脓毒症大鼠心肌细胞凋亡及糖皮质激素的作用

目的 观察脓毒症状态下大鼠心肌细胞凋亡的变化并探讨糖皮质激素对心肌细胞凋亡的影响及其机制,为临床治疗脓毒症心脏损害提供依据.方法 采用盲肠结扎穿孔术制作脓毒症模型.60只体质量为230 ～ 280 g的Wistar大鼠被随机(随机数字法)分为糖皮质激素实验组(n=30)和对照组(n=30).每组大鼠均行盲肠结扎穿孔术,每组术后4h开始给予舒普深200 mg/kg,2次/d.实验组在以上基础上给予地塞米松0.5 mg/kg.每组随机分为3个亚组(6、24、72 h组),于相应时间点取出各组大鼠心脏,分离左心室,制备单细胞悬液,进行流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率.使用SPSS 11.5统计软件系统,所有数据以均数±标准差表示((x-)±s),两组间采取独立样本t检验,多组间数据比较采用单因素方差分析.同时左心室行免疫组化检测抗细胞凋亡蛋白B淋巴细胞瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)的表达.结果 激素组大鼠各时间点心肌细胞凋亡率分别较对照组大鼠心肌细胞凋亡率明显减少(F=9.11,t=5.681,P＜0.01)(6 ht =11.416,P＜0.01;24 h=6.217,P＜0.01;72 h t=3.76,P＜0.01);6h对照组大鼠的心肌细胞凋亡率显著低于24 h及72 h对照组大鼠(F=13.254,sig =0.000,P＜0.01;sig=0.004,P＜0.01);24 h对照组大鼠的心肌细胞凋亡率显著高于72 h对照组大鼠(sig=0.039,P＜0.05);激素各组大鼠心肌细胞凋亡率差异无统计学意义(F=2.488,6/24 h sig=0.132,P＞0.05; 24/72 h sig=0.549,P＞0.05;6/72 h sig=0.053,P＞0.05).结论 脓毒症时存在心肌细胞凋亡,以24 h最明显,脓毒症时应用糖皮质激素能够减少各个阶段心肌细胞凋亡.     

美托洛尔对脓毒症大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨美托洛尔对脓毒症大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及机制。方法:72只大鼠随机分为对照组(n=24)、脓毒症组(n=24)及治疗组[n=24,脓毒症模型基础上美托洛尔0.05mg冲击量后0.2mg/(kg·h)静脉泵入]。于术后3、6、12、24h测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α),心肌髓过氧化物酶(MPO)和半胱氨酸天冬氨酸酶-3(caspase-3)活性,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,光镜下观察心肌组织病理改变。结果:脓毒症组和治疗组大鼠各时点血浆TNF-α,心肌MPO、caspase-3活性、心肌细胞凋亡指数均较对照组显著升高(P<0.05),以术后12h最显著。应用美托洛尔后,上述指标与脓毒症组各时点相比均有不同程度降低,其中血浆TNF-α和心肌MPO活性在12、24h有统计学差异(P<0.05),心肌caspase-3活性和心肌细胞凋亡指数在6、12和24h有统计学差异(P<0.05),且心肌损害病理改变较脓毒症组显著减轻。结论:美托洛尔具有对抗脓毒症大鼠心肌细胞凋亡的作用,可能与抑制细胞因子、减轻心肌炎症反应、降低caspase-3活性有关。     

脓毒症大鼠心肌细胞凋亡与心功能的关系

目的观察脓毒症状态下大鼠心肌细胞凋亡对心肌力学的影响。方法 60只体重230~280 g的Wistar大鼠随机分成对照组(n=30)、脓毒症组(n=30)。脓毒症组采用盲肠结扎穿孔法(CLP)制作脓毒症模型,对照组采取开关腹法(不进行盲肠结扎穿孔)。两组动物均经右颈内动脉插管监测术后24 h的血流动力学指标,检测左室心肌细胞凋亡率,两组间采用独立样本t检验进行心功能及细胞凋亡率比较,并就心室收缩峰压与心肌细胞凋亡率进行相关性分析。结果脓毒症组的收缩压(SBP,95±5 mm Hg),舒张压(DBP,62±10 mm Hg),平均动脉压(MAP,73±7 mm Hg)、左心室收缩峰压(LVSP,83±5 mm Hg)、左室压力上升最大速率(+dp/dtmax,2 784±40 mm Hg)明显低于对照组(130±7mm Hg,70±11 mm Hg,89±8 mm Hg,137±8 mm Hg,4 928±137 mm Hg),左心室舒张末压(LVEDP,-1±2 mm Hg)及左心室压力下降最大速率(-dp/dtmax,-2 386±210 mm Hg)明显高于对照组(-11±2 mm Hg,-4 814±344 mm Hg),差异有统计学意义(P0.01)。脓毒症组大鼠的心肌细胞凋亡率(8.10%±0.58%)明显高于对照组(0.51%±0.02%),差异有统计学意义(P0.01)。脓毒症组大鼠心肌细胞凋亡率增加,左心室收缩峰压降低,呈负相关性(r=-0.68)。结论脓毒症时心肌力学明显下降,心肌细胞凋亡率增加,脓毒症24 h心功能与心肌细胞凋亡存在负相关。     

