糖尿病大鼠肾皮质细胞过度凋亡

目的 研究糖尿病大鼠肾皮质细胞凋亡的可能机制及其对糖尿病肾病的影响.方法 20只雄性SD大鼠随机分为糖尿病组和对照组.糖尿病大鼠模型采用链脲佐菌素65 mg/kg腹腔注射诱导建立.12周后观察2组体质量、血糖以及血肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白等肾功能指标;采用透射电镜和原位末端标记法（TUNEL法）检测大鼠肾皮质细胞凋亡,并用免疫组织化学的方法检测增殖细胞核抗原（PCNA）以及凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Caspase-3的表达.结果 建模12周的糖尿病组肾小球和肾小管细胞凋亡明显增多（P＜0.01）,肾小球和肾小管细胞PCNA表达无明显差别（P＞0.05）;与对照组比较,糖尿病组肾小管Bax和Caspase-3表达明显增加（P＜0.01）,Bcl-2表达明显减少（P＜0.05）;2组肾小球都不表达Bax和Bcl-2,糖尿病组肾小球有少量Caspase-3表达.结论 糖尿病大鼠肾皮质细胞过度凋亡.包括Bax、Bcl-2和Caspase-3在内的Caspase依赖的线粒体凋亡途径可能参与了糖尿病状态下肾小管细胞的凋亡;细胞凋亡的增多可能是糖尿病肾病发展的原因之一.     

补肾活血排毒法组方中药对慢性肾脏病大鼠肾脏细胞凋亡的影响

目的 观察补肾活血排毒法组方中药对慢性肾脏病大鼠的治疗作用及细胞凋亡的影响.方法 采用单侧输尿管梗阻(UUO)动物模型,将SD雄性大鼠分为假手术组、UUO模型组、补肾活血排毒法中药低剂量治疗组和高剂量治疗组,自动生化分析仪检测肾功能;苏木素-伊红(HE)染色检测肾脏组织病理损伤;TUNEL法检测肾组织细胞凋亡;Western blot法检测B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)水平.结果 与UUO模型组相比,补肾活血排毒法中药各剂量组血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)均明显下降(P＜0.05).病理观察,模型组可见肾小管上皮细胞凋亡、坏死、脱落,炎性细胞浸润,补肾活血排毒法中药各剂量组均较UUO模型组肾损伤程度轻(P＜0.05).TUNEL法检测UUO模型组细胞凋亡数较假手术组明显增多,补肾活血排毒法中药各剂量组可显著减少细胞凋亡数目(P＜0.05).与UUO模型组相较,补肾活血排毒法中药各剂量治疗组Bcl-2水平明显上调,Bax水平下调,Bcl-2/Bax比值升高(P＜0.05).以上结果均呈剂量依赖性.结论 补肾活血排毒法中药能明显下调血清肌酐和尿素氮水平,抑制UUO大鼠肾脏细胞凋亡,调节Bcl-2、Bax水平.     

白藜芦醇对脓毒症小鼠急性肾损伤的保护作用和机制研究

目的探讨白藜芦醇对脓毒症小鼠急性肾损伤的保护作用及作用机制。方法将45只C57BL/6雄性健康小鼠随机分成3组：假手术组（Sham组）、脓毒症模型组[盲肠结扎穿孔（CLP）组]和白藜芦醇实验组（CLP+白藜芦醇组）,每组15只,采用CLP术构建脓毒症小鼠模型,术后72h每组选取存活的5只小鼠处死并取材,检测血肌酐、尿素氮、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）、肾损伤标志物-1（KIM-1）、沉默信息调节相关酶1（SIRT1）表达情况;观察小鼠肾脏结构、肾细胞凋亡情况,计算生存率,检测肾脏组织Caspase-3的表达。结果与Sham组相比,CLP组小鼠肾小球毛细胞血管扩张、充血,肾小管上皮细胞水肿、颗粒性变样,管腔缩小,大量炎症细胞浸润,血肌酐、尿素氮水平均升高（均P＜0.05）,血清NGAL、KIM-1水平均升高（均P＜0.05）;可见大量肾小管上皮细胞凋亡,SIRT1mRNA、蛋白表达水平均升高（均P＜0.05）,Caspase3蛋白表达上调（P＜0.05）;小鼠7d成活率为0%。与CLP组相比,CLP+白藜芦醇组小鼠肾小球毛细血管扩张不明显,炎症细胞浸润有所减轻,血肌酐、尿素氮水平均降低（均P＜0.05）,血清NGAL、KIM-1水平均降低（均P＜0.05）;且肾小管上皮细胞凋亡明显减少,SIRT1mRNA、蛋白表达水平均升高（均P＜0.05）,Caspase3蛋白表达下调（P＜0.05）,小鼠7d成活率为30%（P＜0.05）。结论白藜芦醇可能通过激活SIRT1信号抑制凋亡通路抑制肾小管上皮细胞凋亡,减轻脓毒症相关性急性肾损伤程度。     

