDA含量,可明显降低NO、IL-1β、IL-6、i NOS、NF-κB的水平。结论:解毒通络方通过缓解大鼠神经功能损伤症状,减少脑梗死面积对脑缺血再灌注损伤大鼠起到保护作用。     

丹龙醒脑方对脑缺血再灌注大鼠神经功能和脑梗死面积的影响

目的:研究丹龙醒脑方对脑缺血再灌注大鼠神经功能和脑梗死面积的影响。方法:用线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞缺血再灌注模型。造模成功后将48只SD雄性大鼠随机分为模型组,假手术组,尼莫地平组,丹龙醒脑方大、中、小剂量组,每组各8只。分别灌胃等体积蒸溜水、尼莫地平片与不同剂量的丹龙醒脑方。连续灌胃7d后观察神经功能症状评分与脑梗死面积。结果:神经功能评分、脑梗死面积方面,模型组,尼莫地平组及丹龙醒脑方大、中、小剂量组与假手术组比较,差异均有统计学意义(P0.01);尼莫地平组及丹龙醒脑方大中小剂量组与模型组比较,差异均有统计学意义(P0.05);丹龙醒脑方各剂量组组间比较,差异均无统计学意义(P0.05)。丹龙醒脑方大中小剂量组神经功能评分与尼莫地平组比较,差异均无统计学意义(P0.05);丹龙醒脑方大中剂量组与尼莫地平组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:丹龙醒脑方能改善脑缺血再灌注大鼠神经症状,减少脑缺血再灌注脑梗死面积。     

益气活血汤对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的：探讨中药复方制剂益气活血汤对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法：采用大脑中动脉阻断法制备大鼠脑缺血再灌注模型，缺血60min，再灌注3d。观察药物对脑缺血再灌注引起的神经功能缺损症状及病理损伤的影响．检测脑组织结构型一氧化氮合酶(cNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化和丙二醛(MDA)含量的变化，免疫印迹分析NMDA受体亚单位蛋白NR1的表达。结果：益气活血汤及尼莫地平能显著改善神经功能缺失症状，减小梗死体积和脑水肿面积，减少神经元损伤；益气活血汤和尼莫地平不同程度降低脑组织内cNOS、iNOS活性和MDA含量．抑制NR1表达，增加SOD的活性。结论：益气活血汤对大鼠脑缺血再灌注损伤有保护作用，其机制可能与降低脑组织内cNOS及iNOS活性．降低NR1的表达，减少MDA含量和增加SOD活性有关。