脓毒症大鼠心肌细胞凋亡与p53和Bcl-2基因表达的关系

目的 探讨脓毒症大鼠心肌细胞凋亡的变化及其与Bcl-2和p53基因mRNA表达的关系.方法 取体重190～220 g的成年雄性SD大鼠42只,随机分为三组,脓毒症组30只,正常对照组6只,假手术组6只;脓毒症组以盲肠结扎穿刺法(CLP)复制脓毒症大鼠模型,于术后3 h、9 h、12h、24 h各处死6只大鼠,假手术组麻醉满意后打开腹腔,正常对照组仅行麻醉术,均取1.0 mm3大小的心肌组织,另外余下的6只脓毒症鼠术后待其自然死亡不取心肌.采用电镜和TUNEL法检测大鼠心肌细胞的凋亡,用RT-PCR方法检测大鼠心肌细胞Bcl-2和p53基因mRNA的表达.结果 电镜下大鼠凋亡的心肌细胞胞膜皱缩,核固缩、边集、碎裂,胞膜突起、凋亡小体形成,TUNEL法检测各时间点的脓毒症大鼠心肌细胞的凋亡率均较正常对照组和假手术对照组明显升高(P＜0.05),术后12h达到峰值;p53 mRNA表达明显升高(P＜0.05),其表达量与心肌细胞凋亡指数呈正相关性(r=0.976,P＜0.05);Bcl-2 mRNA表达明显降低(P＜0.05),其表达量与心肌细胞凋亡指数呈负相关性(r=-0.833,P＜0.05).结论 脓毒症大鼠心肌细胞的凋亡明显增高,p53和Bcl-2 mRNA的表达异常是其可能机制之一.     

铁调素基因干扰对脓毒症小鼠淋巴细胞凋亡的影响

目的：探讨铁调素基因干扰对脓毒症小鼠淋巴细胞凋亡的影响。方法选择6-8周BALB/C 雄性健康小鼠10只,随机均分为实验组（铁调素基因干扰组,n=5）和对照组（对照RNA干扰腺病毒组,n=5）。采用尾静脉高动力注射的方法分别给予两组小鼠铁调素特异性shRNA腺病毒和对照RNA干扰腺病毒。13 d后,两组小鼠采用盲肠结扎穿孔（CLP）法复制脓毒症模型。CLP模型制备24 h后处死小鼠,留取全血和脾脏标本。采用流式细胞术测定脾脏T淋巴细胞亚型CD4＋和CD8＋的数量百分比、外周血和脾脏T淋巴细胞的凋亡百分比;采用Western blot法检测脾脏组织凋亡相关蛋白caspase-3和caspase-9的活化水平。结果实验组CLP模型24 h后脾脏CD4＋T细胞、CD8＋-T细胞百分比明显低于对照组（t分别=3.28、3.21, P均＜0.05）;实验组小鼠脾脏和外周血T淋巴细胞凋亡率较对照组明显增高（t分别=4.76、5.12, P均＜0.05）;实验组小鼠脾脏组织凋亡相关蛋白caspase-3和caspase-9活化水平较对照组明显增强（t分别=9.86、6.16, P均＜0.05）。结论铁调素基因干扰引起脓毒症小鼠淋巴细胞凋亡增加,铁调素可能在脓毒症的免疫调控中发挥重要作用。     

转染抗凋亡bcl-xL基因抗大鼠急性缺血心肌细胞凋亡

目的:探讨抗凋亡基因bcl-xL治疗大鼠急性心肌梗死的可行性。方法:实验于2004-02/2005-02在中山大学第二附属医院医学实验中心完成。建立大鼠急性心肌梗死模型,大鼠随机分为实验组和对照组各10只,实验组用腺病毒介导的方法将bcl-xL基因导入急性缺血大鼠的心肌,对照组仅用生理盐水代替;用免疫组化法半定量分析显示大鼠心肌抗凋亡基因bcl-xL蛋白表达水平,采用缺口末端标记技术和流式细胞仪评估大鼠心肌细胞是否发生凋亡及凋亡的程度。结果:16只大鼠进入结果分析。①4周后取心脏梗死区标本免疫组化检测bcl-xL蛋白表达,发现对照组心肌只有少数着色,而实验组的心肌组织大多数呈深棕色。半定量分析显示,实验组的心肌组织内bcl-xL蛋白表达阳性单位值明显高于对照组(19.66±4.62,8.89±2.16,t=-5.98,P<0.01)。②两组心肌组织中均检测到缺口末端标记技术阳性染色的凋亡细胞。③显微镜下计数,对照组心肌细胞凋亡指数明显高于实验组犤(18.19±4.15)%,(7.25±2.09)%,t=6.65,P<0.01犦。④流式细胞仪检测结果为实验组心肌缺血后转染bcl-xL基因细胞凋亡率为(6.79±1.98)%,而对照组的细胞凋亡率为(20.15±6.04)%,实验组出现明显低于对照组的凋亡峰。结论:转染bcl-xL基因后在心肌组织内有高效的bcl-xL蛋白表达,心肌细胞凋亡指数明显减少,流式细胞仪检测到的细胞凋亡峰明显降低,而未转染bcl-xL基因的心肌细胞因缺血缺氧出现大量的凋亡细胞,细胞凋亡峰显著增高,表明心肌细胞通过转染bcl-xL基因,虽然没有完全阻断细胞凋亡,但大大提高了抗凋亡能力。同时心肌细胞的抗缺血、缺氧和抗损伤能力明显增强,提示转染bcl-xL基因通过其抗凋亡作用能明显提高心肌细胞在缺氧条件下的生存能力。     