Fas/FasL诱导细胞凋亡在大鼠抗GBM肾炎中的作用

目的 探讨Fas/FasL诱导细胞凋亡在大鼠抗肾小球基底膜(CBM)肾炎中的作用.方法 复制大鼠抗GBM肾炎模型,在实验室的2、7、14、21和28 d,行以下处理:收集24 h尿、血清样本检测大鼠24 h尿蛋白、血肌酐及血尿素氮含量;取肾组织经光镜、电镜观察肾组织病理变化;采用KT-PCR法和Western blot法检测肾组织中Fas、FasL和Caspase-3的表达情况;采用分光光度法检测肾组织中Caspase-3活性;采用TUNEL法检测大鼠肾组织细胞凋亡情况.结果 与正常对照组大鼠相比,肾炎模型组大鼠24h尿蛋白、血肌酐及血尿素氮含量均明显升高(P<0.01);肾组织中Fas、FasLmRNA及其蛋白和Caspase-3mRNA及其蛋白活性均明显增加(P<0.01);肾组织中凋亡细胞数明显增多(P<0.01),且与Fas、FasL及Caspase-3表达呈正相关(P<0.01).结论 Fas/FasL诱导的细胞凋亡在大鼠抗GBM肾炎中发挥重要作用.     

大黄酚介导TLR4/NF-κB通路对IgA肾病大鼠肾损伤和免疫反应的调控作用

  目的  探讨大黄酚(CP)对IgA肾病大鼠肾损伤和免疫反应的调控作用。  方法  将大鼠随机分为5组:对照组, IgA肾病模型(IgA)组, IgA+CP低、中、高剂量(2.5、5、10 mg/kg)组,除对照组外,其余组的大鼠采用脂多糖+牛血清蛋白+四氯化碳法建立IgA肾病模型,造模完成后,IgA+CP组腹腔注射不同剂量的大黄酚,对照组和模型组给予等容生理盐水,每天1次,连续给药4周。留取24 h尿液检测尿蛋白含量,取血检测血清肌酐和尿素氮;肾脏组织HE染色和TUNEL染色检测各组大鼠病理损伤和细胞凋亡;RT-PCR和Western blot检测肾组织Caspase-3和Caspase-9表达水平;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测丙二醛(MDA)、过氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(Gpx)含量;ELISA和Western blot检测血清和肾组织白介素-1β、-6 (IL-1β、IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达;并采用RT-PCR和Western blot检测Toll样受体4(TLR4)、核转录因子-κB P65(NF-κB P65)表达水平和下游血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)蛋白表达水平。  结果  CP能剂量依赖性的降低IgA肾病大鼠尿蛋白、血清肌酐和尿素氮水平(P < 0.01);改善模型大鼠肾脏组织病理损伤、降低细胞凋亡率(P < 0.01),降低凋亡相关蛋白Caspase-3和Caspase-9的mRNA及蛋白表达水平(P < 0.01);抑制MDA产生的同时,增加抗氧化酶Gpx、SOD活性(P < 0.01);降低IL-1β、IL-6、TNF-α的血清水平和蛋白表达水平(P < 0.01);下调TLR4、NF-κB P65和VCAM-1的表达水平(P < 0.01)。  结论  大黄酚对IgA肾病大鼠起到保护作用,其机制可能是通过TLR4/NF-κB P65信号通路调节IgA肾病的免疫反应,减轻肾损伤。     

