鲎试剂法测定细菌内毒素影响因素的研究

鲎试剂法是利用鲎血细胞溶解物 ( LimulusAmebocyte Lysate,LAL;Tachypleus AmebocyteLysate,TAL)与微量 ( pg·ml-1级 )细菌 (主要是革兰氏阴性细菌 ,G-)的内毒素反应 ,从而检出被检物中内毒素的一种生物体外检测新技术 ,我国常用的鲎试剂主要为东方鲎的细胞裂解物。因为具有快速、简便、经济、灵敏度高、重现性好、一次可同时测几个样品等优点 ,正被日益广泛应用于医药卫生、食品卫生、环境卫生、分子生物学以及微生物学中。鲎试剂法大致可分为凝胶法、比浊法、比色法 (显色法 )等。凝胶法为限度试验 ,比浊法、比色法 (显色法 )常作…     

鲎试剂和鲎试验及其在医药方面的应用

1956年Bang发现将革兰氏阴性细菌注入美洲鲎即引起致命的血管内凝血反应。后阐明凝血原因乃由于细菌内毒素作用于鲎的循环血细胞(即变形细胞)的溶解物,使其变成凝胶所致。“鲎试验法”最初由J.Levin于1964年提出,它就是利用鲎血液的变形细胞溶解物(Limulus Amelocyte Lysate,简称LAL)作为试剂,与细菌内毒素产生凝     

应用鲎试剂凝胶法检查抗狂犬病血清中细菌内毒素的研究

目的 研究鲎试剂凝胶法与家兔测温法检测抗狂犬病血清不同生产阶段产品中细菌内毒素与热原试验结果的相关性，来确定抗狂犬病血清细菌内毒素的限量标准。方法 确定内毒素的限值和供试品溶液最大有效稀释倍数；制备供试品溶液在最大有效稀释倍数下作干扰试验；确认无干扰作用后，用鲎试剂凝胶法检测抗狂犬病血清不同生产阶段产品进行细菌内毒素的限量检查，并与家兔测温法结果相对比。结果 连续检查十批抗狂犬病血清制品细菌内毒素的限量符合规定，鲎试剂凝胶法与家兔测温法试验符合率100％。结论用鲎试剂凝胶法对抗狂犬病血清不同生产阶段产品进行细菌内毒素的限量检测为快速、准确，可用鲎试剂凝胶法代替家兔测温法检测抗狂犬病血清制品中热原。     

复方氨基酸注射液细菌内毒素检测法

目的建立用凝胶法检测复方氨基酸注射液(18AA)细菌内毒素方法。方法用不同厂家的鲎试剂对不同批号的复方氨基酸注射液分别进行干扰试验,考察复方氨基酸注射液(18AA)细菌内毒素检测法。结果复方氨基酸注射液对鲎试剂反应无干扰作用。结论细菌内毒素检测法可用于复方氨基酸注射液(18AA)的热原检测。     

注射用顺铂细菌内毒素检查法的建立

目的:建立注射用顺铂的细菌内毒素检查法.方法:参照中国药典2000年版检测细菌内毒素的凝胶法.结果:以氯化钠注射液溶解的注射用顺铂经细菌内毒素检查用水稀释4倍后对鲎试剂无干扰作用.结论:用灵敏度为0.5 Eu/ml的鲎试剂检测注射用顺铂的细菌内毒素是可行的,可以用细菌内毒素法取代家兔热原法.     

细菌内毒素检测的影响因素

细菌内毒素检查是利用鲎试剂能与微量细菌内毒素起凝胶化反应 ,从而检测出供试品中微量内毒素的一种生物体外检定技术。鲎试验是国际上至今为止检测内毒素最优的方法 ,它简单、快速、灵敏又准确 ,因而被美国 ,日本厚生省及我国药典定为内毒素检测法 ,并已广泛被世界各国采用。最常用的是凝胶方法。该法可用于注射药品、放射性药物、生物制品及生产工艺流程中的内毒素检测。但鲎试剂与内毒素之间的反应十分复杂 ,易受各种因素的干扰而出现假阳性或假阴性的结果。下面就可能影响检测结果的因素进行讨论。1　外源性污染　做热源实验时 ,环境 (…     