线粒体损伤在脓毒症大鼠心肌细胞凋亡中的作用

目的 探讨线粒体损伤在脓毒症大鼠心肌细胞凋亡中的作用及其可能机制.方法 72只SD大鼠随机(随机数字法)分为2组:(1)阴性对照组18只,腹腔注射无菌生理盐水;(2)脓毒症组,按大肠杆菌内毒素注射后6、12、24 h分为3个亚组,各18只.取心脏组织,光镜和电镜下观察组织病理学和超微结构的变化,TUNEL法原位检测心肌细胞凋亡并计算凋亡指数,免疫印迹法检测核转录因子-κB (NF-κB) p65的表达,黄嘌呤氧化酶法测定线粒体超氧化物歧化酶(SOD)活性,比色法检测线粒体还原型谷胱甘肽(GPx)活性,硫代巴比妥酸法测定线粒体脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量,OxyBlot TMas蛋白氧化检测试剂盒观察线粒体蛋白氧化.结果 脓毒症大鼠心肌有炎症细胞浸润,细胞水肿及空泡形成,并且在24 h最明显;心肌细胞凋亡指数和核蛋白NF-κB p65活化均显著增加(P＜0.05).脓毒症大鼠心肌线粒体损伤明显,至24 h病变最严重,线粒体膜破碎,线粒体嵴消失,大量空泡形成.脓毒症大鼠心肌线粒体抗氧化酶SOD和GPx活性显著下降(均P＜0.05),线粒体脂质过氧化和蛋白氧化均显著增加(均P＜0.05),并呈时间依赖性.结论 线粒体损伤在脓毒症心肌细胞凋亡中发挥重要作用,其作用机制可能与线粒体抗氧化物酶活性降低,活性氧产生过多和聚集有关.     

硫化氢对心肺复苏后大鼠心肌缺氧诱导因子-1α的影响

目的 研究心肺复苏后大鼠心肌细胞缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)的变化及外源性硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)的干预作用.方法 实验在华中科技大学同济医学院附属同济医院动物实验室进行,雄性SD大鼠45只,采用窒息法建立大鼠心搏骤停模型,随机(随机数字法)分为3组,每组15只:(1)对照组,仅行麻醉、气管插管及动静脉插管操作;(2)CPR组,进行模型制备及复苏;(3)CPR+硫氢化钠(NaHS)组,以NaHS作为H2S供体,在CPR开始前1 min经股静脉给予50μg /kg NaHS,其余操作同CPR组.观察各组血流动力学参数,留取6 h心肌组织,采用RT-PCR法检测HIF-1α mRNA表达,采用MPO测定试剂盒测定各组心肌组织MPO含量,三组动物于24 h处死取心肌组织行病理学检查.采用单因素方差分析,组阳比较采用t检验.结果 CPR组和CPR+NaHS组的血流动力学指标差异无统计学意义(P＞0.05).与对照组相比,CPR组和CPR+NaHS组HIF-1α基因表达均上升,CPR+NaHS组上升更为显著(P＜0.05),与CPR组比较,CPR+NaHS组HIF-1α基因表达升高(P＜0.06);与对照组相比,CPR组和CPR+NaHS组心肌MPO活性出现不同程度升高(P＜0.05),与CPR组比较,CPR+NaHS组心肌MPO活性下降(P＜0.05);通过对心肌苏木精-伊红(HE)染色切片观察显示,CPR组和CPR+NaHS组出现不同程度的病理损伤,GPR+NaHS组的病理损伤轻于CPR组.结论 HIF-1α mRNA在心肺复苏后大鼠心肌细胞的表达增强,硫化氢可能通过上调HIF-1α的表达,对心肺复苏后心肌起保护作用.     