内质网应激预处理对大鼠急性缺血性肾损伤的保护作用

目的 研究内质网应激预处理对大鼠急性缺血性肾损伤的保护作用. 方法 24只雄性SD大鼠均分为对照组、衣霉素(tunicamycin,TM)处理组、缺血再灌注(ischemia reperfusion,I/R)组,衣霉素+缺血再灌注(TM+I/R)组.采用自动生化分析仪检测大鼠血肌酐、尿素氮水平, PAS染色检测肾小管损伤情况,免疫组化和Western blot检测肾组织内质网应激标志物GRP78蛋白表达. 结果 ①与对照组(0.2±0.03)比较,I/R组肾组织GRP78表达(2.4±0.17)增加(P<0.05),与对照组血肌酐、尿素氮[(47.42±6.02)μmol/L、(4.75±1.77)mmol/L]比较,I/R组血肌酐[(186.83±20.21)μmol/L]、尿素氮[(21.73±2.33)mmol/L]水平升高(P<0.05),肾小管损伤评分升高. ②TM组大鼠肾组织GRP78表达升高,但未见明显肾小管损伤,与对照组比较,血肌肝、尿素氮水平无明显变化. ③与I/R组比较,TM+I/R组大鼠GRP78表达(3.2±0.24)升高;肾小管损伤评分降低(P<0.05),血肌酐[(98.72±14.55) μmol/L]、尿素氮[(13.22±2.45)mmol/L]水平降低(P<0.05). 结论 内质网应激预处理对急性缺血性肾损伤有保护作用,其机制可能为通过激活适宜的内质网应激,上调肾组织GRP78表达,从而抑制I/R导致的过度内质网应激,提高肾组织对缺血的耐受性,减轻细胞和组织损伤,实现其对大鼠急性缺血性肾损伤的保护作用.     

血必净联合法舒地尔对脓毒症急性肾损伤后肾小管细胞凋亡的影响

目的探讨早期应用血必净联合法舒地尔对脓毒症急性肾损伤后肾小管细胞凋亡的影响及机制。方法将60只雄性SD大鼠随机分为分假手术组、脓毒症组、血必净组、法舒地尔组和联合用药组,每组12只。以盲肠结扎穿孔法制造脓毒症模型,假手术组麻醉后开腹翻动肠道,随即关腹;脓毒症组按4ml/kg尾静脉注射0.9%氯化钠注射液;血必净组按4ml/kg注射血必净;法舒地尔组按20mg/kg注射盐酸法舒地尔;联合用药组予等剂量血必净和法舒地尔注射。在造模后6、24h再将每组随机分为2个亚组,每个亚组6只。检测各时间点大鼠的肾功能和炎症指标,观察肾小管病理改变、测定肾小管损伤评分,采用TUNEL法观察肾小管凋亡细胞,并计算凋亡指数(AI)。用免疫印迹法测定ROCK-1、MYPT-1和caspase-3表达的变化。结果（1）造模后24h时与脓毒症组相比,各用药组肾功能均能明显改善（P＜0.05）,在抑制TNF-α、IL-6表达上联合用药组优于两单药组（均P＜0.05）。（2）造模后24h时联合用药组与两单药组比较,肾小管损伤评分和AI值明显降低（均P＜0.05）。（3）造模后24h时联合用药组与两单药组比较,更能抑制MYPT-1的磷酸化,促使caspase-3表达下降（均P＜0.05）。结论脓毒症早期血必净联合法舒地尔可以通过Rho/ROCK信号通路抑制凋亡蛋白的表达,减少肾小管细胞在脓毒症进程中的凋亡,发挥协同作用减轻脓毒症导致的急性肾损伤。     

凋亡相关基因Bax、Bcl-2及细胞色素C在链脲佐菌素糖尿病大鼠肾组织内的表达

目的 观察糖尿病大鼠肾组织中促凋亡基因Bax、凋亡抑制基因Bcl-2及细胞色素C(cytochrome C,cytC)的表达变化.方法 雄性SD大鼠24只,随机分为糖尿病组和正常对照组,每组12只.糖尿病组给予2％链脲佐菌素(溶于pH4.4、0.1 mol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液)按65 mg/kg单次腹腔注射,复制糖尿病模型.正常对照组只注射相当体积的枸橼酸缓冲液.分别于4周、12周后测体质量、尿蛋白、血糖、血清尿素氮及血清肌酐水平.用H-E染色观察肾形态学变化,免疫组织化学染色观察Bax、Bcl-2和cytC蛋白表达变化,TUNEL法观察大鼠肾皮质细胞凋亡情况.结果 与正常对照组比较,糖尿病组大鼠24 h尿蛋白、血糖、尿素氮及血肌酐水平升高(P＜0.05,P＜0.01).糖尿病组大鼠4周时肾小球体积增大,12周时肾小球系膜基质增生和肾小球硬化,肾小管上皮细胞空泡样变.随病程延长,糖尿病组大鼠肾小管上皮细胞Bax及cytC表达增加,而Bcl-2表达减弱.细胞凋亡检测结果显示,糖尿病组大鼠4周时凋亡细胞增多,多数在远曲肾小管,12周时远曲肾小管及近曲肾小管均可见凋亡细胞.结论 Bax及cytC表达随糖尿病病程延长而增强,引起细胞凋亡增加,导致肾功能异常,这可能是糖尿病肾病的重要发病机制.     

