大鼠脑缺血再灌注损伤后Nrf2表达变化及清热化瘀方的干预效应

目的:观察清热化瘀方对大鼠脑缺血再灌注损伤后Nrf2 mRNA及其蛋白表达的影响。方法:SD雄性大鼠120只,随机分为假手术组(SO组),模型组(MCAO组)和清热化瘀组(QRHY组),每组按照缺血再灌注后12 h、1 d、2 d、3 d 4个时间点分为4个亚组,每个亚组10只(n=10)。采用线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模型(MCAO),检测大鼠神经功能变化,用RT-PCR及Western blot方法观察缺血再灌注后各个时间点Nrf2 mRNA及其蛋白的表达变化。结果:①QRHY组可以减轻大鼠再灌注12h和1d神经功能缺损评分(P0.05);②MCAO组Nrf2 mRNA及其蛋白表达均于缺血再灌注后12 h开始明显上升,24 h达高峰(P0.01),随再灌注时间延长其表达逐渐下降,但仍保持较高表达水平(P0.05);QRHY组较MCAO组各时间点其表达均明显升高(P0.05或P0.01)。结论:脑缺血再灌注损伤能诱导Nrf2 mRNA及其蛋白的表达,清热化瘀方可进一步促进其表达达到神经保护作用。     

P62通过调控自噬与抗氧化通路保护大鼠脑缺血再灌注损伤

目的探讨大鼠脑缺血再灌注后P62介导的微管结合蛋白轻链3(LC3)和Kelch样ECH相关蛋白1(kelchlike ECH-associated protein 1,Keap1)表达的变化。方法将80只SD大鼠随机分为假手术组和模型组(采用线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型),每组40只,分别于12h,1、2和3d取材,每个时间点10只。采用化学荧光法测定脑组织活性氧水平,透射电子显微镜观察神经细胞中自噬及凋亡形态结构变化,分别采用qRT-PCR和Western blot法观察P62和LC3和Keap1 mRNA和蛋白在缺血半暗带表达变化。结果与假手术组比较,模型组大鼠各时间点脑组织中活性氧水平显著升高,1d时达峰值[(238.23±25.51)%vs (134.60±12.48)%,P0.01];透射电子显微镜下,模型组大鼠神经细胞线粒体肿胀,可见不同程度自噬小体形成,细胞发生迟发性神经元死亡。与假手术组比较,模型组各时间点P62mRNA和蛋白表达明显下调,1d达最低值(1.915±0.711 vs 1.253±0.679;0.10±0.02 vs 0.16±0.04,P0.01);各时间点LC3、Keap1mRNA和蛋白表达显著升高,1d达到最高值(0.862±0.501 vs 1.450±0.245,1.125±0.421 vs 2.037±0.730;1.25±0.17 vs 0.36±0.07,1.35±0.14 vs 0.24±0.05,P0.05,P0.01)。结论大鼠脑缺血再灌注损伤后LC3和Keap1表达水平增加,而P62表达减少,诱导了细胞自噬和氧化应激的发生。     

针刺治疗急性缺血性中风研究进展

随着我国人口老龄化的加剧,中风的发病率呈现不断增加的趋势。中风起病急、病情重,若治疗不及时则容易留下肢体偏瘫、言语不利、感觉障碍等后遗症状。随着现代医学的快速发展,早期治疗的有效方法主要有溶栓和机械取栓治疗,此类疗法可快速恢复缺血区域的脑灌注,使缺血部位得到有效再灌注,挽救缺血半暗带区域。但因其有一定的时间窗限制,故限制了该疗法在临床上的应用。针刺治疗急症的疗效经过了数千年的验证,疗效肯定,有"急则用针.     

浅谈扶阳思想对失眠治疗的指导意义

“火神派”认为失眠多由于阳不能潜归于阴而出现夜不能寐,多为相火不潜于肾水之中,而浮起扰神所致。本文从病因病机出发,以阳主阴从观为基础,探讨扶阳理论治疗该病,使浮阳内潜,改善失眠的指导意义。     

胡跃强运用扶阳法及三焦次第疗法治疗中风经验

介绍胡跃强教授运用扶阳法及三焦次第疗法治疗中风的经验。胡教授经过临床实践,结合前人经验,提出了中风的病因病机以阳虚为本的新观点,倡导以温阳为法,疏通三焦的治疗思想。先以清通上焦,次而疏通中焦脾胃,再以温固下焦善后。     

桂枝法联合盐酸多奈哌齐治疗血管性痴呆30例临床观察

目的:观察桂枝法联合盐酸多奈哌齐治疗血管性痴呆的临床疗效。方法:采用单盲、随机、平行对照试验的设计方法,将60例血管性痴呆患者分为治疗组和对照组,每组各30例。对照组采用盐酸多奈哌齐治疗,治疗组在对照组的基础上加用桂枝法化裁的阳化汤治疗。观察治疗前后2组患者的简易智能量表(MMSE)、日常生活功能(ADL)评分的变化。结果:治疗后治疗组的显效率和总有效率分别为36. 7%和80. 0%,对照组分别为26. 7%和63. 3%,2组比较,差异有统计学意义(P 0. 05);且治疗组治疗后MMSE和ADL评分均明显高于对照组(P 0. 05)。结论:桂枝法联合盐酸多奈哌齐治疗血管性痴呆效果显著,优于单用盐酸多奈哌齐治疗。     

基于Nrf2/ARE信号通路探讨清热化瘀方对大鼠脑缺血再灌注损伤氧化应激反应的影响

目的:从核转录因子E2相关因子2/抗氧化反应元件(Nrf2/ARE)信号通路探讨清热化瘀方对脑缺血再灌注损伤大鼠氧化应激的影响及可能的作用机制。方法:采用Longa线栓法制备局灶性脑缺血再灌注大鼠(MCAO)模型,将160只SD大鼠随机分为4组,分别为假手术组(SO),模型组(MCAO),清开灵组(QKL),清热化瘀方组(QRHY)。每组大鼠40只,根据取材时间点12 h,1 d,2 d,3 d可以分为每组分为4个亚组,每个亚组10只大鼠。分别采用氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测量脑梗死体积,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和免疫组化检测Nrf2/ARE信号通路蛋白Nrf2和血红素加氧酶1(HO-1)mRNA及其蛋白表达变化。结果:与SO组比较,大鼠脑缺血再灌注后1 d,MCAO组梗死体积显著升高(P0.01),QKL组较MCAO组梗死体积明显减小(P0.05);QRHY组脑梗死体积较QKL组进一步缩小(P0.05);MCAO组Nrf2和HO-1 mRNA及其蛋白表达均于缺血再灌注后12 h开始明显上升,24 h达高峰(P0.05,P0.01),随再灌注时间延长其表达逐渐下降,但仍保持较高表达水平(P0.05);QKL组较MCAO组Nrf2和HO-1 mRNA及其蛋白表达明显升高(P0.05),QRHY组较QKL组进一步升高Nrf2和HO-1 mRNA及其蛋白表达(P0.05,P0.01)。结论:清热化瘀方治疗脑缺血再灌注损伤可能通过激活Nrf2/ARE信号通路而降低细胞氧化损伤的程度,从而达到保护神经元的作用。