人参总皂苷经HIF-1α/HO-1信号通路减轻脓毒症大鼠心肌损伤的机制研究

目的观察人参总皂苷(TG)对脓毒症心肌损伤(SMI)大鼠缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路的调控作用,探究其治疗SMI的作用机制。方法SD雄性大鼠给予内毒素+脂多糖诱导建立大鼠SMI模型,随机分为模型组(SMI组),TG低(20mg/kg)、中(40 mg/kg)、高(60 mg/kg)剂量组和乌司他丁阳性对照组(阳性组,10 000 U/kg)组,每组10只。另取10只,给予生理盐水设置为正常对照组(Normal组)。观察各组大鼠毛发、活动、精神状态等一般行为后,麻醉处死,取血清,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠心功能指标心肌肌钙蛋白I(cTnI)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平及血清炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素-8(IL-8)含量;取心脏组织,用苏木精-伊红试剂(HE)染色观察心脏组织病理损伤形态;用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测心脏组织HIF-1αmRNA、HO-1mRNA相对表达水平;用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心脏组织HIF-1α、HO-1、IL-8及TNF-α蛋白相对表达水平。结果与Normal组比较,SMI组大鼠出现精神萎靡、毛发松乱、活动减少、眼睑部出现黏稠分泌物等脓毒症表现,心肌细胞水肿、坏死、炎性浸润等病理损伤现象明显,血清TNF-α、IL-8、cTnI、CK-MB含量和心肌组织HIF-1αmRNA及蛋白、HO-1 mRNA及蛋白、IL-8及TNF-α蛋白表达升高(P <0.05)。与SMI组比较,TG低、中、高剂量组及阳性组大鼠心肌组织HIF-1αmRNA及蛋白、HO-1 mRNA及蛋白表达升高(P <0.05),脓毒症表现改善,病理损伤现象减弱,血清cTnI、CK-MB含量以及血清及组织中IL-8和TNF-α表达降低(P <0.05),且TG各剂量组上述指标改善呈剂量依赖性。与TG高剂量组比较,阳性组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TG可激活HIF-1α、HO-1基因及蛋白表达,抑制炎症反应,改善SMI大鼠心肌损伤。     

钙通道阻滞剂在危重烧伤脓毒症防治中的应用

目的 探讨尼莫地平在危重烧伤脓毒症防治中的作用.方法 将28例危重烧伤脓毒症病例随机分为2组:治疗组(n=14)和对照组(n=14).2组除实施相同的脓毒症综合治疗方案外,治疗组应用微量泵持续给予生理盐水+尼莫地平注射液15 μg/(kg·h)进行治疗,对照组给予相同剂量的生理盐水治疗.观察2组血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、C-反应蛋白(CRP)、前降钙素(PCT)、脑钠肽(BNP)、血钙、离子钙水平变化和血流动力学变化.结果 ①血流动力学指标明显改善(ABF、ACC、LVET、TSVR对照组治疗前后t值分别为3.93、3.37、3.75、7.02,治疗组治疗前后t值分别为6.46、4.98、6.29、4.60,P＜0.01或P＜0.05),平均动脉压无明显变化(P＞0.05).与对照组比较,治疗组主动脉血流量(ABF)、左心室血流最大流速(ACC)、左心室射血分数时间(LVET)、外周血管阻力(TSVR)改善更为明显(t值分别为2.29、2.07、2.23、2.14,P＜0.01或P＜0.05).②血浆TNF-α、IL-6、CRP浓度明显下降(TNF-α、IL-6、CRP对照组治疗前后t值分别为2.38、2.29、2.45,治疗组治疗前后t值分别为4.04、4.04、2.56,P＜0.01或P＜0.05).PCT、BNP治疗组更明显(PCT、BNP治疗组治疗前后t值分别为5.45、2.44,P＜0.01或P＜0.05).与对照组比较,治疗组TNF-α、IL-6、CRP、PCT、BNP下降更为明显(t值分别为2.20、2.17、2.19、2.17、2.61,P＜0.01或P＜0.05).③血浆总体钙和离子钙浓度轻度降低,治疗前后无明显变化(P＞0.05).结论 钙通道阻滞剂尼莫地平能降低脓毒症患者的血清炎性递质水平,抑制机体过度的炎症反应,抑制心肌细胞钙超载,改善心肌细胞功能,起到良好的细胞保护作用,从而提高了脓毒症的治愈率.     

急性心肌梗死患者血浆白细胞介素-8水平及其与室壁瘤形成关系的研究

目的 通过测定急性心肌梗死(AMI)患者早期血浆IL-8浓度水平变化结合同时导管法左心室造影(LVG)心室容积、压力及形态的变化,探讨IL-8在AMI后急性室壁瘤(LVA)形成患者血浆中的动态变化特点及其与LVA形成和心功能状态的关系.方法 将首次前壁AMI患者62例根据入院即刻LVG结果分为LVA形成组(29例)和无LVA组(33例).均于发病后6、12、18、24、48、72 h采血检测IL-8.于PCI完成后即刻及6个月复查时行LVG,测定左心室舒张末期容积指数(LVEDVI)、左心室收缩末期容积指数(LVESVI)、左心室射血分数(LVEF)、室壁运动记分(WMS)、左心室舒张末期压(LVEDP).随访6个月内主要恶性心脏事件(MACE)的发生率.结果 ①wA形成组自AMI发作至再灌注时间较无LVA组明显延长(t=2.35,P＜0.05),同时Killip Ⅲ级心力衰竭发生率明显高于无LVA组(χ2=12.63,P＜0.05).②LVA形成组血浆IL-8峰值浓度明显高于无LVA组[(0.64±0.08)μg/L与(0.53 ±0.09)μg/L,t=2.17,P＜0.05],同时峰值时间显著早于无LVA组[(8.12±2.01)h与(10.5±2.65)h,t=2.42,P＜0.05].③PCI后即刻和术后6个月时,无LVA组LVEF、LVESVI、LVEDVI、WMS和LVEDP各参数均优于有LVA形成组[t值分别为2.57,2.02,2.32,2.43,1.99;2.55,2.41,2.22,2.17,2.62,P均＜0.05).④LVA形成组患者在6个月随访期间梗死后心绞痛、NYHAI≥3级心力衰竭发生率及随访期间病死率明显高于无LVA组患者[(18.51%与3.03%,χ2=14.92;40.74%与18.18%,χ2:23.27;17.24%与3.03%,χ2=16.01;P均＜0.05).结论 血浆IL-8水平在AMI后LVA形成患者中明显高于无LVA者,且与左心室重构程度和血流动力学变化密切相关,提示心肌血管免疫炎症递质IL-8的过度激活参与了AMI后LVA的形成过程,并影响着AMI后左心室重构和LVA的进程.     