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及机制

目的 观察中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)对大鼠缺血再灌注肾损伤的保护作用及机制.方法 通过切除一侧肾脏,夹闭对侧肾蒂45 min建立大鼠缺血再灌注损伤模型,将30只成年雄性Sprague Dawley大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和缺血再灌注给药组,每组10只.将50 μg重组大鼠NGAL溶于2 mL灭菌蒸馏水中,分别于缺血前30 min、缺血中、缺血后30和60 min经缺血再灌注给药组大鼠尾静脉注射0.5 mL,假手术组及缺血再灌注组于相同时间点给予相同剂量的0.9％氯化钠注射液.取再灌注24 h后大鼠的下腔静脉血检测血清肌酐(sCr)和血尿素氮(BUN)水平;采用苏木精-伊红(H E)染色观察肾脏的形态学变化;免疫组织化学染色检测B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)及活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 (Caspase-3)的表达;末端转移酶标记技术(TUNEL)染色观察肾小管上皮细胞的凋亡情况.结果 再灌注24 h后,缺血再灌注组的sCr和BUN水平显著高于假手术组及缺血再灌注给药组(P值均＜0.05).光学显微镜下见缺血再灌注给药组的肾脏损伤情况较缺血再灌注组显著减轻.假手术组Bax和Caspase-3的蛋白阳性表达率分别为(3.72±0.48)％、(0.61±0.15)％,缺血再灌注给药组分别为(7.44±1.64)％、(3.17±0.32)％,均显著低于缺血再灌注组的(15.46±1.96)％、(7.29±1.06)％(P值均＜0.05).TUNEL染色见假手术组及缺血再灌注给药组的凋亡细胞数分别为(1.80±0.84)及(7.80±1.92)个/高倍视野,均显著少于缺血再灌注组的(15.40±3.05)个/高倍视野(P值均＜0.05).结论 给予外源性NGAL可抑制Caspase-3激活,减少Bax表达,减轻组织损伤,从而发挥肾脏保护作用,为急性肾损伤的治疗提供新的靶点.     

阿霉素肾病大鼠凋亡相关基因FADD和APAF1启动子DNA甲基化的变化

目的 探讨阿霉素肾病大鼠肾脏组织中凋亡相关基因DNA甲基化的变化与疾病进展的关系.方法 12只SD雄性大鼠随机分为阿霉素肾病组和正常对照组,每组6只.阿霉素肾病组大鼠分别于首次和1周后阴茎静脉注射5 mg/kg和2.5 mg/kg阿霉素造模.于造模后8周经腹主动脉采血,处死大鼠并留取肾脏组织.对两组大鼠血肌酐(Crea)、血尿素氮(BUN)、血清白蛋白(ALB)及尿白蛋白/肌酐比值(UACR)等生化指标进行检测和比较；Masson染色观察肾脏组织病理学改变；TUNEL染色观察大鼠肾小管和肾小球细胞凋亡情况；采用Real-Time PCR技术经高分辨率熔解曲线(HRM)分析法对两组大鼠肾皮质Fas相关死亡区(FADD)和凋亡蛋白酶活化因子1(APAF1)启动子DNA甲基化进行检测,Real-Time PCR检测FADD mRNA表达.结果 与正常对照组比较,阿霉素肾病组大鼠Crea、BUN和UACR显著升高(P＜0.05或P＜0.01),ALB明显降低(P＜0.01).病理组织学检查发现:阿霉素肾病组大鼠肾小球系膜细胞增生明显,毛细血管受压,球囊粘连；肾小管上皮细胞肿胀,间质增生、炎症细胞浸润.TUNEL染色细胞凋亡检测发现,与正常对照组比较,阿霉素肾病组大鼠肾小管和肾小球凋亡细胞数量明显增加(P＜0.01).HRM分析法和Real-Time PCR检测结果显示:与正常对照组比较,阿霉素肾病组FADD启动子DNA呈较高程度的 甲基化,FADD mRNA表达明显上调(P＜0.05).结论 在阿霉素肾病大鼠中,FADD基因启动子检测序列DNA甲基化程度增高,但其可能并非为影响FADD mRNA表达的主要因素.     