生脉注射液细菌内毒素检查方法的探讨

目的 建立生脉注射液的细菌内毒素检查方法.方法 采用<中国药典>2010年版附录检测细菌内毒素的凝胶法.用不同厂家的鲎试剂与同厂家和不同厂家生产的生脉注射液分别进行干扰试验,考察生脉注射液对细菌内毒素检查的干扰作用,确定其最小不干扰稀释倍数.结果 实验证明,生脉注射液对细菌内毒素检查有抑制作用,经稀释至40倍后干扰作用完全被消除.结论 使用鲎试剂凝胶法检查生脉注射液的内毒素是可行的,可以用细菌内毒素检查法取代原检查法.     

鲎法检测复方乳酸钠注射液的探讨

目的　通过复方乳酸钠注射液内毒素对鲎试剂的灵敏度试验 ,确定了鲎法检测复方乳酸钠注射液的可能性。方法　用鲎法对复方乳酸钠注射液细菌内毒素进行检测。结果　复方乳酸钠注射液对鲎试剂凝集没有干扰作用 ,可用于标定灵敏度为 0 .5EU·ml-1的鲎试剂检测样品的细菌内毒素。结论　用鲎法检测复方乳酸钠注射液的热原可提高检测效率和灵敏度 ,对实际工作有一定参考价值     

鲎试验法在输液系统的应用

鲎试验法(Limulus test)系由Levin 和 Bang(1968)所建立,是利用鲎血变形细胞溶解物作试剂(即鲎试剂)来检测微量细菌内毒素的一种生物学测试方法。此法的基本原理为内毒素遇鲎试剂产生蛋白凝固反应(Protein coegklation     

注射用复方甘草酸苷细菌内毒素检查方法的研究

目的 研究注射用复方甘草酸苷对细菌内毒素检查试验的干扰情况,建立其细菌内毒素限量检查的方法 . 方法 采用细菌内毒素凝胶法,用不同厂家的鲎试剂对3批注射用复方甘草酸苷进行干扰试验. 结果 注射用盐酸赖氨酸最大非干扰浓度为0.25 mg/ml. 结论 注射用复方甘草酸苷细菌内毒素限值确定为1.5 EU/mg,可应用鲎试剂进行细菌内毒素检查.     

鲎试剂法与兔温法对几个大輸液品种热原检测的比较

<正> 自1956年Bang发现美洲鲎注入革兰氏(G-)杆菌可引起致命的血管内凝以来,鲎变形细胞溶解物(LAL)用于检测微量内毒素的研究受到国外普遍重视。1968年,Liven等发现鲎变形细胞溶解物在微量的G-细菌内毒素作用后形成凝胶。鲎试验是利用鲎试剂中含有的凝固酶原,在微量的细菌内毒素作用下使凝固酶原变为凝固酶,通过凝固酶     

苦参素注射液细菌内毒素检查方法探讨

为探讨苦参素注射液中细菌内毒素的检查方法，我们采用凝胶法，用不同厂家生产的鲎试剂，通过灵敏度复核试验、干扰初筛试验和干扰试验对三批苦参素注射液细菌内毒素检查的可行性进行考察。所用鲎试剂灵敏度为0．25EU／ml。结果发现苦参素注射液原液对鲎试剂与内毒素的凝集反应有干扰作用，但经10倍稀释后，可完全消除其干扰作用；选择1：100稀释液进行干扰试验和内毒素检查。提示可用凝胶法检查苦参素注射液的细菌内毒素。     

鲎法检测奥硝唑注射液内毒素的增强抑制实验

目的:通过对鲎试剂的灵敏度试验,确定鲎法检测奥硝唑注射液细菌内毒素的可行性。方法:用鲎法对其细菌内毒素进行检测。结果:奥硝唑注射液对鲎试剂凝集没有增强抑制作用,可用标示灵敏度为0.25Eu·ml-1的鲎试剂检测样品的细菌内毒素。结论:该方法灵敏、简便,可用于检测奥硝唑注射液的内毒素。     