培哚普利对大鼠心肌梗死后心肌细胞凋亡及心功能的影响

目的：探讨大鼠心肌梗死后心肌细胞凋亡和心功能的变化及培哚普利干预的影响。方法：结扎大鼠左冠状动脉前降支建造心肌梗死模型，成功后随机分为培哚普利干预组（A组，n=16）和心肌梗死组（B组，n=16），另设假手术组为对照（C组，n=16）。术后24h起各组分别予培哚普利（A组）和蒸馏水（B、C组）灌胃，6周后TUNEL法检测各组大鼠非梗死区心肌组织中心肌细胞凋亡指数的情况、实时荧光定量PCR法检测凋亡调控基因P53mRNA含量的变化，并以超声心动图评价大鼠心功能。结果：6周后A、B两组与C组相比心肌细胞凋亡指数、P53mRNA含量及左室舒张末期内径均显著升高（P〈0．05），而左室短轴缩短率和左室射血分数显著降低（P〈0．05）；A组与B组相比中心肌细胞凋亡指数、P53mRNA含量和左室舒张末期内径明显下降，而左室短轴缩短率和左室射血分数明显升高（P〈0．05）。结论：大鼠心肌梗死后心肌细胞凋亡指数及凋亡相关基因P53mRNA的表达显著升高，左室功能明显下降；培哚普利能降低P53mRNA的表达，减少心肌细胞凋亡，改善左室功能。     

超声心动图左心室压力-应变环对正常高值血压及高血压患者心肌做功的评价

目的应用超声心动图左心室压力-应变环（PSL）评价正常高值血压及高血压患者心肌做功。 方法选取2019年8月至2020年3月于首都医科大学附属北京朝阳医院行超声心动图检查的高血压患者45例（高血压组）,纳入同期正常高值血压患者40例（正常高值血压组）和正常血压受试者30例（正常血压组）。所有纳入对象均进行超声心动图检查。测量常规超声心动图参数,应用二维斑点追踪超声心动图测量受试者左心室整体长轴应变（GLS）、机械离散度（MD）;通过左心室PSL评价心肌做功参数,包括心肌整体做功指数（GWI）、整体有效做功（GCW）、整体无效做功（GWW）、整体做功效率（GWE）。比较3组间超声心动图参数以及心肌应变和心肌做功参数,分析心肌做功参数与常规超声心动图参数和心肌应变参数的相关性。 结果正常血压组、高值血压组、高血压组GLS呈减低趋势,但3组间差异无统计学意义（P＞0.05）。高血压组较正常血压组、高值血压组MD增大,差异均有统计学意义（P均＜0.05）。高值血压组较正常血压组GWI、GCW增加（P均＜0.05）。高血压组较正常血压组GWI、GCW、GWW增加,GWE减低,差异均有统计学意义（P均＜0.05）;较高值血压组GCW、GWW增加,GWE减低,差异均有统计学意义（P均＜0.05）。高血压组中,GWI、GCW分别与GLS（r=0.695、0.691,P＜0.001）、LVEF（r=0.409、0.406,P=0.001）呈正相关。GWW与GLS呈负相关（r=-0.306,P＜0.05）,与MD呈正相关（r=0.384,P=0.002）。GWE与GLS呈正相关（r=0.519,P＜0.001）,与MD呈负相关（r=-0.482,P＜0.001）。 结论正常高值血压患者心肌做功效率仍正常,而高血压患者心肌做功效率受损,能量损失增加。超声心动图左心室PSL定量评价心肌做功可为正常高值血压及高血压患者心脏功能评估提供更多有价值的信息。     