姜黄素抗白血病细胞活性及其机制

目的 探讨姜黄素对白血病细胞的致凋亡作用及其相关作用机制.方法 MTT细胞毒实验检测姜黄素对白血病HL-60细胞的生长抑制作用,Annexin V/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡的发生,提取细胞总蛋白Western blot检测survivin蛋白、caspase-9和caspase-3剪切带的表达.结果 姜黄素对白血病HL-60细胞显示了高效的细胞毒活性,IC50值为(1.66±0.31)μmol/L.0、2、4和8μmol/L的姜黄素处理HL-60细胞48h后,细胞的凋亡率分别为(2.44±1.24)％、(17.12±3.61)％、(34.82±6.63)％和(53.94±8.17)％,各处理之间差异有显著性(P＜0.01).Western blot结果显示姜黄素诱发了HL-60细胞内caspase-9的裂解和继发的caspase-3剪切,同时姜黄素也剂量依赖性的下调了HL-60细胞内survivin蛋白的表达.结论 姜黄素对人白血病细胞具有高效的致凋亡作用,下调细胞survivin蛋白的表达激活线粒体凋亡途径是其致凋亡的主要作用机制.     

低分子量肝素对SAP大鼠肾组织保护的实验研究

目的观察低分子量肝素(LMWH)对大鼠重症急性胰腺炎(SAP)肾组织热休克蛋白70(HSP70)表达、肾组织的光镜下形态学的改变及血清尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)水平的变化,探讨LMWH对肾组织保护的作用机制。方法选用Wistar大鼠随机分为3组,假手术组(A组)、SAP模型组(B组)、SAP低分子量肝素治疗组(C组),术后24h和72h分别取肾组织,HE染色检测肾组织形态学变化,免疫组化检测肾组织HSP70的表达,并测定大鼠血清BUN和Cr。所有实验数据均采用均数±标准差(x±s)表示,统计学处理用F检验。结果肾组织HSP 70表达:各组肾组织HSP70表达在术后24h比72h多,统计学处理有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。A组HSP70表达较少,B组HSP70表达最多,C组HSP70表达明显下调,与B组比较有显著性差异(P<0.01)。光镜下可见:A组大鼠双侧肾脏无明显病理改变;B组肾小管上皮细胞坏死脱落,肾小管水肿;C组肾小管水肿程度较B组明显减轻,未见肾小管上皮细胞坏死,但有红细胞渗出。血清Cr和BUN含量:C组与B组比较,有显著性差异(P<0.01,P<0.015)。结论 LMWH通过下调肾组织内HSP70表达,减轻SAP大鼠肾的损伤,从而起到保护肾组织的作用。     

盐酸右旋美托咪啶通过提高HIF-1α的表达减轻糖尿病大鼠肾缺血再灌注损伤

目的本研究探讨盐酸右旋美托咪啶（Dex）是否通过提高HIF-1α的表达减轻糖尿病大鼠肾缺血再灌注后损伤。方法高 脂高糖饮食8周后的SD大鼠,30 mg/kg链脲佐菌素（STZ）腹腔注射,建立糖尿病大鼠模型。以大鼠双肾动脉结扎60 min再灌注 120 min 的方法制作肾缺血再灌注损伤模型。分为普通大鼠组（Con）,假手术组（sham）,普通大鼠肾缺血再灌注损伤模型组 （Con+I/R [ischemia-reperfusion, I/R]）,普通大鼠肾缺血再灌注损伤模型Dex治疗组（Con+I/R+Dex）,糖尿病大鼠组（DM）,糖尿 病大鼠Dex治疗组（DM+Dex）,糖尿病大鼠地高辛（Dig）灌胃组（DM+Dig）,糖尿病大鼠肾缺血再灌注损伤模型组（DM+I/R）,糖 尿病大鼠肾缺血再灌注损伤模型Dex治疗组（DM+I/R+Dex）,糖尿病大鼠地高辛灌胃后肾缺血再灌注损伤模型Dex治疗组 （DM+Dig+I/R+Dex）。夹闭双肾动脉前2 h给予腹腔注射Dex,其它组别腹腔注射等量生理盐水。地高辛作为HIF-1α的抑制 剂,对于地高辛组予地高辛片0.05 mg/（kg· d）灌胃1周。所有组别大鼠肾缺血再灌注后取血样,分离血浆,多功能生化仪检测肌 酐（Scr）和尿素氮（BUN）含量,Western blot 测定HIF-1α、cleaved caspase-3、Bcl-2、Bax,ELISA 检测HIF-1α、p-eNOS、eNOS, TUNEL法测定肾小球细胞凋亡比例。结果普通大鼠和糖尿病大鼠在肾缺血再灌注后Scr、BUN、HIF-1α、p-eNOS、eNOS表达 水平及细胞凋亡比例均显著升高（P<0.05）;肾缺血再灌注损伤模型Dex治疗后Scr、BUN、p-eNOS、eNOS表达水平明显降低, HIF-1α表达水平明显升高,差异有统计学意义（P< 0.05）;与Con+I/R相比,DM+I/R组Scr、BUN、p-eNOS、eNOS进一步升高;与 DM+I/R组相比,DM+I/R+Dex组Scr、BUN、p-eNOS、eNOS、cleaved caspase-3、Bax表达水平及凋亡细胞比例明显降低,HIF-1α 及Bcl-2表达明显升高;与DM+I/R+Dex组相比,DM+Dig+I/R+Dex组cleaved caspase-3、Bax表达水平及凋亡细胞比例明显升 高,HIF-1α及Bcl-2表达水平显著下降。结论Dex可能通过提高2型糖尿病大鼠HIF-1α的表达,抑制肾脏细胞的凋亡,减轻肾脏 细胞缺血再灌注后损伤。     