血袋保存液细菌内毒素定量检测方法探讨

目的探讨定量检测血袋保存液中细菌内毒素(BET)的方法。方法用碱性调节剂来消除血袋保存液中枸椽酸盐类抗凝剂对鲎试剂检查的干扰,建立标准曲线,对处理后的血袋保存液用BET-32M细菌内毒素检测系统进行定量检测,同时用凝胶法作对照。结果动态浊度法定量检测细菌内毒素检测数据符合药典规定的限值(5.56EU/mL),并与凝胶法结果一致,检测结果准确、可靠。结论建立的内毒素检测方法可用于血袋保存液的定量检测。     

鲎试验法在输滚热原检测中的应用

鲎试剂是从海生动物鲎提取的鲎血细胞溶解物制成的一种冻干试剂。这种试剂可与微量细菌内毒素起凝胶反应,从而用来检测内毒素的一种实验技术,称为鲎试验。近年来国外很多报导普遍认为该法检测内毒素确实是一种快速、简便、灵敏的方法。鲎试验起初应用于诊断病人内毒素血症,随后很快被用于革兰氏阴性细菌脑膜炎,尿路感染等疾病的快速、敏感诊断,以及放射性同位素药品,抗菌素的热原检测,卫生学上也用来检测各种水质和食品污染的程度。引起我们极大兴趣的是 Moaulog 等[1]用鲎试验法对100批输液和放射性药品的热原检查,并用家兔法进行对照,两法符合率达96%;Fumarola 等和Ronnlerger 也进行了对照实验,结果两法完全符合[2];Wachtel 等的报道,认为鲎试验     

鲎试验对灯盏花素注射液细菌内毒素的检测

目的评价鲎试验法对灯盏花素注射液细菌内毒素检测的可行性。方法通过细菌内毒素限值的确定、最大有效稀释倍数、鲎试剂标示灵敏度的复核及干扰试验用鲎试验法对灯盏花素注射液进行细菌内毒素检测。结果灯盏花素注射液在1∶10稀释度下,采用灵敏度为0.5 EU.ml-1的鲎试剂,对鲎试剂有明显的增强作用,在1∶20稀释度下,采用灵敏度为0.25 EU.ml-1的鲎试剂可消除干扰,进行细菌内毒素检测。结论灯盏花素注射液在1∶20稀释度下,采用灵敏度为0.25 EU.ml-1的鲎试剂可消除干扰,进行细菌内毒素检测。     

丙泊酚注射液细菌内毒素检查法研究

目的建立丙泊酚注射液细菌内毒素的检查方法。方法参照《中国药典》2010年版二部附录的细菌内毒素检查方法,采用两个厂家的鲎试剂,对不同稀释倍数的丙泊酚注射液进行干扰试验。结果丙泊酚注射液稀释12倍时对鲎试剂与细菌内毒素之间的凝集反应既无抑制作用,也无增强作用。3个批号的供试品细菌内毒素均符合要求。结论凝胶法可用于检测丙泊酚注射液的细菌内毒素。     

氨苄西林钠细菌内毒素检查法实验研究

目的:建立氨苄西林钠的细菌内毒素检查方法.方法:按<中国药典>2005年版二部附录细菌内毒素检查法进行.结果:氨苄西林钠浓度为1.25 mg/ml时,对鲎试剂无增强或抑制作用,其细菌内毒素限值可定为0.2 EU/mg.结论:可用细菌内毒素检查法(凝胶法)代替家兔热原检查法控制其热原.     

动态浊度法测定注射用血凝酶(立止血)中的细菌内毒素

目的建立注射用血凝酶中细菌内毒素含量的动态浊度检测方法.方法通过干扰试验,确定立止血中细菌内毒素鲎法检测不干扰浓度.结果立止血对鲎试剂无干扰作用.结论本方法干扰因素小,检测结果准确,可作为日常检测使用.     

丹参川芎嗪注射液细菌内毒素检查方法的研究

目的 考察使用鲎试剂方法检测丹参川芎嗪注射液中细菌内毒素的可行性.方法 按照中国药典2010年版(二部)附录Ⅺ E细菌内毒素检查法,用2个厂家的鲎试剂对3个批号的丹参川芎嗪注射液进行干扰试验.结果 丹参川芎嗪注射液原液对鲎试剂与细菌内毒素之间的凝集反应有抑制作用,经稀释2倍后,用灵敏度λ为0.5 EU/mL的鲎试剂进行...