峰值应变离散度和纵向心肌应变评价不同替代疗法的尿毒症患者左心室收缩功能

目的探讨峰值应变离散度（PSD）和整体纵向峰值应变（GLPS）评价不同替代治疗的终末期肾病患者左心室整体纵向收缩功能和左心室收缩同步性的价值。 方法选取2018年7月至10月在浙江大学医学院附属第一医院就诊并进行替代治疗的慢性肾病V期患者89例,根据不同替代治疗方法分为3组,分别是肾移植组30例;血液透析组31例和腹膜透析组28例。同时选取健康成年人33名作为对照组。采集心尖两腔心切面、三腔心切面及四腔心切面3个长轴切面连续3个心动周期的二维灰阶动态图像,分析得出左心室心肌纵向峰值收缩应变曲线和纵向应变达峰时间牛眼图,并自动计算出PSD和GLPS。符合正态分布的计量资料多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验法;不服从正态分布的计量资料多组间比较采用秩和检验,组间两两比较采用秩和检验。应用受试者操作特征（ROC）曲线分析PSD诊断左心室收缩非同步性的临床价值;符合正态分布的变量采用Pearson相关分析,否则使用Spearman相关分析。随机抽取20例患者进行PSD的观察者内和观察者间的重复性检验。 结果治疗终末期肾病3组左心室各节段纵向应变达峰时间差异增大,PSD均较对照组明显增高（P＜0.05/6）,血液透析组和腹膜透析组的GLPS绝对值均较对照组明显下降（P＜0.05/6）,而肾移植组GLPS绝对值与对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05/6）。肾移植组PSD和GLPS绝对值与血液透析组、腹膜透析组比较,差异有统计学意义（P＜0.05/6）;血液透析组、腹膜透析组的PSD和GLPS比较,差异无统计学意义（P＞0.05/6）,血液透析组PSD［（50.29±17.12）ms］和腹膜透析组PSD［（56.21±19.85）ms］高于对照组［（30.48±7.12）ms;t=-6.101、-6.467,P均＜0.05/6］和肾移植组［（39.80±5.65）ms;t=-3.234、-4.179,P均＜0.05/6］。血液透析组GLPS绝对值［（16.12±3.35）%］和腹膜透析组GLPS绝对值［（16.61±3.84）%］低于对照组［（21.34±2.88）%;t=-6.699、-5.494,P均＜0.05/6］和肾移植组［（19.80±2.94）%;t=-4.619、-3.631,P均＜0.05/6］。终末期肾病治疗3组PSD与左心室质量指数呈正相关（r=0.632,P＜0.05）,PSD与GLPS绝对值呈负相关（r=-0.468,P＜0.05）;PSD的最佳截点是34.5 ms,ROC曲线下面积为0.872,预测左室收缩非同步性的敏感度为85.4%,特异度为78.8%;PSD测值在观察者间和观察者内有良好的重复性和稳定性（相关系数=0.978、0.991）。 结论终末期肾病3种替代治疗方法中以肾移植的疗效最好;PSD是评价左心室心肌运动同步性较全面、直观和准确的新指标,容易测量且重复性好,易于推广普及,还能显著预测慢性肾病患者左室收缩非同步性,对临床早期干预和治疗心血管并发症具有一定的指导意义;应用PSD与GLPS能够较早地评价LVEF保留的终末期肾病治疗患者左心室心肌收缩功能,为临床诊断和疗效评估提供帮助。     

三硝基丙酸预处理对缺血-再灌注兔心肌细胞凋亡的影响

目的 观察三硝基丙酸(3-NPA)预处理对缺血-再灌注兔心肌细胞凋亡的影响及其机制.方法 24只新两兰大耳兔随机分为对照组(C组)、实验组(3-NPA组)和阻滞剂组(5-HD)组),每组8只.5-HD组在开胸前24 h通过耳缘静脉注射特异性线粒体NIP敏感钾通道阻滞剂5-羟基癸酸(5 mg·kg-1),C组和3-NPA组注射同样体积的生理盐水.10 min后3-NPA组和5-HD组注射3-硝基丙酸(3mg·kg-1),C组注射同样体积的生理盐水.通过结扎兔左冠状动脉建立心肌缺血-再灌注动物模型,三组缺血 30 min再灌注120 min.检测再灌注120 min后心肌梗死面积、心肌细胞凋亡指数、Bcl-2和Bax蛋白的表达.对实验数据进行方差分析榆验.结果 3-NPA组的心肌梗死面积显著低于其它C组[(0.26±0.07)vs.(0.45±0.09),P＜0.01]和5-HD组[(0.26±0.07)vs.(0.40±0.07),P＜0.01];C组和5-HD组之间没有显著性差异[(0.45±0.09)vs.(0.40±0.07),P＞0.05].3-NPA组心肌细胞凋亡指数明显小于C组[(27.72±5.18)vs.(45.91±10.54),P＜0.01]和5-HD组[(27.72±5.18)vs.(43.44±7.33),P＜0.01].3-NPA组bcl-2表达高于另外两组[(0.123±0.046)vs.(0.079±0.019),(0.080±0.019),P＜0.05],而Bax明显低于另外两组[(0.095±0.020)vs.(0.14±0.05) and(0.15±0.05),P＜0.05].结论 3-NPA预处理对缺血-再灌注心肌具有良好的扰凋亡作用,这与其开放断线粒体ATP敏感钾通道有关.     