氢气对蛛网膜下腔出血致急性肾损伤大鼠的保护作用

目的探讨氢气对蛛网膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage,SAH）致急性肾损伤（acute kidney injury,AKI）大鼠的保护作用。 方法SPF级雄性Sprague Dawley（SD）大鼠,350~400 g,按随机数字表法分为对照组、模型组和氢气治疗组,每组12只大鼠。模型组和氢气治疗组采用大脑中动脉穿刺法和造影剂复合甘露醇输注模拟SAH模型;氢气治疗组大鼠在模型制备成功后24 h和48 h时置入预充2.9%浓度氢气的麻醉诱导箱中2 h作为氢气治疗,模型组置入预充空气的诱导箱;对照组除不刺破颅内血管外,其他操作均与模型组相同。在模型制备成功后72 h取主动脉血0.7~1.0 mL,检测尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）和血肌酐（serum creatinine,SCr）水平。经心脏灌注后肾组织取材,采用苏木精-伊红染色法（hematoxylin-eosin staining,HE）观察大鼠肾脏病理变化;酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）测定大鼠肾脏组织活性氧簇（reactive oxygen species,ROS）水平;蛋白印迹法测定大鼠肾脏组织B淋巴细胞瘤2 （B-cell lymphoma-2,bcl-2）、bcl-2相关蛋k（bcl-2 associated-k,bak）及裂解的半胱氨酸蛋白酶3（cleaved caspase-3）蛋白表达;免疫荧光法测定大鼠肾脏细胞凋亡率;在细胞实验中采用300 μmol/L过氧化氢处理24 h肾小管上皮细胞（NRK52E）的方法制备氧化应激模型,干预后24 h、48 h分别用2.9%浓度氢气处理2 h,检测肾上皮细胞内丙二醛（malonaldehyde,MDA）和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）含量以及细胞凋亡率。结果模型组和氢气治疗组大鼠BUN和SCr水平高于对照组,氢气治疗组大鼠BUN和SCr水平低于模型组（P＜0.05）。模型组和氢气治疗组大鼠肾小管损伤评分高于对照组,氢气治疗组大鼠肾小管损伤评分低于模型组（P＜0.05）。模型组和氢气治疗组大鼠肾脏组织bcl-2/bak蛋白比值低于对照组,cleaved caspase-3蛋白表达高于对照组;氢气治疗组大鼠肾脏大鼠肾脏组织bcl-2/bak蛋白比值高于模型组,cleaved caspase-3蛋白表达低于模型组（P＜0.05）。模型组和氢气治疗组大鼠肾脏细胞凋亡率高于对照组,氢气治疗组大鼠肾脏细胞凋亡率低于模型组（P＜0.05）。模型组和氢气治疗组肾小管上皮细胞MDA水平和凋亡率高于对照组,SOD水平和存活率低于对照组;氢气治疗组肾小管上皮细胞MDA和凋亡率低于模型组,SOD和存活率高于模型组（P＜0.05）。 结论氢气对SAH致AKI大鼠具有保护作用,其机制与氢气能减少ROS生成后抑制肾脏细胞凋亡有关。     

术前血肌酐和尿素氮正常患者肝移植早期急性肾损伤的发生与生存分析

【目的】 分析术前血肌酐?尿素氮正常患者的肝移植早期急性肾损伤(AKI)的发生及生存状况?【方法】 82例术前血肌酐?尿素氮正常患者在我院移植中心接受下腔静脉全阻断改良背驮式肝移植术?术后3 d(术后早期)将根据AKI网络工作组有关急性肾损伤诊断标准评估AKI发生和分期,并根据急性肾损伤情况将病人分为两组:急性肾损伤组(A组),非急性肾损伤组(C组),术后追踪并记录2组患者术后30 d?术后1?2和3年生存率? 【结果】 82例术前血肌酐?尿素氮正常肝病患者,除去2例再次移植者,共80例,出现急性肾损伤38例(A组),发生率为47.5%;未发生急性肾损伤42例(C组)?A组MELD大于18分和循环不稳定发生率高于C组(P 0.05)【结论】 术前血肌酐?尿素氮正常的患者肝移植急性肾损伤发生率仍然较高,并影响术后短期和长期生存?     