姜黄素上调线粒体融合蛋白2抑制脓毒症小鼠淋巴细胞凋亡的实验研究

目的 研究姜黄素抑制脓毒症小鼠淋巴细胞凋亡的作用与机制.方法 取45只清洁级BALB/c雄性小鼠,随机(随机数字法)分为3组,即假手术组(n=15),脓毒症组(n=15),姜黄素组(n=15),实验重复3次.脓毒症组行盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP),术前予等体积生理盐水灌胃1周;姜黄素组行CLP术,术前给予姜黄素200 mg/ (kg-d)灌胃1周;假手术组仅行开腹,不予以结扎、穿孔,术前等体积生理盐水灌胃1周.观察各组小鼠术后24h病死率,并处死存活小鼠,分离脾脏淋巴细胞.采用流式细胞术、TUNEL法检测淋巴细胞凋亡情况;流式细胞术检测线粒体膜电位水平;Western Blot检测线粒体融合蛋白2(Mitofusin2,Mfn2)、Bax、Bcl-2蛋白表达.数据采用SPSS 18.0软件进行分析,计数资料采用x2检验,计量资料组间比较采用单因素方差分析.结果 小鼠病死率采用x2检验,脓毒症组小鼠术后24h病死率为46.7％,较假手术组0.00％明显升高(x2 =27.391,P＜0.01),姜黄素组病死率较脓毒症组有所降低(40.0％ vs.46.7％,x2=6.429,P=0.01).脾淋巴细胞凋亡率比较采用单因素方差分析,3组比较,P＜0.01,差异具有统计学意义.进一步两两比较,脓毒症组脾淋巴细胞凋亡率为(17.1±1.67)％,较假手术组(9.43±1.06)％明显增高(P ＜0.001);姜黄素组淋巴细胞凋亡率(12.70±1.25)％较脓毒症组比较明显下降(P=0.012).脾淋巴细胞线粒体膜电位比较采用单因素方差分析,3组比较P＜0.01,差异具有统计学意义.进一步两两比较,脓毒症组线粒体膜电位降低率为(45.13±4.14)％,较假手术组(21.63±1.62)％明显升高(P＜0.01),姜黄素组线粒体膜电位降低率为(29.67±2.15)％,较脓毒症组明显降低(P=0.001).蛋白表达情况采用单因素方差分析,3组线粒体Bax蛋白(P＜0.01)、胞浆Bax蛋白(P＜0.01),差异具有统计学意义.进一步两两比较,与假手术组比较,脓毒症组线粒体Bax蛋白表达水平明显上调(P=0.001),而胞浆Bax蛋白表达水平明显降低(P＜0.01).经姜黄素预处理后线粒体Bax蛋白水平较脓毒症组明显降低(P=0.02),胞浆Bax蛋白表达水平明显升高(P＜0.01).3组细胞总Mfn2蛋白(P ＜0.001)、Bcl-2蛋白(P=0.001),差异具有统计学意义.进一步两两比较,与假手术组比较,脓毒症组Mfn2蛋白(P=0.015)、Bcl-2蛋白(P=0.01)表达水平明显降低,经姜黄素预处理后Mfn2蛋白(P=0.002)、Bcl-2蛋白(P =0.001)水平明显上调.结论 姜黄素能够上调Mfn2表达,促进线粒体融合进而抑制脓毒症小鼠脾淋巴细胞的凋亡.     

核因子-κB在大鼠烧伤后中性粒细胞致心功能损害中的作用

目的 探讨大鼠烧伤早期核因子-κB(NF-κB)活化对中性粒细胞(PMN)在心肌组织中聚集和发生损害作用的影响.方法 将170只Wistar大鼠随机分正常对照组(20只)、烧伤组(90只)、烧伤后吡咯烷二硫代氨基甲酸盐干预组(PDTC组,60只).后两组大鼠均于背部造成35%体表总面积Ⅲ度烧伤后,立即腹腔注射等渗盐水,且PDTC组同时皮下注射PDTC 250 mg/kg.对照组除不烧伤外,其余处理同烧伤组.伤后1、3、6、12、24 h,凝胶电泳迁移率分析法检测心肌组织NF-κB活性;逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测心肌组织白细胞介素8(IL-8)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA的表达;八导生理记录仪记录左心室最大收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)及心室内压最大上升速率(+dp/dtmax)和下降速率(-dp/dtmax);并测定心肌组织髓过氧化物酶(MPO)活性.对照组作相同检测.数据采用SPSS 10.0统计软件行单因素方差分析.结果 烧伤组大鼠心肌组织NF-κB活性伤后迅速增高,伤后1 h达峰值(20.27±3.43)×104积分灰度值(A),明显高于对照组[(2.18±0.38)× 104A,P＜0.01],伤后24 h仍高于对照组(P＜0.01).伤后3、6、12、24 h心肌组织ICAM-1和IL-8mRNA表达、MPO活性均较对正常对照组明显升高(P＜0.01),:LVSP、±dp/dtmax明显低于正常对照组(P＜0.01),而LVEDP高于正常对照组(P＜0.01).与烧伤组比较,PDTC组上述指标指标均有明显的改善(P＜0.01).结论 严重烧伤可活化心肌组织NF-κB,从而上调黏附分子和趋化因子等的合成和释放,导致PMN在心肌组织中聚集,引起心肌功能损害.     

心肌肥厚性疾病患者左心室扭转与心肌纤维化的相关性研究

目的应用三维超声斑点追踪成像技术分析心肌肥厚性疾病患者左心室扭转与心肌纤维化程度的相关性。 方法收集2017年7月至2019年2月在哈尔滨医科大学附属第四医院行心脏超声及心脏磁共振（CMR）检查的心肌肥厚性疾病患者31例,根据CMR钆造影剂延迟强化阳性与否诊断患者是否存在心肌纤维化,并将患者分为心肌纤维化组20例,无心肌纤维化组11例。另选取健康体检者35例作为对照组。应用三维斑点追踪成像技术测量左心室基底段、中间段、心尖段旋转角度峰值,左心室整体扭力及左心室扭转角度峰值。比较心肌肥厚性疾病患者与健康对照组的常规二维超声参数,以及心肌肥厚性疾病心肌纤维化组、无心肌纤维化组与健康对照组的左心室旋转、扭转参数。分析左心室扭转角度峰值与钆造影剂延迟强化阳性心肌/左心室心肌质量比值的相关性。 结果与健康对照组比较,心肌肥厚性疾病无心肌纤维化组及心肌纤维化组的左心室基底段、中间段、心尖段旋转角度峰值及左心室扭转角度峰值均明显升高（无心肌纤维化组：t=4.45、7.51、-5.45、-6.79,心肌纤维化组：t=-5.53、-9.84、-5.82、-9.45;P均<0.01）;心肌肥厚性疾病心肌纤维化组左心室心尖段旋转角度峰值及左心室扭转角度峰值较无心肌纤维化组明显升高（t=-2.71、2.36,P均<0.05）。心肌肥厚性疾病患者左心室扭转角度峰值与钆造影剂延迟强化阳性心肌/左心室心肌质量比值呈正相关（r=0.58,P=0.001）。 结论三维斑点追踪技术可有效评估心肌肥厚性疾病患者左心室扭转及旋转,左心室整体扭转角度峰值与左心室心肌纤维化呈正相关,三维斑点追踪技术可为临床检测心肌肥厚患者心肌纤维化提供新的方法和选择。     

高原不同海拔地区大鼠严重烫伤延迟复苏后肾组织细胞凋亡及低氧诱导因子-1α的表达

目的 探讨高原不同海拔地区大鼠严重烫伤延迟复苏后肾组织低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达及与细胞凋亡的关系.方法 雄性Wistar大鼠240只,建立高原烫伤模型[30%总体表面积(TBSA)Ⅲ度烫伤],分别在1 517 m和3 840 m两个海拔高度将大鼠随机分为延迟复苏组(DFR,n=50)、即时复苏组(IFR,n=60)和正常对照组(CG,n=10).分别于伤后1、6、12、24、72和168 h从右肾组织取材,采用大组织芯片技术和原位末端缺刻标记法(TUNEL)检测肾组织细胞凋亡.用免疫组化染色技术与图像分析技术检测肾组织HIF-1α的表达.结果 随海拔梯度上升,肾小管上皮细胞水肿、颗粒变性、坏死及崩解;肾小球毛细血管不同程度扩张、充血,内皮细胞变性、坏死;肾间质充血、水肿,炎性细胞浸润.DFR组较IFR组、高海拔较低海拔地区病变均明显加重.随海拔梯度上升,细胞凋亡和HIF-1α表达均增强.阳性表达均位于肾小管上皮细胞的胞核上;其表达强度DFR组和IFR组均高于CG组,高海拔组高于低海拔组,同一海拔高度DFR组高于IFR组(P均＜0.01).细胞凋亡指数与HIF-1α阳性表达灰度值呈负相关(r=-0.651,P＜0.01).结论 高原地区不同海拔高度严重烫伤可导致HIF-1α表达增强,同时伴肾小管细胞凋亡增加.肾损伤与肾组织细胞凋亡有关;表明HIF-1α可能参与了肾组织细胞凋亡.     

左西孟旦治疗严重脓毒症及脓毒症休克的临床疗效的Meta分析

目的 采用Meta分析评价左西孟旦在严重脓毒症及脓毒症休克中的疗效,为其在脓毒症中的治疗提供循证医学证据。方法 使用中文和英文数据库,检索左西孟旦治疗严重脓毒症及脓毒症休克的随机对照研究。设定文献纳入和排除标准,对符合标准文献进行质量评定并进行数据提取。应用RevMan 5.3对相关研究的病死率、左心室射血分数（LVEF）、心脏指数(CI) 、肌钙蛋白I(TnI)、乳酸（Lac）、去甲肾上腺素用量进行分析。结果 共纳入13项研究,491例患者,其中左西孟旦组251例,对照组240例。与对照组相比,左西孟旦组的病死率显著降低（RR=0.78,95%CI=0.63~0.96,P=0.02）,CI（WMD=0.79, 95%CI=0.56～1.03, P＜0.01）、LVEF(WMD=9.03%,95%CI=6.74%～11.31%,P＜0.01)显著升高,TnI (WMD=-1.22,95%CI=-1.52～-0.77,P＜0.01)、Lac(WMD=-1.41,95%CI=-1.56～-1.27,P＜0.01)显著降低,两组去甲肾上腺素用量 (WMD=-0.01,95%CI=-0.03～0.01,P=0.45)差异无统计学意义。结论 与对照组相比,左西孟旦能显著降低严重脓毒症及脓毒症休克患者病死率,降低Lac及TnI的水平,增加CI及LVEF。Meta分析证据支持在严重脓毒症及脓毒症休克中应用左西孟旦。