间苯三酚对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用

目的：研究间苯三酚对大鼠肾缺血再灌注损伤（ischemia reperfusion injury, IRI）的保护作用及机制。方法：将雄性Wistar大鼠48只平均分为3组（n=16）：假手术组（Sham组）切除大鼠右肾后,左肾动脉进行同等分离,但不予夹闭;对照组即肾缺血再灌注组（ischemia reperfusion, I/R组）,腹腔注射等量的生理盐水,15 min后切除大鼠右肾,无创动脉夹夹闭左肾动脉45 min;实验组即缺血再灌注间苯三酚预处理组（phloroglucinol,PG组）,腹腔注射间苯三酚注射液（30 mg/kg）,15 min后切除大鼠右肾,无创动脉夹夹闭左肾动脉45 min。每组动物再均分为两个亚组（n′=8）,分别于再灌注后6和24 h将大鼠处死。处死前经下腔静脉取血,检测血清肌酐（secrum creatinine, SCr）、尿素氮（blood urine nitrogen, BUN）;将肾于冠状位切成两半,一半组织制作成组织匀浆,取组织上清液检测丙二醛（malondialdehyde, MDA）、过氧化氢酶（catalase, CAT）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）及谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase, GSH-Px）;另一半组织行石蜡包埋,切片进行病理组织学观察,再灌注后24 h的大鼠肾组织行核转录因子-kapa B(nuclear factor-kapa B, NF-κB)及Caspase 3免疫组织化学检测。结果：再灌注后 6 h,I/R组大鼠血清SCr和BUN分别为(103.9±10.4) μmol/L和(15.2±1.0) mmol/L,PG预处理的SCr及BUN分别为(81.8±13.4) μmol/L和(11.5±1.2) mmol/L;再灌注后24 h,I/R组大鼠血清SCr和BUN分别为(154.9±12.1) μmol/L和(28.1±1.4) mmol/L,PG预处理的SCr及BUN分别为(103.8±5.9) μmol/L和(16.0±1.0) mmol/L;PG预处理组较I/R组明显改善肾功能（P<0.05）;苏木素-伊红染色病理图片可见肾小管损伤较I/R组明显减轻（P<0.05）;经PG处理后大鼠肾组织内MDA含量较I/R组低（P<0.05）,SOD及CAT含量较I/R组高（P<0.05）,GSH-Px含量较I/R组高（P<0.05）。再灌注后24 h,经间苯三酚处理的肾组织内核因子-kapa B在细胞核内表达的水平明显降低,活化的Caspase-3亦较I/R组有所减少。结论：间苯三酚通过减轻氧化应激和炎性损伤,抑制细胞凋亡,有效改善了大鼠肾IRI。     

依达拉奉对大鼠肾脏缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的研究依达拉奉对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及探讨其相关机制,为预防肾脏缺血再灌注损伤用药提供实验依据。方法雄性SD大鼠36只,随机分为A组（对照组）、B组（缺血再灌注组）、C组（依达拉奉组）。测定SOD活性和MDA含量,观察肾组织Bcl-2、Bax的表达;测定血肌酐和尿素氮浓度。结果 （1）与A组比较,B组、C组SOD活性明显下降,MDA含量明显升高。与B组比较,C组SOD活性明显升高,MDA含量明显降低。（2）与A组比较,B组、C组Bax表达明显增加,Bcl-2表达增加,Bcl-2/Bax比值降低。与B组比较,C组Bcl-2表达增加,Bax表达减弱,Bcl-2/Bax比值增高。（3）与A组比较,B组和C组Cr、BUN浓度升高,与B组比较,C组Cr、BUN浓度降低。结论 （1）依达拉奉能够改善大鼠肾脏缺血再灌注后的肾功能,减轻损伤;（2）其机制可能是通过调控Bcl-2/Bax介导的细胞凋亡而实现。     

人参皂甙对急性肾衰大鼠的肾保护作用与下丘脑室旁核ChAT免疫反应活性变化的相关性

[目的]探讨人参皂甙对急性肾衰大鼠的肾保护作用与下丘脑室旁核ChAT免疫反应活性（ChAT-IR）变化的相关性。[方法]选用健康雄性SD大鼠,随机分为4组：ARF＋NS组、ARF＋GS组、NS＋NS组和NS＋GS组。采用甘油致急性肾衰的动物模型,通过整体实验和免疫组织化学的方法,观察急性肾衰大鼠口服人参皂甙（25 mg/2mL）48 h后,血清尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）和肌酐（creatinine,Cre）水平的变化,肾皮质匀浆丙二醛（malon-dialdehyde,MDA）和还原型谷胱甘肽（reduced glutathione,GSH）水平的变化,同时观察下丘脑室旁核ChAT免疫反应活性的变化。[结果]急性肾衰大鼠口服生理盐水2 mL处置48 h（ARF＋NS组）后,血清尿素氮和肌酐水平显著升高;明显高于NS＋NS组（P〈0.05）。而急性肾衰大鼠口服人参皂甙处置48 h（ARF＋GS组）后,血清尿素氮和肌酐水平降低,明显低于ARF＋NS组（P〈0.05）,但与NS＋NS组差异无显著性意义。ARF＋NS组肾皮质匀浆MDA水平明显升高（P〈0.05）,GSH水平明显降低（P〈0.05）;而ARF＋GS组肾皮质匀浆MDA水平降低（P〈0.05）;GSH水平升高（P〈0.05）。免疫组织化学的结果显示ARF＋NS组下丘脑室旁核ChAT-IR明显增强（P〈0.05）。ARF＋GS组下丘脑室旁核ChAT-IR进一步增加,明显高于ARF＋NS组（P〈0.05）。[结论]急性肾衰大鼠口服人参皂甙48 h后,能显著改善肾衰大鼠的肾功能,明显减轻肾组织氧化损伤,并增强肾组织抗氧化损伤的能力,表明口服人参皂甙具有抗急性肾衰和肾保护的作用。下丘脑室旁核胆碱能神经元活性的增强可能是人参皂甙抗急性肾衰和肾保护的作用的中枢机制之一。     

BiPAP治疗重症肺炎致急性呼吸衰竭疗效观察

目的评价无创双水平气道正压通气(BiPAP)对重症肺炎所致急性呼吸衰竭(ARF)的治疗效果。方法采用BiPAP呼吸机治疗重症肺炎所致急性呼吸衰竭(ARF)患者25例,观察治疗效果。结果治疗前后PaO2和PaO2/FiO2比较差异有显著性(P<0.05)。结论用BiPAP正压通气治疗重症肺炎所致急性呼吸衰竭疗效肯定。     

前列腺素E1脂微球载体制剂联合肾衰丸对慢性肾衰竭大鼠肾脏保护作用的研究

目的研究前列腺素E1脂微球载体制剂(Lipo-PGE1)联合肾衰丸对慢性肾衰竭大鼠肾脏的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法 5/6肾切除法复制大鼠慢性肾衰模型。将大鼠随机分为假手术组(10只)、模型组(10只)、Lipo-PGE1治疗组(10只)、肾衰丸治疗组(10只)以及Lipo-PGE1联合肾衰丸治疗组(10只),8周后检测各组大鼠血尿生化指标,观察肾组织病理改变;免疫组织化学方法检测各组大鼠肾小球纤维连接蛋白(FN)、转化生长因子-β(1TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)的蛋白表达水平。结果模型组大鼠尿蛋白、血清尿素氮和肌酐水平显著高于假手术组,肾小球系膜区和肾间质纤维化病变显著。Lipo-PGE1治疗组、肾衰丸治疗组以及Lipo-PGE1联合肾衰丸治疗组尿蛋白、血清尿素氮和肌酐水平较模型组均有不同程度的下降,肾脏的病变有明显的减轻,而Lipo-PGE1联合肾衰丸治疗组上述指标下降更为明显。与假手术组相比,模型组大鼠肾皮质FN、TGF-β1和CTGF的表达明显上调。Lipo-PGE1治疗组、肾衰丸治疗组以及Lipo-PGE1联合肾衰丸治疗组,FN、TGF-β1和CTGF的表达均有不同程度的抑制,而Lipo-PGE1联合肾衰丸治疗组抑制程度更为显著。结论 Lipo-PGE1联合肾衰丸能更有效地减少慢性肾衰竭大鼠蛋白尿,保护肾功能,延缓肾脏纤维化的进展,具有明显的肾脏保护作用。